Способ определения содержания морфоциклина

 

Изобретение относится к медицине , а именно к способам определения морфоциклина, и может быть применено для качественного и количественного определения этого соединения при биохимических , токсикохимических и биофармацентических исследованиях.Цель - повышение чувствительности и избирательности определения. Способ заключается в экстрагировании анализируемого вещества этилацетатом из биоматериала , прибавлении диметилформамида и ацетата магния с последующим измерением интенсивности флуоресценции с максимумом возбуждения при 425 нм и излучения при 490 нм. 2 табл. С S

СООЗ С06ЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

09) (1!) А1 (5!)5 G О1 !1 21/64

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР

1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К Д ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

«. :.ь, )««"Щя !) .Ф

- «:,, «!« . /; ;«. «, « «

« (46) 07.08. 92. Бил. Р 29 (21) 47033!9/35 (22} 18.04.89 (71) Курский государственный медицинский институт (72) A.À.Хабаров, И.В.Ельков, С.Ç.Пискунов и С.П.Разиньков (53) 543.42 (Одд.д) (56) 13денфренд С. Люминесцентный анализ в биологии и медицине. И.:

Иир, 1965, с.50.

Сааведра Ф.Э., Соловей Н.С. Фотоколориметрическое определение морфоциклина в олеморйоциклине. — Фармация, !9 78, ХХЧТТ, 1!" 1, с ° 88-89. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ

140РФОЦИ КЛИНА

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения морфоциклина и может быть применено для качественного и количественного on" ределения этого соединения при биохимических, токсикохимических и био" фармацевтических исследованиях.

Целью изобретения является повышение чувствительности и избирательности анализа биоматериалов.

Способ осуществляется следующим образом.

К анализируемой пробе биологического материала (кровь, моча, слюна)

Ъ прибавляют этилацетат, встряхивают, центрифугируют и к аликвотной части слоя этилацетата прибавляют диметилформамид, магния ацетат и блуориметрируют при во. )уждении флуоресценции с максимумом 425 нм, излучения

«алуоресценции с максимумом 490 нм.

2 (57) Изобретение относится к медици. не, а именно к способам определения морфоциклина, и может быть применено для качественного и количественного определения этого соединения при биохимических, токсикохимических и биофармацевтических исследованиях. Цельповышение чувствительности и избирательности определения. Способ заключается в экстрагировании анализируемого вещества этилацетатом из биоматернала, прибавлении диметилформамида и ацетата магния с последуюшим измерением интенсивности флуоресценции с максимумом возбуждения при 425 нм и излучения при 490 нм. 2 табл.

Линейная зависимость между концентрацией морфоциклина и интенсивностью флуоресценции лежит от О,! до 20 мкг/мл (см.табл.!). Оптималь.ная концентрация раствора ацетата магния составляет 2Х (см.табл.2}.

Экстрация морфоциклина иэ крови и мочи при его концентрации 20 мкг/мл достигается полная. СР

Пример l. Качественное определение морфоциклина препарата. )

К 1 - 2 мг препарата прибавляют

4 — 5 мл диметилфсрмамида, 1 мл

27-ного раствора ацетата магния, перемешивают и в ультрафиолетовом свете наблюдают желто-зеленую флуоресценцию;

Пример 2. Качественное определение морфоцнклина в биоматериале

\ (крови н моче).

16!107!

Ъ

К 1 мл плазмы крови или мочи прибавляют 2 мл буферного раствора с

РН 5-6, 3 мл этилацетата и встряхивают 3 мин. Затем центрифугируют прн

3000 об/мин 2 мин. К 1 мл этилацетата прибавляют 8 мл диметилформамида, ! мл 2%-ного раствора ацетата магния перемешивают и .флуориметрируют. В ультрафиолетовом свете наблюдают жел- 1р тую флуоресценцию.

Пример 3. Количественное определение морфоциклина в крови и моче.

Относительная интенсивность флуоресценции,Е

Концентрация, мкг/мл

0,1 1 3

0,2 2 6

0,3 3 9

0,4 4 12

05 5 15

06 6 18

0,7 . 7 21

0,8 8 24

0,9 9 27

1,0 10 30!

О 10

19 20

28 29

38 39

49 49

58 58

68 68

77 78

85 86

94 95!

О

68

74

83 нмй способ для определения морфоциклина в биологических жидкостях. Способ обладает также большей избирательностью за счет образования внутрикомплексного соединения морбоцикли" на с катионом Mg в среде Я".Ф, Подобной реакции не дают, все антибиотики, которые могут одновременно назначаться больным (группы пенициллина, группы цефалоспоринов, группы стрептомицнна, антибиотики-аминогликозиды, антибиотики макролиды, группы левомицитина, группы рифампицина,разных

f5 групп лиикомицин гидрохлоридgpBсто

К 1 мл плазмы крови или мочи прн- мицин сульфат, фузидин, натрия, полибавляют 2 мл буферного .раствора с миксин сульфат, грамицидин, иистаРН 5 — 6,3 мл этилацетата и встряхи- тин, леворин, амфотерицин В) и суль" вают 2 мин, центрифугируют 2 мин при фаииламиды, 5000 об/мин. К 1 мл слоя этилацета- 20 Ф о р м у л а н s î б р е т e H H R та прибавляют 8 мл диметилформамида. мп 2%-ного раствора ацетата Способ определения содержания мормагния в д!!фА перемешивают и Алуо- фоциклнна, включающий обработку анариметрируют относительно стандартно- лизируемой пробы химическим реагенz о раствора морфоциклина, для чего 25 том и измерение оптической характев ряд пробирок прибавляют 0,1, 0,5, Ристики полУченного продукта, по вв1,pp стандартного раствора морфо- личине которой проводят определение циклина в диметилформамиде, с сойеР- отличающийся тем что с

I 1 жанием 50 мкг/мл, соответственно целью повышения чувствительности и

8,9, 8,5, 8 мл диметилформамида,1 мл 30 избирательности анализа биоматериа2%-ного раствора ацетата магния в ди- . лов, пробу предварительно экстрагиметилформамиде, перемешивают и фпуо- Руют.из бноматериала этилацетат м

Ф риметрируют одновременно .с испытуе- экстракт растворяют в диметилформамыми растворами, миде, в качестве реагента используТаким образом, способ позволяет - ют ацетат магния и измеряют интенповысить чувствительность определе- сивность флуоресценцин раствора при

35 ння в 50 раз по сравнению с прототи" длине волны возбуждения 425 нм и дпнпом, что позволяет использовать дан- не волны регистрации 490 нм, Таблица l

Зависимость интенсивности флуоресцеиции анутрикомплексного соединения морфоциклина с магнием от концентрации морфоциклина

1611071

Та блица 2

Зависимость интенсивности флуоресценцни комплекса морфоциклина с магнием от концентрации ацетата магния в, днметилформамиде (кон.центрация мордоциклина

20 мкг/мл). ч

Концентрация аце- Относительная тата магния, Х интенсивность флуоресценции,X

Составитель С.Бадтиева

Техред Л.Сердюкова Корректор 11.Шароши Редактор Н.Коляда

Заказ 3469 Тира к Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раукская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.улсгород, ул. Гагарина, 101

0,1

0,5

1,0

2,0

3,0

36

73

82

82