Способ диагностики гиперферментемии при нарушении внешнесекреторной функции поджелудочной железы

 

Изобретение относится к медицине, а именно к методам диагностики. Сущность способа: исследуют сыворотку крови больного, нанесенную на предметное стекло, покрытую покровным и высушенную при 37-38^oС в течение 1,5-2 ч. Образовавшиеся в сыворотке крови больного кристаллы сопоставляют с кристаллами модельных композитов, которые предварительно получают путем обогащения сыворотки крови здорового человека ферментами трипсином, амилазой, липазой. При наличии кристаллов в виде ячеистой или дендритной сеток диагностируют гипертрипсинемию, при наличии субпараллельных ламелей - гиперамилаземию, при наличии пузырьковых камер с отростками - гиперлипаземию. Способ обеспечивает высокую информативность и достоверность. 11 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в лечении заболеваний поджелудочной железы.

Своевременное определение нарушения ферментопродукции поджелудочной железой, диагностика гиперферментемии (выброс липазы, амилазы, трипсина) продолжают вызывать затруднения в практике врачей различных специальностей (терапевтов, гастроэнтерологов, хирургов, эндокринологов и др.).

Нередко приступ острого панкреатита своевременно не распознается, а трактуется как клиника острого живота, обусловленная перфорацией язвы желудка, приступом острого холецистита, острого аппендицита, кишечной непроходимости. Это приводит к тактическим ошибкам (Хендерсон Дж. Патофизиология органов пищеварения. - С. -Петербург, 1997, с.197-224). Нарушение внешней секреции поджелудочной железы (ПЖ) может наблюдаться и при хроническом панкреатите, а также при других заболеваниях органов желудочно-кишечного тракта, при которых вторично страдает ПЖ, при развитии осложнений после операций на ПЖ и близлежащих органах. Известны случаи нарушения внешней секреции ПЖ (в первую очередь, увеличение содержания в крови ферментов липазы, амилазы, трипсина) при кардиоваскулярном шунтировании, трансплантации сердца, почек.

Нарастание болевого синдрома при остром панкреатите и обострении хронического панкреатита сопровождается повышением содержания в крови ферментов амилазы, липазы, трипсина (Циммерман Я.С. Хронический панкреатит. Методические рекомендации. - Пермь, 1990; Логинов А.С., Сперанский М.Д., Асташенкова К. Ю. Скрининговые методы экспресс-диагностики заболеваний печени и поджелудочной железы. Методические рекомендации. - М., 1987; Григорьев П.Я., Яковенко Э.П. Диагностика и лечение болезней органов пищеварения. - М.: Медицина, 1996).

Диагностика гиперферментемии позволяет получить ценную информацию о нарушении внешней секреции поджелудочной железы. Наиболее важным в диагностическом процессе является исследование содержания ферментов в плазме сыворотки крови (СК), определение содержания α-амилазы, липазы, трипсина. α-амилаза образуется поджелудочной железой, слюнными железами. Гиперамилаземия наблюдается при многих заболеваниях, но наиболее выражена при остром панкреатите.

Липаза катализирует расщепление глицеридов, высших жирных кислот. Она образуется в поджелудочной железе, легких, кишечнике. Повышение активности сывороточной липазы может быть следствием патологии поджелудочной железы, легких, кишечника, желудка, лейкоцитарного ростка крови.

Трипсин вырабатывается в поджелудочной железе, из которой в составе поджелудочного сока (в виде трипсиногена) поступает в двенадцатиперстную кишку и участвует в переваривании белков пищи. При поражении поджелудочной железы активность трипсина резко повышается, особенно при остром панкреатите.

Диагностику нарушения ферментообразовательной функции поджелудочной железы осуществляют путем количественного определения содержания ферментов в сыворотке крови - α-амилазы, липазы, трипсина, а также и в других биологических жидкостях. При этом используют различные способы количественного определения ферментов (Медицинские лабораторные технологии. Справочник. Т.2. - С. -Петербург, 1999; Биохимические методы исследования в клинике. - М., 1969).

Активность липазы определяют в большинстве способов на основании титрометрического определения количества освободившихся под действием фермента жирных кислот. Эти способы отличаются используемым субстратом: оливковое масло, твин, тербутирин (Биохимические методы исследования в клинике. Справочник. - М., 1969, с.186-191).

