Способ и композиция для лечения боли

 

Изобретение относится к медицине, к терапии, и может быть использовано для лечения боли. Вводят уменьшающее боль эффективное количество любого соединения в соответствии со структурной формулой I и в соответствии с указанными фармацевтическими композициями. Данное изобретение способствует эффективному купированию боли, в том числе и невропатического генеза. 2 н. и 4 з.п.ф-лы, 1 табл.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к лечению или предупреждению боли или ноцицепции.

Уровень техники

Боль представляет собой сенсорное ощущение, отличное от восприятий прикосновения, давления, тепла и холода. Она часто описывается пострадавшими такими терминами как яркая, тупая, ноющая, колющая, режущая или обжигающая и, как обычно считают, включает в себя как первоначальное восприятие, так и реакцию на это восприятие. Этот диапазон восприятий, а также изменчивость в восприятии боли различными индивидуумами затрудняет точное определение боли, однако многие индивидуумы страдают от сильной и постоянной боли.

Боль, которая вызвана повреждением нервных структур, часто проявляется как нервная сверхчувствительность или гипералгезия и ее называют “невропатическая” боль. Боль также может быть “вызвана” стимуляцией ноцицептивных рецепторов и может передаваться через интактные нервные пути, причем такую боль называют “ноцицептивной” болью.

Уровень стимуляции, при котором боль становится заметна, называется “порог болевой чувствительности”. Аналгетики представляют собой фармацевтические агенты, которые облегчают боль путем повышения порога болевой чувствительности без потери сознания. После введения аналгезирующего лекарства для ощущения боли требуется стимул большей интенсивности или более длинной продолжительности. У индивидуума, страдающего от гипералгезии, аналгезирующее лекарство может оказывать антигипералгезирующий эффект. В отличие от аналгетиков агенты, такие как местные анестетики, блокируют передачу в периферических нервных волокнах, таким образом блокируя осознание боли. Анестетики общего действия, с другой стороны, уменьшают осознание боли путем потери сознания.

Сообщалось, что антагонисты тахикинина индуцируют антиноцицепцию у животных, которая, как считается, является аналогичной аналгезии у человека (Maggi et al, J. Auton. Pharmacol. (1993) 13, 23-93). В частности, было показано, что непептидные антагонисты NK-1 рецептора обеспечивают такую аналгезию. Например, антагонист NK-1 рецептора RP 67,580 обеспечивает аналгезию, эффективность которой сравнима с эффективностью морфина (Garret et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1993) 88, 10208-10212).

Опиоидные аналгетики представляют собой прочно установившийся класс аналгезирующих агентов с морфиноподобным действием. Синтетические и полусинтетические опиоидные аналгетики представляют собой производные пяти химических классов соединений: фенантренов, фенилгептиламинов, фенилпиперидинов, морфинанов и бензоморфанов. Фармакологически эти соединения имеют различные активности, таким образом, некоторые являются сильными агонистами опиоидных рецепторов (например, морфин), другие представляют собой от умеренных до мягких агонистов (например, кодеин), еще одни проявляют смешанную активность агониста-антагониста (например, налбуфин), и еще одни являются частичными агонистами (например, налорфин). Несмотря на то, что опиоидный частичный агонист, такой как налорфин (N-алкильный аналог морфина), будет антагонизировать аналгезирующие эффекты морфина, при приеме отдельно он может быть сильнодействующим аналгетиком сам по себе.

Из всех опиоидных аналгетиков морфин остается наиболее широко используемым, но в дополнение к его терапевтическим свойствам он имеет и ряд недостатков, включая угнетение дыхания, пониженную моторику желудочно-кишечного тракта (приводящую к запору), тошноту и рвоту. Переносимость и физическая зависимость также ограничивают клинические применения опиоидных соединений.

Аспирин и другие салицилатные соединения часто используют в лечении для прерывания усиления воспалительного процесса при ревматоидных заболеваниях и артрите и временного облегчения боли. Другие лекарственные соединения, используемые для этих целей, включают в себя производные фенилпропионовой кислоты, такие как Ибупрофен и Напроксен, Сулиндак, фенилбутазон, кортикостероиды, противомалярийные средства, такие как хлорохин и гидроксихлорохина сульфат, и фенематы (J.Hosp.Pharm., 36:622 (May, 1979)). Однако эти соединения неэффективны при невропатической боли.

