Способ моделирования внелегочных туберкулезно-аллергических заболеваний

 

Изобретение относится к экспериментальной патологии и терапии. Дпя повышения воспроизводимости и стабильности модели подопытному животному после сенсибилизации убитыми микобактериямн туберкулеза вводят антиген той же культуры,предварительно обра ботанной ультразвуком интенсивностью 40-50 Вт/см, амплитудой колебаний 2,5-3,5 мкм, частотой 43-45 кГц в течение 5-10 мин. г л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ . «ЗЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А1 (19) 00

«5g g С 09 В 23 28

Ф % (. Дф

9a;., Tf gg,..

" " . с4 " «ю ту„

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ(СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3823355/28-14 (22) 10. 12. 84 (46) 23.08.87. Бюл. У 31 (71) Ленинградский научно-исследовас тельский институт фтиэиопульмонологии (72) Э.Н.Беллендир, С.К.Бояркина, В.И.Горяшина, И.У.Салмагамбетов, P.Ê.ßãàôàðîâà, Е.И.Мякотина и Н.М.Попов (53) 615.475(088.8) (56) Песчанская И.Н. Экспериментальное моделирование туберкулезных поражений -глаза. — Проблемы туберкулеза, 1973, У 12, с. 65-70. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ВНЕЛЕГОЧНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗНО-АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБО- .

ЛЕВАНИИ (57) Изобретение относится к экспериментальной патологии и терапии. Для повышения воспроизводимости и стабильности модели подопытному животному после сенсибилиэации убитыми микобактериями туберкулеза вводят антиген той же культуры, предварительно обра.— ботанной ультразвуком интенсивностью

40-50 Вт/см, амплитудой колебаний

2,5-3,5 мкм, частотой 43-45 кГц в течение 5-10 мин.

1 133236

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной патологии и терапии.

Цель изобретения — повышение воспроизводимости и стабильности модели.

В качестве разрешающего фактора используют антиген, приготовленный из убитых автоклавированием микобактерий туберкулеза, обработанных ультразвуком в течение 5-10 мин при интенсивности 40 — 50 Вт/см, частоте

2.

43 - 45 кГц, амплитуде колебаний

2,5 — 3,5 мкм в непрерывном режиме.

Пример 1. Воспроизведение ту- 15 беркулезно-аллергического поражения глаз.

Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберку- 2 леэа иэ расчета 1 мг культуры на

1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси, наливают в пробирку диаметром 15 мм,которую помещают в стеклянный стакан емкостью 500 мл, 25 наполненный холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение 5 мин интенсивностью

50 Вт/см, амплитудой колебаний

3,5 мкм, на частоте 45 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену.Всю процедуру приготовления антигена проводят с соблюдением правил асептики во избежание инфицирования взвеси. Подопытного кролика породы шиншилла серой масти массой

3 кг через 2 мес после сенсибилиза40 ции убитыми микобактериями туберкулеза фиксируют к станку в положении на животе. С целью обезболивания вводят 3,0 мл 17-ного раствора промедола. В правый глаз закапывают 1Х45 ный 1 аствор дикаина с добавлением

0,1Х-ного раствора адреналина.Ретробульбарно в область правого глаза вводят 3,0 мл 0,257.-ного раствора ноковаина.Оперируемый глаз обкладывают стерильными салфетками, которые фикси50 руют эа края век. В шприц набирают приготовленный антиген, обработанный . ультразвуком и эмульгированный в физиологическом растворе, в количестве 1 мл. Верхнее веко поднимают ве55 коподъемником, глазное яблоко фиксируют пинцетом за верхнюю прямую мьппцу. Тонкой иглой, насаженной на

2 2 шприц, прокалывают роговую оболочку правого глаза в верхней ее части, у лимба.Медленно без усилий вводят в переднюю камеру глаза антиген в количестве

0,1 мг (0 1 мл взвеси убитых и обработанных ультразвуком микобактерий туберкулеза). Иглу извлекают,глаз промывают .4 -ным раствором борной кислоты.

Через 5 дн в тканях правого глаза развился воспалительный процесс с экссудацией и отеком. Через 3 мес после введения разрушающей дозы антигена отмечалось помутнение прозрачных сред глаза с полной потерей зрения. В последующие периоды наблюдалось хроническое течение процесса.