Недостатком этих способов является их невысокая специфичность, т.к. эти субстраты гидролизируются не только липазой, но и другими эстеразами печеночного происхождения.

Титрометрический способ определения липазы основан на титровании жирных кислот, освобождающихся в результате ферментативного гидролиза, фотометрический - связан с введением в реакционную смесь особых реактивов. В качестве унифицированого способа используют турбидиметрический, в котором в качестве субстрата используют оливковое масло (Справочник. Медицинские лабораторные технологии. Т.2. - С.-Петербург, 1999, с.39-41).

Принцип: спектрофотометрическое определение изменения мутности суспензии оливкового масла под действием липазы.

Реактивы: оливковое масло, оксид алюминия, сульфат меди, этиловый спирт, натриевая соль дезоксихолевой кислоты, соляная кислота.

Специальное оборудование: спектрофотометр с термостатируемой кюветой.

Ход определения: Перед определением исследуемую сыворотку крови и реактивы прогревают до температуры измерения. В кювету приливают 3 мл рабочей эмульсии оливкового масла, добавляют 0,1 мл сыворотки крови, смешивают (без встряхивания) и ставят в термостат при 30^oС или 37^oС, через 2 минуты измеряют экстинкцию (Е1) против дистилированной воды или воздуха при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм, затем кювету снова помещают в термостат при той же температуре и через 5 минут измеряют экстинкцию (Е2), рассчитывая ΔЕ за 1 мин. Расчет активности липазы производят по формуле Недостатки способа: - нарушение нативности СК (подогревание, соединение с реактивом); - использование реактивов, требующих дополнительной обработки; - применение дорогостоящей аппаратуры; - косвенное определение наличия липазы.

Трипсин определяют в сыворотке крови путем определения его активности по Эрлангеру с сотр. в модификации В.А. Шорникова (Биохимические методы исследования в клинике. - Л., 1969, с.206-208). Способ основан на расщеплении трипсином синтетического бесцветного субстрата - бензоиларгинин-р-нитроанилид - с образованием окрашенного р-нитроанилина, количество которого определяют калибриметрически.

Недостаток способа: - использование реактивов сопровождается трудоемкостью и дороговизной способа; - использование спектрофотометра; - проведение расчетов;
- нарушение нативности сыворотки крови;
- недостоверность результатов.

Наиболее распространено в последнее время определение трипсина с помощью набора Био-LA СНЕМА-тест (Kasafirek Е., Chavko M., Bartik M.: Coll. Czechisiov. Chem. Commum. 36, 4070, 1971) - фотометрическим способом. В основе способа лежит способность трипсина гидролизировать хромогенный субстрат. N-альфа-тозил-L-аргинин-4-нитроанилид. Образовавшийся 4-нитроанилид определяют фотометрически (кинетический способ).

Кинетический способ.

Реактивы: трис буфер 3,4 ммоль, хлорид кальция 1,7 ммоль/флакон, субстрат L-тара 10 ммоль/л, стандартный раствор 4-нитроанилин 500 мкмоль/л.

Состав инкубационной смеси:
Трис буфер, рН 8,2 (25^oС) - 40,6 ммоль/л,
L-TAPA - 0,94 ммоль/л,
СaCl - 20,6 ммоль/л.

Объемное соотношение сыворотка:инкубационная смесь - 1:16.

Вспомогательный реактив:
раствор уксусной кислоты - 1,75 ммоль/л.

Ход определения:
1. Готовят буферный раствор с реактивом.

2. Готовят рабочий раствор (смешивают реактив - 1 доля реактива 2 и 9 долей буферного раствора).

Измеряют оптическую плотность в интервале 30-90 секунд и вычисляют изменение оптической плотности за минуту (ΔА).

Измеряют оптическую плотность стандарта против бланка (А2).

Расчет по формуле

Недостатки способа:
1. Нарушение нативности сыворотки.

2. Использование фотометра.

3. Приготовление рабочего и буферного растворов.

Способ определения активности α-амилазы
В биологических жидкостях делится на три основные группы:
1. Редуктометрические, основанные на определении образующихся из крахмала сахаров.

2. Амилокластические, основанные на определении количества нерасщепленного крахмала по его реакции с йодом.

3. Хромолитические, основанные на использовании комплексов субстрат-краситель, которые под действием α-амилазы распадаются с образованием водорастворимого красителя (Справочник. Медицинские лабораторные технологии. Т.2. - С.-Петербург, 1993, с.19 и 20).

