Вещество, инициирующее образование центров кристаллизации, и способ получения инициатора образования центров кристаллизации льда

 

Изобретение относится к области пищевой промышленности. В качестве инициатора образования центров кристаллизации льда используют экстракт из ягод или листьев облепихи. Экстрагирование проводят водным раствором пектина, моно-, олиго- и/или полисахарида. Использование изобретения позволит повысить качество замороженных пищевых продуктов. 2 с. и 5 з.п.ф-лы, 1 ил., 3 табл.

Предметом изобретения является вещество, инициирующее образование центров кристаллизации льда, и способ его получения.

Известно, что продукт может быть более легко заморожен в присутствии инициатора образования центров кристаллизации льда, то есть, при более высокой температуре, чем при спонтанном замораживании. Действительно, инициатором образования центров кристаллизации льда способствуют образованию кристаллов льда при более высокой температуре, чем та, при которой кристаллы образуются в отсутствие этих агентов. Таким образом, до последнего времени такие вещества применялись при замораживании продуктов, в частности, пищевых продуктов, благодаря чему удавалось снизить затраты энергии, необходимой для замораживания этих продуктов (EP A1 0424771).

Также известно, что инициаторы образования центров кристаллизации льда могут увеличить размеры кристаллов льда при замораживании некоторых продуктов (Ryder, J.M., 1987, Thesis, p. 155, Rhode Island University). Действительно, кристаллы льда, в продуктах, замороженных в присутствии инициаторов образования центров кристаллизации, по размерам превышают кристаллы, полученные при замораживании этих продуктов обычным способом. Более того, эти большие кристаллы льда позволяют влиять на консистенцию замороженных продуктов, модифицируя ее. Эта модификация может быть стабилизирована путем лиофилизации с последующим нагреванием замороженного продукта. Таким образом, вещества, образующие центры кристаллизации льда, до последнего времени применялись для замораживания продуктов, в особенности, пищевых продуктов, для того, чтобы получить наиболее полезную консистенцию конечного продукта (Agric. Biol. Chem., 50 (1). 169 - 175, 1986).

Большинство биологических соединений, инициирующих образование центров кристаллизации льда, были получены из микроорганизмов или насекомых (EP 0424771 A1). Однако, может быть очень полезным выделение инициаторов центров льдообразования из растений, особенно, из съедобных растений, с целью применения этих веществ для замораживания, структурирования и криоконцентрирования продуктов (как, например, пищевых продуктов).

Задачей настоящего изобретения является удовлетворение этих потребностей.

Таким образом, согласно настоящему изобретению, вещество, инициирущее образование центров кристаллизации льда, экстрагируют из облепихи (Hippophae). Оно может быть в виде агрегата, содержащего белковую и липидную части. Более того, облепиха может быть, в частности, Hippophae rhamnoides, Hippophae salicifolia, Hippophae tibetana или Hippophae neurocarpa.

Все растения, которые относятся к роду Hippophae, являются облепихой. Этот кустарник широко распространен в Европе и Азии и очень удобен для получения многочисленных оранжевых ягод. Таким образом, облепиха является источником, богатым веществом, инициирующим образование кристаллов льда.

В описании, следующем далее, термины "агент" или "затравочный агент" используются в значении "инициатор образования центров кристаллизации льда".

Согласно настоящему изобретению, в способе получения вещества, образующего центры кристаллизации льда, используют экстракт из ягод облепихи или листьев, содержащих вышеназванное вещество.

Предпочтительнее всего использовать спелые ягоды облепихи (имеются в виде ягоды, которые уже созрели до приобретения ими оранжевого цвета), и, особенно, ягоды с содержанием воды от 80 до 90%. Ягоды перемалывают или раздавливают под прессом (или центрифугированием) и затем неочищенный сок используют в качестве экстракта.

Поскольку ткани ягод и, в особенности, их наружная оболочка содержат большое количество затравочного агента, возможна и прямая экстракция ягод экстрагирующим раствором, содержащим пектин, моно-, олиго- и/или полисахариды, и предпочтительнее, по меньшей мере, одним из этих растворов, содержащих (в воде) от 0,0001 до 2% (весовых) пектинов всех степеней этерификации или от 0,0001 до 2% по весу, по меньшей мере, одного из указанных выше сахаридов.