Через 6 мес после. введения разрешающей дозы антигена кролик выведен из опыта. При гистологических исследованиях обнаружены: инфильтрация роговицы клеточными элементами, скопление в ткани радужной оболочки лимфоидных клеток ввиде небольших узелков без выраженных грануляционно-некротических изменений, скопление в передней камере глаза жидкого экссудата с большим количеством эротроцитов,отек тканей радужной оболочки, разволокнение стромы роговицы.

Таким образом, у животного удалось получить туберкулезно-аллергическое поражение глаза в чистом виде без каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления °

Пример 2. Воспроизведение туберкулезно-аллергического поражения синовиальной оболочки коленного сустава.

Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберкулеза иэ расчета 1 мг культуры на

1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси наливают в пробирку диаметром 15 мм, которую помещают в стеклянный стакан емкостью 500 мл, наполненный холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение 10 минут интенсивностью

40 Вт/см, амплитудой колебаний

2,5 мкм, на чатоте 43 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену. Всю процедуру приготовления

4 области коленного сустава. Острые воспалительные изменения в области

133236

Таким образом, у кролика было получено туберкулезно-аллергическое поражение синовиальной оболочки коленного сустава в чистом виде беэ каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления,.

Формула изобретения

Составитель М.Позняк

Техред М.Дидык ; Корректор 0.111åêìàð

Редактор В.Петраш

Заказ 3837/47 Тираж 433

ВНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий

113035,Москва, Ж-35,Раушская наб., д 4/5

Подписное

СССР

Производственно"полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул . Проектная, 4 антигена проводят с соблюдением правил асептики во избежание инфицирования взвеси. Подопытного кролика породы шиншилла серой масти массой

3,5 кг через 2 мес после сенсибилиЯ зации фиксируют к iстанку в положении на спине.Выстригают шерсть в области правого коленного сустава.

С целью обезболивания операции вводят 10

) внутримышечно 3,5 мл 1Х-ного раствора промедола.Кожу коленного сустава дважды обрабатывают 1Х-ным раствором иодоната. Операционное поле обкладывают стерильными салфетками. 15

В шприц набирают приготовленную заранее взвесь антигена в физиологическом растворе в количестве 1 мл. Иглой,насаженной на шприц, прокалывают кожу, в точке на 5 мм выше места 20 прикрепления связки надколенника к гребню большеберцовой кости по средней линии. Связку надколенника прокалывают с таким расчетом, чтобы нанчик иглы находился в толще крыловидной складки синовиальной оболочки, но не проникал в полость сустава. Взвесь антигена в количестве

0,15 мг (О, 15 мл взвеси убитых мико-. бактерий туберкулеза, обработанных 30 ультразвуком) вводят в ткань синовиальной оболочки. При этом контролируют правильность положения острия иглы. При правильном положении иглы для инъекции требуется приложить некоторое усилие, при неправильном (проникновение в полость сустава) содержимое шприца вытекает свободно, а при снятии шприца с иглы через нее выделяется синовиальная жидкость. 40 ,По окончании введения антигена иглу извлекают резким движением, место инъекции смазывают иодом.

Через 6 дн. после введения разрешающей дозы антигена в толщу синовиальной оболочки появилась болезнен-. ность, утолщение сустава в попереч- нике до 28 мм,местное повышение тема пературы до 37,3 С и гиперемия в пораженного сустава стихли через

2 мес и процесс приобрел хроническое течение. До 1 r. после введения разрешающей дозы антигена увеличение размера сустава сохранялось, развились деформирующие изменения и контрактура пораженного сустава до 80

Через 1 r. после введения разрешаю- . щей дозы антигена кролик выведен иэ опыта. При гистологических исследованиях определяются признаки хронического аллергического синовита с

Г выпотом,имеющим фибринозно-геморрагический характер, обнаруживаются лимфоидно-клеточные узелки и участки периваскулярной гистиолимфоцитарной инфильтрации. Обнаружено разрастание фиброэной ткани,а также разрушение хрящевой и костной тканей суставнык поверхностей с развитием деформирующего артроза.

Способ моделирования внелегочных туберкулезно-аллергических заболеваний путем иммунизации специфическим антигеном из убитой культуры микобактерий туберкулеза, о т л ич а ю шийся тем,что, с целью повышения воспроизводимости и стабиль-. ности модели, животному после имму, низации местно в ткани, обладающие повышенной чувствительностью,вводят антиген той же культуры,предварительно обработанной ультразвуком интенсивностью 40-50 Вт/см, амплитудой и колебаний 2,5-3,5 мкм, частотой

43-45 кГц в течение 5-10 мин.