Устройство для проведения электрофореза в геле

 

Использование: в кардиологических и инфекционных отделениях больниц и клиник , медицинских учреждениях помощи матерям и детям, инвалидам и престарелым для выявления дислипопротеидемий (атеросклероз , ишемическая болезнь сердца), Сущность изобретения: держатель с двух сторон от рабочей поверхности содержит планки, верхняя поверхность которых параллельна верхней поверхности держателя, на которые натягиваются одна или несколько ацетат-целлюлозных мембран, которые крепятся прижимами, вставляемыми в прорези держателя, причем с двух сторон держателя между его наружной стенкой и мембраной помещается прокладка из пористого материала. На держатель с мембраной устанавливается шаблон, по краям которого расположены буртики, по ширине совпадающие с верхней поверхностью планок держателя, имеющей ряд окон, содержащих с двух сторон ряд направляющих прорезей для аппликатора. 1 з.п.ф-лы, 6 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1?80513 АЗ (51)5 А 61 N 1/30

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ л (21) 4883533/14 (22) 20.11.90 (46) 07.12,92, Бюл. N. 45 (76) В,И.Соболев (56) Авторское свидетельство СССР

N997672,,кп, А 61 N 1/30, 1979. (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ

ЭЛЕКТРОФОРЕЗА В ГЕЛЕ . (57) Использование: в кардиологических и инфекционных отделениях больниц и клиник, медицинских учреждениях помощи матерям и детям, инвалидам и престарелым для выявления дислипопротеидемий (атеросклероз, ишемическая болезнь сердца), Сущность изобретения: держатель с двух

Изобретение относится к медицинской технике и может быть. использовано в кардиологических и инфекционных отделейиях больниц и клиник, медицинских учреждени ях помощи матерям и детям, инвалидам и престарелым.

Известно устройство для проведения встречного иммуноэлектрофореза Австрийской фирмы "IMMNO",ñoäåðæàùåå камеру, разделенную по длине перегородкой на две полости и устанавливаемый на перегородку держателя геля, в который предварительно заливается гель. Держатель с гелем электрически соединяет катодно-анодное пространство камеры. В слое геля на рабочей поверхности выполнены два ряда выемок круглой формы для внесения в них исследуемых сывороток и антисывороток, Однако с помощью такого устройства нельзя определить фракционный состав пи2 сторон от рабочей поверхности содержит планки, верхняя поверхность которых параллельна верхней поверхности держателя, на которые натягиваются одна или несколько ацетат-целлюлозных мембран,. которые крепятся прижимами, вставляемыми в прорези держателя, причем с двух сторон держателя между его наружной стенкой и мембраной помещается прокладка из пористого материала. На держатель с мембраной устанавливается шаблон, по краям которого расположены буртики, по ширине совпадающие с верхней поверхностью планок держателя, имеющей ряд окон, содержащих с двух сторон ряд направляющих прорезей для аппликатора. 1 з.п.ф-лы, 6 ил. попротеидов в сыворотке крови с целью выявления нарушения липидного обмена, возникающего при ишемической болезни сердца и атеросклероза.. а также фракционный состав белков с целью выявления злокачественных опухолей. алпергических С заболеваний, острых и хронических воспа- Ql лительных процессов. и

Для осуществления этой задачи необхо- (Д димо новое конструктивйое решение, с применением мембранных носителей, обеспечение постоянного свободного нвтя- (д) жения мембраны во время работы и возможность многократного фиксированного нанесения пробы.

Прототипом заявленного устройства является устройство для проведения электрофореза в геле, содержащее ряд камер, кажда из которых содержит крышку, электроды, перегородку. разделяющую камеру

1780513 на две полости, устанавливаемый на перегородке держателя, имеющий рабочую поверхность, при этом рабочая поверхность держателя параллельна верхней поверхности держателя геля и расположена от нее на расстоянии 1,2 — 1,6 мм, Недостаток известного устройства указан выше.

