Штамм бактериофага еnтеrовастеr aerogenes для диагностики, профилактики и лечения инфекции, вызываемой еnтеrовастеr aerogenes

 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии, а именно к выявлению и выделению нового специфического штамма бактериофага для диагностики , профилактики и лечения инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами Enterobacter aerogenes. Целью изобретения является получение нового специфического бактериофага Ent. aerogenes для ускоренной идентификации Изобретение относится к медицинской вирусологии микробиологии, а именно к выявлению и выделению нового специфического штамма бактериофага для диагностики, профилактики и лечения инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами Enterobacter aerogenes. Целью изобретения является получение нового, специфического бактериофага Е. aerogenes для ускоренной идентификации свежевыделенных микробных штаммов Епт. aerogenes, а также для лечения и профилактики инфекций, вызванных этими микроорганизмами . Специфический бактериофаг обладает определенным, точно лимитированным и стабильным диапазоном действия , высокой адсорбционной способностью при коротком латентном периоде и достаточной урожайностью, высоким показателем эффективной множественности. Изобретение подтверждает возможность применения бактериофага Ent, aerogenes в качестве диагностического, профилактического и лечебного препарата для предотвращений инфекций, вызванных микробами Ent. aerogenes. Штамм специфического бактериофага значительно сокращает объем необходимых бактериологических исследований и позволяет установить вид возбудителя в короткий срок (7-18 ч). Бактериофаг Ent. aerogenes, имея титр 105-106 по методу Аппельмана, может быть применен как лечебно-профилактический препарат. Штамм бактериофага Ent. aerogenes зарегистрирован в коллекции НПО Бактериофаг Тбил- НИИВСпод № Ф-135. свежевыделенных микробных штаммов Е. aerogenes, а также для лечения и профилактики инфекций, вызванных этими микроорганизмами . Бактериофаг Е. aerogenes представляет собой селекционированный клон со специфическим действием, выделен из сточных вод методом обогащения с подсевом. Селекционирование специфического клона из отдельных негативных колоний проведено СП с о on СР ю о 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 С 12 N 7/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

К "363

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4749006/13 (22) 11.10.89 (46) 23.10.91. Бюл. N 39, (71) Научно-производственное объединение

"Бактериофаг" Тбилисского научно-исследовательского института вакцин и сывороток (72) Г.Г.Джапаридзе, Е.В.Церетели и Т.Г.Чанишвили (53) 576,858.9 (088.8) (56) Энтеробактерии, — M., 1985. (54) ШТАММ БАКТЕРИОФАГА ENTегоBACTER AегоGENES ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ, ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИИ, ВЫЗЫВАЕМОЙ ENTегоBACTER AегоGENES (57) Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии, а именно к выявлению и выделению нового специфического штамма бактериофага для диагностики, профилактики и лечения инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами Entегоbacter aегоgenes. Целью изобретения является получение нового специфического бактериофага Ent.

aегоgenes для ускоренной идентификации

Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии, а именно к выявлению и выделению нового специфического штамма бактериофага для диагностики, профилактики и лечения инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами

Entегоbacter aегоgenes.

Целью изобретения является получение нового, специфического бактериофага Е. .aегоgenes дпя ускоренной идентификации

„„. Ж„„1685998 Al свежевыделенных микробных штаммов Ent, aегоgenes, а также для лечения и профилактики инфекций, вызванных этими микроорганизмами, Специфический бактериофаг обладает определенным, точно лимитированным и стабильным диапазоном действия, высокой адсорбционной способностью при коротком латентном периоде и достаточной урожайностью, высоким показателем эффективной множественности.

Изобретение подтверждает возможность применения бактериофага Ent aегоgenes в качестве диагностического, профилактического и лечебного препарата для предотвращений инфекций, вызванных микробами

Ent. aегоgenes. Штамм специфического бактериофага .значительно сокращает объем необходимых бактериологических исследований и позволяет установить вид возбудителя в короткий срок (7 — 18 ч). Бактериофаг

Ent. aегоgenes, имея титр 10 — 10 по методу

Аппельмана, может быть применен как лечебно-профилактический препарат. Штамм бактериофага Ем. aегоgenes зарегистрирован в коллекции НПО "Бактериофаг" ТбипНИИВС под N Ф-135. свежевыделенных микробных штаммов Е.

aегоgenes, а также для лечения и профилактики инфекций, вызванных этими микроорганизмами.

Бактериофаг Е, aегоgenes представляет собой селекционированный клон со специфическим действием, выделен иэ сточных вод методом обогащения с "подсевом". Селекционирование специфического клона из отдельных негативных колоний проведено

1685998 методом выделения генетически однород(/ ной популяции.

