Способ лечения и профилактики аллергических заболеваний

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аппергологии Цепь - устранение побочных эффектов, сокращение сроков лечения, возможность применения при поливалентной аллергии Сущность изобретения принимают мипровит - продукт из высшего мицелиапьного гриба Fusanum culmorum штамма ВСБ-927 по 0.75 г 3 раза в день в течение 4 недель в качестве добавки к питанию 2 табл.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

IC ПАТЕНТУ

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 4946800/14 (22) 20.0691 (46) 15.1093 Бюл. ¹ 37 — 38 (71) Московская медицинская академия им И М.Сеченова (72) Логина Н Ю, Морозова Г Р, Брусина ЛИ; Бабахин АА.; Гущин И С. Чабан Л М; Серова ТА, Ершов

И В.; Бапмасов СП; Башкатова Л П. (73) Лагина Надежда юрьевна (54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ

<191 БК пц 2000808 С1 (51) 84

АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аппергологии. Цепь — устранение побочных эффектов, сокращение сроков лечения, возможность применения при попивапентной аллергии Сущность изобретения принимают мипровит — продукт из высшего мицепиапьного гриба

Iusarium culmorum штамма ВСБ-927 по 0,75 г 3 раза в день в течение 4 недель в качестве добавки к питанию. 2 табл

2000808

Марганец

Цинк

Медь

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и представляет собой новый способ лечения и профилактики аллергических заболеваний с помощью Мипровита. понижающего или стабилизирующего Jg E антителообраэование.

Известен способ лечения anneprweских заболеваний с помощью дробного введения аллергенов, полученных иэ различных биологических субстатов: пищевых продуктов, эпидермиса животных и человека, растений и микроорганизмов и проч. Механизм действия этого способа, называемого специфической иммунотерапией (СИТ), основан на достижении эффекта специфической гипосенсибилизации в ответ на введение конкретных аллергенов и преимущественной продукции блокирующих антител класса JgG к ним, Он выбран в качестве прототипа, он же базовый обьект. Однако

СИТ имеет ряд недостатков: сроки лечения составляют 4-6 мес с необходимостью повторных курсов, применение ее ограничено рядом медицинских противопоказаний, а также тем, что в некоторых случаях введение коммерческих аллергенов сопровождается обострением процесса, не позволяющим провести полноценный курс лечения. Одним из основных недостатков

СИТ так же является ее низкая эффективность при лечении поливалентной аллергии. так как при этом оптимальный подбор и введение всех аллергенов для достижения полной гипосенсибилизации практически невозможен. Кроме этого СИТ не применяется для профилактики аллергических заболеваний.

Целью изобретения является устранение побочных эффектов, сокращение сроков лечения, возможность применения при поливалентной аллергии и для профилактики аллергических заболеваний

Цель достигается тем. что назначение

Мипровита из высшего мицелиального гриба Fusarilum culmorum штамма ВСБ-927 в качестве профилактической оздоровительной добавки к питанию, ведет к снижению активности аллергического процесса путем понижения или стабилизации JgF антителообразования у больных аллергическими заболеваниями

Мипровит это экологически чистый природный продукт. представляющий собой грибницу или мицелий высшего гриба

Fusarium culmorum штамма ВСБ-927, полученный путем аэр<.бного жидкофазного культивирования мицелиального гриба в асептических условиях с использованием естествpííогo сырья Måëýññû сAå лович5

55 ной, тростниковой или молочной сыворотки.

Мипровит разрешен Минздравом СССР для пищевого использования и для опробации в качестве лечебно-профилактического питания. Медико-биологическая оценка безвредности Мипровита проведена

Институтом питания АМН СССР

Химический состав Мипровита. к абсолютно сухому веществу

Влажность. не более 7

Сырой протеин, не менее 40

Углеводы 20

Липиды, не более 6

Минеральные вещества 9

Белок Мипровита содержит следующие необходимые для организма аминокислоты, к абсолютному сухому веществу;

