Способ отбора форм тритикале на выполненность зерна

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к биохимическим анализам белков растений, и может быть использовано ; в селекции на повышение качества зерна. Цель изобретения - повьппение эффективности отбора за счет возможности целенаправленного выделения форм тритикале с генетически обусловленной выполненностью зерна. Зерновики форм тритикале измельчают, получают белковые вытяжки. Перед проведением электрофореза в ячейки геля вносят вытяжку 5 в оставшуюся часть вытяжки добавляют трипсин, размешивают и наносят в следуюпсую ячейку геля. После электрофореза гшастины геля окрашивают на проявление амилазного спектра и анализируют данные спектра. В качестве форм с выполненным зерном отбирают формы, в электрофореграммах которых имеются зоны с меньшей активностью амилаз алейронового слоя и появляются дополнительно фракции с р - амилазной активностью при добавлении трипсина. 2 шт., 1 табЛ;, i с:

аЕЕСОВЭНАа

1ЦЩВТ "; .(,КАЯ б фяио е (л МБА (19) (И) СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPblTHRM

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4298519/30-13 (22) 13.07.87 (46) 30.01.89. Бюл. N -4 (71) Белорусский научно-исследова- тельский институт земледелия (72) Г.А,Василевская, Н.Н.Безлюдный, И.А.Гордей и В.Е.Росенкова (53) 631.521 (088.8) (56) Сборник научных работ НИИ сельского хозяйства централвно-черноземной полосы им. B.Â.Докучаева, т, 13, вып.1, ч. 2, 1976, с. 130-137. (54) СПОСОБ ОТБОРА ФОРМ ТРИТИКАПЕ

НА BbliI0JIHFННОСТЬ ЗЕРНА (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к биохимическим анализам белков растений, и может быть использовано, в селекции на повьппение качества зерна.

Цель изобретения — повьппение эффек (д11 4 А 01 Н 1/04, А О1 С 7/00 тивности отбор а за счет возможности целенаправленного выделения форм тритикале с генетически обусловленной выполненностью з ерна. 3ерновики форм тритикале измельчают, получают белковые вытяжки. Перед проведением электрофореза в ячейки геля вносят вытяжку, в оставшуюся часть вытяжки добавляют трипсин, размешивают и наносят в следующую ячейку геля. После электрофорез а пластины геля окрашивают на проявление амилазного спектра и анализируют данные спектра. В качестве форм с выполненным зерном отбирают формы, в электрофореграммах которых имеются зоны с меныпей активностью амилаз алейронового слоя и появляются дополнительно фракции с P— амилазной активностью при добавлении трипсина. 2 ил., 1 табл.

1454324

И зобретение относитея к сельскому хозяйству, в частности к биохимичес" ким анализам белков растений, и может быть использовано в селекции на повышение качества зерна.

Цель изобретения " повышение эффективности отбора за счет возможности целенаправленного выделения форм тритикале с генетически обусловленной 10 ! ,выполненностью зерна.

На фиг. 1 представлена электрофореграмма формы с выполненным зерном, на фиг.2 — то же, с невыполненным эер" ном, где С вЂ” трек беэ трипсина, Д вЂ” 15 трек с трипсином, 1(а) — зона аналиIs a апейронового слоя, 1 (б) — эона 3-амилаз.

Пример. Зерновики измельчают, з аливают трис-глициновым буфером, рН 20

8,3, оставляют на холоде на 3 ч либо на ночь. Электрофорез проводят в пласинах ПААГ, 8,5 . Перед анализом в ячейки геля вносят вытяжку, затем в оставшуюся часть вытяжки добавляют 25 трипсин (5 мг), размешивают и наносят в следующую ячейку геля.. После электрофореза ппастины геля окрашивают на проявление амилаэного спектра. Для этого гель вы- 30 держнвают в крахмальном клейстере

5 мин (крахмал для. иодометрии), гель промывают водой и помещают на 5 мин в ацетатный буфер, рН 5,5, опять промывают водой и переносят в 6 раз разбавленном водой 0,3/-ном Х в

З -ный KI. Отбирают образцы с меньшей шириной амилаэ алейронового слоя и среди них — образцы, имекщие дополнительные фракции с Р-амилазной активностью в треке с трипсином по сравнению с треком без трипсина.

Проведена оценка 59 образцов тритикале по ширине амилаз алейронового слоя и наличию дополнительных ком45 понентов в зоне (-амнлаэы в сравнении с общим числом о -амилазных компонентов и шириной компонентов

ПП 20, визуальной оценкой выполненности эндосперма по 10-балльной системе, принятой в ВИРе, и массой

1000 зерен; проведен пересев и оцен.ка потомства. Данные приведены в таблице, где из 50 семей селекционной популяции 11 72 выделено 6 семей, характеризующихся меньшей активностью амилаз алейронового слоя и присут ствием дополнит ельных компонентов в спектре 3-амилаз после действия трипсина, которые отобраны в качестве форм с выполненностью зерна.

Из данных таблицы видно, что в треке отобранной семьи Р 59 после при бавления трипсина появились новые дополнительные компоненты с Р-амилаа ной активностью,в треке с трипсином выбракованной семьи 8 8 такие элементы отсутствуют, 1

Отобранные семьи при пересеве увеличили массу,1000 зерен и выполненность эндосперма либо сохранили указанные показатели, остальные (выбракованные) снизили как выполненность эндосперма, так и массу 1000 зерен даже при отсутствии провокационных усЛовий в сухой год. Учет общей гетерогенности амилазного спектра и ши рина компонента ПП 20 не дал четких различий по этим показателям.

Формул а иэ обр ет ения

Способ отбора форм тритикале на выполненность зерна, включающий получение из з.ерна анализируемых форм белковых вытяжек, диск-электрофорез белков в .гелевом носителе, анализ полученных электрофореграмм и выделение зон амилаз, по которым судят о выполненности зерна анализируемых форм, отличающийся тем, что, с.целью повышения эффективности отбора за счет возможности целенаправленного выделения форм тритикале с генетически обусловленной выполненностью зерна, перед дискэлектрофореэом к части вытяжки каждой формы добавляют трипсин, анализируют электрофореграмиа двух частей вытяжки, а в качестве форм с выполненным зерном отбирают те, в электрофореграммах которых имеются зоны с меньшей активностью амилаз алейронового слоя и появляются дополнительно фракции с Р-амилазной активностью при добавлении трипсииа.

1454324

Базовый слособ соб

85 1986

985

11 2

59 + 38 44 3 4

2,5

50+

11 + 54 56

0 5

18 +

47 48

48 51 6 7 эг+

48 50 6 7

20 +

2248 47

6 5

П р к и е ч а к я е. "+" - образцы отобраны н качестве форм с выпоаненностъв верка

Вкзуальнак оценка ка вылолкенко арка, балл

43 40 4 3

48 50 4 5

5 7

Ширин олен

ПП 20