Среда для выращивания клубеньковых бактерий

 

СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ, содержащая мелассу , источник органического азота и физиологически активных веществ, сернокислый а1.1моний, фосфорнокислый однозамещенный калий, фосфорнокислый двузамещенный калий, сернокислый магний, мел и чоду отличающаяся тем, что, с целью стандартизации среды и повышения титра клубеньковых бактерий, в качестве источника органического азота и физиологически активных веществ среда содержит сухой ферментолизат кормовых дрожжей, полученный с помощью ферментного препарата из Actinomyces rutgersensis 88, при следующем соотношении компонентов , г/л: Меласса20,0-30,0 Сернокислый аммоний0,5-1,0 Фосфорнокислый5J однозамещенный (Л калий0,25-0,5 Фосфорнокислый двуз амещенный калий0,25-0,5 Сернокислый магний 0,2-0,3 Мел1,0-3,0 Сухой ферментолизат кормовых дрожжей 2,0-5,0 ВодаОстальное

COlO3 СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИИ

3(51) С 12 1 20

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ вой и Ь v 1 r д ;"0,5-1,0

2,0-5, О

Остальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ХОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3471434/30-15 (22) 19.07.82 (46 ) 30. 06. 84. Бюл . Р 24 (72) Е. В. Чекасина, A. П. Ужкуренас, A. f3. Хотянович, A. И. Позднякова, А. П.Шпокене, Н. Ю. Амстердамская, В. И. Шрамко, A. И. Черемухина и В.С.Краснопольская (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии, Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактериальных препаратов и Всесоюзный научно-исследователь" ский институт прикладной энзимологии (53) .576. 851. 155 (088. 8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР

9 540852, кл. С 12 И 1/20, 1976.

2. Авторское свидетельство СССР

9 293785, кл. С 05 F 11/00, 1972. ! (54) (57) СРЕДА ДЛЯ ВЫРИЦИВАНИЯ КЛУ

БЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЯ, содержащая мелассу, источник органического азота и физиологически активных веществ, сернокислый аммоний, фосфорнокислый,.S0ÄÄ 1100307 А однозамещенный калий, фосфор нокислый двузамеще нный калий, сернокислый магний, мел и воду о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью стандартизации среды и повышения титра клубеньковых бактерий, в качестве источника органического азота и физиологически активных веществ среда содержит сухой ферментолиэат кормовых дрожжей, полученный с помощью ферментного препарата иэ Actinomyces rutgersensis 88, при следующем соотношении компонентов, г/л:

Меласса 20,0-30,0

Сернокислый аммоний

Фосфорнокислый однозамещенный калий О, 25-0, 5

Фосфорнокнслый двузамещенный калий 0,25-0,5

Сернокислый магний 0,2-0,3 ф

Мел 1,0-3,0

Сухой ферментолизат кормовых дрожжей IaeaL

Вода

1100307

О, 25-0, 5

Изобретение относится к сельскохозяйственной и технической микробиологии и может быть использовано прй производстве йнокулянтов для бобовых культур.

В связи с расширением производства препаратов клубеньковых бахтерий в СССР. возникает необходимость изыскания рациональных питательных сред для культивирования клубеньковых бактерий с использовайием доступных и стандартных субстратов, Обеспечи:вающих получение высоких титров клубеньковых бактерий в едийице объема ферментационной жидкости. В настоящее время в качестве источника органического азота и физио" логически активных веществ дЛя выращивания клубеньковых бактерий в производственных условиях используют различные экстракты. 20

Известна питательная среда, содержащая в качестве источника органического азота и физиологически ак" тивных веществ бобовый н дрожжевой экстракты. Однако они представляют 25 собой нестандартные продукты: помимо. того, стоимость их довольно высока 1Х

Известна среда, содержащая в указанном качестве кукурузный экстрак1 2).

Однако он также не является стан- 30 дартным продуктом, что исключает возможность получения стандартизированной (по органическому азоту) питательной среды. Кроме того, в кукурузном экстракте содержатся летучие 35 органические кислоты, ингибирующие рост клубеньковых бактерий, что препятствует накоплению максимального их титра. Кукурузный экстракт является сравнительно дефицитным сырьем, 40 и поиск его заменителей актуален.

Целью изобретения является стандартиз.ация среды и повышение титра Клубеньковых бактерий.

