Способ выявления альтернариозной инфекции у семян пшеницы
Использование: в сельском хозяйстве при оценке селекционного материала на устойчивость к альтернариозной инфекции. Сущность изобретения: семена выдерживают в спирте для дезинфицирования. Помещают их на питательный субстрат из картофельного агара при рН 2-3 с добавлением 3 % сахара и выдерживают на нем в течение 3 суток. Альтернариозную инфекцию выявляют путем микроскальпирования. 4 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)5 А 01 С 1/08
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) 1яйс ЯДА т
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ: :
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4850347/15 (22) 12.07.90 (46) 15.02.93. Бюл. М 6 (71) Целиноградский сельскохозяйственный ийститут (72) 3.П;Карамшук (56) Хохряков M.Ê. и др. "Определитель болезней сельскохозяйственных культур", М,:
Крлос, 1984, с.305. (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АЛ6ТЕРНАРИОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ У СЕМЯН ПШЕНИЦЫ
Изобретение относится к сельскому хо.. зяйству, в частности к способам фитопатологической экспертизы предусматривающей выявление скрытой альтернариозной инфекции в зародышевой зоне семян пшеницы, что может быть использовано в получении здоровых проростков для использования их в селекционном и семеноводческом процессах выведения высокоурожайных сортов яровой пшеницы и повышения урожайности имеющихся сортов.
Известен способ анализа семян зерновых культур на фузариоз и гельминтоспориоз, принятый за прототип, предусматривающий дезинфекцию и раскладку их на питательные агаровые среды с последующим микроскопированием. Семена дезинфицируют сулемой (1:1000), формалином (1:300), марганцовокислым калием (0,5%), хлорноватистым натрием (0,5%), 1% раствором борной воды, 96% или 50% раствором спирта (семена погружают на 3 мин, вынимают, просушивают на фильтрах и раскладывают на питательные среды). Рекомендуемые питательные среды следующие: Ы 1794343 А1 (57) Использование; в сельском хозяйстве при оценке селекционного материала на устойчивость к альтернариозной инфекции.
Сущность изобретения: семена выдерживают в спирте для деэинфицирования. Помещают их на питательный субстрат из картофельного агара при рН 2 — 3 с добавлением 3 % сахара и выдерживают на нем в течение 3 суток. Альтернариоэную инфекцию выявляют путем микроскальпирования, 4 табл, мальцпептонный агар, клевероглюкозный агар, овсяной агар, свекловичный агар, сусловый агар. Используют также картофельный агар. Очищают. нарезают кубиками 200 г картофеля, зали ;ют 1 л воды, кипятят 40 мин. Жидкость о фильтровывают, добавляют 20 г aгара, 1-" капли 50%-ного раствора лимонной кислоты на 10 мл среды, кипятят до растворения агара, разливают в пробирки, При приготовлении картофельно-глюкозного агара все производят как в первом случае только еще добавляют 20 г глюкозы.
Hàäîñòàòê0ì отмеченного способа является то, что он рекомендуется только для выделения грибов из рода фузариум и гельминтоспориум, Испытание предлагаемых сред для определения грибов из рода
Alternaria приводило к тому, что питательные среды зачастую зарастали грибами из рода Mucor, что затрудняло выявление грибов из рода Alternarla, кроме того ни одна из отмеченных питательных средств и средства дезинфекции семенного материала не имели той высокой точности оценки выявления скрытой альтернариоэной инфекции в зародышевой зоне пшеницы, 37о 1 i 13
Цель изобретения — разработка способа оценки селекционного и семеноводческого материала на устойчивость к альтернариозной инфекции, а также дающего возможность выделения здоровых проростков пшеницы для использования их в биотехнологии селекционного и семеноводческого процессов, Поставленная цель достигается тем, что семена пшеницы дезинфицируют в 96%ном спирте, извлекают и переносят сквозь пламя спиртовки и раскладывают на подкисленный соляной кислотой картофельный агар. о
Способ изучался на мягкой и твердой "5 сортах пшеницы, имеющих различное экологическое происхождение и полученных с различных агротехнических фонов, В анализ шли раздельно чеонозародышевые и белозародышевые семена. Полученные здоровые проростки и проростки с пораженной зародышевой зоной грибами рода
Alternaria выращивались в вегетационных и полевых опытах на темно-каштановой почве в условиях сухой степи Северного Казахстана.