В частности, экстрагирующий раствор выбирают из группы, состоящей из растворов альгинатов, полигалактуроновой кислоты, амилозы, амилопектина, полиманнанов, арабинозы, галактозы, лактозы, глюкозы, фруктозы и сахарозы.

Для проведения экстракции, ягоды можно раздавить или перемолоть, затем добавить к полученному объему от 1 до 200 объемов, по меньшей мере, одного из указанных выше экстрагирующих растворов. Однако, лучше всего добавить от 5 до 100 объемов и дать смеси прореагировать в течение 1 - 30 мин при температуре от 4 до 35^oC, затем центрифугированием или фильтрованием отделить твердую часть и собрать жидкую часть, обладающую инициаторной (затравочной) активностью.

Предпочтительны ягоды или твердую часть экстрагированной смеси, по меньшей мере, еще раз экстрагируют, как описано выше. Для этого ягоды или твердую часть от предыдущей экстракции ресуспендируют (каждый раз в одном из названных экстрагирующих растворов), затем твердая часть может быть удалена, а жидкая собрана. Таким образом, можно видеть, что затравочная активность различных экстрактов остается одинаковой, по крайней мере, для первых 25 последовательных экстракций одного и того же материала. Однако предпочтительно сначала отделить сырой сок от ягод перед последовательным экстрагированием из них затравочного агента. Установлено, что неочищенный сок содержит сахара, ароматические соединения и белки, которые разрушают затравочную активность.

Подобным образом готовят экстракт из листьев. Для этого листья должны быть перемолоты и затем затравочный агент экстрагируется из них таким же образом, как описано выше (по крайней мере, одним из указанных растворов, содержащих, например, пектин, моно-, олиго- и/или полисахариды).

Ягоды облепихи, будучи съедобными, обычно используют для производства ликеров и джемов, а неочищенный экстракт ягод облепихи может быть непосредственно использован как натуральная добавка для приготовления пищевых продуктов, например, с целью их замораживания, структурирования или криоконцентрирования.

В процессе замораживания продукта возможно добавление названного затравочного агента к замораживаемому продукту и проведение замораживания указанного продукта при температуре от -5 до -10^oC. Преимуществами использования затравочного агента, согласно настоящему изобретению, являются возможность проведения замораживания при более высоких температурах (в интервале от -5 до -10^oC) и то, что при этом добавка является съедобной.

В другом способе, при структурировании пищевых продуктов, указанный инициатор образования центров кристаллизации льда, добавляли к замораживаемому продукту, затем данный продукт замораживали при температуре от -5 до -25^oC, лиофилизировали и лишь затем нагревали. Преимуществами использования затравки (согласно настоящему изобретению) являются возможность проведения замораживания при высокой температуре (например, при -5 - 10^oC), то, что при этом добавка является съедобной, и то, что кристаллы получаются больших размеров, что в результате приводит к улучшенной модификации консистенции продукта.

Наконец, возможно также криоконцентрирование жидкостей, например, таких как кофейный экстракт, фруктовый или овощной сок, путем добавления к ним экстракта, содержащего согласно настоящему изобретению затравочный агент, и дальнейшего замораживания данной жидкости при температуре от -5 до -10^oC с последующим отделением кристаллической фазы от жидкой (например, центрифугированием). Преимущество использования затравки настоящего изобретения, заключается в том, что становится возможным проведение замораживания при высокой температуре (от -5 до -10^oC) и, например, в том, что используемая добавка является съедобной и образуются кристаллы больших размеров, что в результате приводит к улучшенному разделению фаз и к тому, что скорость кристаллизации относительно выше, что приводит к ускорению процесса криоконцентрирования.

Согласно настоящему изобретению, подробно, с учетом различных свойств, определенных при помощи специальных тестов, описан инициатор образования центров кристаллизации льда. В результатах, если нет специальной оговорки, приводятся весовые проценты.

Измерение затравочной (инициаторной) активности экстрактов облепихи Приготовление экстрактов ягод облепихи: Ягоды облепихи (Hippophae rhamnoides) собирают после созревания и затем до употребления хранят замороженными при температуре -40^oC. Экстракт хранят при 4^oC.

- Экстракт 1 (неочищенный экстракт ягод): ягоды оттаивают, раздавливают и затем центрифугируют в пробирках Эппендорфа (5000 g_n, 10 минут) при 20^oC. Надосадочную жидкость используют в качестве экстракта.

