Способ постановки диагноза у животных на бруцеллез

 

Класс А 614; 3011, 6 № 150586

СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Подписная группа Лб 189

А. А. Аливердиев

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА У ЖИВОТНЪ|Х

Заявлено 7 августа 1961 г. за ¹ 741221/30 в Комитет по делам изобретении и открьпий при Совете Министров СССР

Опубликовано в «Бюллетене изобретении» ¹ 19 за 1962 г.

Известные способы диагностики бруцеллеза у животных посредством реакции гемагглютинации и реакции связывания комплемента позволяют выявлять животных, больных бруцеллезом в острой и хронической формах. Однако эти способы не позволяют выявить животных, находящихся в периоде иммунологической негативности и слабой г.еактивности организма при заражении бруцеллезом. Кроме того, известные способы не позволяют отличить животных, больных бруцеллезом, от животных, содержащих в сыворотке крови антитела, возникающие в результате вакцинации против бруцеллеза.

Отличительной особенностью предложенного способа является то, что реакцию гемагглютинации осуществляют с антигеном, полученным из испытуемой сыворотки.

Способ диагностики бруцеллеза у животных посредством данной реакции гемагглютинации позволяет отличить больных бруцеллезом животных от здоровых, дающих положительные реакции прн исследовании их крови на бруцеллез, и способствует скорейшей ликвидации бруцеллеза.

Для осуществления способа диагностики брун=.ëëåçà используют следующие компоненты: эритроциты барана, испытуемую сыворотку, положительную и отрицательную сыворотки, углекислый газ, физиологический раствор и дистиллированную воду.

Эритроциты барана готовят в виде 5%-ной взвеси на физиологическом растворе.

Положительную и отрицательную сыворотки освобождают от гетерогенных (нормальных) агглютининов. Для этого к 1,8 лл сыворотки № 150586

Предмет изобретения

Способ диагностики бруцеллеза у животных посредством реакции гемагглютинации, отличающийся тем, что, с целью выявления больных среди животных, дающих положительную реакцию на бруцеллез при серологических исследованиях, реакцию гемагглютипации осуществляют с 30THI åíoì, полученным из испытуемой сыворотки.

Состав из елъ Мусин

Texpeä T. П. Курилко

Редакзор О, Д. Ус

Корректор Г. E. Опарина

Поди. к пен, 25/VIII — 63 г. Формат бум. 70 X 108 /in Объем 0,18 изд. л.

Заказ 2110 18 Тираж 400 Цена 4 коп.

ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4.

Типография, пр. Сапунова, 2. добавляют 0,2 мы 5,,-ной взвеси эритроцитов барана. Полученпу1о смесь встряхивают и выдерживают 30 мин при комнатной температуре, затем центрифугируют в течение 15 мин при скорости центрифуги

1500 об/мин. Надосадочную часть центрифугата отсасывают в пробирку, а осадок выбрасывают.

Из испытуемой сыворотки готовят антиген по методу проф. Иоффе, Берут 1 мл испытуемой сыворотки, добавляют 4 мл дистиллированной воды. Через разбавленную сыворотку пропускают углекислый газ в течение 25 — 26 мин. После этого сыворотку центрифугируют 30 мин при скорости центрифуги 1500 об7мин, удаляют надосадочную жидкость, оставшийся осадок промывают 5 мл физиологического раствора, еще раз центрифугируют, сливают надосадочную жидкость, а в осадок, содержащий антиген, добавляют до 1 мл физиологического раствора.

Реакцию гемагглютинации проводят следующим образом: берут

0,5 мл У,-ной взвеси эритроцитов барана, добавляют 0,5 мл антигена и выдерживают 2 час при температуре + 37 или 18 — 24 час при комнатной температуре. Смесь эритроцитов с антигеном встряхивают через каждые 10 — 15 мин. После выдерживания к смеси добавляют

4 — 5 мл физиологического раствора и центрифугируют в течение 10 мин при скорости центрифуги 1500 об!мин. Удаляют надосадочную часть центрифугата, в осадок вносят 4 — 5 мл физиологического раствора, встряхивают, вновь центрифугируют и надосадочную часть снова удаляют. По удалении надосадочной части осадок (эритроциты) разводят до получения 5 о, -ной взвеси. После этого берут пробирки и вносят в них положительную сыворотку по 0,5, 0,25, 0,12 и 0,06 мл, 5 о7о-ную взвесь эритроцитов по 0,2 мл в каждую пробирку и физиологический раствор — соответственно 0,3, 0,6, 0,7 и 0,8 мл.

Положительной реакцией на бруцеллез считается реакция, при которой выпадает зонтикообразный осадок, состоящий из неразбивающихся комков эритроцитов с положительной сывороткой при отсутствии таких комков в контрольных пробирках.