Способ получения глохидиев пресноводных двустворчатых молюсков
Использование: разведение водных животных , в частности жемчужниц. Сущность: из воды извлекают половозрелых особей и их обсушивают на воздухе при температуре 13:15°С в течение 1-30 мин. 3 табл.
СО103 СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 4 (00, 1 () О СО I )> (21) 4849789/13 (22) 23.07.90 (46) 15,01.93. Бюл. ¹ 2 (71) Институт биологии развития им. Н. К, Кольцова, Советско-американское совместное предприятие "ПГД" (72) В.В.Зюганов, lO;H.Ñoïoâ, А,А.Зотин, Л.П.Незлин, И.В,Михно. К,Н.Буданов, Ю.М,Чегодаев и И.М,Параманова (56) Заявка Японии ¹ 38231-78, кл. А 01 К 61/00, 1986. Изобретение относится к области разведения водных животных и может быть использовано при разведении редких и исчезающих видов моллюсков, при разработке экологически чистых систем рационального ведения рыбного хозяйства. Одним из наиболее ценных в экономическом отношении пресноводных двустворчатых моллюсков является европейская жемчужница, занесенная в Красную книгу СССР как исчезающий вид. Установлено, что существование этого моллюска тесно связано с существованием некоторых ценных видов лососевых рыб, т.к. его личиночное развитие проходит в жабрах этих рыб, а взрослые особи активной биофильтрацией улучшают водйую среду обитания лососевых рыб. Поэтому разработка технологии разведения европейской жемчужницы позволит одновременно повысить численность и ценных аидов рыб. На пути создания такой технологии неизбежно встает проблема получения зрелых глохидиев (личинок) моллюска для последующего заражения ими рыб. „„5U„„178?398 Al (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЗРЕЛ61Х ГЛОХИДИЕ8 ОТ МОЛЛЮСКОВ (57) Использование: разведение водных животных, в частности жемчужниц. Сущность: из воды извлекают половозрелых особей и их обсушивают на воздухе при температуре 13-15 С в течение 1-30 мин. 3 табл. Известно несколько способов получения зрелых глохидиев от двустворчатых моллюсков: моллюсков.-производителей помещают в небольшой сосуд, воду в котором нагревают в течение часа до комнатной температуры, отбирают созревших самок моллюска, разрезают у них мускулы-замыкатели створок раковины, вскрывают жабры и вынимают глохидиев; в другом варианте этого способа отобранных созревших самок с помощью пинцета раздражают механически внутренние органы, в том числе содержащие глохидиев жабры, после чего моллюсков помещают в небольшой сосчд с аэрируемой водой слоем 20 см, куда запускают заражаемую глохидиями рыбу. 3а прототип принят следующий способ получения зрелых глохидиев от моллюсков; отбирают самок, содержащих глохидиев, среди которых должно быть не менее 50% созревших, затем отобранных моллюсков помещают в садок, находящийся в сосуде с аэрируемой водой и заражаел ой ли:. днями рыбой, Недостаток способа сос 0t t7 R I ðóä.|". ìкости отбора моллюсков, зэк л юч:1 ощ: .«с я в 1787398 визуальном осмотре моллюсков и исследовании под микроскопом их выделений. Кроме того, вторичный отбор самок, у которых доля созревших глохидиев превышает 507, связан с риском их травмирования при взятии проб содержимого органов размножения, Целью изобретения является снижение травмирования моллюсков и снижение трудоемкости способа. Цель достигается теу, что при отборе из воды извлекают половозрелых особей, а в качестве стимуляции нереста осуществляют обсушивание особей на воздухе при температуре от 13 до 15 С в течение от 1 до 30 мин и помещают их в воду. Пример 1. Опыты проводились с европейской жемчужницей Margarltifera margaritlfera L. на Кольском полуострове в конце августа — сентябре. Температура воды в реке; 9 — 11 С, температура воздуха: +13-15 С. Половозрелые жемчужницы (размер раковин от 7 „-o 12 cM) были отобраны при подводном исследовании, Отобрано 60 особей, из них на 40 особях поставлен опыт. а 20 служили контролем. Жемчужниц осторожно поднимали иэ реки. раскладывали на прибрежном грунте и через разные промежутки времени (контрольных — сразу) помещали в сосуды с речной водой слоем 3-5 см, Результаты опытов представлены в табл.1. Иэ табл.1 видно, что при всех испытывавшихся сроках