Лизин 3,0

Метионин 0,75

Триптофан 0.4

Валин 1.8

Аргинин 2.2

Гистидин 1,0

Треонин 1,85

Глутаминовая к-та 4,8

Фенилаланин 1,4

Лей цин 2,2

Изолейцин 1,35

Аспарагиновая к-та 3,2

Серин 1,38

Пролин 1,0

Глицин 1,75

Аланин 2,6

Цистин 0,4

Тирозин 1,85

Содержание витаминов в Мипровите составляет,мкгlг:

В > - {тиамин) 12,8

В (рибофлавин) 56,8

В iz (цианокабаломин) 8,5

Пантотеновая к-та 61,0

В4 {холин) следы

-PP(о я -Ta) 380

Вб (пиридоксин) 21,8

Фолиевая к-та 18,0

Биотин 2,0

Мипровит имеет следующий состав макро- и микроэлементов:

Макроэлементы, мг/г на абс, сухое вещество:

Фосфор 15,0

Кальций 4.4

Калий 17,37

Натрий 1 74

Микроэлементы, мкгlг

Железо 64.0 (в легко усвояемой форме)

39,0

18.0

100

2000808

10

Стронции 13,0

Молибден 12,0

Кобальт 2,0

Хром 8,0

Никель 4.0

Свинец 2,0

Кадмий 0.2, Липиднзя фракция Мипровита на 70 состоит из ненасыщенных жирных кислот, 50 из которых составляет линолевая кислота. По содержанию и характеру жирных кислот липиды Мипровита близки к облепиховому и подсолнечному маслам, Абсолютная безвредность Мипровита позволяла рекомендовать его в качестве добавки к питанию в дозах, составляющих 1/3 суточного белкового рациона. Противоаллергический эффект оздоровительной пищевой добавки мипровита, как было установлено эмпирическим путем, достигается его 3-кратным приемом по 0,75 г ежедневно в течение 4 недель. Прием меньших доз не оказывало никакого клинического действия и не приводило к изменению JgE антителообразования. Увеличение дозы существенно не влияло на эффективность противоаллергического лечения и его продолжительность, следовательно является нерациональным.

Таким образом. схема противорецидивного лечения и профилактики аллергических заболеваний с помощь1о Мипровита представляет собой ежедневный 3-кратный его прием по 0,75 г в течение 4 недель.

Мипровит выдается больным в виде сухой измельченной биомассы по 20 г в пакетах из металлизировзннои пленки с ламинированным покрытием и принимается ежедневно по 0,75 с (1 чайная ложка) 3 раза в день в течение 4 недель в виде добавки к питанию.

Учитывая вкусовые качества предлагаемой пищевой добавки, обладающей характерным привкусом и ззг>асом грибов, одним иэ более целесообразных способов применения биомассы является добавление в каши, супы, соусы предвари1ельно измелb II нного гриба. Некоторые лица лучше переносят

Мипровит при добавлении его в кисели, фруктовые пюре или варенье.

П р и л е р 1. Больная Н., 38 лет, страдает поллинозом, риíîv.оньюнктивальнblй синдром, аллергией к элзковым травам, пищевая перекрестная аллvðrия. Больна с 1986 года, получила трздици >ниylo противоаллергическую терапию с недостаточным клиническим эффе«!otn Г.опьнзя принимала

Мипровит в июн 1 !90 года в виде сухой измельченной биот1 :-.. ll в течение 4 недель по 0,75 г 3 раза в;1I.».. r «з lec1t«. пищевой добавки K K3tltзм,".. нк>рл l1lll1 соусзм.

После приема Мипровита было отмечено исчезновение пищевой аллергии и снижение клинических проявлений риноконьюнктивзльного синдрома в период цветения злаковых трав, При этом установлено снижение уровня общего 39Р с 355 МЕ/мл до 65

MEIìë. Уровень JgF в сыворотке крови or>ределяли с помощью иммуноферментных наборов Phadezym IgE PRIST (Швеция).

Пример 2. Больной Л„41 года, страдает поллинозом, риноконыонктивальнь1й синдром, аллергия к пыльце сорных трав с

1982 года. Несмотря на проводимую традиционную терапию: СИТ, введение гистоглобулина, медикаментозную терапию, заболевание прогрессировало, и в 1988 году, присоединился астматический синдром.

