Кормовая добавка для жвачных животных

 

Изобретение относится к кормопроизводству . Сущность: кормовая добавка для жвачных животных включает биологическиактивное вещество и наполнитель, в качестве биологически-активного вещества добавка содержит полиметионил-полилизин с мол.м. 440000-850000 при соотношении метионин-лизин 0,4-2,0 в количестве 0,1-1,0% и наполнитель-остальное. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК...«Ф

М (Зф 85 01418 (3 ) 01.02.85 (3 )Fr (7 ) Рон Пуленк Нютрисьон Анималь (Fr) (7 ) Антуан Пюигсервер, Юбер Гертнер и

Д ниель Берковиси (Fr) (5 ) Европейский патент М 0015668, кл А 23 К 1/16, 1980, Изобретение относится к кормопроизв дству.

Цель изобретения: повышение стабильн сти добавки при рН около 6 и выделение б ологически активного вещества при рН

2, Изобретение иллюстрируется следующ ми примерами, Пример 1. Получение добавки поли ериз.

N-ка рбоксиангидрид N-карбобензокси

L лизина полимеризуют в присутствии иниц атора (метилата натрия) в диоксане при т мпературе 20 С, Исчезновение мономера и реакционной среды позволяет следить эа е о полимеризацией. Полимеризация зак нчивается через 75 часов. Полученный и лимер имеет вид вязкого продукта.

Полимер обрабатывают уксусной кислот й, насыщенной бромистоводородной кисл той, в течение 30 мин.

Полученный осадок промывают этилов м спиртом и высушивают. После раствор ния в воде и диализа полученный поли L л зин выделяют из раствора путем лиофи„„Ы2„„1836029 АЗ водству. Сущность: кормовая добавка для жвачных животных включает биологическиактивное вещество и наполнитель, в качестве биологически-активного вещества добавка содержит полиметион ил-полилиэин с мол.м. 440000-850000 при соотношении метионин-лизин 0,4 — 2,0 в количестве

0,1-1,0 Я, и наполнитель — остальное. 2 табл. лизации, Молекулярный вес составляет порядка 290000 дальтон.

Дезаминирование поли L лизина позво- С.„ ляет проверить наличие свободных аминогрупп. После кислотного гидролиза анализ показывает один единственный пик, соответствующий наличию а-амино е-гидроксикапроновой кислоты.. ОО

N-карбоксиангидрид N-карбобензокси

L лизина получен путем барботирования безводного фосгена в суспензии N-карбобензокси L лизина в безводном тетрагидро- С фуране при температуре 45 С. После окончания реакции барботирование безвод- 1О ного азота позволяет удалить излишек фосгена, После испарения растворителя продукт растворяется в этиилацетате. Растворитель испаряется, а остаток забирается этилацетатом. Операция повторяется дважды. Nкарбоксиангидрид N-карбобензокси L лизина кристаллизируется в результате медленного добавления гексана в его раствор в этилацетате до соотношения 1-1 (по объему).

1836029

Полученные кристаллы промываются смесью гексана с этилацетатом (в пропорции 9 — 1 по объему). Кристаллы плавятся при

97ОС.

Пример 2. Поли-L-лизин, растворенный в пропорции 5 мг/см буферного фосз фата натрия (100 мМ) с рН 6,5, содержащего

150 MM хлористого натрия, выдерживают при температуре 4 С, При энергичном перемешивании и поддержании постоянного рН путем добавления щелочи натрия 0,1 N добавляют 1 моль N-карбоксиангидрида метионина на остаток лизина.

После выдерживания в течение ночи при температуре 4 С продукт диалиэируют водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируют.

В результате получают поли L метионил-поли-L-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0,55, а содержание остатков измененного лизина составля27%

Производительность фиксации составляет порядка BO .

N-карбоксиангидрид L-метионина имеет вид маслянистого продукта и получается в вышеописанных условиях для последующего получения N-карбоксиангидрида Nкарбобенэокси L-лизина.

Пример 3, Действуют как было описано в примере 2, но используют 3 моля

N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли L-метионил-поли L-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 1,90, а содержание остатков измененного лизина равно

49%.

Пример 4, Действуют как было описано в примере 3, но используют 5 молей

N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли-(=метионил-поли-L-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 3,40, а содержание остатков измененного лизина составляет 70%.

Пример 5, Поли-L-лизин растворяют при температуре 4 С в буферном растворе бикарбоната натрия (100 мМ) при рН 10,2, содержащем 150 мМ хлористого натрия. Добавляют 1 моль N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина. Дают температуре подняться до 20 С, а рН реакционной смеси регулируют до рН 3-4 в течение 10 мин. После охлаждения до 4 С продукт диалиэируют дистиллированной водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируется.

Получают поли-L-метионил-поли-1=лизин, в котором соотношение метионин-ли5

10 зин составляет 0,45, а содержание остатков измененного лизина составляет 45%.

Пример 6. Действуют как было описано в примере 5, но добавляют 1,2 моля

N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли-L-ìåòèoíèë-поли-! -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0,53, а содержание остатков измененного лизина составляет 50 .

Пример 7. Действуют как было описано в примере 5, но добавляют 3 раза по 1 молю N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли- -метиснил-поли-L-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 2,10, а содержание остатков измененного лизина составляет 66%.

