Устройство для исследования физико-химических параметров живых микрообъектов

 

УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИССЖДОВАНИЯ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ЖВЫХ МИКРООБЪЕКТОВ, содержа.щее камеру с крьппкой и боковыми отверстиями , в которых размещены датчики контроля и изменения параметров среды в камере, мешалку с крыльчаткой , а также предметное и покровное стекла, расположенные соответственно в дне камеры и в крышке, о тличающе е с я тем, что, с целью обеспечения одновременного наблюдения за движением живых микрообъектов , заданного изменения пара-с метров среды и их измерения,предметное и покровное стекла установлены с эксцентриситетом относительно оси камеры, а крышка установлена с возможностью вращения и на ее внутренней поверхности расположена крыльчат (Л ка мешалки.

(I 9) () 1) СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

С:

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ИЙ (21) 2862961/18-.10 (22) 27.!2.79 (46) 15.11.85. Бюл. 1(.42 (71) МГУ им. М.В.Ломоносова (72) И.И.Броун и Н.М.Исаев (53) 535.823(088.8,) (56) 1. Камера для тканевых культур.

Научно-технический бюллетень фирмы

ОПТОН/ФРГ, У 1/75.

2. Руководство по изучению биологического окисления полярографическим методом. М.: Наука, 1973, с. 50-59. (54)(57) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ

ЖИВЫХ МИКРООВЬЕКТОВ, содержащее камеру с крьппкой и боковыми отвер(5ц4 G 01 N 21/00; G 02 В 21/00 стиями, в которых размещены датчики контроля и изменения параметров среды в камере, мешалку с крыльчаткой, а также предметное и покровное стекла, расположенные соответ- ственно в дне камеры и в крышке, отличающееся тем, что, с целью обеспечения одновременного наблюдения за движением живых микрообъектов, заданного изменения пара-г метров среды и их измерения, предметное и покровное стекла установлены с эксцентриситетом относительно оси камеры, а крышка установлена с возможностью вращения и на ее внутрен- е ней поверхности расположена крыльчат" ка мешалки.

1 1191

Изобретение отнбсится к лаборторной физико-химической технике, а именно к устройствам для исследования физико-химических параметров живых микрообъектов, и может быть использовано в различных областях биологии и медицины для наблюдения за движением микрообъектов в слоях различных сред фиксированной толщины методами световой микроскопии при 1О одновременном изменении и регистрации физико-химических параметров среды, связанных с жизнедеятельностью микрообъектов.

Известна камера для наблюдения 15 фиксированных живых микрообъектов, состав среды в которой изменяется принудительно при замещении всего объема среды инкубации фиксированных клеток, зазор между предмет-20 ным и покровным стеклами составляет несколько миллиметров f1) .

Данная камера непригоцна для на" блюдения за движением живых микрообъектов различными способами свето- 25 вой микроскопии в первую очередь методом темного поля"} при одновременном направленном изменении состава среды.

Наиболее близким к изобретению по б своей технической сущности является устройство для исследования физикохимических параметров живых микрообъектов, содержащее камеру с крьппкой и боковьп и отверстиями, в кото35 рые вставлены датчики контроля и изменения параметров среды в камере, мешалку с крыльчаткой, а также предметное и покровное стекла, расположенные соответственно в дне камеры и в крышке (2j .

С помощью такого устройства можно изменять физико-химические параметры среды и контролировать происходящие изменения. Однако посредством этого устройства невозможно наблюдать за движением живых микрообьектов методами световой микроскопии.

Целью изобретения является обеспечение одновременного наблюдения за движением живых микрообъектов, заданного изменения параметров среды и их измерения.

Укаэанная цель достигается 55 тем, что в устройстве для исследования физико-химических параметров живых микрообъектов предметное

782 и покровное стекла установлены с эксцентриситетом относительно оси камеры, а крьппка установлена с возможностью вращения и на ее внутренней поверхности расположена крыльчатка мешалки.

На чертеже схематически изображен общий вид устройства.

Устройство включает камеру 1, в дно которой вмонтировано с эксцентриситетом предметное стекло 2. На боковой поверхности камеры выполнено отверстие 3. Крышка 4 камеры установлена с возможностью вращения и снабжена покровным стеклом 5, ось которого имеет. эксцентриситет с осью камеры и крыльчаткой 6 мешалки.

Устройство имеет также уплотнительные кольца 7, термостатирующее устройство 8 с входным 9 и выходным

10 патрубками, прижимное неподвижное полукольцо 11, прижимное подвижное полукольцо 12, эксцентриковый прижим

13, опору 14 эксцентрикового прижима, подшипник 15 скольжения эксцентрикового прижима, подшипник 1б скольжения камеры, шестерню 17 и гильзы 1820, в которые вставлены датчики.

Устройство работает следующим образом.

Рассмотрим случай исследования влияния высоких концентраций ионов натрия на подвижность Е. со1 в анаэробных условиях.

Камеру 1 устанавливают на предметном столике микроскопа и фиксируют с помощью двух полуколец 11 и

12. Затем камеру нагревают до 30 С с помощью термостатирующего устройства 8, соединенного через патрубки

9 и 10 с выносным термостатом. В одну из гильз вводят электрод для измерения концентрации кислорода. Свет фокусируют %а предметном стекле 2 камеры. Далее камеру заполняют средой для инкубации бактерий и закрывают крьппкой 4. Избыток жидкости вытекает через отверстие 3, через которое в процессе наблюдения вводят добавки. Крышку 4 фиксируют с помощью эксцентриковых прижимов 13, предотвращающих подъем крышки 4 при вращении. Шестерню 17 крышки 4 присоединяют к валу двигателя. Объектив микроскопа опускают до попадания предметного стекла 2 в фокус, включают двигатель и перемешивают содержимое камеры с помощью крыльчатки

82 4 количество концентрированного раствора хлористого натрия,перемешивают 30-40 с и производят наблюдение за бактериями. Наблюдение проводят

20-30 мин при периодическом перемешивании среды.

Данное устройство позволяет регистрировать одновременно методом световой микроскопии скорость движения бактерий и концентрацию кислорода в среде инкубации, благодаря чему удается показать, что в анаэробных-условиях экэогенные ионы натрия .(150 мкИ ) возобновляют движение бактерий на 2-3 мин.

3,11917

6. После стабилизации показаний кислородного электрода через отверстие

3 вносят суспензию бактерий. После равномерного распределения бактерий по камере двигатель выключают и опре- g деляют скорость движения бактерий в течение 20-30 с. Затем перемешивание продолжают. Остановки крыльчатки мешалки не нарушают линейности показаний кислородного электрода.

После исчерпания в среде инкубации кислорода скорость движения бактерий подает. Когда скорость движения бактерии достигает нуля, через отверстие 3 в камеру вносят необходимое

ВНИИПИ Заказ 7149/39. Тираж 896 Подписное

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул. Проектная, 4