Доступные терапии боли также имеют недостатки. Некоторые терапевтические агенты требуют пролонгированного применения, перед тем как пациент ощутит эффект. Другие существующие лекарства вызывают серьезные побочные эффекты у некоторых пациентов, и за субъектами нужно внимательно следить, чтобы гарантировать, что какие-либо побочные эффекты не являются чрезмерно угрожающими. Большинство существующих лекарств дают только временное облегчение боли и должны приниматься последовательно на суточной или недельной основе. С развитием заболевания количество лекарственного средства, необходимого для облегчения боли, часто увеличивается, таким образом увеличивая возможность вредных побочных эффектов.

Рецепторы NMDA определяют путем связывания N-метил-D-аспартат (NMDA) содержащего комплекса рецептора/ионного канала с несколькими различными идентифицированными доменами связывания. NMDA сам по себе представляет собой молекулу, структурно сходную с глутаматом (Glu), которая связывается на глутамат-связывающем сайте и является высокоселективной и сильнодействующей в активации рецептора NMDA (Watkins (1987); Olney (1989)).

Известны многие соединения, которые связываются на NMDA/Glu связывающем сайте (например, СРР, DCPP-ene, CGP 40116, CGP 37849, CGS 19755, NPC 12626, NPC 17742, D-AP5, D-AP7, CGP 39551, CGP-43487, MDL-100,452, LY-274614, LY-233536 и LY-233053). Другие соединения, которые называют неконкурентными антагонистами NMDA, связываются на других сайтах в NMDA рецепторном комплексе (примерами являются фенциклидин, дизоцилпин, кетамин, тилетамин, CNS 1102, декстрометорфан, мемантин, кинуреновая кислота, CNQX, DNQX, 6,7-DCQX, 6,7-DCHQC, R(+)-HA-966, 7-хлор-кинуреновая кислота, 5,7-DCKA, 5-иод-7-хлор-кинуреновая кислота, MDL-28,469, MDL-100,748, MDL-29,951, L-689,560, L-687,414, ACPC, ACPCM, ACPCE, аркаин, диэтилентриамин, 1,10-диаминодекан, 1,12-диаминододекан, ифенпродил и SL-82.0715). Эти соединения подробно рассмотрены Rogawski (1992) и Massieu et al., (1993) и в статьях, перечисленных там.

В дополнение к его физиологической функции глутамат (Glu) может быть нейротоксичным. Нейротоксичность Glu называют “эксайтотоксичностью”, поскольку нейротоксическое действие Glu, подобно его полезным свойствам, опосредовано процессом возбуждения (Olney (1990); Choi (1992)). В норме, когда Glu высвобождается у синаптического рецептора, он связывается только временно, а затем быстро удаляется от рецептора с помощью процесса, который транспортирует его обратно в клетку. В некоторых аномальных условиях, включая удар, эпилепсию и травму ЦНС, захвата Glu не происходит, и Glu накапливается около рецептора, приводя к устойчивому возбуждению электрохимической активности, что приводит к гибели нейронов, которые имеют рецепторы Glu. Многие нейроны в ЦНС имеют рецепторы Glu, таким образом эксайтотоксичность может вызывать огромное количество повреждений ЦНС.

Острое эксайтотоксическое повреждение может происходить как результат ишемических событий, гипоксических событий, травмы головного или спинного мозга, некоторых типов пищевого отравления, в которое вовлечен эксайтотоксический яд, такой как домоевая кислота, и опосредованной припадком нейрональной дегенерации, которая может являться результатом устойчивой эпилептической активности (эпилептический статус). Большое количество доказательств указывает на рецептор NMDA как на один из подтипов рецепторов, через которые Glu опосредует существенное количество повреждений ЦНС, и хорошо установлено, что антагонисты NMDA эффективны в защите нейронов ЦНС от эксайтотоксической дегенерации при этих синдромах острого повреждения ЦНС (Choi (1988); Olney (1990)).