обсушивания моллюсков на воздухе происходит вымет глохидиев, а в контроле вымета не наблюдали. Минимальное время начала выброса глбхидиев при продолжительности выдерживания на воздухе 15 и 30 мин составляло собственно 4 и 5 мин, а при продолжительности 45 и 60 мин — уже 8 и 15 мин, Выдерживание жемчужниц на воздухе более часа может привести к нежелательным, хотя и обратимым, изменениям в метаболизме моллюсков. Пример 2. Условия проведения опыта те же, что в примере 1, Испытывали различФормула изобретения Способ получейия глохидиев пресноводных двустворчатых моллюсков. предусматривающий отбор моллюсков иэ воды, и стимуляцию их нереста и возвращение в ные сроки выдерживания жемчужниц на воздухе, Результаты представлены в табл.2, Вымет глохидиев при сроках выдерживания моллюсков на воздухе 1-30 мин начинается через 2 — 27 мин после помещения моллюсков в воду и может продолжаться 15-56 мин. Продолжительность вымета, видимо, не связана с продолжительностью вы- . держивания жемчу>книц на воздухе, а начало вымета зависит от нее, Самый ранний выброс (через 2 — 3 мин) наблюдали после выдерживания на воздухе в течение 10 — 15 мин, а самый поздний (через 10 мин) после выдер>кивания в течение 1 мин. Пример 3. Условия проведения эксперимента те же, что и в примере 1. Полученных зрелых глохидиев, а также оставшихся в жабрах моллюсков собирали, освобождали от слизи и исследовали под микроскопом для определения их инвазионности. Полученные данные приведены в табл,З, Из табл.З видно; что выметанныа после выдерживания на воздухе моллюсков глохи25 дии по сравнению с оставшимися в жабрах обладают большей инвазионностью, а следовательно, жизнеспособностью. Выдерживание на воздухе позволяет получать от самок моллюсков наиболее инвазионных глохидиев. Пример 4. Условия проведения опыта те же, что и в примере 1, Для определения жизнеспособности глохидиев полученных предложенным способом, ими заражали 450 двухлетков семги и вели наблюдение за развитием глохидиев в жабрах рыб в течение 40 сут, Через 40 дней после заражения рыб в их жабрах развивались более 50 первоначально прикрепившихся глохидиев, что соответствует литературным данным, Полученные с помощью обсушивания моллюсков глохидии обладают достаточной жизнеспособностью. воду, от л и ч а ю щи и с я тем, что, с целью снижения травматизма особей, при отборе иэ воды извлекают половозрелые особи. а в качестве стимуляции нереста осуществляют обсушивание особей на воздухе при 13— 15 С в течение 1-30 мин. 1787398 Таблица Результаты опытов по стимуляции вымета глохидиев применением выдерживания на воздухе и последующего помещения >кемчужниц в воду Количество особей жемчуж- Время начала Продолжинереста по- тельность выниц всего в опыотнерестив- сле помещемета, мин те* шихся ния в воду, мин мин 4-22 15 5-21 8 — 18 15 — 38 О 20 конт оль * самцы и самки жемчужниц визуально неразличимы Таблица 2 Вымет глохидиев жемчужницами в зависимости от продолжительности выдерживания моллюсков на воздухе Таблица 3 Сравнение инвазионности глохидиев, полученных нашим способом, и оставшихся в жабрах моллюсков Пример Число самок жемчу>книц в опыте. экз Доля глохидиев, свободных от оболочек. в от общего числа Частота кол-во Среднее время удерживания глохидиев. на волоске. с в одном моллюске выметант оставшиеся в жабоставшиеся B жабвыметанияа гл ° эю ю вымета3 ные ные ах ах 95.6 11,2 10,8 10-15 3,5 Продолжительность выдерживания на воздухе, 5 3 26-46 36 — 49 31-34 30-37 Кол-во глохидиев, полученных в среднем от одной самки, млн. шт 3,1 — 3,4 3,0-4,0 3,2 — 4,1 3,1 — 3,9 1787398 Продолжение табл. 3 Доля глохидиев. своСреднее время удер- Частота "хлопания" Прикол-во "хлопков" в мер 1мин в о ном моллюске оставшие- выметанвыметанвыметаноставшиеся в жабся в жабные ные ные ах ах 3,4 11,2 15,7 89.1 3,7 10,9 10,3 91,3 1 — 3 Составитель lO. Сопов Техред M,Ìîðråíòàë Корректор Л. Филь Редактор Заказ 537 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород. ул.Гагарина, 101 Число самок жемчужниц в опыте, зкз 3 бодных от оболочек, e $ от общего числа оставшиеся в жабрах живэния глохидиев на волоске. с 10-15 10-15
