Способ определения скрытой крови в биологическом материале

 

Изобретение относится к медицине, а именно к клиническим диагностичес- , ким исследованиям, и предназначено для быстрого и безопасного определения крови в экскрементах и другом биологическом материале при диагностике внутренних кровотечении. Цель изобретения - повышение точности способа определения , упрощение, изоляция инфицированного материала от окружающей среды. Цель достигается путем помещения пробы в лунки, образованные плас- . тиной с толщиной 1,5-2 мм, содержащей отверстия диаметром 10-15 мм, и приклеенной к пластине индикаторной бумагой , которая пропитана реактивом, содержащим раствор амидопирина 15-20%, раствор анилина гидрохлорида 0,5-27 и этанол 95%, с последующим закрыванием лунок другой пластиной; Полученный комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизируют . Проявление реактива осуществляют раствором перекиси водорода, вводимого путем прокола пакета. Реак-- тив стабилизируют путем добавления к нему предварительно раствора гидроксиламина 0,1-0,2%. При наличии в пробе . 0,1-0,2% и более крови появляется яркое фиолетово-сиреневое окрашивание. Способ обеспечивает высокую точность определения, надежную изоляцию инАнцированного материала от окружающей среды и медицинского персонала, использование безопасных в работе легкодоступных и недорогих реактивов, простоту применения. 1 з.п. А-лы. (Ј О J ел 4Ь -U

«(2» *

СО|03 СОНЕТСНИХ

1:-- .) СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

/у (19) (ll) ($g)g С О1 |) 33/72

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЬ|Й НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4688098!14 (22) 06.03.89

1 (46) 23.01.92. Бюл. P 3 (71) Научно-исследовательский институт онкологии им. проф. H.Н.Петрова (7 ?) М.Г.Иоганнсен и Д.П.Волков (53) 616.07(088.8) (56) Лвторское свидетельство СССР

)| 885881, кл. С 01 И 33/48, 1981. (54) СПОСОБ ОБНЛРУ1|ЖН|Г СКРЪ|ТОЙ КРОВИ

В БИОЛОГИЧЕСКОМ МЛТЕРИАПЕ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к клиническим диагностичес- .

I ким исследованиям, и предназначено для быстрого и безопасного определения крови в экскрементах и другом биологическом материале при диагностике внутренних кровотечениГ . Цель изобретения — повышение точности способа on ределения, упрощение, изоляция инфицированного материала от окружающей среды. Цель достигается путем помещения пробы в лунки, образованные плас, тиной с толщиной 1,5-2 мм, содержащей

Изобретение относится к медицине, а именно к клиническим диагностическим исследованиям, и предназначено для быстрого и безопасного определения крови в экстрементах при диагностике скрытых кипечных кровэтт". |ений, à также может быть использовано при выявлении скрытой крови в моче и другом биологическом материале у обследуемого лица при подозрении на внутреннее кровотечение.

2 отверстия диаметром 10-15 мм, и приклеенкой к пластине индикаторной бумагой, которая пропитана реактивом, содержащим раствор амидопирина 15-20%, раствор анилина гидрохлорида 0,5-2% и этанол 95%, с последующим закрыванием лунок другой пластиной; Полученный комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизируют. Проявление реактива осуществляют раствором перекиси водорода, вводимого путем прокола пакета. Реак-. тив стабилизируют путем добавления к нему предварительно раствора гидроксиламина 0,1-0,2%. При наличии в про— бе. О, 1-0, 2% и более крови появляется яркое фиолетово-сиреневое окрашивание.

Способ обеспечивает высокую точность определения, надежную изоляцию инфицированного материала от окружающей среды и медицинского персонала, использование безопасных в работе легкодоступных и недорогих реактивов, простоту применения. 1 з.п. ф-лы.

Определение скрытой крови произво дится с помощью химической реакции на пероксидазу, поскольку гемоглобин обладает высокой пероксидазной активностью. В реакции участвует хромоген неокраше п!пе вещество, к".торое в л« цессе окисления образует краситель, являющийся индикатором реакции.,(ругой обязательный компонент — окислитель. Катализатором является гомоглобин крови.

