Способ получения стимулятора роста микроорганизмов из кормовых дрожжей
Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской микробиологии, и может быть использовано при получении питательных сред. Способ предусматривает смешивание кормовых дрожжей с водой с последующим кипячением. После кипячения экстракт охлаждают, отстаивают, декантируют. Далее к экстракту добавляют натрий фосфорнокислый двузамещенный, перемешивают до полного растворения соли, подщелачивают до рН 7,2-8,3, перемешивают. После чего добавляют хлористый кальций, вновь перемешивают, подщелачивают, до рН 6,7-7,1, кипятят в течение часа, оставляют на 10-14 ч. После отстаивания фильтруют, фильтрат концентрируют и высушивают известными способами. Предлагаемый способ улучшает процесс фильтрации, повышает степень очистки целевого продукта, а сухая форма препарата обеспечивает стандартность, удобство при использовании и стабильность при хранении. 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской микробиологии, и может быть использовано при получении питательных сред различного целевого назначения.
В приготовлении питательных сред в качестве стимуляторов роста микроорганизмов широко используют экстракты, диализаты, автолизаты дрожжей (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7).Известны способы получения экстрактов дрожжей, предусматривающие экстрагирование водорастворимых факторов роста с последующей фильтрацией (8, 9, 10).Однако указанные способы не обеспечивают возможность получения препаратов высокого качества. Это связано с низкой эффективностью процесса фильтрации и с недостаточно высокой прозрачностью получаемых экстрактов.Наиболее близким к предлагаемому по совокупности признаков и достигаемому эффекту является способ получения экстракта кормовых дрожжей, заключающийся в том, что кормовые дрожжи смешивают с водой, кипятят при постоянном перемешивании и фильтруют (11).Недостатками указанного способа являются длительность процесса фильтрации, наличие взвешенных частиц и высокая пигментация экстракта.Слабая фильтруемость и недостаточно высокая степень чистоты экстрактов объясняются тем, что суспензия кормовых дрожжей представляет собой полидисперсную коллоидную систему с размером частиц от нескольких микрон до одного и выше миллиметра.Коллоидные частицы быстро забивают поры фильтрующего материала, в результате чего резко падает скорость фильтрации.Предлагаемым изобретением решаются задачи увеличение скорости фильтрации и повышение степени очистки целевого продукта.Для достижения названного технического результата в предлагаемом способе кормовые дрожжи ГОСТ 20083-74, ОСТ 59-17-76 смешивают с водой, перемешивают, нагревают до кипения, кипятят 15-20 мин, затем охлаждают, отстаивают в течение 18-24 ч, декантируют, к экстракту добавляют натрий фосфорнокислый двузамещенный, перемешивают, подщелачивают до рН 7,9-8,3, вносят хлористый кальций, перемешивают, доводят рН до 6,7-7,1, кипятят в течение 1 ч, выдерживают 10-14 ч, фильтруют, фильтрат концентрируют и высушивают известными способами.Отличительные признаки предлагаемого способа от указанного выше известного, наиболее близкого к нему, заключаются в том, что после кипячения экстракт кормовых дрожжей отстаивают и после декантации обрабатывают смесью солей фосфорнокислого натрия двузамещенного и хлористого кальция.В результате химической реакции образуется гель фосфата кальция с развитой поверхностью, обладающий высокой адсорбирующей способностью по отношению к коллоидным частицам и пигментирующим веществам, вследствие чего повышается степень очистки и происходит осветление целевого продукта. Кроме того, гель фосфата кальция снимает заряд коллоидных частиц, что приводит к образованию сравнительно крупных, пористых частиц, через слой которых легко осуществляется фильтрация.Подщелачивание экстракта после внесения фосфата натрия до pH 7,9-8,3 обеспечивает полноту протекание реакции между хлористым кальцием и фосфатом натрия, что исключает наличие в экстракте ионов кальция, обладающих ингибирующими свойствами по отношению к микроорганизмам, а последующее подщелачивание до рН 6,7-7,1 обеспечивает лучшие условия для адсорбции балластных веществ.В отличие от известного способа, предусматривающего получение жидкого препарата, что создает у потребителя определенные проблемы, связанные хранением и транспортировкой, предлагаемый способ предусматривает получение сухого препарата, обеспечивающий стандартность, удобство при использовании и стабильность при хранении.Способ осуществляют следующим образом.Пример 1. В реактор наливают 2000 л воды, включают мешалку, загружают 100 кг кормовых дрожжей, смесь перемешивают в течение 10-15 мин. В паровую рубашку реактора подают пар давлением 1,0-1,2 атм, люк реактора закрывают, нагревают до кипения и кипятят 15-20 мин. После окончания кипячения пар отключают и в паровую рубашку реактора подают теплую воду, охлаждают до 70-75С, а затем подают холодную воду.