Недостатки вышеупомянутых способов:
- использование субстратов;
- нарушение нативности сыворотки крови;
- использование косвенной реакции (крахмал+йод);
- трудоемкость и недостоверность.

Нами в качестве прототипа использован унифицированный амилокластический способ со стойким крахмальным субстратом (способ Каравея) (Справочник. Медицинские лабораторные технологии. Т.2. - С.-Петербург, 1999, с.20 и 21).

Принцип: α-амилаза гидролизует расщепление крахмала с образованием конечных продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. Об активности α-амилазы судят по уменьшению интенсивности окраски.

Реактивы:
1. Бензойная кислота.

2. Гидрофосфат натрия (Na₂HPО₄).

3. Крахмал, растворимый для нефелометрии или по Lintner (выпускается специально в качестве субстрата).

4. 154 мМ (0,9%) раствор хлорида натрия: 9 г NaCl растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды в мерной колбе емкостью 1 л, затем доводят до метки.

5. Субстратно-буферный раствор, рН 7,0: 13,3 г гидрофосфата натрия и 2 г бензойной кислоты растворяют в 250 мл 154 мМ раствора хлорида натрия и доводят до кипения. Суспендируют 0,2 г растворимого крахмала в небольшом количестве холодной дистиллированной воды и вводят в кипящий буферный раствор. Кипятят 1 минуту, охлаждают и доводят объем дистиллированной водой до 500 мл. Субстратно-буферный раствор должен быть прозрачным, он стабилен при комнатной температуре в течение 10-12 дней.

6. Йодид калия (KI).

7. Йодат калия (KIO₃).

8. Фторид калия(КF).

9. Концентрированная HCl.

10. 0,01 н. раствор йода: 0,036 г KIО₃ + 0,45 г KI растворяют в 40 мл дистиллированной воды и медленно при помешивании добавляют 0,09 мл концентрированной НСl. 5 г фторида калия растворяют в 50 мл дистиллированной воды, фильтруют в мерную колбу, приливают 40 мл раствора йода и доливают дистилированной водой до объема 100 мл. Хранят в посуде из темного стекла. Годен в течение месяца. Если в рабочий раствор йода не добавляют фторид калия, то его следует готовить ежедневно из 0,1 н. раствора I.

Ход определения:
- 0,5 мл субстратно-буферного раствора помещают в пробирку, нагревают 5 минут при температуре 37^oС, добавляют 0,01 мл сыворотки крови.

- Инкубируют 7,5 минут при температуре 37^oС. Время инкубации необходимо точно отсчитывать по секундомеру с момента добавления биологической жидкости (сыворотки крови) в крахмальный субстрат. Тотчас же после инкубации добавляют 0,5 мл 0,01 н. раствора йода и доводят объем дистиллированной водой до 5 мл.

- Фотометрируют в кювете с длиной оптического пути 10 мм при длине волны N (3,3-8,9 мг/с л) 630-690 нм (красный светофильтр) против дистиллированной воды.

Производят расчет:
Активность α-амилазы выражают в миллиграммах или граммах 1 крахмала, гидролизованного 1 л биологической жидкости за 1 с инкубации при 37^oС.

Расчет производят по формуле
,
где А - активность α-амилазы, мг/с л;
Ек - экстинкция контрольной пробы,
Ео - экстинкция опытной пробы;
0,2 - количество крахмала, введенного в опытную и контрльную пробы, мг;
10⁵ - коэффициент пересечения на 1 литр сыворотки крови;
7,5•60 - коэффициент пересечения на 1 с инкубации.

Недостатки способа:
1. Трудоемкость.

2. Использование (приготовление) сложных реактивов.

3. Длительность исследования.

4. Воздействие токсических веществ.

5. Нарушение нативности исследуемого фермента.

6. Использование фотометра (сложность прибора).

7. Недостоверность определения.

Задачи:
1. Упростить способ приготовления пробы.

2. Повысить информативность за счет выделения микротипов кристаллов, характерных для селективной гиперферментемии.

3. Повысить точность и качество диагностики нарушения внешнесекреторной функции поджелудочной железы.

