Способ диагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний

 

Использование: изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний , протекающих с инфекционно-аллер-: гическим и аутоиммунным компонентом. Цель - упрощение способа. Для этого исследуют мочу обследуемого больного с последующим использованием иммунологических тестов, например метода фотометрического определения иммунных агрегатов. При этом предварительно определяют степень мутности и используют мочу , соответствующую стандарту мутности II-IV. Если степень мутности соответствует стандарту 1, то ее выдерживают при 4-8°С в течение 6-8 ч. 1 з.п. ф-лы. СО С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК. (19) (11) (s1)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

li - -/

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 3 Э

00 (21) 4777395/14 (22) 30,11.89 (46) 23.04.92. Бюл. М 15 (71) Харьковский фармацевтический институт и Харьковский медицинский институт (72) И.Л.Дикий, Е.Г.Дубенко, М.М.Шамаев, В.Д.Яковенко, В.Г.Чернуский, М.А.Георгиянц, Л.С.Стрельников, А.В.Аркатов и

А.Н.Трунов (53) 615.373(088.8) (56) Кирикадзе В.В. и др. Количественное определение антител в крови. — Методические рекомендации. М., 1984.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний, протекающих с инфекционно-аллергическим и аутоиммунным компонентом.

Известен способ диагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний путем фотометрического определения иммунных комплексов в плазме или сыворотке крови, образующихся и ри добавлении специального антигена.

Недостатком известного способа является необходимость взятия не менее 30-40 мл крови, что в условиях неблагоприятной эпидемиологической ситуации по СПИД нежелательно. Известный способ не исключает параспецифические и неспецифические реакции, что снижает диагностическую ценность результатов и не всегда объективизирует клинический диагноз. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННО-АЛЛЕРГИЧЕСКИХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (57) Использование: изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний, протекающих с инфекционно-аллер- гическим и аутоиммунным компонентом.

Цель — упрощение способа. Для этого исследуют мочу обследуемого больного с последующим использованием иммунологических тестов, например метода фотометрического определения иммунных агрегатов. При этом предварительно определяют степень мутности и используют мочу, соответствующую стандарту мутности НЧ. Если степень мутности соответствует стандарту 1, то ее выдерживают при 4 — 8 С в течение 6 — 8 ч. 1 з. и, ф-лы.

Цель изобретения — упрощение и повышение чувствительности способа диагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний.

Поставленная цель достигается путем использования в качестве объек а исследования для иммунодиагностики мочи обследуемых больных.

Способ осуществляют следующим образом.

У обследуемого при мочеиспускании или катетеризацией собирают в стерильную посуду 30 — 40 мл мочи, в которой визуально определяют степень мутности. При наличии мутности, соответствующей эталону II — IV, моча непосредственно используется в иммунологическом исследовании. При мутности, соответствующей эталону I, мочу

1728806 дополнительно выдерживают в течение 4 — 6 при температуре 4 — 8"С.

Для иммунодиагностического исследования инфекционно-аллергических заболеваний используют набор стандартных микробных аллергодиагностикумов, например выпускаемых Казанским НИИВС, а для иммунодиагностики аутоиммунных заболеваний — тканевые антигены, полученные из гомогенатов висцеральных органов по известному способу. Рабочие разведения эмульсий и растворов антигенов получают путем разбавления 1 мл в равном объеме физиологического раствора натрия хлорида с последующим отстаиванием s течение 30 мин при комнатной температуре, Иммунодиагностическое исследование проводится путем фотометрического определения количественного содержания иммунных агрегатов в моче. Для каждого антигена и аллергена готовят последовательные разведения от 1:30 до 1:30720 (10 пробирок) в дистиллиросанной воде. В кюветы ФЭК-M наливают по 1,7 мл исследуемой мочи (опыт) и дистиллированной воды (контроль). "0" устанавливают по воде. 3атем берут 0,1 мл из 10-й пробирки соответствующего аллергена или антигена добавляют в "опыт" и колориметрируют, затем из 9-й пробирки и т.д. Количество иммунных агрегатов определяют по следующей формуле;

В случае отсутствия в моче антител к специфическому антигену или аллергену иммунные агрегаты не образуются и оптическая плотность мочи непрерывно снижается, В зависимости от интенсивности реакции преципитации получают один из трех вариантов перегиба кривой; пологое снижение оптической плотности "плато" или пик

Результаты оцениваются следующим образом: Qq = 0,004 — отрицательная реакция; 0„,= 0,160 — слабоположительная реакция; Q = 0.9298 — положительная реакция;

Q — — 1,657 — резкоположител ьная реакция. Р

Диагностическое значение имеют результаты, соответствующие слабоположительному, положительному и резкоположительному показателям, Варьирование положительных результатов в пределах диагностических значений свидетельствует аб интенсивности патологического процесса.

Результаты отличаются строгой специфичностью и позволяют решить диагностичсские задачи, связанные с обследованием бального, 5 П ри ме р 1, У20 больных с1и II ñòàäèåé атеросклеротической дисциркуляторной энцефалопатией параллельно исследованы кровь и моча с использованием 20 антигенов сосудов и тканей головного мозга, 10 Установлены следующие нарушения: позвоночная артерия 0,33 л- 0,09 (моча)

0.29 + 0,06 (кровь); передняя мозговая артерия 0,48 ч 0,11 — 0,52+. 0,13; средняя мозговая артерия 0,45 "= 0,11 — 0,54»- 0,13;

15 височная кора 0,25+ 0,005 — 0,22"- 0,007; теменная кора 0,218+ 0,060 — 0,234 0,080.

Пример 2. У больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом параллельно исследованы кровь и моча. Получены сл едую щие резул ьтаты (моча — кровь): тонзиллярный антиген 0,782 0,140—

0.820 +. 0,180; стрептококк 0,427+ 0,015—

0,432 + 0,016: стафилококк 0,722л- 0,170—

0.718+. 0,110.

Пример 3. Параллельно исследованы моча и кровь 20 больных с диагнозом цирроз печени, Получены результаты: антиген паренхимы печени 0,442+ 0,094 — 0,419 +. 0,008, антиген соединительно-тканого замещения печени 0,834»- 0,134 — 0,867 л- 0,184.

Пример 4. Обследованы моча и кровь

10 больных инфекционно-аллергической бранхиальной астмой, Получены следующие результаты; антиген трахеи 0,111 л- 0.018 — 0,123 + 0,031: антиген бронхов

0,483л 0,083 — 0,465+. 0,072; антиген легких 0,874 - 0,117 — 0,856++ 0,134, Таким образом, к преимуществам предлагаемого способа иммунодиагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний относится использование в качестве исследуемой жидкости физиологического экскрета организма (мочи), исключение манипуляций и операций, связанных с применением шприцев, нарушением кожных покровов и забором крови, чувствительность и простота методического исполнения, 50

Формула изобретения

1. Способ диагностики инфекционноаллергических и аутоиммунных заболеваний путем выявления антител к специфическому антигену в исследуемой жидкости организма, отличающийся тем. что, с целью упрощения способа, выявление антител ведут в моче, в которой предварительно определяют степень мутности.

1728806

15

25

35

45

Составитель И.Дикий

Техред М.Моргентал Корректор M.Êó÷eðÿaàÿ

Редактор Н.Тупица

Заказ 1406 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что, с целью оптимизации способа, мочу, соответствующую эталону мутности, выдерживают при 4-8 С в течение 4-6 ч..