1707544

4 цель изобретения — повышение точности (правильности результатов), упрощение способа.

На основе высокоэффективного беэо5 пасного и рекомендованного к использованию Иинздравом СССР реактива азопиром создается индикаторная бумага.

Для изготовления индикаторной бумаги реактив азопирам следует модифицировать по сравнению с его наиболее распространенным вариантом для обеспечения максимальной сохранности бумаги при ее высокой чувствительности.

Состав азопирама для индикаторной бумаги (мас.X):

Амидопирин 15-20 .

Анилин гидрохлорид 0,5-2,0

Этанол 95 Остальное .

В этот реактив дополнительно вводится стабилизатор следующего состава, мас.Х: уидроксиламин гидрохлорид 1,02,0; дистиллированная вода остальное.

Стабилизатор вводится н предварительно приготовленный азопирам в коли- 5 честве О, 1 от объема азопирама. Стабилизированным азопирамом пропитывается бумага. Срок использования индикаторной бумаги с азопирамом 12 мес, если в реактив введен стабилизатор, а без 30 него — 1 — 2 мес.

Основу устройства для выявления скрытой крови составляют перфориронанные пластинки белого или кремового цвета. Для их изготовления можно ис35 пользовать плотный картон, пластмассу, дерево (медицинские шпателн) и т.п. материалы. Оптимальные размеры пластинки: длина 75-140 мм, ширина 1823 мм, толщина i,5-2,0 мм. Каждая пластинка имеет 1 — 4 отверстия диа. метром 10 — 15 мм. Отверстия смещены к одному концу пластинки, а другой, неперфорированный ее конец удобно брать рукой при использовании.

Эти отверстия заклеены индикаторной бумагой с одной стороны пластинки. Таким образом, на каждой пластинке образуются лунки (углубления), края которых образованы краями отверстий в пластинках, а дно — индикаторной бумагой.

Две такие пластинки склеиваются с помощью бумаги попарно длинными стоГокаи . и обраэуыт бендика горное уст—

Ройство, складывающееся, как обложка киги. На одной стороне (поверхности)

4 этого устройства находятся лунки. На другой поверхности — ипдикато..ная бумага, закрывающая отверстия в пластинках.

К этому складному устройству придается третья пластинка из того же материала, но беэ отверстий и без бумаги. Эта неперфорированная пластинка служит шпателем для нанесения исследуемого материала.

Комплект, состоящий иэ сложенного индикаторного устройства и шпателя укладывают в отделение (карман) пакета из тонкого прозрачного и бесцветного полиэтилена.

При взятии пробы на анализ отворачивают край липкой ленты, герметиэирующей один карман, и извлекают индикаторное устройство; вносят исследуемый материал в. углубления устройства (лунки) так, чтобы он касался индикаторной бумаги, образующей дно лунок.

После нанесения материала во все лунки устройство складывают лунками внутрь, помещают н тот же карман пакета, из которого устройство было извлечено, и вновь заклеивают карман (экскременты) оказываются между пластинками, а снаружи — чистая поверхность пласти гок и индикаторной бумаги.

Таким образом, при закладынании устройства обратно в карман пакет не пачкается.

Пакет используют, н зависимости от количества карманов в нем, 1 — 4 дня.

Каждый день вводят материал в лукки одного индикаторного устройства.

Для постановки реакции ка скрытую кровь достаточно, не вскрывая пакет, проколоть полиэтиленовую пленку и ввести в карман несколько капель

ЗЕ-ной перекиси водорода, которая и является проявляющим раствором. Если н материале, находящемся в лунках, была примесь крови, индикаторная бума. га окрашивается в фиолетово-сирененый цвет. Если крови не было, цветной реакции не будет.

Пример 1. Обследуемьп на кишечное кровотечение получает конверт с пакетом. В пакете 3 отделения (кармана) с индикаторными устройствами. В каждом индикаторном устройстве

4 лунки.