- Экстракт 2 (измельченные ягоды): замороженные ягоды интенсивно перемалывают в дробилке (POLITRON) в течение 5 минут. Используют экстракт, содержащий шкурки ягод.

- Экстракт 3 (сок измельченных ягод): перемолотые ягоды центрифугируют (5000 g_n, 10 минут) при 4^oC. В качестве экстракта использовали надосадочную жидкость.

- Экстракт 4 (осадок перемолотых ягод): после центрифугирования предварительно перемолотых ягод, осадок растворяют в 3-х кратном объеме воды и используют в качестве экстракта.

- Экстракты с 5 по 7: осадок перемолотых и отцентрифугированных ягод помещают в 25-кратный объем раствора, содержащего 0,01, 0,1 или 0,5% пектина в воде, смеси дают прореагировать в течение 15 минут (время от времени перемешивая), затем смесь центрифугируют (10000 g_n, 10 минут), после чего супернатант использовали в качестве экстракта.

- Экстракты 8 и 9: осадок перемолотых и отцентрифугированных клеток экстрагируют так же, как описано выше для экстрактов 5 - 7, но в двукратном объеме водного раствора, содержащего 0,001 или 0,0001% пектина.

- Экстракты 10 и 22: осадок перемолотых и отцентрифугированных клеток экстрагируют так же, как описано выше для экстрактов 5 - 7, растворами, соответственно содержащими 0,1% раствор пектина, этерифицированного в разной степени (10%, 38%, 75%) или растворами, содержащими, соответственно 0,1% полигалактуроновую кислоту, 0,1% амилозу, 0,1% амилопектин, 0,01% альгинат, 1% полиманнаны (полисахаридная фракция кофе), 0,1% галактозу, 0,1% глюкозу, 0,01% арабинозу и 0,01% сахарозу.

Затравочная (инициаторная) жидкость: Затравочную активность вещества, присутствующего в продукте, определяют путем измерения температуры, при которой продукт замерзает. (Эту температуру назвали затравочной температурой). Затем эту температуру сравнивают с температурой, полученной при замораживании продукта без затравочного агента (контроль). Затравочная активность наблюдается, если температура замерзания продукта в присутствии данного агента выше, чем температура замерзания контрольного продукта.

Затравочная активность может быть охарактеризована тремя температурами: температурами (в ^oC) инициации образования кристаллов льда T20, T50, T80, указывающими, что 20%, 50% и 80% (соответственно) проб, замерзают при данной температуре.

В последующем описании термин "точка образования центов кристаллизации" будет означать "затравочную температуру, при которой заморожено 50% образца", т.е., величину T50.

Капельный тест: вышеназванные экстракты 1 - 4 (10^o) разбавляют 10 - 1000 раз (от 10^-1 до 10^-3) двойным дистиллятом или клубничным соком. Десять капель (по 10 мкл) экстракта помещают на алюминиевую фольгу, покрытую парафином. Фольгу помещают на водяную баню и охлаждают со скоростью 0,1^oC в минуту. Все разведения находятся на одной и той же фольге. Затем определяют значения T20, T50 и T80.

Клубничный сок готовят центрифугированием свежих, предварительно вымытых ягод клубники (на кухонной центрифуге) с последующим повторным центрифугированием сока при 4^oC (10000 g_n, 15 минут). Супернатант затем хранят при -20^oC в замороженном виде, и размораживают непосредственно перед употреблением.

Тест стеклянной пробирки: 100 мл описанных выше экстрактов 5 - 22 10-кратно разбавляют дважды дистиллированной водой, наливают в тонкостенную стеклянную пробирку, которую затем помещают на водяную баню и охлаждают со скоростью 0,1^oC в минуту. Затем определяют значения T20, T50 и T80.

В табл. 1 (табл. 1 - 3 см. в конце описания) представлены результаты, полученные капельным тестом для экстрактов 1 - 4. В таблице приводятся средние значения по трем повторностям.

Как можно видеть из таблицы, существенные различия наблюдаются между затравочной температурой экстрактов, разбавленных до 10^-2 и затравочной температурой контрольных образцов, замороженных без затравки. В противоположность этому, затравочная активность сырого клубничного сока, разбавленного 1 : 1000, была относительно низкой. Кроме того, наблюдаются различия в значениях затравочных температур грубых экстрактов (10^oC) и разбавленных экстрактов. Возможно, высокое содержание сахара в грубых экстрактах разрушает затравочную активность агента, В табл. 2 показаны данные, полученные для экстрактов 5 - 22 при трехкратном проведении теста стеклянной пробирки.

