Питательная среда для биосинтеза @ -каротина

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается производства витаминов, в частности/3-ка-ротина. Целью изобретения является повышение степени изомерной чисУоты целевого продукта. Это обеспечивается за счет того, что питательная среда для биосинтеза ^каротина, содержащая маслосодержащие компоненты, выбранные из^ ряда: растительное масло, соапсток, фосфатидная эмульсия, и воду, дополнительно содержит отходы очистки семян подсолнечника, при следующем соотношении компонентов, мас,%: отходы очистки семян подсолнечника 3,0-7,0; маслосодержащие компоненты, выбранные из ряда: растительное масло, соапсток, фосфатидная эмульсия 2,0-6,0,' вода остальное. 2 табл.•

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„, Щ „„1712418 А1 (я)ю С 12 Р 23/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Изобретение относится к микробио- . получить продукт, соответствующий мирологической промышленности и касается . вым стандартам по содержанию Р-формы. производства витаминов, в частности про- Цель изобретения — повышение стевитамина А Р-каротина. пени изомерной чистоты целевого проИзвестна питательная среда для. био- дукта при сохранении его выхода и синтеза Р-каротина, содержащая источники а кти в ности. углерода, азота, фосфора и воду, на кот0рой Поставленная цель достигается тем, что получают Р-каротин с помощью культуры в питательную среду вводят отходы очистгриба Blakesleatrisporaсиспользованиемв ки семян подсолнечника при следующем качестве источников углерода, азота и фос- соотношении компонентов, мас. : отходы фора вещество из ряда: растительное мас- семян подсолнечника 3.0 — 7,0, маслосоло, соапсток, полученный после щелочной . держащие компоненты из ряда: расти нейтрализации, гидрофуз, фосфатидная, тельное масло, соапсток, фасфатидная эмульсия, полученная при гидратации мас-. эмульсия 2,0-6,0. ла, а также жмых томатов после отделения Пример 1. Инокулум культуры гриба от них сока. При этом уровень накопления Blakeslea trlspora в виде густой или средней

Р-каротина 26312 — 95800мкг/100мл. густоты массы серовато-желтого цвета с

При использовании данных компонен-. хорошо разветвленным равномерным по тов питательной среды из биомассы при вы-, толщине гиф мицелием с гомогенной протопработке кристаллов каротина не удается . лазмой вносят в ферментационную среду 3 О

Дь

СО (21) 4655696/13 (22) 27.02.89 .(46) 15.02.92. Бюл. N- 6 (71) Краснодарский политехнический институт . (72) P.Â. Казарян, Т.И.Тимофеенко, С;М. Боб-. нева и М,Н.Бобнева (53) 577,16 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 1207145, кл. С 12 P 23/00, 1986. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ БИОСИНТЕ3А Р-КАРОТИ. НА (57) Изобретение относится к микробиологической, промышленности и касается и роизводства витаминов, в частности Р-каротина. Целью изобретения является повышение степени изомерной чистоты целевого продукта, Это обеспечивается за счет того, что питательная среда для биосинтеза

Р-каротина, содержащая маслосодержащие компоненты, выбранные из ряда: растительное масло, соапсток, фосфатидная эмульсия, и воду, дополнительно содержит отходы очистки семян подсолнечника, при следующем соотношении компонентов, мас. ; отходы очистки семян подсолнечника 3,0 — 7,0; маслосодержащие компоненты, выбранные из ряда: растительное масло, соапсток, фосфатидная эмульсия 2,0 — 6,0; вода остальное. 2 табл.

1712418 в количестве 20% от объема питательной среды, составляющей, мас,%:

Отходы очистки семян подсолнечника 3,0

Растительное масло 6,0

Вода 91,0 и выращивают в аэробных условиях до накопленияф-каротина 49937 мкг/100 мл культуральной жидкости в течение 120 ч.

Количество биомассы 3,0 г/100 мл а.с.в., продуктивность биомассы 16646 мкг/г а.с.в, или 16,6 г/кг, степень изомерной чистоты

Р-каротина 97,5%.

Пример 2, Процесс ведут согласно примеру 1, Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян. подсолнечника 4,0

Растительное масло 4,0

Вода . 92,0

Накопление Р-каротина -96117 мкг/100 мл, количество биомассы 4,7 г/100 мл а.с.в,, продуктивность биомассы 20450 мкг/г а;с.в, или 20,5 г/кг, степень изомерной чистоты

Р-каротина 97,8%.

Пример 3. Процесс ведут по примеру

"1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 7,0

Растительное масло 2,0

Вода 91,0

Накопление Р-каротина 68321 мкг/100 мл, количество биомассы 5,5 г/100 мл а.с.e., продуктивность биомассы 12422 мкг/г а.с.в. или 12,4 r/êã, степень изомерной чистоты

Р-каротина 98,9%.

