Способ определения степени повреждения эритроцитов

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5D 4 А 61 В 500 А 61 В 1000

/

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ . ::, К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ 4

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3663035/28-14 (22) 18.10.83 (46) 30.03.86. Бюл. № 12 (71) Киевский ордена Трудового Красного

Знамени медицинский институт им. акад.

А. А. Богомольца (72) А. И. Грицюк, А. Н. Пархоменко, П. А. Ангелуца. Ю. Н. Сиренко и В. 3. Нетяженко (53) 616.155.1 (088.8) (56) Коваль Н. Н. — В кн. Новые методы диагностики и лечения. Сборник трудов Алтайского мединститута. Барнаул, 1974, с. 130.

„„SU„„1220636 А (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ПОВРЕЖДЕНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ путем отбора пробы крови, приготовления взвеси эритроцитов, смешивания ее с химическим реагентом, регистрации оптической плотности и определения времени полного гемолиза, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве химического реагента используют изотонический раствор мочевины, а степень повреждения эритроцитов определяют по соотношению времени полного гемолиза у пациента и здорового донора, причем при повреждении 12,5 — 37,0", о определяют умеренную, а при повреждении 37,5% и более— выраженную степень повреждения эритроцитов.

1220636

Изобретение относится к медицине., B 1астности к кардиологии и гематологии, и может быть использовано в ревматологии, трансфузиологии, сердечно-сосудистой хирургии и радиационной медицине.

Цель изобретения — повышение точности способа путем обработки эритроцитов изотоническим раствором мочевины и дифференциации умеренной и выраженной степеней повреждения эритроцитов.

Способ осуществляется следующим обраЗОМ,.

Производят забор венозной крови, которую стабилизируют 3,8%-ным раствором цитрата натрия. Пробу крови центрифугируют 15 мин со скоростью 1500 об/мин.

Осторожно удаляют слои плазмы и лейкоцитов, Остывп1ийся Осадок эр?1троцитов разводят изотоническим раствором хлорида натрия в соотношении 1:9.

Время полного гемолиза эритроцитов изучают по изменению оптической плотносTH раствора мочевины после добавления взвеси эритроцитов. С этой целью используется фотоэлектроколориметр Ф;!К-56М. Графическую регистрацию динамики процесса Гемолиза осуществляют оксигемографом 036 — М, подключенным к фотоэлек. троколориметру через мостовых сопротивлений РЗЗ. Определение производится при красном светофильтре фотоэлектроколориметра.

Б опытную кювету с рабочей гранью 5 мм вносят 2 мл 0,3 М раствора мочевинь1.

Для обеспечения быстрого и равномерного распределения эритроцитов в кювете используется штопорообразная мешалка с рабочим шагом 2 мм и частотой вращения

600 об/мип (может быть использована любая мешалка). Вращением правого барабана фотоэлектроколориметра устаиавл ивакгг писчик оксигемографа в крайнем правом положении и включают лентопротяжный механизм оксигемографа со скоростью

1 см/мии. В опытную кювету быстро добавляют 0,05 мл суспензии эритроцитов в изо Гокическом растворе хлорида натрия.

При добавлении эритроцитов, которые являются оптически плотными частицами, оптическая плотность раствора увеличиваетсч, и писчик оксигемографа быстро отклоняется влево, однако вследствие разрупения эритроцитов в процессе гемолиза происходит постепенное падение оптической плотности раствора, которое регулируется в виде кривой. Переход кривой линии в пряму ю свидетельствуpT 0 полном Гемолизировапии эритроцитов.

Время полного гемолиза определяют на регистрирующей бумаге оксигемографа по длине отрезка АВ, где точка А отражает момент добавления эритроцитов в опытнук1 кювету, а точка В является ппоекцией точки перехода кривой линии в прямую на нулеву10 ликию.

При скорости движения лентопротяжного механизма оксигемографа 1 см/мин время колкого гемолиза равно длине отрезка

АВх60 с.