Как видно из таблицы 2, экстракты, полученные при помощи раствором пектина, полисахарида или сахара, имеют среднюю затравочную температуру порядка -5,5^oC. Для сравнения был взят чистый раствор пектина, отфильтрованный через мембрану с размером пор 0,45 мкм (Sartorius) или каким-либо другим способом. Затравочная температура такого раствора была меньше, чем -10^oC. Более того, экстракт ягод, полученный при помощи раствора пектина (отфильтрованного через мембрану, размер пор которой составлял 0,45 мкм) сохранял затравочную активность -5,5^oC. Это позволило предложить, что активность не связана с присутствием микроорганизмов в ягодах или на их поверхности.

Наконец, при проведении повторной последовательной экстракции осадка перемолотых и отцентрифугированных ягод с использованием каждый раз 12,5 объемов водного раствора, содержащего 0,1% пектин, и выдерживанием в нем осадка 15 мин с последующим центрифугированием в 25-ом экстракте наблюдалась все еще хорошая затравочная активность. В таблице 3 представлены значения затравочной активности, полученной при последовательной экстракции, проводимой как описано выше. Определение затравочной активности проводили согласно тесту стеклянной пробирки.

Зависимость затравочной активности от степени зрелости ягод.

Была определена сезонная затравочная активность сока из ягод облепихи (Hippophae rhamnoides), собранных в районе Трондгейм (Norway).

В середине июля ягоды маленькие и зеленые, и содержат мало сока. Поэтому, июльские и августовские образцы готовили путем перемешивания ягод с деионизированной водой, затем дробили их при помощи ступки в то время, как сентябрьские - октябрьские образцы оранжевого цвета готовили дроблением ягод в ступке без добавления воды. Экстракты получали после центрифугирования полученных проб (5000 g_n, 10 минут) и фильтрования супернатанта через мембрану с размером пор 0,45 мкм. Точку образования центров кристаллизации льда экстрактов в конечном счете определяли способом, описанным ранее.

На фиг. 1 представлено изменение точки образования центров кристаллизации в зависимости от времени сбора вышеназванных ягод.

Установлено, что наилучшая затравочная активность наблюдается для ягод, собранных в сентябре - октябре, т.е., спелых ягод оранжевого цвета.

Степень спелости ягод также может быть более точно определена путем измерения содержания в них воды известными в этой области способами. Эти измерения были проведены для ягод, собранных с июля по октябрь. Наилучшая затравочная активность была получена для ягод, собранных в сентябре, содержание воды в которых составляло 80 - 90%.

Затравочная активность листьев облепихи.

Листья облепихи (Hippophae rhamnoides) дробили, а затравку (инициатор) экстрагируют из их при помощи раствора пектина или сахара, таким же образом, как это делают при получении экстрактов 5 - 22 из ягод.

Во всех случаях, средняя затравочная активность экстрактов листьев, определенная при помощи теста стеклянной пробирки, имеет значение -5,5^oC. Таким образом, листья облепихи также могут быть источником затравочной активности.

Очистки и характеристика.

Инициатор образования центров кристаллизации льда из облепихи может быть очищен, например, способом, приводимым ниже. Затем инициатор может быть охарактеризован различными способами.

Ягоды облепихи (Hippophae rhamnoides) раздавливают центрифугированием и к соку добавляют 1/3 объема дистиллированной воды. Затем смесь центрифугируют (5000 g_n, 10 минут), а затем надосадочную жидкость фильтруют через мембрану с размером пор 0,45 мкм (Minisart, Sartorius). Фильтрат наносят на колонку для гель-фильтрации (2,6 x 60 см), содержащую Сефакриловую смолу HR 300, и элюируют при 4^oC 0,05 м Трис-буфером pH 7,5 (240 мл/ч). Первый пик элюиции содержит затравочную активность (для этого типа колонки известно, что объем элюата, соответствующий первому элюированному пику, содержит молекулы очень высокой мол. массы).