Пример 4. Процесс ведут по примеру 1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 4,0

Фосфатидная эмульсия 4,0

Вода 92,0

Накопление/З-каротина.112702 мкг/100 мл, количество биомассы 4,9 г/100 мл а.с.в., продуктивность биомассы 23000 мкгlг а.с.в. или 23,0 г/кг, степень изомерной чистоты

Р-каротина 97,8%, Пример 5, Процесс ведут по примеру

1.

Состав питательной среды, мас. ;

Отходы очистки семян подсолнечника, 4,0

Соапсток 4,0

Вода 92,0

Накопление Р-каротина 105546 мкг/100 мл, количество биомассы 4,3 г/200 мл а.с.в., продуктивность биомассы 24545 мкг/г а.с.в. или 24,5 г/кг, степень изомерной чистоты

Акаротина 97,8%.

Пример 6. Процесс ведут по примеру 1.

5 Состав питательной среды, мас.%.

Отходы очистки семян подсолнечника 6,0

Фосфатидная эмульсия 4,0

Вода 90,0

10 Накопление j3-каротина 135844 мкг/100 мл, количество биомассы 5,2 г/100 мл а.с.в., продуктивность биомассы 26124 мкгl г а,с.в, или 26,1 r/кг, степень изомерной чистоты

j3-каротина 98,7%.

15 Пример 7. Процесс ведут по примеру

1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 7,0

20 Растительное масло 2.0

Вода 91,0

Накопление Р-каротина 68312 мкг/100 мл, количество биомассы 5,5 г/100 мл а.с.в., продуктивность биомассы 12420 мкгlг а.с,в.

25 или 12,4 г/кг, степень изомерной чистоты 99,1%.

Пример 8. Процесс ведут по примеру

1.

Состав питательной среды, мас,%:

30 Отходы очистки семян подсолнечника. 7,0

Фосфатидная эмульсия 2,0

Вода 91,0

Накопление j3-каротина 71925 мкг/100

35 мл, количество биомассы 6,0 г/100 мл а.с.в., продуктивность биомассы 11987 мкг/г а,с.в. или 12,0 r/êã, степень изомерной чистоты

Р-каротина 99,0%, Пример 9. Процесс ведут по примеру

40 1, Состав питательной среды, MBc;%:

Отходы очистки семян подсолнечника 7,0

Соапсток 2,0

45 Вода 91,0

Накопление В-каротина 67832 мкг/100 мл, количество биомассы 5,0 г/100 мл а.с.в„ продуктивность биомассы 13566 мкг/г а.с.в, или 13,6 г/кг, степень изомерной чистоты

50 Р-каротина 98,9%.

Пример 10, Процесс ведут по примеру

1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян ,55 подсолнечника 3,0

Растительное масло 6,0

Вода 91,0

Накопление )3-каротина 49937 мкг/100 мл, количество биомассы 3,0 г/100 мл а.с.в., 1712418 продуктивность биомассы 16645 мкг/г à.t:,в. или 16;6 г/кг степень изомерной чистоты

Р-каротина 97,5%, Пример 11. Процесс ведут по примеру 1, Состав питательной среды, мас.%;

Отходы очистки семян подсолнечника 3,0

Фосфатидная эмульсия 6,0

Вода 91,0

Накопление Р-каротина 54856 мкг/100 мл, количество биомассы 3,5 г/100 мл а.с.в., продуктивность биомассы 15673 мкг/г а.с.в. или 15,6 г/кг, степень изомерной "чистоты

Р-каротина 97,4%.

Пример 12. Процесс ведут по примеру 1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 3,0

Соапсток 6,0

Вода 91,0

Накопление Р-каротина 45615 мкг/100 мл, количество биомассы 2,7 г/100 Mll а.с.в„. продуктивность биомассы 16894 мкг/r а.с.в. или 16,9 г/кг, степень изомерной чистоты

Р-каротина 97,6 .

Пример 13. Процесс ведут по примеру 1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 2,0

Фосфатидная эмульоия 4,0

Вода 94,0

Накопление Р-каротина 30857 мкг/100 мл, количество биомассы 3,8 г/100 мл, продуктивность биомассы 8120 мкг/г à.c,в. или

8,1 г/кг, степень изомерной чистоты P-каро-. тина 96,8 .

Пример 14. Процесс ведут по примеру 1.