Сущность изобретения заключается в том, что для диагностики нарушения внешнесекреторной функции поджелудочной железы (гиперферментемии) сыворотку крови наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом, сушат при температуре 37-38^oС, выдерживают на открытом воздухе 1,5-2 часа, затем последуют в проходящем свете и при наличии ячеистой или дендритной сеток - диагностируют гипертрипсинемию, субпараллельных ламелей - гиперамилаземию, пузырьковых камер с отростками - гиперлипаземию.

Способ осуществляется следующим образом:
1. Производят забор крови из вены - 3,0 мл, центрифугируют для получения сыворотки.

2. Сыворотку в виде капель объемом 0,01-0,02 мл каждая наносят на предметное стекло, накывают покровным стеклом.

3. Высушивают в термостате при температуре 37-38^oС на протяжении 1,5-2 часов.

4. Выдерживают на открытом воздухе 1,5-2 часа.

5. Под микроскопом в проходящем свете изучают картину кристаллизации и при наличии в препарате кристаллов в виде ячеистой или дендритной сеток - диагностируют гипертрипсинемию, субпараллельных ламелей - гиперамилаземию, пузырьковых камер с отростками - гиперлипаземию.

Нами предварительно были обследованы эталонные кристаллограммы, для чего сыворотку крови здорового человека, помещенную в емкость из кварца, обогащали ферментами - амилазой, липазой, трипсином.

На фото 1 (а-г) представлены эталонные кристаллограммы (КГ) сыворотки крови здорового человека, обогащенной ферментами. КГ выполнены кристаллами в виде ячеистой сетки и дендритной сетки при пересыщении сыворотки крови (СК) ферментом - трипсином; модельный композит гипертрипсинемии, концентрация трипсина соответственно составила 1200 и 1800 ммоль/л, фото 1 (а, б); кристаллами из субпараллельных ламелей при пересыщении СК ферментом амилазой, модельный композит гиперамилаземии, концентрация амилазы составила 94 ммоль/л•ч, фото 1 в; кристаллами из пузырьковых камер с отростками при пересыщении СК ферментом липазой, модельный композит гиперлипаземии, концентрация липазы - 5,4 у.е., фото 1 г. Способ апробирован на 800 больных.

Примеры
Пример 1, фото 2 (а, в). Больной И., история болезни (ИБ) 1819. Диагноз: острый панкреатит. На фото 2 a-в приведены КГ сыворотки крови больного И., присутствуют пузырьковые камеры с отростками (а, б), дендритная сетка (в).

Технология: из вены больного И. осуществлен забор крови в количестве 3 мл, кровь отцентрифугирована для получения сыворотки. Капли СК (5) объемом 0,01 мл каждая нанесли на предметное стекло, каждую каплю накрыли покровным стеклом и высушили в термостате на протяжении 1,5 часов при температуре +37^oС. Препарат выдержали на открытом воздухе 2 часа, затем изучили в проходящем свете под микроскопом. Найдены кристаллы, представленные пузырьковыми камерами с отростками, дендритной сеткой. Одновременно в СК пациента определили уровень липазы и трипсина, которые оказались повышенными и составили соответственно - 3,4 у.е. (норма 0,8 у.е.), 630 ммоль/л (норма 220 ммоль/л).

Предполагаемая гиперферментемия (гиперлипаземия и гипертрипсинемия) подтвердилась.

Пример 2, фото 3 (а, б). Больная Ж., история болезни 9680. Диагноз: хронический рецидивирующий панкреатит, болевая форма. На фото 3 a, б приведена КГ сыворотки крови больной Ж., присутствуют дендритная сетка (а), субпараллельные ламели (б).

Технология: из вены больной Ж. взято 3 мл крови, которая отцентрифугирована для получения СК. Капли СК (3) объемом 0,02 мл каждая нанесли на предметное стекло, каждую накрыли покровным стеклом и высушили в термостате на протяжении 2 чacoв пpи тeмперaтype +38^oС. Препарат выдержали на открытом воздухе 1,5 часа, затем микроскопировали. Обнаружили кристаллы - дентритную сетку и субпараллельные ламели. Одновременно в СК пациента определили уровень трипсина и амилазы, которые оказались повышенными и соответственно составили 780 ммоль/л (норма 220 ммоль/л) и 72 ммоль/л.ч. (норма 18,5 ммоль/л. ч. ). Предполагаемая гиперферментемия (гипертрипсинемия и гиперамилаземия) подтвердилась.