Таким образом, затравочный агент, получен из облепихи, а не из микроорганизмов, присутствующих в ягодах (т.к. последние были отфильтрованы на мембране с порами 0,45 мкм). Более того, этот агент является высокомолекулярным соединением.

Элюат, содержащий затравочный агент, анализировали при помощи электрофореза в полиакриламидном геле.

SDS-PAGE электрофорез (электрофорез, проведенный в присутствии додецилсульфата натрия (SDS)) показал наличие белка с молекулярной массой 25 - 27 кДа (килодальтон).

Наконец, проведение электрофореза этого соединения в PAGE (без SDS) в крупнопористом геле оказалось невозможным, несмотря на предобрабтку элюата хлороформом, проведенную для отделения и удаления липидной фракции от белковой, и не смотря на присутствие в геле 7M мочевины или неионного детергента (0,5% Тритона X-100).

Следовательно, можно предположить, что затравочный агент представляет собой высокомолекулярный агрегат, содержащий белковую часть, которая может быть прикреплена к клеточным структурам, которые достаточно малы для того, чтобы быть удаленными на фильтре с размером пор 0,45 мкм, но слишком велики для миграции в неденатурированном полиакриламидном геле. Кроме того, данные клеточные структуры могут также обладать затравочной активностью. Наконец, белковая часть представляет собой белок, состоящий из субъединиц с молекулярным весом 25 - 27 кДа.

Инактивация С целью установления структур, ответственных за затравочную активность, затравочный агент подвергают химическим обработкам.

Обработку, позволяющую удалить липидную фазу, проводят на очищенном затравочном агенте. Для этого 2,5 объема хлороформа смешивают с 1 объемом очищенного агента, смесь перемешивают и оставляют на 24 часа при 4^oC, затем хлороформ экстрагируют под воздействием пузырьков воздуха. Таким образом, получают фракцию, содержащую липиды, и фракцию, свободную от последних. При сравнении затравочной активности очищенного агента и агента, не содержащего липиды, наблюдают понижение точки образования центров кристаллизации льда на 4^oC для агента, не содержащего липиды. Таким образом, установлено, что липиды также играют роль в затравочной активности.

Кроме того, липидную фракцию смешивают с фракцией, содержащей очищенный от липидов агент, и оставляют на 14 дней при 4^oC и затем определяют затравочную активность смеси и фракции, содержащей агент, очищенный от липидов. При этом наблюдается увеличение точки образования центров кристаллизации льда на 3^oC. Следовательно, липиды способствуют увеличению затравочной активности.

Таким образом, затравочный агент может также содержать липидную часть.

Исследовали влияние меркаптоэтанола и 0,01М додецилсульфата натрия при различных pH на грубые экстракты ягод. Меркаптоэтанол не оказывает влияния на точку образования центров кристаллизации, что означает, что дисульфидные связи не играют роли при образовании центров кристаллизации льда. Влияние SDS на точку образования центров кристаллизации льда относительно ограничено (от 0 до 1^oC в зависимости от pH), что означает, что положительные заряды на поверхности агента не играют роли для затравочной активности (SDS добавляет в избыток отрицательного заряда белку и, тем самым маскируют положительные заряды поверхности белка). Подобно этому, установлено, что pH также не влияет на поведение затравочного агента.

Было исследовано влияние N-бромсукцинимида (NBS) на точку образования центров кристаллизации льда агента. pH смеси очищенного затравочного агента и NBS (конечная концентрация которого составляла 0,001 М) доводили до 3.0, добавляя небольшие количества 2 М соляной кислоты. Затем оставляли на 30 минут при 25^oC, после чего pH смещали до значения 7,5, добавляя небольшие количества Трис-буфера. Определение точки образования центров кристаллизации до и после обработки показало падение ее на 2,8^oC. Это означает, что очень важными для затравочной активности являются ароматические аминокислоты (NBS окисляет индольные группы и тирозин).

Следующие примеры демонстрируют различное промышленное применение затравочного агента согласно настоящему изобретению: в процессах замораживания продуктов, криоструктурирования замораживаемых продуктов и в процессах концентрирования пищевых жидкостей.

Пример 1. Неочищенный сок из спелых ягод облепихи готовят перемалыванием ягод. Затем раздробленные ягоды центрифугируют и используют надосадочную жидкость.

Эту жидкость добавляют в мороженое в соотношении 1 объем надосадочной жидкости к 600 объемам мороженого в процессе его приготовления традиционным способом. Затем мороженое замораживают при -8^oC.