Проведение СИТ зллергенами сорных трав в 1989 году было прервано из-за обострения аллергического процесса. По этой же причине не удалось провести курс лечения гистоглобулином. В течение 8 лет был вынужден постоянно принимать различные антигистаминные препараты в период цветения трав.

В и1оле 1990 г. за неделю до обычного обострения поллиноза, обусловленного началом сезона цветения сорных траз, больнойй начал принимать М и и ровит l>o описанной схеме. После проведения 4-ндельно о курса в период цветения сорных трав отмечено отсутствие приступов удушья, риноконыанкт11вальный синдротл проявлялся в гленьшей степени и был менее продол.кительным в сравнении с обычным течением болезни. При этом практически отсутствовала необходимость приема антигистзминных препаратов. Уровень JgF y больного (100 МЕ/мл) после окончания цт1етения стэрных трав был в пределах нормы.

Вероятно некоторые клинические проявления поллинозз в первую неделю начз >а цветения трав связаны с тем что противсрецидивное лечение было начато всего лишь эа неделю до обычного -.бострения болезни. Рекомендовано озобновить

«óðñ проф ллактичсского приема Мипровитз зз 3 недели до на,ала се-..онз цветения сорнь1х трав.

П р и M е р 3. Больная Д., 34 го>з, страдает г оллинозом, риноконьюн«тивзльный синдром, аллергия к пыльцt. сорных трав с 1984 года. На учете у зллгртолога находится с 1986 года. Почти пес>оянно принимает внтигистаминные препараты.

Два курса гистоглобулина прошли без эффекта. Не бол ьш ой пол ожител ь н ы и . 11 фе кт был отмече-1 в 1986 и 1987 гг. пос I" rt pr>pt дЕНИя СИТ С аЛЛЕрГЕНаМИ ИЗ СОр. ll трля, СИТ в 1988 и 1989 гг. без клиничес ; -1 улу Iв1ения. П;>сле профилактического I »I зче2000808 ния Мипровита в июне 1990 г„за месяц до предлагаемого начала сезона цветения сорных трав, отмечен положительный клинический эффект. У больной не наблюдалось обычного обострения заболевания и только в конце августа в течение нескольких дней были незначительные проявления ринита.

Антигистаминных препаратов не принимала. Уровень JgE, определяемый в фазе ремиссии до назначения Мипровита, после курса профилактики и после окончания сезона цветения сорных трав не превышал нормы и даже имел тенденцию к снижению (64; 43; 27 МЕ/мл), что свидетельствует о стабилизации Jg E антителообразования.

Мипровит в качестве противорецидивного лечения был применен в группе больных поллиноэом. С этой целью было отобрано 13 человек, страдающих поллиноэом, риноконъюнктивальный синдром с постоянно рецидивирующим течением не менее 5 лет, с отсутствием эффекта на специфическую иммунотерапию и на лечение гистоглобулином. Обычно в сезон цветения им проводилась постоянно симптоматическая лекарственная терапия: антигистаминные препараты, интал, зодитен, перитол и

AP

Мипровит был назначен по 0,75 г 3 раза в день во время еды в течение 4 недель.

Лицам с аллергией к пыльце деревьев и злаковых трав лечение проводили в апрелемае, У лиц с аллергией к сорным травам

Мипровит назначался в июне. У лиц с поливалентной аллергией — к пыльце деревьев. злаковых и сорных трав после первого курса лечения делали 2-недельный перерыв и повторный курс лечения проводился перед началом сезона цветения сорных трав.

Таким образом все больные начинали принимать Мипровит в состоянии ремиссии за 2 недели до предполагаемого сезонного о, острения заболевания, Иммунологические исследования проводились в динамике: перед началом противорецидивного лечения. в период цветения растений и после окончания сезона цветения. B сыворотке крови исследовали уровень иммуноглобулинов класса А. М, G no методу Манчини и уровень JgE с помощью иммуноферментных наборов. Соответственно оценивался клинический эффект проводимого лечения, У всех обследованных больных поллиноэом было отмечено улучшение клинической симптомии, которая выражалась в укорочении периода обострения заболевания, более ner oro его течения без симптомов удушья и более позднего его на <ала, Ни в одном случае уровень общего JgE в сыно30 диционного противоаллергического лече35

45

5

25 ротках крови..этих больных не превышаг нормы в динамике статистически достоверно не изменялся (см. табл.1).