Целью настоящего изобретения является возможность определения фракционного состава липопротеидов в сыворотке крови с целью выявления нарушения липидного обмена, возникающего при ишемической болезни сердца и атеросклероза, а также возможность айределения фракционного состава белков с целью выявления злокачественных опухолей, аллергических заболеваний, острых и хронических воспалительных процессов. И вместе с тем, как известное устройство и прототип, предлагаемое устройство позволяет определить ан тигеньГи антитела с-целью диагностики вирусного гепатита типа В и других вирусных и баКтериальных инфекций в геле, Поставленная цель достигается тем, что на дер>кателе с двух сторон от рабочей поверхности размещены планки; верхняя поверхность которых параллельна рабочей поверхности держателя, на планки уложена по крайней мере одна ацетэтцеллюлозная мембрана, концы которой введены в снабженные прижимами вертикальные прорези держателя со стороны его нерабочей поверхности, при этом пористые прокладки рас-. поло>кены с двух сторон между боковыми поверхностями держателя и мембраной. Устройство при этом снабжено шаблоном с двумя параллельными буртиками, соприкасающимися с мембраной и верхними повер-хностями планок, имеющим ряд окой, две стороны каждого из которых выполнены с выемками для нанесения проб.

На фиг. 1 изобра>кена камера для проведения электрофореза; на фиг. 2 — держатель, разрез; на фиг. 3 — прокладка, поперечное сечение; на фиг, 4 — держатель, вид сверху; на фиг. 5 —.шаблон, вид сверху; на фиг. 6 — шаблон, разрез.

Устройство для электрофореза содер>кит камеру и блок питания (на рис. не показан). Камера содер>кит кювету 1, разделенную по всей длине перегородкой 2 на две полости, образующие два буферноэлектродные пространства, заполненные буферным раствором 3, На перегородку 2 установлен держатель геля 4, имеющий рабочую поверхность 5, которая параллельна верхней поверхности 6 и расположена от нее на расстоянии 1,2-1,6 мм.

15

20 попадание на нее продуктов электролиза и ионов, 30 На держатель 4 с мембраной 13 устанэвпланок 11, 35 Шаблон 16 имеет ряд окон 18, две стороны каждого из которых выполнены с вы45

В основании держателя 4 по всей длине с обеих сторон сделаны вертикальные углубления 7 с одной или несколькими прорезями 8 с каждой стороны. Электроды 9 крепятся к крышке 10, и при установке крышки на кювету 1 располагаются s буфере

На края дер>кателя 4 с двух сторон от рабочей поверхности 5 размещены планки

11, верхняя поверхность 12 которых параллельна рабочей поверхности 5 держателя и расположена от нее на расстоянии от 3 до 5

На планки натягиваются одна или несколько ацетатцеллюлозных мембран 13, концы которых крепятся при>кимами 14, вставляемыми в прорези держателя 8.

С двух сторон держателя между его наружной стенкой и мембраной помещается прокладка 15 из пористого материала.

В. процессе работы мембрана, пропитанная буфером, увеличивается по длине и провисает.

Прокладки 15 осуществляют постоянное натяжение мембраны в процессе работы, обеспечивают дополнительную подпитку мембран буфером и задерживают ливается шаблон 16, па краям которого расположены буртики 17, по ширине совпадающие с верхней поверхностью 12 емками (направляющими) 19 для нанесения проб аппликатором.

Устройство работает следующим образом, Ацетатцеллюлозную мембрану "ВЛАДИПОР" МФА-МА К. 4 или 1ч 5 режут на полосы во всю длину прорези 8, (Например, при 6 прорезях на каждой сторонедержателя ширина мембраны — 28 мм), Готовят буфер, r:

Барбитал натрия (мединал) 12,75

Барбитал (веронал) 2.3, . заливают дистиллированной водой до

1000 мл.

Ацетатцеллюлазную мембрану помещают в буфер на 15-20 мин, затем слегка подсушивают между двумя листами фильтрованной бумаги.

Далее мембрану закрепляют следующим образом: дер>катель 4 верхней поверхностью кладут на стол. Край мембраны закладывают в прорезь 8 и.крепят прижимом 14, Далее

1780513

10 ля 4

20 дицинской практике

30

55 между наружной стенкой держателя 20 и мембраной 13 помещают прокладку 15 из пористого материала, Затем мембрану натягивают на планки 11 и аналогично закрепляют другой край мембраны прижимом 14.

