Способ определения пороговой дозы нитратов

 

Использование: изобретение относится к медицине, в частности экспериментальной , и может быть использовано в токсикологии . Цель изобретения - повышение точности и ускорение способа. Сущность изобретения: затравку крыс исследуемым веществом проводят с первого дня беременности лабораторных животных до родов . После родов забивают самок и исследуют кровь. Определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего гемоглобина крови и по его величине определяют пороговую дозу исследуемого вещества . Положительный эффект: способ является более быстрым по сравнению с традиционным, что позволяет не только сократить время эксперимента, но и сократить (в 10 раз) средства на содержание лабораторных животных.

сОюз сОВетских

СОЦРЕАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/49-=

ГОСУДАРСТВЕННОЕ llATEHTHOE

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ1 (21) 4870592/14 (22) 21,06.90 (46) 23.12.92, Бюл. N 47 (71) Киевский медицинский институт им. акад. А.А.Богомольца и Республиканский научно-гигиенический центр (72) Г.К.Степанковская, О.И,Цыганенко, О.Я.Слободяник, В.С.Лапченко, M.Ï.Ãóëè÷ и Н.Л.Емченко (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРОГОВОЙ

ДОЗЫ НИТРАТОВ (57) Использование: изобретение относится к медицине, в частности экспериментальной, и может быть использовано в токсикологии, Цель изобретения -- повышение

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной медицине.

Цель изобретения — повышение точности и ускорение эксперимента.

Поставленная цель достигается тем, что введение исследуемого препарата в различных дозах осуществляют в течение всего периода беременности, начиная с первого дня, а исследование крови проводят после родов, при этом определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего гемоглобина и no его увеличению по сравнению с контролем определяют rlopOroвую дозу.

Способ осуще твляется следующим образом.

Группу половозрелых крыс-самок массой 150-200 r, у которых предварительно исследуют экстрал -ный цикл с помощью-вагинальных мазков, ри наличии эструса спаривают с самцами 1 самец на 2 самки), По наличию спермато.нидов в матке влагалищ.БЫ 1783434 А1 точности и ускорение способа, Сущность изобретения: затравку крыс исследуемым веществом проводят с первого дня беременности лабораторных животных до родов. После родов забивают самок и исследуют кровь. Определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего гемоглобина крови и по его величине определяют пороговую дозу исследуемого вещества. Положительный эффект: способ является более быстрым по сравнению с . традиционным, что позволяет не только сократить время эксперимента, но и сократить (в 10 раз) средства на содержание лабора-,: торных животных. ного содержимого устанавливают первый день беременности, В зависимости от количества изучаемых доэ химического вещества беременных са- мок рассаживают по группам, включая кон-,, трольную, не менее 6-10 в каждую. С первого дня и на протяжении всего периода Ю беременности самкам перорально вводят (h) изучаемое вещество, После рождения rlo- фь, томства самок забивают путем декапита- (,Д ции, отбирают их органы и кровь, которые ф, исследуют для определения токсического действия путем проведения наиболее спе-:, цифических методов исследования для изу- чаемого химического вещества, Порог вредного действия (минимальные дозы либо концентрации, вызывающие изменения биологических показателей, выходящие за пределы приспособительных физиологических реакций) устанавливают по лимитирующему п указателю, Как видно из табл,1, таким лимитирующим покнзате1783434

Таблица!

Доза нитратов (мг/кг массы тела беременной крысы по нитрат-иону)

1/4 ЛД5, 1/20 лДя> l/100 ЛД.1о 1 400 лДдо контрольная (1 125 мг/кг) (225 мг/кг) (45 мг/кг) (11,2 мг/кг) группа

Показатели

1,44+0,121

«0>05

28,38 1,72 (0,05

7,45480,486 . 0,05

0,26Ы0,06 с 0,05

1>3Ы0,091

«0,05

19,18 1,07

«0,05

8,67420,620

>0,05

0,182+0,018 (0,05

1,55>0,1

1>39- o 179

«0,05

51, 173+6, 090 с 0,05

6>17910,590

«0,05

0,41М0,07 с 0,05

1,4180,112 ,«0,05

33,076 2,43

r0>05

8,198 0,640 0,05

0,490+0,315 (0,05.