Уровень иммуноглобулинов у больных, получавших Мипровит (1 группа) и антигистами н ные препараты (2 груп па).

В табл,1 также приведены результаты исследования группы сравнения, в которую вошли больные (10 человек) поллинозом в начальной стадии обострения, принимавшие антигистаминные препараты s качестве симптоматической терапии. При сравнении этих групп следует отметить. что у больных, получавших антигистаминные препараты, уровень JgE в отличие от больных, получивших Мипровит был выше нормы. Особый интерес представляет статистически достоверное снижение уровня JgE в группе лиц, принимавших антигистаминные препараты, в то время как в группе лиц, принимавших

Мипровит, этого не наблюдалось. Последнее свидетельствует в пользу применения

Мипровита больными аллергией, заключается в том. что блокирующие антитела относятся в JgG классу, Как видно из представленных материалов, у больных поллиноэом с упорно рецидивирующим.течением заболевания и недостаточным клиническим эффектом трания: СИТ, гистоглобулин и другая медикаментозная терапия. Применение

Мипровита в качестве противорецидивирующего лечения сопровождалось достаточно выраженным положительным клиническим эффектом и снижением или стабилизацией

JgE антителообразования. При этом следует отметить, что нормальный уровень JgE сохранялся и после отмены препарата в период всего цветения. Следовательно имелись основания предположить патогенетический механизм действия Мипровита на течение аллергического процесса. Это и было подтверждено экспериментальными исследованиями.

Модулирующие свойства Мипровита изучали на модели сенсибилиэации мышей (СВА х С57В(/6) F> модельным аллергеном овальбумином (ОА), вызывающим повышенный синтез антител класса Е. Животным дважды с интервалом 21 д внутрибрюшинно (в/б) вводили 10 мкг ОА. Мипровит вводили в/б пятикратно с интервалом в сутки в дозах

30, 300 и 3000 мкг в одном случае до первичной иммунизации, а во втором — до вторичной иммунизации ОА, Последняя инъекция

Мипровита осуществлялась в день иммунизации. Другой вариант опытов состоял из однократного e/б введения Мипровита в тех же дозах одновременно как с первич2000808

hoL1. так L1 со вторичной иммунизацией, В каждую группу опытов брали по 10 животных.

Для определения уровней JgE L1 JgG антител к ОА метода » пассивной кожной 5 анафилаксии (ПКА) на морских свинках и иммуноферментным анализом (ИФА) соответственно, на 10-й день первичной и в первую и третью недели вторичной иммунизации у мышей забирали кровь из 10 ретроорбитального пространства, Полученные индивидуальные образцы сывороток испольэовали е ИФА и пулы сывороток от каждой группы в ПКА, ПКА и ИФА с полученными сыворотками проводили по стандарт- 15 ным методикам, Способ иллюстрируется фиг. 1-5.

Пятикратное введение Мипровита в дозах 3000 и 300 мкг до первичной иммунизации полностью тормозило развитие 20 вторичного JgE антителообразования (см, фиг,1). Мипровит е дозе 30 мкг не оказывал влияния на уровень JgE ответа к ОА, который был в этом случае таким же как в группе контрольных животных, которым вместо 25

Мипровита вводили физиологический раствор. Такая же манипуляция (патикратное введение Мипровита), проведенная до вторичной иммунизации ОА, показала значимое снижение уровня JgE антител к ОА при 30 дозах 3000 и 300 мкг через 1 неделю после вторичной иммунизации (см. фиг,2). При дозе 30 мкг так же не отмечено отличия в. уровнях JgE по сравнени1о с контролем, Что касается JgG антителообразованил к ОА, то 35 пятикратное введение мипровита до вторичной иммунизации не оказывало ео всеx дозах статистически достоверного его снижения по сраенени1о с контролем (cM. фиг.3).