Бактериофаг Е, aегоgenes характеризуется следующими свойствами; морфология негативных колоний полиморфна, диаметр колонии 3 — 5 мм, с ободком, прозрачным центром; фаг Е. aегоgenes состоит из головки гексогенальной формы с диаметром 60 х 60 нм и отростка с сокращающимся чехлом 150 нм, специфичен, что подтверждается опытами перекрестного лизиса с гетерологичными видами микроорганизмов семейства кишечных. бактерий (в скобах указано количество проверенных штаммов);

К1еЬз1еИа pneumoniae (200), Entегоbacter

cloaceae (126), Hafnla а!не1 {45), Serratia

marcescens (50), Salmonella — разные виды (200), Shigеllа — разные виды (180), Escherichia coil (150), Рroteus (115), Cltrobacter diversus (30). Чувствительность к фагу не проявил ни один из перечисленных 1096 штаммов, Бактериофаг E. аегсоепез обладает широким диапазоном действия в отношении гомологичных культур, которое определяется на коллекции музейных штаммов Е, aегоgenes {10), полученных из Государственного НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А,Тарасевича, и на 252 свежевыделенных микробных штаммах Е. aегоgenes. Изучение фаголизабельности проводится по методу ФИСК. Из свежевыделенных 252 штаммов фагом лизируется 179, т,е, 71,3, .

Бактериофаг Е; aегоgenes обладает высокой адсорбцион н ой способностью (максимальное время адсорбции 11 мин1. и урожайностью (120-130 частиц на одну инфицированнуюю клетку), латентным периодом 50 мин, высоким показателем эффективной множественности (интенсивное размножение фаза наблюдается при множественности 1 и ниже); высокой термо, устойчивостью (нижняя граница термоустойчивости фага -58 С, верхняя 80 С).

Селекционированный бактериофаг Е.

aегоgenes отвечает всем требованиям, предъявляемым к диагностическим и лечебно-профилактическим фагам как по специфичности, так и по стабильности литического спектра. Штамм бактериофага депонирован в коллекции ТбилНИИВС под

М Ф-135, Пример. Для испытания эффективности предлагаемого фага в идентификации микробных штаммов Е,. aегоgenes проводят опыты на клиническом материале всего с помощью фага идентифицировано 69 микробных штаммов Е. aегоgenes из 75 предварительно исследованных по биохимическим признакам, Штаммы выделены из крови, 5 гноя и кала больных при септических и остро-кишечных инфекциях, Определение фагочувствительных микробных тел заключается в следующем.

Из исследуемого материала выделяют

10 культуры бактерий в чистом виде. Выделенные культуры засевают в бульон Мартена и инкубируют при 37 С в течение 3 ч. После инкубации бульонные культуры наносят на чашки Петри с агаром в виде полосок. Одно15 временно на одну чашку можно нанести 5 — 6 полосок исследуемых культур бактерий, затем чашки подсушивают в термостате

20 мин, Вскрывают ампулы с диагностическим фагом и накапывают фаг на полоски

20 культур тонко оттянутой пастеровской пипеткой. После нанесения фага чашки ставят в термостат при 37 С на 3,0 — 3,5 ч. После инкубации чашки вынимают из термостата и внимательно просматривают полоски. В

25 том случае, если на местах накапывания фага обнаруживают просветления культуры, реакция считается положительной. Просветление культуры само по себе говорит о взаимодействии фага с бактериальной клет30 кой, его обозначают CL — сливной лизис, SCI — полусливной лизис, +++ — отдельные негативные колонии (более 20), В случае отсутствия положительной реакции, просветление полосок на местах накапывания фага

35 не наблюдается, а отсутствие лизиса обозначается (-), Лечебно-профилактический эффект бактериофага Е. aегоgenes в лабораторных условиях измеряется в титрах воздействия

40 фага на гомологичных свежевыделенных штаммах. Титр фага Е. aегоgenes по методу

Аппельмана равняется 10 — 10, что вполне

5 6 удовлетворяет требованиям в установлении активности фага.

45 Применение бактериофага Е. aегоgenes с диагностической целью подтверждает его преимущество в идентификации микробов

Е. aегоgenes по сравнению с биохимическими и другими тестами, особенно в случаях, 50 когда последние не позволяют идентифицировать возбудителя.

Формула изобретения

Штамм бактериофага Entегоbacter

aегоgenes cD-135 для диагностики, профи-, лактики и лечения инфекции, вызываемой

Entегоbacter aегоgenes,