Гемоглобин Иш (ммоль/л) р

Иетгемоглобин 11 и (мкмоль/л) P

Оксигемоглобин (3) 19,94i1,05

7>490+0,295

0,05

0 11 0 02. Сульфгемоглобин (3) Активность НАДН2 зависимой мстгемоглобинредуктазы

3, E7i0.17

«0,05. 3>450 0> 12 (О, 05

2,72020>12 (0>05

1,65i0>08

«0,05

1,65+0, 12

9 5 0 32 (0,05

12,5- 0,30

r0,05

Содершание SH групп крови (ммоль/л) 12,90i0,30

9,7+0,22 (0,05

9,М0,72 (0> 05

«Ъ лем в предлагаемом способе оказался показатель содержания сульфгемоглобина. Концентрация сульфгемоглобина и его процентное содержание от. общего гемоглобина крови подопытных крыс в сравнении с 5 контролем повышалась в зависимости от вводимой дозы, что коррелирует с сбдержа- . нием нитратов в крови этих животных, Наименьшая концентрация сульфгемоглобина наблюдалась в крови крыс, которым вводи- 10 ли нитраты в течение беременности, в дозе

11,2 мг/кг.

Результаты проведения хронического

10-месячного эксперймента приведены в табл.2 (как прототипа, так и предлагаемого 15 способа).

По результатам хрОнического эксперимента была установлена пороговая доза нитратов для крыс, равная 20 мг/кг, в то время как при проведении эксперимента по 20 предлагаемому способу пороговая доза составила 11,2 мг/кг, т.е, почти вдвое меньше, Разница в длительности эксперимента составила 9 месяцев и 7 дней, Таким образом, предлагаемый способ 25 определения порогового действия токсического вещества (нитратов) является более быстрым по сравнению с традиционными, что позволяет не только сократить время эксперимента, но и сократить (в 10 раз) средства по содержанию лабораторных животных. Предлагаемый способ является более чувствительным, что позволит разработать при его использовании действительно безопасные гигиенические нормативы для всего населения. включая его декретивные группы.

Формула изобретения

Способ определения пороговой дозы нитратов, включающий введение лабораторным животным исследуемого препарата и последующее исследование крови, о т л ич а Ео шийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, введение исследуемого препарата осуществляют в различных дозах в течение всего периода беременности животных, начиная с первого дня, а исследование крови проводят после родов, при этом определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего гемоглобина и по его увеличению tlO сравнению с контролем определяют пороговую дозу препарата.

1783434 таблица2

Доза нитратов (мгlкг массы тела крысы по нитрат-иону) Показатели

15

10 контрольная . группа

Гемоглобин И1ш (ммоль/л)

1i65i0,1

25,9Ы6,96 йетгемоглобин 1&m (мкмоль/л)

Оксигемоглобин (ь) 7,5М0,36

0,12 0,02

Суп ьфгемо глоб ин (3) 2,14220, 32 а 0,05

2,95 0i084

Активность НАД.Н2 зависимой метгемоглобинредуктазы

2,94 0,074 2,73 0,197 т0,05 )0,05

Содержание Н групп крови (ммоль/л) 1о,6Ыо,г8

40,05

12,61о 315

11,8М0,71

70, 05

12,23хо, 55

)О, 05

Составитель О.Слободяник

Редактор Т.Козлова Техред М.Моргентал Корректор М.Керецман

Заказ 4512, Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям:и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", 1 . Ужгород, ул.Гагарина. 101

1,62f0,1 0,05

21,6225,72

w0,О5

7,42 0,44 0, 05

0,1310,02 т0,05

1,430,2 р0,05

22,02 и,87 т0,05

7,65М,37 .>О 05"

0,1220,018, >0,05

1, 59(0, 12 0,05

67,37Н2,32 а0,05

7,9Ф0,44 0,05

0,19+0,017

ñ0, 05