При однократном введении Мипроеита 40 одновременно с первичной и лмунизациеи наблюдалось торможение вторичного JgE ответа к ОА только при максимальной дозе

3000 мкг (см. фиг,4), Особснно следует отметить, что введе- 45 ние Мипровита в дозе 3000 мкг одновременно с вторичной иммунизацией приводило к статически значимомуусилению JgG ответа к ОА (см, фиг.5), который приводит к блокированию взаимодействия этого аллергена с 50

JgE антителами и 1аким образом предотвращает развитие аллергических процессов.

В этих же опытах в тесте ПКА изучали сенсибилизиру1ощие свойства Мипровита, т.е. воэможность индуцироеания JgE анти- 55 тел к самому себе. При разведении от 1;4 до

1:256 сывороток зксперик1ентальных мь шей, получивши е! б однократно или пятикратно Мипронл1 fi 1озлх ЗО, 300 и 3000 мкг до первичной ил11 i.iоричн iii 11 ..1унизации

ОА, ни в коем случае но было получено положительной реакции на Мипровит у морск»х свинок. Это свидетельствует об отсутствии аллергизирующих свойств у

Мипроеита, даже при многократном его введении, Таким образом на данной экспериментальной модели была выявлена способность

Мипровита при введении до или одновременно с вторичной иммунизацией тормозить вторичный Jg E ответ к 0А, не влияя при этом или даже частично усиливая JgG антителообраэование и не стимулируя JgE антител к самому себе.

Стабилизирующий эффект Мипроеита на JgE антителообраэование был вылвлен е группе r èö часто длительно болеющих ОР3, получивших профилактическую оздоровительную добавку к питанию с целью повыLU0Hëÿ естественной реэистиености организма. Мипровит назначался по традиционной схеме: flo 0,75 г 3 раза в день в течение 4 недель, Для сравн=íèÿ в табл,,2 приведены данные по уровню JgE в сыворотке крови больных. получивших витаминотерлпию.

Как видно из табл.2 у лиц, принимавших

Мипровит, по срзвнению с контрольной группой отмечалось статистически достоверное снижение уровня JgE до нормы.

Особенно заметное снижение уровня .1г;Е до нормы (около 100 ME/мл) после приема

Мипровита наблюдалось у больных с сопутству1ощими аллергическими заболееан11лML1.

Приведенные экспериментальные и клинические данные свидетельствуют об эффективности использования Мипроеита с целью снижения активности ал;«.pfii еско1о проц оса.

Считают, что в основе пров воаллер1ичес кого действия Мипроеита лелiviT е о с по собность снижать или стабилизирога1ь JgE а1 тителообразоеание, не влияя при этом на продукцию антител классов А.М,6, о 1е ii ссидетельствует снижение вторичного JEE у больных поллинозом в период цветения.

Полага1от, что противоаллергич .ско» действие Мипроеита обусловлено инг1б.1ци и

Jg E антителообразования, так как и L: .ñòii i. что период распада JgE сос1авляет e,олг 2 сут. Был получен пролонгироеанны i эффс«.< у больных поллинозом, который сох; Онялс1 в течение сезона цветения и по=ле 0 мен.,i

Мипроеита, Таким образом можно .:-. дгifi ложите, что Мипрогит воэдейст..уе типспецифическую регуляцию 1пЕ,-; т;

Не были обнаруженьi данные о .: д стеии веществ биологической f pL:, 2000808

JgE антителообразование. Данный феномен описан при проведении CVIT у больных аллергическими заболеваниями с использованием различных коммерческих препаратов аллергенбв. Однако при СИТ гипосенсибилизации строго специфичен и возникает в ответ на введение определенного антигена. В случае поливалентной аллергии далеко не всегда удается провести

"исчерпывающую" диагностику иэ-эа широты спектра аллергенов, B процессе лечения возникают дополнительные проблемы, Оптимальная гипосенсибилизация затруднена, во-первых, из-эа количественных ограничений введения аллергенов с лечебной целью (не более 10 аллергенов на курс), с необходимостью повторных курсов, вовторых, эффект лечения существенно зависит от степени чистоты и антигенной активности каждого аллергена. При отсутствии или недостаточной активности одного из многих аллергенов. СИТ практически неэффективна.