Пример, Отбирают 20-30 семян испытываемого сорта и переносят в чашки
Петри с 96% спиртом, сразу же извлекают пинцетом каждое зерно и проносят его сквозь пламя спиртовки для полного сгорания спирта, прогрева и обеззараживания поверхности семян. Раскладывают эти семена на подкисленный соляной кислой картофельный агар в чашки Петри. При высеве белозародышевых альтернариозных семян, через сутки сквозь лопнувший перикарпий вместе с ростом главного корешка наружу пробивается пучок мицелия грибов рода
Alternaria. Формирование колоний и споро- 40 ношение гриба происходит на третьи сутки.
Картофельный агар готовят следующим образом: 200 г очищенного, нарезанного кубиками картофеля заливают 1 л водопроводной воды, доводят до кипения, настаивают 1 ч, отжимают через марлю. В
Формула изобретения
Способ выявления альтернариозной ин-. фекцииусемян пшеницы, включающийдезинфекцию семян в спирте. выдерживание на питательном субстрате и микроскопирование, отличающийся тем, что. с целью повыше- ия точности способа. после дезин. фильтрат добавляют 30 г сахара (3%), 15 г а ар-агара (1,5%) и доводят водой объем до прежнего уровня. Затем стерилизуют 30 мин при 120 С. Перед анализом семян картофельный агар разогревают и добавляют фиксанал соляной кислоты в концентрации
0,1 г/экв (на 1 л среды — 5 мл HCI), Разработанный способ позволил выявить высокую зараженность семян твердой и мягкой пшеницы грибами рода Alternaria в условиях сухой степи Северного Казахстана (табл. 1).
Патогенную нагрузку грибов рода
Alternaria в зоне зароша несут внешне здоровые белозародышевые семена пшеницы (табл. 2).
Опасность представляют чернозародышевые альтернариозные семена пшеницы, несущие высокую нагрузку грибов, что обуславливает заметно большую поражаемость грибов структурных элементов колоса пшеницы. Патогенное действие грибов рода
Alternaria негативно сказывается на полевой всхбжести и урожайности пшеницы, Период хранения семян пшеницы в течение трех лет способствует стопроцентному поражению зародышевой эоны грибами рода Alternaria. Это отрицательно влияет на жизнеспособность семян пшеницы и снижает урожайность этой культуры до 3,5 ц/га (табл. 3).
Обработка белозародышевых альтернариозных семян химическими протравителями беномил, байтан слабо подавляет грибы рода Alternaria в зародышевой зоне пшеницы (табл. 4), Использование предлагаемого способа анализа семян пшеницы на зараженность зародышевой зоны грибами рода Alternaria позволило выявить широкую распространенность и патогенность этого заболевания, резко снижающего полевую всхожесть, а также возможность отбора здоровых проростков для биотехнологических целей в селекции и семеноводстве, фекции семян в спирте их обрабатывают пламенем, а в качестве питательного субстрата используют картофельный агар при рН 2-3 с добавлением 3% сахара, при этом выдерживание семян на субстрате ведут в течении 3 суток, 179 1343
Таблица 1
Интенсивность заражения грибами рода А!1еглаг а зародышевой зоны различных сортов пшеницы
Таблица 2
Средний диаметр колоний гриба Aiternaria на структурных элементах колоса пшеницы, мм
Полевая всхожесть
Диаметр колоний грибов на пораженных ст уктурных элементах колоса, мм
Растения пшеницы; чешуйки зерно стержень из здоровых проростков от белозародышевых семян из проростков от белозародышевых альтернариозных семян из проростков от чернозародышевых альтернариозных семян
19
23
25
35
51
Таблица 3
Увеличение количества альтернариозных семян в зависимости от срока хранения хранения семян (годы ) три
1 ва доров ых альте альтерна- риозных
96
100 доровых
0
52
36
Харьковская 46 ! Безенчукская 139
1794343
Таблица 4
Действие протравителей на рост грибов рода Alternarla
Составитель З.Карамшук
Техред М.Моргентал Корректор М,Максимишинец
Редактор
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Заказ 377 Тираж . :. Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113О35, Москва, Ж 35, Раувекая наб.. 4/5
