Способ прогнозирования течения постгеморрагического периода при кровопотере

 

Изобретение относится к медицине. Цель изобретения - повышение точности способа. Из плазмы больного получают осадок лейкоцитов. При центрифугировании 1000 об/мин получают плотный осадок лейкоцитов, надосадок сливают. Полученную массу лейкоцитов разводят дистиллированной водой. Для определения активности гексокиназы лейкоциты помещают в инкубационную среду, затем производят спектрофотометрию. После этого определяют активность лактатгидрогеназы, для этого лейкоциты инкубируют, центрифугируют. Полученный осадок растворяют в 5 мл ацетона, выдерживают до стабильного окрашивания и фотометрируют. При снижении этих показателей относительно нормы определяют легкое течение постгеморрагического периода при кровопотере. с S (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (Н) А1 (5)) 4 G 01 N 33/68

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

C .Ж

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3001037/28-1 4 (22) 05.11.80

Г46) 07.09.86. Бюл. Р 33 (71) Ростовский государственный ордена Дружбы народов медицинский институт (72) 3.И.Микашинович (53) 616.07(088.8) (56) Булгаков П.П. Колориметрический метод определения гемоглобина для оценки величины кровопотери. — Хирургия, 1961, У 8, с. 7-9. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕН1И

ПОСТГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ПЕРИОДА ПРИ

КРОВОПОТЕРЕ (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения — повьппение точности способа. Из плазмы больного получают осадок лейкоцитов. При центрифугировании 1000 об/мин получают плотный осадок лейкоцитов, надосадок сливают. Полученную массу лейкоцитов разводят дистиллированной водой. Для определения активности гексокиназы лейкоциты помещают в инкубационную среду, затем производят спектрофотометрию. После этого определяют активность лактатгидрогеназы, для этого лейкоциты инкубируют, центрифугируют.

Полученный осадок растворяют в 5 мл ацетона, выдерживают до стабильного окрашивания и фотометрируют. При снижении этих показателей относительно нормы определяют легкое течение постгеморрагического периода при кровопотере.

1255931

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки состояния организма после массивной кровопотери.

Цель изобретения — повышение точности способа при прогнозировании постгеморрагического периода при кровопотере.

Поставленная цель достигается путем исследования форменных элементов крови (лейкоцитов) в ранний период после кровопотери (0-2 ч) и определения в них ферментов гликоза: лактатдегидрогеназы и гексокиназы.

Способ осуществляют следующим образом.

У пациента производят забор крови в центрифужную пробирку с каплей гепарина (5 000 мг/мл). После получения.плазмы путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 20-30 мин выделяют лейкоциты. Для получения осадка лейкоцитов плазму центрифугируют в течение 12 мин при 1000 об/мин и очищают физиологическим раствором от примесей эритроцитов . Трудно отделимые эритроциты разрушают добавлением раствора хлористого аммония после 5 мин экспозиции. После центрифугирования при 1000 об/мин получают плотный осадок лейкоцитов, надосадок сливают. Полученную массу лейкоцитов разводят 1 мл дистиллированной воды для проведения биохимического анализа. Для определения активности гексокиназы лейкоциты помещают в инкубационную среду, содержащую 0,2 мл НАДФ (1,5 мг/мл), 0,2 мл сернокислого магнита (120 мг/мл), 0,2 мл глюкозы (2,4 мг/мл), 0,,4 АТФIЭ (1 мг/мл), 1 мл трис-буфера рН 7,5, 0,2 мл лейкоцитов, содержащих 300-550 мкг белка. Инкубируют 10 мин при 37 град, прекращают реакцию добавлением 1 М щелочи. Спектрофотометрируют при длине волны 340 нм.

Результаты выражают в микромолях

НАДФН за минуту на 1 г. Для опреде— .пения активности лактатдегидрогеназы

0,4 мл лейкоцитов помещают в инкубационную среду. содержащую лактат натрия 20 мг/мл, НАД. MgS04 . Обьем пробы 2,5 мл . Инкубируют 1 ч при

37 град с тетразолием синим (1ìã/мл) и феназинметасульфатом (2 мг/мл).