Перед забором пробы экскремект н обследуемьп открыпает одно иэ отделений полиэтиленового пакета (карман), снимая липкую ленту. Достает комплект индикаторного устройства, непеоборнропанкой пластик1 7т)75

Составитель Н.Теремина

Техред g, 1îðãåíòàï Корректор Л Обручар

Редактор Н.Лазаренко о

Заказ /

Ти ра.-- Подвисное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открьггиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. т/5

Производственно-издательский комбинат "Патент" ° г.Ужгород, ул. Гагарина, 101 кой (шпателем) на»тост»т Ат порции экскрементов (из разных мест общей массы кала) в лунки Hà поверxíîстb индиYaториой бумаги. Затем обследуемтлй скла. дывает пластинки устройства так, что экскременты в лунках оказываются внутри сложных и прижатых друг к другу пластинок. Ипатель, которым был взят материал, выбрасывают, а сложенные пластинки с порциями экскрементов

Внутрт» (между нт»т»т») обследуемьпт укла-! дьтвает обратно в карман полиэтиленового пакета и вновь заклеивает той же с липкой лентой. 15

На сттедующт»й день атталогичньтт» спо— собом используется содержтп»ое второго кармана, на третий день — третьего кармана.

После окончания использования гер- 20 т»етт»зттровант» и липкой лентой пакет укладывают в конверт, на котором написаны необходимые сведения об обследуемом. Конверт с пакетом сдается (отсылается) в лабораторию. 25

В лаборатории полиэтиленовый пакет вынимают из конверта. Лаборант, не вскрывая пакет, про,алывает полиэтиленовую пле*.ку кот»цом стеклянной пипетки, через которую и вводит в каждый 1 карман на индикаторную бумагу несколько капель З .-ной перекиси водорода.

Если исследуемый материал содержал

0,1 и более крови, немедленно или в течение блт»жайтттетт т»т»ттуттт появляется фиолетово-сиреневое окрапптвание, хорошо заметное на светлом Лотте пластинок через прозрачт»ую пленку пол»»этт»лет»а.

Около порций экскрементов, не содержавших кровь, ократттт»ватт»те не проявляется. g

П р и и е р 2. Обследуемьп» на нали— чие микрогематурии получает конверт с пакетом. В пакете 3 кармана, в каждом кармане индикаторное устройство.

Обращение с пакетом аналогично при- 4 меру 1, только в каждую лунку вводится не порция экскрементов, а капля мочи.,т1алее конверт с использованным »4 Ь пакетом доставляют (отсылают) в лабораторию, где иттдикация крови проводится аналогично примеру 1.

В случае необходимости обследуетпп1 может сам произвести анализ, нанеся на смоченную мочой индикаторную бумагу по 1-2 капли З .-ной перекиси водорода.,Результаты анализа записывают ня конверте, который сдают в лаборато-.

;рию или врачу.

Использоваттие предлагаемого решеI ния обеспечивает по сравнению с известными способами высокую точность (правильность результатов) за счет информативности, ттадежттую изоляцт»ю инфицированного материала от окружающей среды и медицинского персонала, использование безопаснтлх в работе,легкодоступтых и недорогих отечестветтнттх реактт»вов т» материалов, а также простоту изготовлет»т»я и применения.

Формула изобретения

1. Способ определения скрытой крови в биологическом материале путем взаимодействия пробы с реактивом, содержащем раствор амт»допирина 15-20%, раство.т анилина гидрохлорида 0,5-2 т» этанол 95% с ттоследующт»м проявлеH»»ем продук1а реакц »и раствором перекиси водорода, о т л и ч а ю ц и и с я тем, что, с целью изоляции инфицированного материала, повышения точности и упрощения способа, реактивом пропитывают индикаторную бумагу, которая приклеена к пластине толщттной 1,52,0 мм с отверстиями диаметром 1015 мм, в образовавшиеся лунки вносят пробы и закрывают неперфорированной пластиной, комплект помещают в пакет из прозрачноro полимерного материала и герметт»зт»руют, а проявление осуществляют путем прокола пакета.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью стабилизации реактива, он дополнительно содержит 0,1-0,2 гидроксиламина.