В этом отношении Мипровит, обладающий способностью снижать или стабилизировать JgE антителообраэование одновременно к всему спектру аллергенов, имеет большое преимущество.

Кроме того йзвестны ряд побочных эффектов СИТ, в первую очередь общие и местные аллергические реакции на введение аллергенов, препятствующие проведению полноценного курса лечения, индукция аллергического процесса. обусловленная недостаточной степенью очистки коммерческих аллергенов, что сопряжено иногда с ухудшением течения заболевания. Известны также случаи активации аутоиммунных процессов, которые приводили к развитию тяжелых заболеваний.

Мипровит, как показали эксперимен.— тальные и клинические исследования, практически не обладает сенсибилизирующей активностью, в чем также имеет преимущество в сравнении с коммерческими аллергенами.

Специфическая иммунотерапия применяется только для лечения аллергических заболеваний, Экспериментальные данные о воздействии Мипровита при его введении до первичной или до вторичной иммунизации ОА на вторичный иммунный ответ, избирательный стабилизирующий эффект воздействия на JgE антителообразование в случае назначения до развития аллергического процесса, отсутствие сенсибилиэирующих свойств и воздействия на антителообразование других классов иммуноглобулинов, абсолютная нетоксичность, дают предпосылки к возможности использования его в качестве профилактического . средства, например для профилактики профессиональных аллергозов.

Таким образом в сравнении с наиболее распространенным традиционным методом иммунотерапии с использованием дробных введений коммерческих аллергенов применение данного средства имеет следующие преимущества: противоаллергическое действие Мипровита достигается путем перорального приема в течение 3 — 4 нед;

СИТ проводят 4-6 мес; отсутствие обострения заболеваний и других побочных реакций. более широкие возможности применения при поливалентной аллергии по сравнению с СИТ, возможность применения для профилактики аллергических заболеваний. (56) Адо А.Д. Частная аллергология, M.: 1976.

Г.Р,Морозова, Н.B.Ñàôîíîâà, T.Â.Êèíàревская, Д.Н.Спицина, М.А.Макарова и

В.П.Зобнина, Авт, свидетельство М

1272695, выд. 09.08.84 г.

Ovary Z., Caiarae S., KoJima S. — 1пс, Arch.

Allergy Appl. Immunol., 1975, 48, р. 16 — 21.

И.С.Гущин и др. "Патологическая физиологическая и экспериментальная терапия", 1986. 4, с. 18 — 23.

Wagner G., Klinge H., Lubach O.-, Allergologie. 1986, 9, N 9, р, 458-460.

2000808

Таблица !

Таблица 2

Изменение уровня JgE в сыворотке лиц, часто и длительно болеющих ОР3, после приема курса Мипровита

C 10дн

f 10мл! Ой 8/б

У= 0,5 лм г1д .гВди Ф g9

f Q yg О/г 8/6 Яни иммуниэацт ф /7, / Y- О,д ИЛ

Ф ормула избретения

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИческих зАБОлевАний путем введения веществ биологического происхождения, отличающийся тем, что, с целью устранения побочных эффектов, сокращения сроков (0& лечения, возможности применения при поливалентной аллергии, в качестве биологически активного вещества вводят мицелий высшего гриба Fusarium culmorum штамма ВСБ - 927 по 0,75 г 3 раза в день в виде добавки к питанию в течение четырех недель.

2000808

Г ! 092Т

Фиг.2

450

07

1 оун

Юмкг OR д/б

Y= 0,5 мл

2!äÈ гвую 2дн

tio iщду Дни иммунизоиии

М= О,фмл 21 дн 2Вун 42дн !

ОмкгОВ6)6 дно иммуюлн ии

V--05 мл

Фиг. 5

2000808

Дозы Р5-б9

Фиг. 5

Составитель Н.Докшина

Редактор Г.Мельникова Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор М.Самборская

Заказ 3097 Тираж Подписное

НПО "Паиск" Роспатента

113035, Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

/аур —

t 10м(((ОЯ((/6

V-- 0,5мл

21дн 339ж pg ga 10мкг9 Ву Дни имму иза цццц

V ф о*

ДИ «((и н((g>yy

f O,÷÷4/ /IХ