Способ получения биостимулятора

 

Использование: кормопроизводство. Сущность: для ускорения технологического процесса и повышения качества целевого продукта в способе получения биостимулятора путем гомогенизации тимуса в химическом растворе, отделения осадка, обработки надосадочной жидкости с последующим отделением осадка в качестве химического раствора используют 0.85 - 0,9%-ный раствор хлорида натрия , гомогенизацию проводят в течение 14 - 18 ч при температуре 2 - 10°С. а обработку надосадочной жидкости проводят при температуре 78 - 82° С. 1 табл, 1 ил.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 5015616/15 (22) 11.1 2.91 (46) 15.12.9Э Бюл. Na 45-46 (76) Зеленков Валерий Николаевич (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОСТИМУЛЯТОРА (57) Использование: кормопроизводство, Сущность: для ускорения технологического процесса и повышения качества целевого продукта в способе получения биостимулятора путем гомогенизации тимуса (19) RU (и) 2004159 CI (51) 5 А23 К1 16 в химическом растворе, отделения осадка, обработки надосадочной жидкости с последующим отделением осадка в качестве химического раствора используют 0,85 — 0,996-ный раствор хлорида натрия, гомогенизацию проводят в течение 14 — 18 ч при температуре 2 — 10 С, а обработку надосадочной жидкости проводят при температуре 78—

82 C,1 табл,1 ил.

2004159

Предлагаемое изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности — к кормопроиэводству для стимуляции прироста живой массы.

Известен способ получения биостимулятора путем гомогенизации измельченной железы тимуса в химическом растворе, отделения осадка, обработки надосадочной жидкости с последующим отделением осадка.

Однако, известный способ получения биостимулятора длителен, качество целевого продукта невысокое.

Цель предлагемого изобретения — ускорение технологического процесса, повышение качества целевого продукта, увеличение сохранности поголовья.

Предложенный способ получения биостимулятора прост, промышленно применим.

В научно-технической и патентной лите ратуре не известны технические решения, содержащие признаки аналогично предлагаемым, т.е, предложение соответствует критериям изобретения новизна" и "изобретательский уровень", Пример 1. 0,6 кг замороженного тимуса телят (-40 С) измельчают на мясорубке. К полученному фаршу добавляют 3 л

0,85% раствора NaCI, Экстракцию биоактивных веществ проводят в течение 14 ч при температуре 2 С при периодическом перемешивании.

По окончании экстракции субстрат отфильтровывают от жмыха через капроновое сито. Фильтрат подвергают термообработке на водяной бане при температуре 80 С в течение 15 мин. Раствор охлаждают до 24 С и отделяют осадок фильтрацией через

6-слойную марлю. Полученный раствор доводят до объема 6 л 0 9 раствором NaCI.

Определение концентрации полипептидов проводят.при 275 нм спектрофотометрически. В результате конечный препарат содержит 12 мг продукта в 1 мл раствора.

Выход препарата составляет 120000 мг (120 г) из 1 кг тимуса.

Пример 2. 0,4 кг замороженного тимуса телят (-40 С) измельчают на мясорубке. К полученному фаршу добавляют 2 л

0,97 раствора NaCI. Автолиз субстрата проводят в течение 18 ч при температуре 10 С при периодическом перемешивании. По окончании экстракции отделяют жмых от раствора фильтрацией через капроновое сито. Фильтрат подвергают термообработке при 80 С на водяной бане в течение 10 мин. Раствор охлаждают. Осадок отфильтровывают через 6-слойную марлю.

Полученный раствор доводят до объема

4 л 0.9 раствором NaCI. В результате конечный раствор содержит 11 мг продукта в

1 мл. Выход биоактивных веществ полипептидной природы составляет 110000 мг (110 мг) из 1 кг тимуса, Пример 3, 2 кг замороженного тимуса телят (-40 С) измельчают на мясорубке, К полученному фаршу добавляют 10 л 0,9 раствора NaCI. Автолиз субстрата проводят при периодическом перемешивании при температуре 2-6 С. По окончании экстракции отделяют жмых от раствора фильтрацией через капроновое сито. Фильтрат подвергают термообработке на водяной бане при 80 С в течение 10 мин, Раствор охлаждают до 6 С. Осадок фильтруют через

6-слойную марлю. Отфильтрованный раствор доводят до объема 20 л 0,9 раствором

NaCI. В результате конечный раствор содержит 12 мг продукта в 1 мл. Выход биоактивных веществ полипептидной природы составляет 120000 мг (120 г) из 1 кг тимуса.