Для сравнения готовили мороженое обычным способом без добавления агента. Такое мороженое замерзало при -12^oC.

Пример 2. Для приготовления экстракта ягод облепихи, ягоды перемалывают, затем к ним добавляют 10 объемов 0,1% раствора пектина, оставляют смесь на 15 минут, затем центрифугируют при 10000 g_n 10 минут, после чего используют надосадочную жидкость.

Приготовленный описанным выше способом экстракт добавляют к мясному муссу в отношении 1 объем экстракта к 100 объемам мусса в процессе приготовления последнего. Мясной мусс замерзает при -10^oC.

Для сравнения использовали мясной мусс, приготовленный обычным способом, без добавления экстракта ягод облепихи. Такой мусс замерзал при -15^oC.

Пример 3. Для получения белковой пасты соевых бобов, соевый белковый изолят, содержащий 20% белков, нагревают при 70^oC в течение 10 минут. Затем раствор охлаждают до 20^oC. К полученному раствору добавляют экстракт ягод облепихи, полученный как описано в примере 1, в соотношении 1 объем экстракта к 100 объемам пасты. Пасту в виде тонкого слоя толщиной 2 - 5 мм замораживают со средней скоростью 0,1^oC/мин до -20^oC, затем эту температуру поддерживают в течение 10 часов. Затем для стабилизации модифицированной пасты ее (пасту) лиофилизируют, после чего нагревали при 100^oC в течение 2 минут. После этого паста из соевых бобов имела слоистую и волокнистую структуру, которая была очень похожа на структуру "кукурузных хлопьев".

Для сравнения пасту того же состава, но без добавления сока ягод, лиофилизируют и затем нагревали в таких же условиях, как описано выше. Паста, полученная таким образом, имела губчатую беспорядочную структуру, совершенно не похожую на структуру "кукурузных хлопьев".

Пример 4. 0,03% экстракт ягод облепихи, описанный в примере 1, добавляют к кофейному экстракту, содержащему 10% сухих веществ. Смесь замораживают при -6,5^oC в течение 30 мин, затем центрифугируют при 20000 g_n 15 мин при -5^oC и отбирают полученную надосадочную жидкость. Таким образом, жидкую фазу отделяют от кристаллической фазы смеси и получают кофейный экстракт, содержащий 15,3% сухих веществ.

Для сравнения используют кофейный экстракт, к которому не добавляют экстракт ягод облепихи. Такой кофейный экстракт, содержащий 10% сухих веществ, не замерзает в отсутствии затравочного агента, представленного в настоящем изобретении.

Формула изобретения

1. Вещество, инициирующее образование центров кристаллизации, отличающееся тем, что является экстрактом из ягод или листьев облепихи (Hippophae), экстрагированным из них водным раствором пектина, моно-, олиго- и/или полисахарида.

2. Вещество по п. 1, отличающееся тем, что оно выделено из облепихи вида, выбранного из Hippophae rhamnoides, Hippophae salicifolia, Hippophae tibetana или Hippophae neurocarpa.

3. Вещество по п. 1, отличающееся тем, что содержащийся в нем агент, инициирующий образование центров кристаллизации, представляет собой агрегат, содержащий белковую и липидную части.

4. Способ получения инициатора образования центров кристаллизации льда, отличающийся тем, что предусматривает экстрагирование ягод и/или листьев облепихи раствором пектина, моно-, олиго- и/или полисахарида, причем полученный экстракт используют в качестве вещества, инициирующего образование центров кристаллизации.

5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанный раствор выбирают из группы, состоящей из растворов альгинатов, полигалактуроновой кислоты, амилозы, амилопектина, полиманнанов, арабинозы, галактозы, лактозы, глюкозы, фруктозы и сахарозы.

6. Способ по п. 4, отличающийся тем, что экстрагируют раздавленные или дробленые листья и/или ягоды, одну часть которых смешивают с 1 - 200 об. частями раствора, содержащего 0,0001 - 2 вес.% пектина и/или 0,0001 - 2 вес.% по меньшей мере одного сахарида, выдерживают в течение 1 - 30 мин, а затем твердую часть удаляют, а жидкую часть собирают.

7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что удаленную твердую часть подвергают по меньшей мере еще одной экстракции.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5