Пример 3, фото 4 (а, б). Больной Г., история болезни 10620. Диагноз: язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки, осложненная рубцовой деформацией луковицы, подозрение на хронический панкреатит. На фото 4 а, б приведена КГ сыворотки крови больного Г., присутствуют дендритная сетка (а) и ячеистая сетка (б). Технология: из вены больного Г. взято 3 мл крови, которая отценрифугирована. Капли СК (4) объемом 0,02 мл каждая нанесли на предметное стекло, каждую накрыли покровным стеклом и высушили в термостате на протяжении 2 часов при температуре +38^oС. Препарат выдержали на открытом воздухе 1,5 часа, затем изучили в проходящем свете. Найдены кристаллы - дендритная сетка и ячеистая сетка. Одновременно в СК пациента определили уровень трипсина, который оказался повышен и составил 630 ммоль/л (норма 220 ммоль/л). Предполагаемая гиперферментемия подтвердилась.

Пример 4, фото 5 (а, б). Больная М., история болезни 10972. Диагноз: хронический рецидивирующий панкреатит, стадия затухающего обострения, эрозивный рефлюкс-эзофагит, хронический гастродуоденит.

На фото 5 а, б приведены КГ сыворотки крови больной М., присутствуют пузырьковые камеры с отростками.

Технология: из вены больной М. произведен забор крови в количестве 3 мл, кровь центрифугирована. Капли СК (3) объемом 0,02 мл каждая нанесли на предметное стекло и высушили в термостате на протяжении 2 часов при температуре +38^oС. Препарат выдержали на открытом воздухе 2 часа, затем микроскопировали. Найдены кристаллы в виде пузырьковых камер с отростками. Одновременно в СК определили уровень липазы, который оказался повышенным и составил 2,1 у.е. (норма 0,8 у.е.). Предполагаемая гиперферментемия (гиперлипаземия) подтвердилась.

Пример 5, фото 6 (а, б). Больная О., история болезни 9418. Диагноз: хронический гастродуоденит, постхолецистэктомический синдром. Хронический панкреатит, болевая форма. На фото 6 а, б приведена КГ сыворотки крови больной О., присутствуют субпараллельные ламели (а) и ячеистая сетка (б).

Технология: из вены больной О. взяли 3 мл крови, которая отценрифугирована. Капли СК (5) объемом 0,01 мл каждая нанесли на предметное стекло, каждую каплю накрыли предметным стеклом и высушили в термостате при температуре +37^o С на протяжении 2 часов. Препарат выдержали на открытом воздухе 1,5 часа, затем микроскопировали. Найдены кристаллы - субпараллельные ламели и ячеистая сетка. Одновременно в СК определяли содержание амилазы и трипсина, которое оказалось повышенным и соответственно составило 28,5 ммоль/л. ч. и 290 ммоль/л. Предполагаемая гиперферментемия (гиперамилаземия и гипертрипсинемия) подтвердилась.

Пример 6, фото 7.

Больная В. , история болезни 1443. Диагноз: хронический гастродуоденит, хронический холецистит, подозрение на хронический панкреатит. На фото 7 приведена КГ сыворотки крови больной В., присутствует дендритная сетка.

Технология: капли СК больной В. нанесли на предметное стекло (5 капель), каждая объемом 0,02 мл. Каждую каплю накрыли покровным стеклом и высушили в термостате на протяжении 1,5 часов при температуре +38^oС. Образец выдержали на открытом воздухе 1,5 часа и изучили под микроскопом. Найдены кристаллы в виде дендритной сетки. Одновременно в СК определили уровень трипсина, который оказался повышен и составил 285 ммоль/л (норма 220 ммоль/л). Предполагаемая гиперферментемия (гипертрипсинемия) подтвердилась.

Пример 7, фото 8 (а, б). Больной Б., история болезни 9389.

Диагноз: язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки в стадии неполной ремиссии. Катаральный рефлюкс-эзофагит. Хронический рецидивирующий панкреатит, болевая форма. На фото 8 а, б приведена КГ сыворотки крови, присутствуют пузырьковые камеры с отростками (а) и субпараллельные ламели (б).

Технология: 4 капли СК больного Б., каждая объемом 0,01 мл, нанесли на предметное стекло, каждую накрыли покровным стеклом и высушили в термостате при температуре +37^oС на протяжении 1,5 часов. Образец выдержали на открытом воздухе 1,5 часа и микроскопировали. Найдены кристаллы: пузырьковые камеры с отростками и субпараллельные ламели. Одномоментно в СК определили уровень липазы и амилазы, которые оказались повышены и составили соответственно 1,2 у. е. (норма 0,8 у.е.) и 39,8 ммоль/л.ч. (норма 18,5 ммоль/л.ч.) Предполагаемая гиперферментемия (гиперамилаземия и гиперлипаземия) подтвердилась.

