Способ определения ретинола ацетата пальмитата в мазях

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕТИНОЛА АЦЕТАТА (ПАЛЬМИТАТА) В МАЗЯХ путем хроматографии на окиси алюминия, элюирования органическими растворителями и последующего спектрофотометрирования в ультрафиолетовой области спектра , отличающийся тем, что, с целью повышения селективности и точности определения, растворяют мазь в циклогексане, а элкирование проводят ацетонитрилом.

СОЮЗ СО8ЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1151881 (я) G 01 N 30/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

6)

l 1

ГОСУДАРСТВЕННЬЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ71

Н АВТОРСИОЬГФ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3631816/28-13 (22) 04.04.83 (46) 23.04.85 Бюл. М 15 (72) Л.И.Рапапорт, Н.Л.Флейш, Д.В.Прошунина и Т.В.Ковальчук (71) Киевский научно-исследовательский институт фармакологии и токсикологии (53) 543.867(088.8) (56) The analysis olreys and chemicals (Evers N. and Smith. M. eds).

London, 1955, р.277. (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕТИНОЛА

АЦЕТАТА (ПАЛЬИИТАТА) В МАЗЯХ путем хроматографии на окиси алюминия, элюирования органическими растворителями и последующего спектрофотометрирования в ультрафиолетовой области спектра, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности и точности определения, растворяют. маэь в циклогексане, а элюирование проводят ацетонитрилом.,ц ил 9 -2Я- ТО

328(нспр/

828 328 /испр/ст ности ис пытуемого раствора при Л

328 нм; оптичес328 ст 328(ис р/ст/ ст кие плотности раствора стандартного образца при Л

328 нм; содержание ретинола в в1мл

250 раствора стандартного об1 1 l51

Изобретение относится к анализу органических химических соединений и может быть использовано для определения ретинола ацетата (пульмитата) в мазях, в состав которых входят ингредиенты, также поглощающие в УФ5 области спектра (фурацилин, левомицетин, ланолин безводный).

Цель изобретения — повышение селективности и точности определения.

Пример. Исследовали мазь состава:

Фурацилина, r 0,1

Левомицетина, г 2

Ретинола ацетата (пальмитата), ИЕ 1000000

Ланолина безводного, r До 100

Около 1,25 г (точная масса) препарата взбалтывают с 10-15 мл циклогек20 сана до полного растворения мазевой основы и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 1 мп полученного раствора переносят в колонку с окисью алюминия для хроматографии. После погружения раствора в сорбент элюируют ретинол ацетонитрилом до получения 25 мл элюата. Слой ацетонитрила над окисью алюминия дол- 0 жен быть не менее 0,5-1 см. Хроматографирование ведут под вакуумом, обеспечивающим .скорость истечения элюата ,50-70 капель в минуту.

Измеряют оптическую плотность по- 35 лученного элюата на спектрофотометре при длинах волн 316, 328 и 340 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения применяют раствор, полученный в контроль-40 ном опыте, при проведении которого используют мазь, содержащую все сопутствующие ингредиенты (кроме ретинола) и взятую в такой же навеске.

Параллельно проводят хроматографи-85 рование и все последующие операцйи, используя 1 мл раствора стандартного образца ретинола, содержащий

10 МЕ в 1 мл элюата.

В качестве раствора сравнения 50 применяют ацетонитрил.

Вычисляют оптическую плотность раствора стандартного образца Э 8(„с„ 1 с поправкой на светопоглощение сопутствующих соединений по следующе- 55 му уравнению:

1) = 5 82/23 — 2 - 1l ()

3 8 / IIcIIP/ 328 ст 31Ь ст ЭИ ст/

881 1 328 ст, э18 сТ и 3

D 328 / исар /ст/. от D более чем на +57., то при последующем расчете содержания ретинола в мази используют значение

328ст

Исходя из величин оптической плотности, полученных при исследовании испытуемого образца, рассчитывают оптическую плотность испытуемого раствора с поправкой на сопутствующие соединения D (по уравнению (1).

Если Пэ28 (< IIÐ / не Отличается От

D 328 более чем Hà 25Х, то при расче те содержания ретинола в мази используют значение 9828, если же отличается, то используют значение 2328(„,„р1.

Содержание ретинола в ME рассчитывают по формуле:

I где Р828 или П328(„с„р/ — ОнтИЧЕские плотразца в

NE;

50 — разведение, мл; — масса препарата, г.

Результаты количественного определения витамина А в мази, содержащей фурацилина 0.1 r. левомицетина

Образец

Оптическая плотность

Найдено в 1 мл циклогексана

Навеска мази, r

Содержание виМетрологические тамина

А в

1 мл характеристики

ЗИ(испр) циклогексана, МЕ

1 1,2510 250,.20 0,366 0,435 0,362 0,500 247,00 98, 73

S=3 43

S„=1,54

2 1,2585 251,70 0,430 0,495 0,420 0,493

243, 57 96, 77

3 1 э 2500 250 э00 Оэ 370 0 э440 0s 365 0 э510 250> 20 100э 08 S y g =4 28 ь

4 „ 1,2525 250,50 0,363 0,430 0,360 0,482 238, 15 95,07

A= 4,38

1,2510 250,20 0,530 0,565 0,465 0,493 243,77 97,43

1 При содержании витамина А 10 МЕ в 1 мл элюата !) ) =0,505 (среднее пя226(испр) ти определений).

Составитель Н.Гуляева

Редактор P.Öèöèêà Техред С.Мигунова Корре кт ор А. 3 имок о со в

Заказ 2313/33 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r.Ужгород, ул.Проектная, 4

3 1i 518

2,0 витамина А 1000000 МЕ, ланолина безводного до 100,0 представлены в таблице.

Для хроматографии используют ацетонитрил х.ч. по ТУ 6-09-4326-76 или ч по ТУ 6-09-3534-82 (при использовании ацетонитрила ч проверяют его оптическую плотность относительно воды на спектрофотометре при длинах воля 316, 328 и 340 нм; оптическая плотность не должна превышать

0,02). Используют также. циклогексан х.ч. (ТУ 6-09-10-592-76).

Раствор стандартного образца ретинола ацетата (пальмитата) в масле

100000 ИЕ в 1 мл (фактическое содержание ретинола в препарате устанавливают по ГФ Х, ст. 579) растворяют в циклогексане таким образом, чтобы получить раствор, содержащий 250 МЕ ретинола в 1 мл. Раствор пригоден в

81 4 течение 30 дн. при хранении в защищенном от света месте при температуре не выше 10 С.

Окись алюминия для хроматографии (ТУ 6-09 †39-75) нагревают 4 ч при

400О охлаждают в эксикаторе, с хлористым кальцием безводным, добавляют 107 воды, встряхивают в банке с .притертой пробкой в течение 1О мин и оставляют на 10 ч.

Приготовление колонки с окисью алюминия: в колонку с внутреняим диаметром 10 мм, снабженную стеклянным краном, помещают тампон иэ стеклянной ваты, всыпают 8 г окиси алюминия, поверх сорбента помещают тампон из стеклянной ваты, затем смачивают окись алюминия ацетонитрилом и вводят в колонку еще 2-3 мл ацетонитрила; первые 2 мл фильтрата отбрасывают.