Способ определения гексенала в крови

 

Изобретение относится к медшш- .не, а именно к способам определения лекарственных препаратов в биосредах. Цель изобретения - повышение точности , ускорение и упрощение способа. Способ включает экстракцию гексенапа из крови и хроматографический анализ экстракта на колонке с 1%-ной универсальной жидкой фазой на основе битума (ГОСТ 3508-55) на инертон-супер с масс-спектрометрической детекцией. Ошибка определения на концентрациях составляет 0,98%. Время анализа 30 мин. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСИКХ

СОЧИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1627990 А 1

y1)g С 01 ! 33/49

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ.

1 мкл вводят в инжектор хроматографа. В качестве полифазного сорбента используит Ii. — ную универсальнуи жидку фазу (УФФ) — инертон-супер. Газовый хроматограф совмещен с массспектрометром 2091 LKB и стеклянными набивными колонками длиной 60 см и диаметром 2 мм.

Рабочие условия анализа: температура сепаратора 493 К. В качестве газа-носителя используют гелий, подаваемый в колонку со скоростьи

30 мп/мнн, под давлением 0,2 атм.

Температура источника ионов 523 К, инжектора 493 К. Температура колонки изменяется от 4 18 К со скоростью

12 /мин. Ускоряющее напряжение

3,5 кВ. Энергия ионизации электронов

70 эВ. Ток эмиссии катода 1.5 мА. 3апись хроматографических пиксв провоГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫГИЯМ

ГРИ ГННТ СССР (21) 4412518/! 4 (22) !8.04.88 (46) 15,02 ° 91 . Бюл. Ф 6 (71) Ташкентский государственный медицинский институт (72) B.В.Михайлов, Э.Т.Хусанова, О,А,Мамин, А.М.Усманов, Э.А,Арипов, Г.Р Нарметова и А.Д.Сахибов (53) 612.31 3.69(088.8)

1 (56) Skinner R.F. et al. Anal. СЬев., 1973, vol.45, Р 3, р,574-576, Изобретение относится к медицине, в частности к технике исследования биожидкостей человека.

Цель изобретения — повышение точности, ускорение и упрощень способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Кровь центрифугируит при

3000 об/мии в течение 2 мин. К мл полученной сыворотки (или мочи) прибавляют 0,2 мл 5 н.. НС1 и 0,8 мл буфера (0,2 М) НС1-КС1 (рН 2-3). Раствор центрифугируют, осадок удаляит, Экстракцию из водного раствора проводят хлороформом. ллороформный слой .отделяют, эту операцию повторяют трижды. Все хлороформные вытяжкки собираит и испаряют. К остатку добавляют точное количество хлороформа.

2 (54 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕКСЕНАЛА

В КРОВИ (57) Изобретение относится к медици.не, а именно к способам определения лекарственных препаратов в биосредах.

Цель изобретения — повышение точности, ускорение н упрощение способа.

Способ вкличает экстракции гексенала из крови и хроматографический анализ экстракта на колонке c !%-ной универсальной жидкой фазой на основе битума (ГОСТ 3508-55) на инертон-супер с масс-спектрометрической детекцией.

Ошибка определения на концентрациях

1 ° 10 r составляет 0,987.. Время ана-7 лиза 30 мнн. 2 табл.

1627990 зг

Т а блица 1

Х УМФ в полифаэном сорбенте УЖФинертон-супер

Удельный удерживаемый объем, см /г

2436,94

2551,61

3004,2

3019,80

4501,42 дят с помощью детвктЬра по полному ионному току. 1Х-ный УЖФ вЂ” инертон-, супер выбран по зксперйментальным данным. Дпя этих целей проведены исследования с )-, 2-, 3-, 4- и 57-ным

Л(Ф - инертон-супер и определен удельный удерживаемый объем гексенала на модельных смесях с кровью доноров (см. табл.2)-.

Если анализ проводить с более низкой концентраций УМФ в полифазном сорбенте (ниже 1Я), то может быть адсорбция на твердом носителе, так как при малых концентрациях неподвижной жидкой фазы (НЖФ) он полностью не покрывается с неподвижной жидкой фазой.

Количественный анализ гексенала проводят методом абсолютной калибровки, Диапазон исследуемых концентраций препарата в хлороформном растворе 1 10 - 1 ° 10 г. Строят калибровочные графики для этих диапазонов концентраций.

Результаты количественного аналиsa (см,табл.2) подвергают статистической обработке (на модельных смесях с кровью доноров).

Как видно as данных табл.2, относительная ошибка при 1 ° 10 равна

0,67., при 1 10 - 0,98Х при 1 ° 10

2,26Х, а при 1 10 - 5,707. . Согласно

-Т известному способу при точности 10относительная ошибка составляет

3,15Х, Для проведения известного спо соба требуется 3 ч, а для проведения прЕдалгаемого способа — 30 мин.

Пример ° Больной Е.Г.И.

Диагноз: рецидивные камни обеих почек; хронический пнелонефрит. Оперирован 14,03.88 г.

Гексенал вводили в количестве 00 мг. Кровь брали из локтевой вены через 5, 10, 20, 40, 60, 80, 360 мин после введения гексенала. Количество гексенала в каждой пробе определяли предлагаемым способом, Количественное определение гексенала проводили методом абсолютной калибровки.

Площади хроматографических пиков составляли, см, для пробы, взятой и через, мин, после введения:

5 7,45

lO 5 32

20 4 Ol

15 ° 40 3,69

60 2,36

80 2,01

360 1,56

По калибровочному гРаФику определяли концентрацию (мг/мл) гексенала в пробах крови (учитывая разведение в 40 мкл), которая составила череэ,мин, после введения:

25 5 1 77 10

10 1,25 10

20 6,25 10

40 2,72 10

60 2,18 10

30 1,35 ° 10

360 4,57 1О

Формул а изобретения

Способ определения гексенала в крови путем экстракции органическим растворителем и хромато-масс-спектрометрии, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, 40 ускорения н упрощения способа, в качестве неподвижной фазы используют

1Х-ную универсальную жидкую фазу. яа основе битума (ГОСТ 3508-55) на инертс -супер.

1627990

Таблица 2

ДХ.,„

Компоне н т Проба, Х, нг нг ст пизе

Гексенал

П р и м е ч а н и е. X — средний результат, S> — среднеквадратическое отклонение; Д Х вЂ”; ДХ а нотносительная погрешность; t < - критерий Стъюдента.

Составитель В.Иитювин

Техред Л.Олийнык Корректор А.Осауленко

Редактор А,Огар

Заказ 338 Тиразк 410 Подпис кое

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР

113035, Иосква, й-35, Рауаская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óêãîðîä, ул. Гагарина, 101

l 00

0,1

100,2 0,63 0,63

9,82 0,1 0,96 2,46

1,03 0,035 0,023

0,104 0,0068 0,0063

0,60

0,98

2,26

5,70