Пример 8, фото 9 (а, б). Больной Ж., история болезни 13200. Диагноз: хронический панкреатит, период обострения. На фото 9 (а, б) приведены КГ сыворотки крови больного Ж., присутствуют субпараллельные ламели.

Технология: кровь из вены в количестве 3 мл взята у больного Ж., отцентрифугирована. Капли СК (4) каждая объемом 0,01 мл нанесли на предметное стекло. Каждую каплю накрыли покровным стеклом и высушили в термостате на протяжении 1,5 часов при температуре +38^oС. Образец выдержали на открытом воздухе 1,5 часа, затем исследовали под микроскопом в проходящем свете. Найдены кристаллы в виде субпараллельных ламелей. Одновременно определили в СК уровень амилазы, который оказался повышен и составил 45 ммоль/л.ч. Предполагаемая гиперферментемия (гиперамилаземия) подтвердилась, что свидетельствует о нарушении внешнесекреторной функции поджелудочной железы.

Пример 9, фото 10 (а, б). Больная Б., история болезни 12228. Диагноз: хронический панкреатит, стадия неполного обострения. Хронический эрозивный гастрит, катаральный бульбит. На фото 10 а, б приведена КГ сыворотки крови больной Б., видны субпараллельные ламели (а) и пузырьковые камеры с отростками (б). Технология: капли СК (3) больной Б. нанесли на предметное стекло, каждая объемом 0,01 мл. Каждую каплю накрыли покровным стеклом и высушили в термостате при температуре +37^oС на протяжении 1,5 часов. Образец выдержали на открытом воздухе 2 часа и микроскопировали. Найдены субпараллельные ламели и пузырьковые камеры с отростками. Одновременно в СК больной определили уровень амилазы и липазы, которые оказались повышены и соответственно составили 78 ммоль/л.ч. и 3,8 у.е. (норма амилазы - 18,5 ммоль/л.ч. и липазы - 0,8 y. e.). Предпологаемая гиперферментемия (гиперамилаземия и гиперлипаземия) подтвердилась.

Пример 10, фото 11. Больной Ш., история болезни 10767. Диагноз: язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки с локализацией язвы на задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки, НР-ассоциированная, стадия обострения. Реактивный панкреатит. На фото 11 приведена КГ сыворотки крови больного Ш, присутствуют субпараллельные ламели.

Технология: капли СК больного Ш. нанесли на предметное стекло (5 капель), каждая объемом 0,01 мл. Каждую каплю накрыли покровным стеклом и высушили в термостате на протяжении 2 часов при температуре +38^oС, образец держали на открытом воздухе 1,5 часа и микроскопировали. Найдены субпараллельные ламели. Одновременно в СК определили уровень амилазы, который оказался повышен и составил 48 ммоль/л.ч. (норма - 18,5 ммоль/л.ч.). Предполагаемая гиперферментемия (гиперамилаземия) подтвердилась.

Способ при осуществлении позволяет:
1. Упростить определение гиперферментемии.

2 Исключить использование сложных химических реактивов и приборов.

3. Снизить себестоимость диагностики.

4. Создает возможность проведения экспресс-диагностики нарушения внешнесекреторной функции поджелудочной железы.

5. Обеспечивает высокую информативность.

6. Повышает достоверность получения результатов.

Формула изобретения

Способ диагностики нарушения внешней секреторной функции поджелудочной железы, включающий исследование сыворотки крови больного, нанесенной на предметное стекло, покрытое покровным, высушенной 37-38^oС в течение 1,5-2 ч с последующим изучением кристаллов, отличающийся тем, что предварительно создают модельные композиты путем обогащения сыворотки крови здорового человека ферментами, с кристаллами которых сопоставляют кристаллы сыворотки крови больного, и осуществляют диагностику гиперферментемии: при наличии кристаллов в виде ячеистой или дендритной сеток диагностируют гипертрипсинемию, при наличии субпараллельных ламелей - гиперамилаземию, при наличии пузырьковых камер с отростками - гиперлипаземию.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12