Проточный флуоресцентный детектор для аминокислотного анализа

 

li ПРОТОЧНЫЙ ФЛООРЕСЦЕНТНЫй ДЕТЕКТОР ДЛЯ АМИНОКИСЛОТНОГО АНАЛИЗА содержащий источник света, проточную: микрокювету и фотодетектор, отличающийся тем, что, с целью OTff упрощения детектора; проточная микрокювета , расположенная на общей оптической оси с источником света и фотодетектором , выполнена с входным окном из кварца и параллельным ему выходным окном из стекла, а в качестве источника света применен радиолюминесцентный излучатель, размеры и форма светящейся поверхности которого равна размерам и форме входного окна проточной микрокюветы. 2. Детектор по п. 1, о т л и ч аю щ и и с я тем, что, с целью упрощения регулировки и настройки оптической схемы, излучающая поверхность .радиолюминесцентного источника света непосредственно контактирует с входным окном проточной кюветы, а входная поверхность фотодетектора установлена на минимально возможном расстоянии отВЫХОДНОГО окна проточной кюветы. 1.0 0.5 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

3(5Н G 01 N 21 64

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1,0

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАЫ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21 ) 3566193/18-25 .(22) 16.03.83 (46 ) 30.08.84. Бюл. 9 32 (72) Л.В.Карклит и E.H.Tâåðäîõëåáîâ (71) Институт молекулярной биологии

AH СССР (53) 535.37(088.8) (Ь6) 1. Sameguna К. et al. Condensation of ninhydrin with aldehydes and

primary .amines to yield highly

fluorescence ternary products. Ana1yt.

Siochem. 197), ч,42 р..237. .2. Steichen J. Д Пиа1 - purpose

absorbance- Г1аоrescence detector

for high - рressure 11аиХй chromatoгаphy. Chromatography 1975, ч;104„ р. 39. (прототип). (54)(57) 1. ПРОТОЧНЫЙ ФЛООРЕСЦЕНТНЫЙ

ДЕТЕКТОР ДЛЯ АИИНОКИСЛОТНОГО АНАЛИЗА, содержащий источник света, проточную:, микрокювету и- фотодетектор, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью

tired

„„SU„„1111078 упрощения детектора; проточная микрокювета, расположенная на общей оптической.оси с источником света и фотодетектором, выполнена с входным окном из кварца и параллельным ему выходным окном из стекла, а в качестве источника света применен раднолюминесцентный излучатель, размеры и форма светящейся поверхности которого равна размерам и форме входного окна проточной микрокюветы.

2. Детектор по п. 1, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью упрощения регулировки и настройки оптиче. ской схемы, излучающая поверхность радиолюминесцентного источника света непосредственно контактирует с вход- ю ным окном проточной кюветы, а входная поверхность фотодетектора установлена на минимально возможном расстоянии от выходного окна проточной кюветы.

1111078

Изобретение относится к измерителям интенсивности флюоресценции лото. ка жидкости и может найти применение в хроматографических системах разделения и анализа аминокислот, а также в биотехнологии, биохимии, медицине 5 и молекулярной биологии.

Известны жидкостные хроматографы, которые представляют собой систе. му, состоящую из следующих основных элементов: насосов, подающих в ко- 10 лонку буферные растворы и анализируе мую смесь, колонки, заполненной сорбентом, который удерживает индивидуальные вещества анализируемой смеси в различное время; реактора, уста-)5 новленного на выходе колонки, в котором разделенные индивидуальные вещества,например аминокислоты, переводятся в форму, имеющую повышенную интенсивность флюоресценции; оптичес-20 кого детектора, регистрирующего в узкой спектральной области изменения ,интенсивности флюоресценции во време» ни, соответствующие последовательному выходу с колонки индивидуальных аминокислот lil.

Однако известные устройства характеризуются сложностью конструкции.

Наиболее близким ло технической сущности к изобретению является проточный флюоресцентный детектор, для амйнокислотного анализа, содержащий источник света, проточную микрокювету и фотодетектор t2l.

Недостатки этого устройства заключаются, во-первых, в относительно больших габаритах оптической части прибора, обусловленных необходимостью формирования возбуждающего пучка и точного его сведения на центр проточной микрокюветы, во-вторых, высо- 40 кой стоимости оптических деталей, поскольку использованы кварцевые линзы и фильтры, юстировка которых требует высокой квалификации.

Цель изобретения — упрощение кон- 45 .струкции оптической схемы прибора.

Поставленная цель достигается тем, что в проточном флюоресцентном детекторе для аминокислотного анализа, содержащем источник света, про- 50 точную микрокювету и фотодетектор, проточная микрокювета, расположенная на общей оптической оси с источником света и Фотодетектором, выполнена с . входным окном из кварц и параллель- 55 ным ему выходным окном иэ стекла, а в качестве источника света применен радиолюминесцентный излучатель, размеры и форма светящейся поверхности которого равны размерам и форме входного окна проточной микрокюветы.

Излучающая поверхность радиолюминесцентного источника света может непосредственно контактировать с вход ным окном проточной кюветы, а входная поверхность фотодетектора установлена на минимально возможном расстоянии от выходного окна проточной кюветы.

На фиг. 1 дан слектр излучения одного иэ типичных радиолюминесцентных источников (РЛИ); на фиг. 2 схема оптического детектора согласно изобретению.

Схема включает источник света 1, кювету 2, кварцевые окна 3 и 4 кюветы, фотоэлектронный детектор 5.

РЛИ, светящаяся поверхность которого имеет размеры и форму, равные таковым входного окна 3 проточной кюветы 2, наложен на это окно, изготовленное иэ кварца. Выходное окно кюветы изготовлено из обычного стекла, не пропускающего возбуждающий свет, максимум интенсивности которого лежит в области 330 нм, но прозрачного для света флюоресценции комп лекса "аминокислота-ортофталевый альдегид" (максимум свечения — при

570 нм ). В непосредственной близости от выходного окна 4 кюветы 2 (зазор между этими элементами..схемы определяется толщиной шторки ) находится входная поверхность фотоэлектронного умножителя, регистрирующего свет флюоресценции образца, протекающего через кювету

Устройство работает следующим образом.

Свет источника 1 проходит через кварцевое окно 3 кюветы 2, возбуждая люминесцентное свечение объекта.

Свет люминесценции проходит через стеклянное окно 4 кюветы, не пропускающее свет источника 1, и регистри. руется фотоэлектронным детектором 5.

Конструкция устройства проста и не содержит дорогих и требующих точной юстировки оптических деталей. В то же время практически все или значительная часть излучения источника (РЛИ l используется для возбуждения флюоресценции объекта, а потери света, вносимые поглощением, отражением и аберрациями линз или зеркал, также отсутствуют. Это в значительной мере компенсирует потери чувствительности регистрации, связанные со значительно меньшей,чем у дуговых ламп, интенсивностью светового потока РЛИ.

1111078

Составитель Н.Зоров

Редактор М.Келемеш Техред.T.Ôàíòà Корректор О.Тигор

Заказ 6302/35 Тираж 822 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4