Поскольку время полного гемолиза эритроцитов зависит от времени года, время

Il0ли0Г0 Ге !0.1иза у 607bHbIX Bblp;IiKBIOТ B Ilp0цеllтах 110 отнои1ению к cpo;IIIO»y времени гемолиза 3 — 5 здоровых доноров, полагая, что эритроцитарная мембрана у этих лиц ке изменена. Доноры обследуются параллельВ0 с больными ежемесячно.

Степень повреждения эритроцитов определяют по формуле

Бремя полного геМ О. I H B B B O I I bi 1 Å, с 100%

= — 100% Бремя среднего

Il 0.! hOi 0 Гем 0.!Из а

B 3 0 P 0 !I bl X Д 0 Н 0РОН, С

Бре.;!я полубогo гемолиза в опыте, с

00% X 1 Бремя среднего

П 0 Л 11 О Г О Г P. М 0.1 И 3 d

ЗДОРОВЫХ "ОНОР0В, С.

Степень повреждения эрк1

2011итов

rI чи

Пример 2. Больная Б., 61 год, находилась на стационарном лечении по поводу острого инфаркта миокарда. Диагноз инфаркта установлен на основании критериев, использованных в первом случае. Время гемолиза в 1-е сут заболевания — 90 с (в контроле -- 145 с) степень повреждения эритроцитов соответственно — 38%, выраженных клинических признаков сердечной недостаточности не выявлено. Длительное время несмотря на введение наркотических анальгетиков сохранялся выраженный болевой синдром. На 2-е сут течение заболева1:.ия осложнилось истинным кардиогенным шоком. Hpå IB гемолиза уменьшилось до

1 мин степень повреждения эритроци55 тов — 59%, агрегация эритроцитов увеличилась на 20% относительная вязкость крови возрасла в 1,5 раза. Г1ри явлениях прогрессирующей сердечной недОстаточности

Пример 7. Больной Н., 54 года, находился на стационарном лечении с диагнозом: острый инфаркт миокарда. Диагноз трансмурального инфаркта миокарда установлен на основании клинических данных, изменений ЗКГ, повышения активности ферментов сыворотки крови. Время гемолиза в первые сутки составило 150 с (в контроле — 177 с), степень повреждения эритроцитов составляла 15% и в динамике болезни существенно не уменьшилась. Агрегация эритроцитов и вязкость крови не увеличились, Течение заболевания было благоприятным, признаки циркуляторных расстройств не отмечались.

1220636

io

Зо

3»

55 не поддающейся медикаментозному лечению, больная умерла.

Пример 3. Больной Г., 77 лет, находился на стационарном лечении по поводу острого инфаркта миокарда. Течение заболевания осложнилось первичной фибрилляцией желудочков, в постреанимационном периоде возникли явления отека мозга, появились признаки почечно-печеночной недостаточности. С лечебной целью больному произведен сеанс гемосорбции на активированных углях (СНК вЂ” 3M) со средней производительностью 120 мл/мин при общем объеме перфузии 32 л. До гемосорбции время гемолиза составило 90 с (в контроле — 135 с), степень повреждения эритроцитов — ЗЗЯ, гемоглобин

105 г/л, свободный гемоглобин не определялся. После перфузии время гемолиза уменьшилось вдвое, степень повреждения эритроцитов — 67Я, гемоглобин составил

95 г/л, свободный гемоглобин не определялся. На 2-е сут заболевание после гемосорбции у больного появились признаки гемолитической анемии: возрос непрямой билирубин, количество гемоглобина снизилось до 80 г/г, появился свободный гемоглобин. Несмотря на проведение активной терапии при нарастающих явлениях отека мозга больной умер.

Пример 4. Донор Б., 29 лет, практически здоров, степень «повреждения» эритроцитов 5,0О

Пример 5. Больная П., 20 лет, с диагнозом: ревматизм, неактивная фаза, недостаточность митрального клапана. Миокардиосклероз. ХНК О. Степень повреждения эритроцитов — 10,1 g.