Такая конструкция обеспечивает постоянное натяжение мембраны за все время проведения электрофореза и исключает касание ее рабочей 5 поверхности держатеВ каждую часть буферного пространства кюветы 1 заливают по 43+ 1 мл буфера 3.

Далее держатель 4 с мембраной 13 устанавливается на перегородку 2. На держатель устанавливается шаблон 16. На специальный трафарет (на рис. не показан) на расстоянии, соответствующем Шагу зубьев аппликатора, наносится при помощи пипеточного дозатора исследуемые образцы сывороток, Далее эти сыворотки при. помощи эппликатора многократно (в зависимости от необходимого количества вещества) переносят на мембрану через наи равл я ющие выемки 19.

Направляющие выемки 19 служат для точного нанесения пробы в одно и то же место, поскольку перенос многократный.

Окна 18 служат для визуального наблюдения оператором момента соприкосновения аппликатора с мембраной, что исключает разрыв мембраны. Шаблон 16 фиксируется по внутреннему (можно наружному) периметру кюветы 1, а также имеет, кэк и держатель 4, замок 21, исключающий неправильную установку

Каждое окно 18 имеет несколько направляющих выемок 19, что необходимо для нанесения проб в разное место мембраны. (Выбирается оператором). Буртики 17 служат для того. чтобы шаблон прижимал по 40 краю мембрану, но не соприкасался с ее рабочей йоверхнастью в тех местах, где происходит фракционирование при электрофорезе.

Кювета с держателем закрывается 45 крышкой и подключается к разъему блока питания.

На камеру подается напря:кение. После электрофореза белков (- 30 мин) ацетатцеллюлозная мембрана помещается в

0,25%-ный раствор амидно-черного 7% раствора уксусной кислоты в течение 1 — 2 мин, после чего проводится отмывание мембраны в 7%- ной уксусной кислоте.

После электрофореза липопротеидов ацетэтцеллюлозная мембрана помещается в раствор судана черного. 5 мл изопропанола и 10 мл 5% NaOH, Окрашивание проводится от 1до 3 ч, После скрашивания мембрана отмывается в воде.

Устройство позволит увеличить область применения прибора путем определения фракционного состава липопротеидов на ацетатцеллюлозной мембране с целью выявления нарушения липидного обмена, возникающего при ишемической болезни сердца «атеросклерозе; фракционный состав белков на ацетатцеллюлозной мембране с целью выявления злокачественных опухолей, аллергических заболеваний, острых и хронических воспалительных процессов; антигены и антитела в агаровом геле с целью диагностики вирусного гепатита В, и других вирусных и бактериальных инфекций.

Обработка результатов легко поддается полной автоматизации. Предлагаемое устройство найдет широкое применение в меФормула изобретения

1, Устройство для проведения электрофореза в геле, содержащее ряд камер, каждая из которых включает кювету с перегородкой, разделяющей ее на две полости для буфера, на которой размещен держатель геля с рабочей поверхностью, с двух сторон от кбторой выполнены параллельные вертикальные прорези, а также крышку с электродами и пористые прокладки, о т л и ч а.ю щ е е с я тем, что, с целью определения фракционного состава белков и липопротеидов в сыворотке крови, на-держателе с двух сторон от рабочей поверхности размещены планки, верхняя поверхность которых параллельна рабочей поверхности держателя, на планки уложена по крайней мере одна ацетатцеллюлозная мембрана, концы которой введены в снабженные прижимами вертикальные прорези держателя со стороны его нерабочей поверхности, при этом пористые прокладки расположены с двух сторон между боковыми .поверхностями держателя и мембраной.

2. Устройство по и. 1, о т л и ч а ю щ е ес я тем, что оно снабжено шаблоном с двумя параллельными буртиками, соприкасающимися с мембраной и верхними повеохностями планок, имеющим ряд окон, две стороны каждого из которых выполнены с выемками для нанесения проб.

1780513 I 780513

Щг5 б-б

Составитель В,Соболев

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор А.Мотыль

Редактор С.Кулакова

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101

Заказ 4443 Тираж . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5