Наличие лизина и метионина в пслиме20 рах может быть выявлено опытным путем в результате последовательного переваривания при помощи ферментов, имеющихся в пищеварительном тракте, например. пепсина, поджелудочного сока, кишечной аминопептидазы.

В табл. 1 приведены относительные количества лизина и метионина, высвобождающиеся в ходе переваривания.

Результаты таблицы показывают, что

30 примеры 4 и 7 не гарантируют достаточного расщепления "сополимера", В этих примерах цепь полилизина включает более 50 остатков модифицированного лизина (пример 4, где 70 звеньев лизина модифициро35 ваны и пример 7, где модифицированы 66% звеньев лизина).

Поэтому сополимеры, у которых максимально 50 структурных групп лизина в цепи полилизина замещены цепью

40 полиметионина, являются эффективными.

B зависимости от типа используемого полимера уровень наличия обеих аминокислот очень различен, Обычно продукты, полученные в резуль45 тате полимеризации при рН 6,5 и имеющие относительно высокое содержание метионина (пример 3), легко гидролизуются, тогда как продукты, полученные при рН 10,2 и отличающиеся высоким содержанием остатков измененного лизина (пример 7),менее доступны для протеолитических ферментов, Кроме того, продукты, полученные при рН 6,5 и имеющие высокое содержание остатков измененного лизина, 55 гидролизуются легче, чем продукты, полученные при рН 10,2 путем последовательных добавлений N-карбоксиангидрида метионина, Обычно удовлетворительно наличие обеспечивается в случае, когда соотноше1836029 ние метионин-лизин равно 2 или более предпочтительно около 1, причем это соот-! ношение может изменяться в зависимости

) от используемого метода получения полиметионилполилизина.

Питательная ценность полиметионилполилизинов, используемых в композициях по настоящему изобретению, была выявлена на примере крысы, получавшей питание с недостаточным количеством лизина и метионина. Например, использовали поли-1лизин и поли-L-метионил-поли-L-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляло порядка 1, а содержание остатков измененного лизина составляло 30 . Полученные результаты представлены в табл. 2.

Из вышеприведенной таблицы следует. что добавка в базовой режим лизина и метионина существенно увеличивает прирост животных и что прирост животных, получающих режим с добавкой поли-(=метионилполи-L-лизина, не очень отличается от прироста животных, режим питания которых дополнен свободными аминокислотами. Кроме того, добавление лизина в виде поли- -лизина оказывается более эффективным. чем добавление свободного лизина.

1 !

Полиметионил-полилизин по настоящему изобретению растворимы, в рубце, но обладают стойкостью к бактериальному разложению. Например, поли-L-метионилполи-L-лизин (0,5 г) может быть помещен в нейлоновые мешочки, размер ячеек которых составляет 300х300 микрон. Мешочки инкубируются в течение 48 часов в рубце овец с фистулами, Затем мешочки вынимаются и и ромываются. Количество остаточного активного вещества определяется соответствующим методом. Количества

L-лизина и L-метионина, оставшиеся. в нейлоновых мешочках, составляют соответственно 80 и 60 исходных количеств. Когда L-лизин и L-метионин принимаются в свободном виде, лишь малая часть этих аминокислот избегает микробной ферментации.

Таким образом, полиметионил-полилизин по настоящему изобретению представляет собой очень хорошие добавки в рацион питания жвачных животных.

На-.тоящее изобрегение касается композиций для кормления скота, содержащих достаточное Kîëèчество полиметиоt èë-полилизина.

5 Полиметионил-полилизиHû могут добавляться в готовые комбикорл э.

Они мокнут добавляться также в кормовые добавки. чаще всего вместе с другими веществами, например, витаминами и ми-.

10 неральными солями. Эти кормовые добавки могут либо добавляться в рацион, либо потребляться отдельно в чистом виде и составляют обычно от 5 до 20 кормового рациона.

15 - "Премиксы"., используемые для приготовления кормовых добавок или кормов, содержат обычно от 1 до 20% полиметионил-полилизина.

Сами "премиксы" получаются обычно из

20 концентратов, содержащих от 99,9 до 20 полиметионил-полилизина, к которому добавляют, например, пищевые красители, амортизаторы, диспергирующие вещества и пищевые наполнители.

25 Концентраты и премиксы имеют обычно порошкообразную форму. Кормовые добавки и комбикорма могут быть либо в виде порошка, либо в виде гранул, полученных обычными способами, 30 Пример 8. К 1000 г фуража равномерно вводят диспергированием 20 г порошкообраэного кормового концентрата, содержащего 10% полиметионил-полилиэина, в котором соотношение метионин-лизин

35 составляет около 1.

Получают корм, который непосредственно усваивается животными, Формула изобретения

40 Кормовая добавка для жвачных животных, включающая биологически активное вещество и наполнитель, о т л и ч а ю щ а яс я тем, что, с целью повышения стабильности добавки при рН около 6 и выделении

45 биологически активного вещества при рН

2,5, в качестве биологически активного вещества добавка содержит полиметионилполилизин с мол.м, 440000 — 850000 при соотношении метионил;лизин 0,4 — 2,0 в ко50 личестве 0,1 — 1,0 и наполнитель — остальное.

1836029,Таблица 1

Таблица 2

Составитель Г.Мазаева

Техред M. Ìîðãåíòàë Корректор С,Патрушева Редактор О,Стенина

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 2988 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35, Раушская наб., 4/5