После инкубации центрифугируют, полученный осадок растворяют в 5 мл ацетона, выдерживают до развития

3S

40 стабильного окрашивания и фотометриpvIoT при 570 нм. Результаты BblpBEd ют в микрограммах на 1 г белка.

Пример 1. Больная В, 18лет, поступила в гинекологическое отделение больницы с дисфункциональным маточным кровотечением. Потеря крови точно не установлена. Больной проведено исследование крови сразу после поступления в отделение, При исследовании крови в этот период получены следующие результаты: содержание гемоглобина 114 г/л, активность гексокиназы лейкоцитов 20 мкмоль/мг, активность лактадегидрогеназы 50мкг/мг.

Полученные лабораторные данные указывали на высокую активность ферментов гликолиза, свидетельствующих о формировании гипоксических сдвигов в организме. Таким образом, предполагалось тяжелое течение постгеморрагического периода. Действительно, в течение дня состояние больной утяжелялось, артериальное давление понизилось до 80-55 мм рт.ст. Пульс участился до 150 ударов в минуту.

Через сутки уровень гемоглобина понизился. Общее состояние больной и полученные данные лабораторных исследований указывали на необходимость принятия экстренных мер интенсивной терапии. Последующее капельное введение комплекса глюкозы, витаминов. полиглюкина и дача кислородного коктейля привело к повышению артериального давления. Однако на протяжении еще недельного срока состояние боль— ной оставалось среднетяжелям. Уровень гемоглобина свидетельствовал о развитии анемии. Только по истечении месяца интенсивной терапии состояние больной стало удовлетворительным.

Пример 2. Больная Т., 47 лет, поступила в гинекологическое отделение больницы с маточным кровотечением. Потеря крови в момент поступлеl ния не превышала 200 мл. Больной проведено исследование крови сразу после поступления в отделение. При исследовании крови в этот период получены следующие результаты: содержание гемоглобина 116 г/л, активность гексокинаэы в эритноцитах 11 мкмоль/мг белка, активность лактатдегидрогена.зы 41,6 мкмоль/кг. Полученные лабораторные данные указывали на повышение активности ферментов гликолиэа, 1255

Формула из обре тения

Составитель Н. Хрусталева

Техред.Л.Сердюкова Корректор М. Демчик

Редактор Н. Рогупич

Заказ 4816/44

Тираж 778

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 свидетельствующие о накоплении в крови молочной кислоты и увеличении анаэробных процессов в организме.

Таким образом, несмотря на оптимальный уровень содержания гемоглобина и прекращения кровотечения предполагалось тяжелое течение постгеморрагического периода. Действительно, через сутки у больной начал резко снижаться гемоглобин, состояние 10 больной утяжелилось. Состояние больной становилось угрожающим и по жизненным показаниям потребовалось проведение хирургических мероприятий.

После проведения хирургического лече- 1 ния течение постоперационного периода было тяжелым, требовавшем проведение мер интенсивной терапии, реанимационных мероприятий. После выписки из стационара больная пос- 20 тавлена на диспансерный учет.

Пример 3. Больная А., 25 лет, поступила в гинекологическое отделение с маточным кровотечением. Потеря 25 крови не превышала 200 мл. Больной проведено исследование крови сразу после поступления в отделение. При исследовании крови в этот период получены следующие результаты: со- щ0 держание гемоглобина 116 г/л, активность гексокиназы лейкоцитов 9мкмоль/

931 4

/мг белка, активность лактатдегидрогеназы 8 мкг/мг белка.

Полученные лабораторные данные указывали на снижение активности ферментов гликолиза, свидетельствующие об уменьшении активности процессов, протекающих в анаэробных условиях. Полученные результаты указывали на легкое течение постгеморрагического периода. Действительно, в течение суток после введения глюкозы, комплекса витаминов, раствора хлористого кальция, антибиотиков, состояние улучшилось и через 48 ч больная была выписана.

Способ прогнозирования течения постгеморрагического периода при кровопотере путем биохимического анализа крови, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности способа, в лейкоцитах определяют активность лактатдегидрогеназы и гексокиназы и при снижении этих величин относительно нормы определяют легкое течение постгеморрагического периода, а при увеличении показателей относительно нормы прогнозируют тяжелое течение постгеморрагического периода при кровопотере.