Состав питательной среды, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 8,0

Фосфатидная эмульсия 4,0

Вода 88,0

Накопление Р-каротина 29754 мкг/100 мл, количество биомассы 6,9 г/100 мл а.,с.в., продуктивность биомассы 4312 мкг/г а.с.в, или 4,3 гlкг, степень изомерной чистоты

Р-каротина 96,7%.

Составы и свойства питательных сред по примерам 1 — 14 приведены в табл.1.

При введейии в питательную среду отходов очистки семян подсолнечника в количестве 3,0-7,0 (примеры 1-12) активность полученной культуральной жидкости находится на уровне 45615 — 135844 мкг/100 мл.

При этом продуктивность биомассы (12,026,1 мкг/г) соответствует требованиям технических условий на кормовой препарат

5 микробиологического каротина (не менее

10 г/кг Р-каротина).

Степень изомерной чистоты Р-каротина в биомассе, содержащей отходы семян подсолнечника, составляет 97,4 — 99,1 .

10 Высокая продуктивность биомассы и высокая степень изомерной чистоты целеВого продукта (P-каротина) позволяют в далц ейшем получать кристаллический, Р1 каротин, соответствующий мировому стан15 дарту (массовая доля Р-каротина — степень изомерной чистоты 99,9%, 182-184 С).

При введении в состав среды 2,0 и

8,0% отходов очистки семян подсолнечника (примеры 13 и 14) продуктивность био20 массы снижается и находится на уровне

4,3-8,1 г/кг.

В табл.2 представлены сравнительные данные по основным характеристикам биомассы, полученной из предлагаемой и из25 вестной питательных сред. Биомассу, как предлагаемую, так и известную, выращивали в условиях.

Таким образом, предлагаемая питательная среда обеспечивает получение биомас30 сы с более высокой степенью изомерной чистоты Р-каротина (на 1 — 2 ) при сохранении его активности.

Формула изобретения

2,0-6,0

Остальное

Питательная среда для биосинтезаР-каротина, содержащая маслосодержащие компоненты, выбранные из ряда: растительное масло, соапсток, фосфатидная эмуль-, 40 сия, и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения степени изомерной чистоты целевого продукта, она дополнительно содержит отходы очистки семян подсолнечника при следующем соотношении компо45 нентов, мас.%:

Отходы очистки семян подсолнечника 3,0-7,0

Маслосодержащие компоненты, выбранные из ряда: растительное масло, соапсток, фосфатидная эмульсия

Вода

1712418

Таблица 1

Степень нзонернод чистоты

Р -каротина, ь

Состав питатедьной среды, нас.2 доннер

Накоплен. иее Р-каротина, нкг/100 нл

Ородуктивность бноиассы, нкгlг а.с.в. (r/xr) Колнчесг ео биомассы, г/100 нл а.с.в.

Отходы очистки сеням подсолнечника

Наслосодеркащие кснпоненты

Растнтель- Соапсток Фосфатидное несло ная внульсия

6,0

4,0

2,0

4,0

k,0

4,0

2,0

2,0

2 ° О

6,0

6>0

6,0

4,0

4,0

Т а бл и ц а 2

Состав и свойства !

Среда

Прототип

Предлагаемая

Состав, мас.4:

Растительное масло

Соапсток

Фосфатидная эмульсия

° Отходы очистки семян подсолнечника

Жмых томатов

4

112700 94500

97,8 95,9

Активност ь )т> - каротина, мкг/100 мл

96117

105546

97,8 .

9400 123696.

96,0 95,8

Степень . изомерной чистоты, 6 9/,8

Составитель Р, Казарян

Редактор Л, Пчолинская Техред M.Mîðãåíòàë Корректор С. Шевкун

Заказ 510 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 191

1 3,0

2 4,0

3 7,0

4 4,0

5 4,0 .

6 6 ° О

7 7,0

8 7,0

9 7,0

10 3,0

ll 3,0

12 3,0

13 2,0

14 . 8,0 .

91,0

92,0

91>0

92>0

92,0

90,0

91,0

91 ° О

91.> О

91,0

91,0

91,0

94,0

88,0

49937

9617

68321

1)2702

105546

135844

68312

67832

49937

54856

30857

29754

3>0

4,7

5 5

4>9

4,3

5,2

6,0

5,0

3 0

3 5

2>7

3,8

6,9

16646 (16,6)

20450 (20,5)

12422 (12,4)

23000 (23,0)

24545 (24,5)

26т24 (26,1)

12420 (12,4)

11987 (12>0)

13566 (13,6)

16645 (16,6)

15673 (15,6)

16884 (16,9)

8120 (8,1)

4312

97,5

97,8

98>9

97,8

97,8

98,7

99 ° 1

99,0

98,9

97,5

97 4

97,6

96,8

96,7