Растворы полипептидов, полученные в соответствии с примерами 1 — 3, стерилизуют с использованием стандартного фильтрационного оборудования, Испытания полученных образцов на токсичность и пирогенность по стандартным методикам на животных показали безвредность и апирогенность полученных предложенным способом препаратов, Для проверки полученных образцов на количественное содержание в них пептидов различных молекулярных весов проведен хроматографический анализ препаратов в геле Сефадекса à — 50 с измерением оптической плотности фракций препарата при 260 нм, Для сравнения в тех же условиях был испытан коммерческий препарат Тималин (ВФС-42 — 1571 — 85) производства Мясоконсервного комбината "Новосибирский", Хроматографические профили препаратов приведены на чертеже, на котором обозначено: 0 — хроматограмма препарата

"Тимарис"; 1,2,3 — хроматограммы препарата "Тимарис", полученного по предложенному способу.

Как видно иэ чертежа препарат Тимарис, полученный предложенным способом, существенно отличается от препарата Тималин (прототип) своей гомогенностью и отсутствием высокомолекулярных фракций с м.в.

60000 дальтон. В препарате Тимарис содержится до 99,5о полипептидов с м.в, меньше

12000 дальтон, а в прототипе только.80 .

Как видно из чертежа способ позволяет получать препараты полипептидной приро2004159 ды с хорошей воспроизводимостью по содержанию пептидов.

По своим характеристикам препарат

Тимарис близок к пептидным препаратам под названием Т-активины.

Изучение биологической активности полипептидного препарата Тимарис проведено в реакции "активного" розеткообразования /аŠ— POK/ обработанных трипсином тимоцитов морской свинки с эритроцитами кролика по стандарту определения биоактивности для тималина. (См. В Ф С 42-1571 — 85 Тималин).

Данные испытаний приведены в таблице.

В соответствии с ВФС 42 — 1571 — 85 препарат считают биологически активным, если при снижении среднеарифметического числа POK при воздействии трипсина по сравнению с нормой препарат восстанавливает количество POK не менее чем íà 40% по сравнению с контролем.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОСТИМУЛЯТОРА путем измельчения исходного сырья, фильтрации, термообработки, отличающийся тем, что в качестве исходного сырья используют ткань железы - тимуса, измельчение ведут s присутствии 0,85 Я,-ного расКак видно из таблицы препараты Тимарис, полученные по предлагаемому способу, являются биоактивными по единому критерию с прототипом.

5 Таким образом, предложенный способ по сравнению с прототипом менее трудоемок, исключает стадии использования

Л ВЖ, сокращает время реализации, отличается простотой, содержит меньшее количе10 ство операций.

Наряду с этим препарат Тимарис не уступает по основным показателям прототипу (биоактивность, токсичность, пирогенность), превосходя Тималин по достигаемо15 му качеству очистки.

Препарат Тимарис, полученный предложенным способом, может использоваться в ветеринарной практике как иммуномодулятор и биостимулятор.

20 (56) Авторское свидетельство СССР

N 1695869, кл. А 23 К 1/00, 1991. твора хлористого натрия, перед фильтрацией измельченного сырья проводят экстракцию биоактивных веществ в течение 14 - 18 ч при 2 - 10С, причем термообработку фильтрата ведут при 80 С в течение 10 - 15 мин, затем его охлаждают, дополнительно фильтруют и разбавляют раствором хлористого натрия.

2004159

О оггт мчес р р ллотмрст

Составитель В. Зеленков

Редактор H. Семенова Техред М,Моргентал Корректор М. Ткач

Тираж Подписное

НПО "Поиск" Роспатента

113035, Москва, Ж-35, Рауаская наб., 4/5

Заказ 3358

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород. ул.Гагарина, 101