Поставленная цель достигается тем, что среда для выращивания клубеньковых бактерий, содержащая ме" лассу, источник органического азота и физиологически активных веществ, сернокислый аммоний, фосфорнокислый однозамещенный калий, фосфорнокислый 50 двузамещенный калий, сернокислый магний, мел и воду, в качестве источ- ника органического азота и физиологически активных веществ содержит сухой ферментолизат кормовых дрожжей 55. полученный с помощью ферментного препарата из Actinошусеи rutgersensiв

88, при следующем соотношении компонентов, r/ë:

Меласса 20, 0-30, О 60

Сер нокислый аммоний 0,5-1,0

Фосфорнокислый однозамещенный калйй 65

Фосфорнокислый двузамещенный калий О, 25-0,5

Сер нохи слый магний 0 2-0 3

Мел 1,0-3,0

Сухой ферментолизат кормовых дрожжей 2,О-5,0

Вода Остальное

Культивирование медленно растущих клубеньковых бактерий сои и люпина и быстрорастущих клубеньковых бактерий гороха и люцерны.

П р и м е.р 1. Культуру клубеньковых бактерий сои (шт. 646) выращивали в жидкой питательной среде состава, r/ë: меласса 20,0„ серно« кислый аммоний 0,5; фосфорнокислый однозамещенный калий 0,5; фосфорнокислый двузамещенный калий 0>5; сернокислый магний 0,2; мел 2,0; (ферментолизат ВВК 5,0. Выращивали клубеньковые бактерии сои в колбах и бутылях с 2,0 л питательной среды на качалке при 220 об/MHH при 28-30"С и течение 72 ч. Получили титр в культуральной жндкостн 26,3 млрд/мл бактерий. В контрольной среде (с ку-. курузным экстрактом титр был

17,7 млрд/мл бактерий.

П р и М е р 2. Культуру клубеньковых бактерий люпнна (шт. 363а) выращивали в жидкой питательной среде состава, г/л: меласса 30,0; сернокислый аммоний 1,0„ фосфорйокислый однозамещенный калий 0,5; фосфорно" кислый двузамещенный калий 0,5 сернокислый магний 0,2; мел 1,5 Ферментолизат ВВК 3,0. Выращивание культуры проводили в колбах и бутылях с

2,0 л питательной среды на качалке при 220 об/Мин при 28-30 С в течение 90 ч. Получили титр в культуральной жидкости 23,0 млрд/мл бактерий, в контрольной среде титр был

15, 8 млрд/мл бактерий.

Пример 3, Культуру клубеньковых бактерий гороха (шт,250а) выращивали в жидкой питательной среде состава, r/ë: меласса 30,0; сернокислый аммоний 0 5; фосфорнокислый однозамещенный калий 0,25; Фосфорнокислый двузамещенный калий 0,25 сернокислый магний О;2; мел 3,0

Ферментолизат БВК 4,0. Выращивали клубеньковые бактерии гороха в колбах и бутылях с 1,5 л питательной среды а также в ферментаторах в течение 28-42 .ч при 28-30 С. Получили титр в культуральной жидкости

19,7 млрд/мл, в кольитрольной среде (с кукурузным экстрактом) титр был

12,5 млрд/мл бактерий гороха.

П р и.м е р 4. Культуру клубеньковых бактерий люцерны (шт. 425a ) выращивали в жидкой питательной среде состава, г/л: меласса 20,0; сер1100307

Составитель В.Адамушкин

Редактор Т. Веселова ТехредС. Мигунова Корректор А.Ильин

Заказ 4543/23 Тираж 522, Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент" r.Óærîðîä, ул. Проектная, 4 нокислый аммоний 1,0g фосфорнокислый одноэамещенный калий 0,25; фосфорнокислый двуэамещенный калий

0,25; сернокислый магний 0,3; мел

1 0> ферментолизат БВК 2,0. Выращивание культуры клубеньковых бактерий люцерны проводили .в колбах и буты- . лях с 1,5 л питательной среды на качалке при 220 об/мин при 28-30 С в о течение 30-40 ч а также в ферментаторах. Получили титр в культуральной жидкости 38 млрд/мл, в контрольной среде титр был 19,8 млрд/мл бактерий люцерны.

Применение изобретения позволяет повысить титр клубеньковых бактерий

s ферментационной жидкости на 45-60%.