Пример б. Больной М., 46 лет, страдающий ишимической болезнью сердца, редкими приступами стенокардии напряжения (1-й функциональный класс) на фоне атеросклероза венечных артерий сердца и атеросклеротического кардиосклероза. ХНК

Π— 1. Степень повреждения эритроцитарных мембран — 12,0Я.

Пример 7. Больная С., 52 года, в течение двух последних лет страдала редкими приступами стенокардии, которые участились и стали носить более длительный характер последние два месяца.

Степень повреждения эритроцитов при поступлении — 12,5Я. В результате проведения адекватной терапии ее удалось снизить до 6,2Я.

Пример 8. Больной Н., 42 лет, с диагнозом ИБС, гипертоническая болезнь 11 степени с частыми гипертоническими кризами. Атеросклеротическнй кардиосклероз.

ХНК 2А. Степень повреждения эритроцитов при поступлении — 25,0Я, после проведения курса лечения — 10,4Я.

Пример 9. Больной Ш., 35 лет, болеет системной красной волчанкой, хроническое течение, 11 степень активности с поражением кожи, почек, суставов, сердца.

ХНК 1, ХПН 1. Исходная степень повреждения эритроцитов — 37,0О. под влиянием интенсивного лечения, включая кортикостероиды, ее удалось снизить до 19,8О.

Пример 10. Больная Я., 24 лет, с выраженной застойной недостаточностью кровообращения на фоне дилатационной кардиопатии с синдромом диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови и декомпенсированным метаболическим ацидозом. В результате проведенного в клинике лечения несколько снизилась выраженность нарушения кровообращения, однако степень повреждения эритроцитов осталась неизменной — 37,5Я.

Пример 11. Больная К., 36 лет, страдающая узелковым периартериитом высокой степени активности с поражением легких, почек, кожи, суставов. ХПН 1, ХЛН 1.

С целью дезинтоксикации и уменьшения активности аутоиммунного процесса проведена операция гемсорбции. При этом степень повреждения эритроцитарных мембран увеличилась с 38,0Я до 45,1Я, значительно возросла концентрация свободного гемоглобина, что потребовало продолжения антикоагулянтной и назначения мембранстабилизирующей терапии.

Пример 12. Больной С., 50 лет, поступил в состоянии истинного кардиогенного шока с признаками острого трансмурального инфаркта миокарда. Несмотря на применение интенсивной терапии и контрапульсации артериальное давление стабилизировать не удалось, отмечалось повреждение эритроцитарных мембран — 66,4g>.

Вследствии неэффективности проводимой терапии больной умер.

Из приведенных примеров видно, что при исследовании проницаемости эритроцитарных мембран группы здоровых лиц максимальное повреждение эритроцитов — 12,4ОО.

Изменения в указанных границах (от О до 12,4О) отмечаются также при благоприятном течении различных заболеваний.

При более тяжелом течении заболеваний, сопровождающихся болевым синдромом, активацией симпатико-адреналовой, калликреинкининовой систем, системном поражении сосудистого русла, отмечается умеренное повреждение эритроцитарных мембран, что сопровождается появлением в крови свободного гемоглобина, некоторым увеличением свертывающей активности эритроцитов и сдвигами кислотно-щелочного равновесия в сторон компенсированного ацидоза или алколоза. Вместе с тем, при проведении патогенической терапии удается уменьшить степень повреждения эритроцитов до величин, наблюдаемых у больных с благоприятным течением патологических процессов и у здоровых доноров.

1220б36

Составитель Н. Гуляева

Редактор Е. Конча Техред И. Верес Корректор В. Бутяга

Заказ 1506!4 Тираж 659 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений н открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Выраженная степень повреждения эритроцитов наблюдается при тяжелом и часто неблагоприятном течении ряда заболеваний, а также при проведении травмирующих эритроциты лечебных процедур (операция гемосорбции, контрпульсации). При этом отмечаются признаки декомпенсированного метаболического ацидоза, большая концентрация недоокисленных продуктов метаболизма, в несколько раз возрастает уровень свободного гемоглобина, значительно повышается свертывающая активность эритроцитов.