Способ определения лектинов

 

Изобретение относится к биохимическому анализу и позволяет ускорить определение лектинов. Готовят серию последовательных двукратных разведений исследуемого раствора, добавляют по 0,5 мл 2%-ной суспензии эритроцитов и через 1-2 с по 0,01 мл 0,015.н. раствора соляной кислоты до достижения рН 1-2. Регистрируют изменения светорассеяния на самописце в течение 1 мин. О наличии лектинов в экстракте свидетельствует форма полученнойкривой. to ;о а 00

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) А1 (51)4 G 01 N 33 5

) ; p I д) F

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3775694/28-14 (22) 27.07.84 (46) 15.02.87. Бюл. Р 6 (71) Институт биологии южных морей им. А.О.Ковалевского (72) Ю.С.Чурилов (53) 611-01851(088.8) (56) Королев Н.П. и др. Цитология, 1982, т. 24, вып. 6, с. 736. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛЕКТИНОВ (57) Изобретение относится к биохимическому анализу и позволяет ускорить определение лектинов. Готовят серию последовательных двукратных разведений исследуемого раствора, добавляют по 0,5 мл 27-ной суспензии зритроцитов и через 1-2 с по 0,01 мл 0,015 .н. раствора соляной кислоты до достижения рН 1-2. Регистрируют изменения светорассеяния на самописце в течение 1 мин. О наличии лектинов в экГ стракте свидетельствует форма полученной кривой.

Формула и з о б р е т е н и я, Способ определения лектинов путем добавления исследуемой пробы в суспензию эритроцитов и последующей регистрации изменения светорассеяния, отличающийся тем, что, с целью ускорения анализа, в смесь дополнительно вносят соляную кислоту до достижения рН 1-2.

Составитель Н.Гуляева

Техред Л.Сердюкова Корректор С.Шекмар

Редактор А.Ревин

Заказ 7893/39 Тираж 798 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

1 12901

Изобретение относится к биохимии, а именно к способам определения лектинов °

Цель изобретения — ускорение анализа за счет дополнительной обработки 5 пробы соляной кислотой.

Способ осуществляют следующим образом.

К серии последовательных двукратных разведений исследуемого раствора 19 добавляют равное количество 2 -ной суспензии эритроцитов, затем вносят соляную кислоту до достижения рН 1- 2 и регистрируют изменение светорассеяния . 15

Пример 1. Изучали наличие лектинов в черноморской водоросли

Ulva rigida. Готовили экстракт тканей водоросли (0,1 г сырой массы в 1 мл буферного раствора рН 7,5). Экстракт 20 фильтровали и готовили его двукратные последовательные разведения объемом по 0,5 мл. К каждому разведению до— бавляли по 0,5.мл 2 -ной суспензии эритроцитов и через 1-2 с по 0,01,мл 25

0,015 н. раствора соляной кислоты до достижения рН 1,8. Последовавшие изменения светорассеяния регистрировали на самописце в течение одной минуты.

Форма полученной кривой свидетель-. 30 ствовала о наличии лектинов в экстракте. Титр лектина, характеризующий экстракт, составил 1:512. Время выявления 1 мин. В дальнейшем обнаруженный таким образом лектин был выде- лен в чистом виде.

Пример 2. Исследовали наличие лектинов в тканях средиземноморских радиолярий отряда Spumellaria. Гото68 2 вили экстракты тканей исследуемых объектов (0,1 г ткани на 1 мл буфер,ного раствора рН 7,5). Экстракты фильтровали и готовили его двукратные последовательные разведения объемом по 0,5 мл. К каждому разведению добавляли по 0,5 мл 2 -ной суспензии эритроцитов и через 1-2 с 0,015 н. раствор соляной кислоты до рН 1,0.

Последующие изменения светорассеяния регистрировали на самописце в течение минуты. Форма полученной кривой свидетельствовала о наличии лектинов в экстракте. Титр лектина 1:8. Время определения 1 мин.

Пример 3. Выявляли лектины в тканях водоросли Cystoseira barfata.

Экстракт и его разведения, а также реакционные смеси готовили как в примере 1. Добавления кислоты проводили аналогично, рН смеси устанавливался равным 2,0 ед. Последовавшие изменения светорассеяния регистрировали в течение 40 с. Форма кривой свидетельствовала о наличии лектинов в экстракте. Титр лектина 1:1024.

Время определения 40 с.