Способ постановки реакции агглютинации при инфекционной энтеротоксемии овец

 

№ 14O538

Класс ЗОЙ 1в4

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1(06) 2 иснс1 .ч с/7 L/12 и п,l" 139

В. И. Леньков

СПОСОБ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ АГГЛ1ОТИНА1.1 ИИ

П Р И И Н Ф Е К Ц И О Я Н О Й 3 Н Т Е P O T O K C L A. 1!4 È О В:-1, Заявл Ho 12 авва!;в 1961 г. аа ¹ 693291/ 0 — !6 в K(i .,;IITt lië .евам цв в, ете:! . 9 в отв! ытв!! прв Гове., Миаветг ав (.(СР

Оп бликовol!ii в «Бе ».(тесе I::.ii(ð«òi!:ï ) ¹ 16 1 1(16!

Постановка реакции агглютинации с целью диагносцирования некоторых заболеваний животных известна. Инфекционную энтеротоксемию диагносцируют серологическими методами — реакцией нейтрализации токсина возбудителей заболевания, а также на основании результатов бактериологического исследования, причем последнее продолжается до

8 дней.

Описываемый способ реакции агглютинации позволяет сократить

-тот срок на 6 — 7 дней. Отличительная особенность способа заключается в том, что в качестве исследуемого материала берут фильтрат содержимого тонкого отдела кишечника больной или павшей овцы. Реакцию агглютинации ставят на предметных стеклах или в пробирках. Для этого готовят пять разведений стандартной сыворотки против клостридиум перфрингенс типа «Д» с физиологическим раствором в концентрации

1: 100, 1: 200, 1:400, 1: 800, 1: 1600. К 0,5 мл каждого разведения добавляют по 0,5 мл фильтрата содержимого кишечника, смешивают по две капли специфического антигена клостридиум перфрингенс типа «Д», после чего читают реакцию: капельную на предметных стеклах по истечении 8 — 10 мин, в пробирках по истечении 24 час.

Предлагаемый способ реакции агглютинации может быть выполнен непосредственно в хозяйствах без использования лабораторных животных. Компоненты для реакции агглюгинации изготавливает Южно-Казахстанская НИВС.

Содержимое тонкого отдела кишечника, взятое от павшей овцы с подозрением на инфекционную энтеротоксемию, разводят физиолоп1ческим раствором в соотношении 1: 1 или 1: 2, в зависимости от густоты и фильтруют через бу 1ажный фильтр, или через фильтр Зс!!нтца.

Фильтрат содержимого кишечника смешивают в пробирке с стандартной агглютинирующей сывороткой против клостридиум перфрингенс типа «Д» и ставят в термостат на 30 мин. при 37 — 38 или на один час при комнатной температуре (18 — 20 ). Затем две капли смеси из каждой пробирки (разведения сыворотки) наносят на предметное стекло и добавляют одну каплю антигена и тщательно смешивают. Реакцию учитывают в течение 10 .ипк. Если в одном или нескольких разведениях в течение этого времени реакция агглютинации не наступила, то это означает, что в содержимом кишечника имеется эпсилон-токсин. Реакция агглютинации не наступила потому, что сыворотка пошла на нейтрализацию токсина. В данном случае диагноз на энтеротоксемию— положительный. Если же pãàêöèÿ в течение 10 яви наступила во всех разведениях — диагноз отрицательный.

Одновременно с постановкой реакции на предметном стекле, если есть необходимость, в каждую пробирку с оставшейся смесью сыворогки и фильтрата добавляют две капли антигена, смешивают и ставят на

24 часа при комнатной температуре. Реакция агглютинации считается положительной, если жидкость в пробирке просветлела, а на дне осели микробные тела в виде зонтика. Если жидкость в пробирке не просвеглела или микробные клетки осели в виде пуговки, легко разбивающейся в равномерную муть — реакция отр.:щательная. Контролем реакции слу>кит физиологический раствор с антигеном и стандартная сыворотка в указанных выше разведениях без фильтрата содержимого кишечника.

В первом — реакция не должна наступать в течение часа, во втором— должна наступить в течение 10 мин.

Предмет изобретен и я

Эксперт — составитель описания А, Д. Мусин

Редактор М. И. Бородина 1 екред А. А. Камышникова Корректор Н, В Щербакова

Формат бум. 70; 108 /,6

Тираж 450

ЦБТИ при Комитете 10 делам изобретений при Совете Министров СССР

Москва, 1.1еитр, М. Черкасский пер., д.

Объем 0,18 уел. л.

Цена 4 коп открытий

Подп. к печ. 6.!Х-61 r

Зак. 8778

2/6

Типография ЦБТИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР. Москва, Петровка, 14.

Способ посгановки реакции агглютинации при инфекционной энтеротоксемии овец при помощи сыворотки, антигена и физиологического раствора, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени в постановке диагноза инфекционной энтеротоксемии овец до 1 суток,, в качестве исследуемого материала берут фильтрат содержимого тонкого отдела кишечника больной или павшей овцы и ставят реакцию агглютинации на предметных стеклах или в пробирках, для чего делают пять разведений стандартной сыворотки клостридиум перфрингенс типа

«Д» с физиологическим раствором в концентрации 1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1á00, к 0,5 ил каждого разведения добавля1от 0,5 ил филь трата из кишечника, смешивают и добавляют по две капли специфического антигена клостридиум перфрингенс типа «Д», после чего читают реакцию: капельпую на предметных стеклах по истечении

8 — 10 лпн, в пробирках по истечении 24 час.