Способ выделения антигенов из растворимых иммунных комплексов

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной и клинической иммунологии . Цель изобретения - повышение выхода антигена. К сыворотке крови больного добавляют дистиллированную воду, подкисленную до рН 4,6 раствором уксусной кислоты. Центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют. Осадок промывают подкисленной водой, центрифугируют. Затем осадок растворяют в физиологическом растворе для вьделения антигенов и исследования свойств и состава иммунных комплекс 9 сов.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„Я 1„„126 1 4

4. " (1

l. (ji

;" 1

1;(:

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н A STOPCHOIVIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

fl0 делАм изОБРетений и ОтнРытий (21) 3449645/28-14 (22) 08.06.82 (46) 07.11.86. Бюл. Ф 41 (71) 1-й Ленинградский ордена Трудового

Красного Знамени медицинский институт им,акад.И.П.Павлова и Научноисследовательский институт экспериментальной медицины (72) Л.С.Косицкая и Т.P.Ëàâðîâà (53) 6!5.373 (088.8) (56) Dipeon М., Laver M °, Riza J., Bach J. Jornal of Immunologicae

Methods, 1977, 16, 165-183. (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ ИЗ

PACTBOPHMhlX ИММУННЫХ КОМПЛЕКСОВ (50 4 А 61 К 39/00 G 01 N 33/536 (57) Изобретение относится к медици» не и может быть использовано в экспериментальной и клинической иммунологии. Цель изобретения - повышение выкода антигена. К сыворотке крови больного добавляют дистиллированную воду, подкисленную до рН 4,6 раствором уксусной кислоты. Центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют. Осадок промывают подкисленной водой, центрифугируют. Затем осадок растворяют в физиологическом растворе для выделения антигенов и исследования свойств и состава иммунных комплексов.

l2

Составитель Г.Крюкова

Редактор Н.Бобкова Техред Л.Сердюкова Корректор И.ИУска

Заказ 5955/3 Тираж 660 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

I по делам изобретений и открытий

113035, Чосква, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r.Óæãîðoä, ул.Проектная,4

Изобретение относится к медицине и может найти применение в экспериментальной и клинической иммунологии, Цель изобретения — повышение выхода антигена и упрощение способа; за счет осаждения иммунных комплексов подкисленной дистиллированной водой и растворением физиологическим раствором, Способ осуществляется следующим образом.

К 0,1 мл сыворотки крови больного добавляют 2 мл охлажденной до 4 С . дистиллированной воды, подкисленной до рН 4,6 0,1 И раствором уксусной кислоты, после чего центрифугируют в течение 30 мин при 3000 об,/мин при

4 С. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок однократно промывают тем же объемом подкисленной воды и центрифугированием в течение 30 мин, после чего осадок растворяют в 3 мл 0,1

Na0H — для количественного определения иммунных комплексов Но величине оптической плотности среды на спектрофотометре при длине волны

280пр или в физиологическом растворе в объеме, равном исходному объему исследуемого субстрата — для вьделения антигенов и исследования свойств и состава иммунных комплексов

Пример l. Больной Г-ов И.П., диагноз: бронхиальная астма инфекционно-зависимая, гормоноэависимая.

Иммунные комплексы осаждали дистиллированной водой, подкисленной до рН 4,5, центрифугировали при 3000 об/

/мин 30 мин, осадок элюировали физиологическим раствором и определяли антигенспецифическим методом в реакции торможения пассивной гемагглюти68174 нации. Антиген выделен в количестве

150 мкг, что характерно для тяжелой формы бронхиальной астмы.

Пример 2. Больная Як-ва Н.Н., диагноз: ревматоидный артрит, нефропатия. Имунные комплексы осаждали дистиллированной водой, подкисленной до рН 4,7, центрифугировали при

3000 об/мин 30 мин, осадок элюирова10 ли физиологическим раствором,и определяли антигенспецифическим методом.

Антиген вьделен в количестве 140 мкг, что характернб для осложненной формы ревматоидного артрита.

15 Использование изобретения позволяет увеличить выход антигена из иммунных комплексов на 407 IID сравнению с известным способом прототипом и упростит его, так как для его осуществле20 ния не требуется сложной аппаратуры и реактивов и сокращается время исследования.

Таким образом, способ может быть использован для выявления специфического антигена при различных патологических состояниях, коррекции лечения и может быть применен в любой клинической лаборатории.

ЗО Формула из о бр етения

Способ вьделения антигенов иэ растворимых иммунных комплексов, включающий осаждение их, центрифугирование и элюирование, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения выхода продукта и упрощения способа, осаждение осуществляют дистиллированной водой, подкисленной уксус40 ной кислотой до рН 4,6, а элюирование ведут физиологическим раствором.