В процессе охлаждения проводят отстаивание экстракта в течение 18-24 ч. Затем верхнюю часть отстоявшегося экстракта ваккумом декантируют в другой реактор. К полученному объему экстракта (1700 л) добавляют 5,1 кг натрия фосфорнокислого двузамещенного, содержимое реактора перемешивают 10-15 мин, подщелачивают 30% раствора едкого натрия до pH 7,9-8,3, перемешивают в течение 10-15 мин, после чего вносят 10,2 л 35% раствора хлористого кальция. Содержимое вновь перемешивают, доводят pH до 6,7-7,1, смесь кипятят в течение часа и оставляют экстракт на 10-14 ч. Далее экстракт сжатым воздухом перекачивают на нутч-фильтры. В течение 15-20 мин фильтрацию проводят самотеком, а затем постепенно включают вакуум, экстракт отфильтровывают в вакуум-выпарительную установку. Концентрирование проводят при разрежении 450-500 мм рт.ст., до содержания в экстракте 6-18% сухих веществ. Высушивание экстракта проводят на распылительной сушке при температуре на входе в сушилку 170-200 С, на выходе не менее 100-110С. Выход сухого экстракта составляет 18-21 кг. Сухой экстракт кормовых дрожжей содержит 1,60,3% аминного азота, влаги не более 7%, рН 5,2-6,2, 0,5% раствор экстракта прозрачный, без опалесценции.Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что к экстракту, полученному после декантации, добавляют 5,95 кг натрия фосфорнокислого двузамещенного и 11,9 л 35% раствора хлористого кальция. Далее согласно примеру 1.Пример 3. Отличается от примеров 1, 2 тем, что к экстракту, полученному после декантации, добавляют 6,8 кг натрия фосфорнокислого двузамещенного и 13,6 л 35% раствора хлористого кальция. Далее согласно примеру 1.В таблице приведены некоторые технологические показатели способов получения экстрактов кормовых дрожжей. Из таблицы видно, что предлагаемый способ имеет преимущество по скорости фильтрации, выходу конечной продукции и по степени пигментации.Бактериологический контроль качества полученного экстракта проводили на модели тиогликолевой среды, рекомендованной для контроля стерильности. При этом было отмечено, что интенсивность роста тест-штамма Cl.oedematiens 198 на среде с экстрактом, полученным по предлагаемому способу, была в 10 раз выше, чем на среде с использованием экстракта, полученного по известному способу.Кроме того, высокая прозрачность и низкая степень пигментации позволяет легко производить учет результатов бактериологических исследований.Таким образом, предлагаемый способ обеспечивает высокую скорость фильтрации, необходимую степень чистоты и прозрачности, что в целом способствует улучшению ростовых свойств экстракта.Способ легко воспроизводим и может быть внедрен на предприятиях, выпускающих питательные среды.БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ1. Ю.П.Козлов. Питательные среды в медицинской микробиологии. Москва, Медгиз, 1950, C. 101-106.2. Руководство по клиническим лабораторным методам исследования./Под ред. Л.Г.Смирновой и Е.А.Кост. Москва, Медгиз, 1960, С. 745-746.3. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней. Под ред. И.К.Матвеева. Москва, 1964, с. 144-145.4. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. М.О.Биргера. Москва, Медицина, 1982. С. 51-52.5. The Oxoid Manual of Culture Media Fifth edition, 1982, S.339-340.6. Microbiology Manual, 1990, Merck, S.261.7. Справочник по микробиологическим питательным средам. Под ред. М.М.Меджидова. Махачкала, 1999, С. 15.8. Инструкция о порядке расследования учета и проведения лабораторных исследований в учреждениях санитарно-эпидемиологической службы при пищевых отравлениях. Москва, 1975, С. 120.9. Справочник. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции. Под ред. Б.И.Антонова. Москва, Агропромиздат, 1986, С. 252.10. Дж.Мейнелл, Э.Мейнелл. Экспериментальная микробиология. Москва, Мир, С. 63-64.11. Л.Б.Бендас, Б.М.Раскин, А.К.Баранова. Стимулятор бактериального роста из кормовых дрожжей. Лаб. дело, 1974, С. 43-46.Формула изобретения
Способ получения стимулятора роста микроорганизмов из кормовых дрожжей, предусматривающий смешивание кормовых дрожжей с водой в соотношении 1:20, кипячение и фильтрацию, отличающийся тем, что после кипячения экстракт охлаждают, отстаивают в течение 18-24 ч, декантируют, к экстракту добавляют 0,3-0,4 кг натрия фосфорнокислого двузамещенного на каждые 100 л экстракта, перемешивают до полного растворения соли, подщелачивают до рН 7,9-8,3, добавляют 0,6-0,8 л 35% раствора хлористого кальция на каждые 100 л экстракта, перемешивают, доводят до рН 6,7-7,1, кипятят в течение одного часа, отстаивают в течение 10-14 ч, фильтруют, фильтрат концентрируют до содержания сухих веществ 6-18% и высушивают известными способами.MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 23.07.2007
Извещение опубликовано: 27.02.2009 БИ: 06/2009