Стимулятор фагоцитоза лейкоцитов крови человека in viтrо

 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для оценки функциональной активности фагоцитирующих лейкоцитов (ФЛ) в экспериментальных исследованиях, а также в клинике для определения резервов функциональной активности ФЛ у больных для выявления различных дефектов макрофагальной системы с целью их коррекции. Цель - повышение фагоцитирующей активности лейкоцитов крови человека IN VITRO. Изобретение заключается в том, что в качестве стимулятора фагоцитоза используют отечественный официальный препарат - желатин, который обладает более выраженным стимулирующим действием по сравнению с наиболее активным известным стимулятором - бактериальным эндотоксином в НСТ-тесте. Активность фагоцитоза возрастает с 49,0±1,5 до 68,2±1,5%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (g))g G 01 N 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

flO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4240476/28-14 (22) 05.05.87 (46) 07.06.90. Бюл. 11 21 (71) Московский медицинский стоматологический институт им, H А,Семашко (72) В.С.Лебедев и В.Б,Бейлина (53) 615,375(088;8) (56) Маянский A.Н, и др. Характерис-. тика функциональной активности нейтрофилов в крови человека с помощью реакции восстановления нитросинего тетразолия. — Микробиология, 1977, М 6, с. 108-111. (54) СТИМУЛЯТОР ФАГОЦИТОЗА ЛЕИКОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO (57) Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для оценки

Изобретение относится к медицине и можетбыть использовано в экспериментальной иммунологии и лабораторно-клинической .практике для оценки резервов функциональной активности фагоцитирующих лейкоцитов (ФЛ) — нейтрофилов, макрофагов, Целью изобретения является повышение фагоцитирующей активности лейко цитов крови человека in vitro, Пример, В качестве объекта стимуляции использовали лейкоциты периферической крови здорового донора с нормальным содержанием лейкоцитов и нормальной лейкоцитарной формулой.

ФЛ получают из слоя гепаринизированной плазмы крови (10 ед„гепарина/мл крови), образующегося в результате

„,80„„1569708 А 1

2 функциональной активности фагоцитирующих лейкоцитов (ФЛ) в экспериментальных исследованиях, а также в клинике для определения резервов функциональной активности ФЛ у больных для выявления различных дефектов макрофагальной системы с целью их коррекции.

Цель — повышение фагоцитирующей активности лейкоцитов крови человека

in vitro, Изобретение заключается в том, что в качестве стимулятора фагоцитоза используют отечественный официальный препарат — желатин„ который обладает более выраженным стимулирующим действием по сравнению с наиболее активным известным стимулятором— бактериальным эндотоксином в НСТтесте, Активность фагоцитоэа возрастает с 49, О+1, 5 до 68, 2+1, 5Х, спонтанного осаждения эритроцитов при комнатной температуре, отделяли от плазмы центрифугированием в два раза отмывали забуференным фосфатами (10 мМ) иэотоническим раствором натрия хлорида (ЗФР) рН 7,2, Функциональную активность ФЛ опре- деляли в НСТ-тесте, Для этого суспен:эию отмытых ФЛ наносили на предметные стекла и инкубировали в течение l ч о во влажной камере при 37 С для получения монослоя, На сформированный монослой после тщательного отмывания

ЗФР последовательно наносили ингредиенты реакции, Функциональную активность ФЛ одновременно определяли в трех параллельных исследованиях: без стимуляции (к клеткам добавляли

1569708

Сос тавит ель Г. Крюков а

P едак тор И, йулла Тех р ед М. Дидык Корректор M,Màêñèìèøèíåö

Заказ 1444 Тираж 510 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

0,05 мл 0,15 М фосфатно-солевого буфера рН 7,2) — спонтанная реакция и после стимуляции в индуцированном

НСТ-тесте (к клеткам добавляли 0,05 мл

10%-ного желатина или 0 05 мл эндотоксина в конечной концентрации

75 мкг/мл и по 0,05 мл 0,2%-ного раствора НСТ). После инкубации во влажной камере при 37 С в течение 30 мин маз- 10 ки фиксировали метанолом, докрашивали яд, а клеток нейтральным красным и подсч тывали число диформаэанположительнь клеток на 100 ФЛ, Результаты выражали в процентах, Количество спок таино активированных клеток 47„ индуцированная активность ФЛ после стимуляцйи желатином 67Х, после стимуляции эндотоксином 43Х.

Положительный эффект предлагаемого ур изобретения подтверждается результатами многочисленных экспериментов, проведенных на клетках периферической крови 25 здоровых доноров, которые обработаны статистически с использованием критерия t Стьюдента.

Применение желатина в качестве стимулятора ФЛ вызывает более высокую стимуляцию по сравнению с известным— бактериальным эндотоксином (P (0,01).

Таким образом, значение применения желатина заключается в повышении чувствительности и точности метода определение резервов функциональной активности ФЛ, Кроме того, предлагаемый стимулятор по сравнению с аналогами и известным имеет следующие преимущества: желатин является отечественным коммерческим официальным и дешевым препаратом, что предоставляет широкие воэможности для его использования.

Формула и з о б р е т е н и я

Применение желатина в качестве стимулятора фагоцитоза лейкоцитов крови человека in vitro.