В дополнение к нейрональному повреждению, вызванному острыми инсультами, избыточная активация рецепторов Glu может также вносить вклад в постепенно развивающиеся нейродегенеративные процессы, приводящие к гибели клеток при различных хронических нейродегенеративных заболеваниях, включая болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз, деменцию, связанную со СПИДом, болезнь Паркинсона и болезнь Хантигтона (Olney (1990)). Обычно считают, что антагонисты NMDA могут быть полезны при терапевтическом лечении таких хронических заболеваний.

В 1980-е гг. обнаружили, что РСР (фенциклидин) (также известный как “ангельская пыль”) действует как “сайт распознавания РСР” в ионном канале NMDA Glu рецептора. РСР действует как неконкурентный антагонист, который блокирует поток ионов через ионный канал NMDA. Совсем недавно стало очевидно, что лекарства, которые действуют на РСР сайт в качестве неконкуретных антагонистов NMDA, вероятно, обладают психотомиметическими побочными эффектами. Более того, в настоящее время известно, что некоторые конкурентные и неконкуретные антагонисты NMDA могут вызывать подобные патоморфологические эффекты в головном мозге крыс (Olney et al., (1991); Hargreaves et al., (1993)). Такие соединения также обладают психотомиметическими эффектами у людей (Kristensen et al., (1992); Herreng (1994); Grotta (1994)).

Сайт связывания глицина NMDA рецепторного комплекса отличается от сайтов связывания Glu и РСР. Также недавно было обнаружено, что NMDA рецепторы существуют в качестве нескольких подтипов, которые характеризуются различными свойствами глицинсвязывающего сайта рецептора. Многие соединения, которые связываются на сайте глицина NMDA рецептора, полезные для лечения удара и нейродегенеративных состояний, описаны в патентах США 5604227, 5733910, 5599814, 5593133, 5744471, 5837705 и 6103721.

Сущность изобретения

В настоящее время обнаружено, что некоторые соединения, которые проявляют свойство связывания с сайтом глицина NMDA рецептора, полезны для уменьшения боли и особенно для уменьшения невропатической боли.

Следовательно, в данном изобретении предложен способ лечения боли, при котором вводят уменьшающее боль эффективное количество любого соединения в соответствии со структурной формулой I:

где А представляет собой (СН₂)_n, где n имеет значение, выбранное из 0,1, 2, 3 или 4;

D выбран из 5- или 6-членной гетероарильной группировки или ее бензпроизводного, имеющих 1, 2 или 3 кольцевых атома, выбранных из кислорода, азота или серы; а

R₁ представляет собой галогено.

В конкретных воплощениях изобретения данный способ включает в себя введение уменьшающих боль эффективных количеств соединения в соответствии со структурной формулой I, где D выбран из пиридила, хинолила, пиразинила, пирадизинила, фуранила, бенз[b]фуранила, имидазолила, оксазолила, тиенила, бенз[b]тиенила и тиазолила.

В более конкретных воплощениях изобретения данный способ включает в себя введение уменьшающего боль эффективного количества соединения в соответствии со структурной формулой II, где

Еще более конкретные воплощения изобретения представляют собой такие, где данный способ включает в себя лечение соединением в соответствии со структурной формулой II, и D выбран из пиридила, хинолила, пиразинила, пирадизинила, фуранила, бенз[b]фуранила, имидазолила, оксазолила, тиенила, бенз[b]тиенила и тиазолила.

Еще более конкретные воплощения изобретения представляют собой такие, где данный способ включает в себя лечение примерным соединением, специально описанным здесь.

Другие аспекты изобретения представляют собой фармацевтические композиции, которые содержат соединение в соответствии со структурной формулой I; применение соединений в соответствии со структурной формулой I для изготовления лекарственных средств и фармацевтических композиций и способ, при котором соединения по изобретению связываются с сайтом глицина NMDA рецептора теплокровного животного, такого как человек, так, чтобы полезным образом ингибировать активность NMDA рецептора.

Подробное описание изобретения

Соединения по изобретению представляют собой те, которые находятся в пределах объема родового описания, и особенно те соединения, которые приведены в примерах ниже.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений по изобретению включают в себя соли присоединения кислоты, такие как метансульфонат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, цитрат, трис(гидроксиметил)аминометан, малеат, и соли, образованные с фосфорной и серной кислотами. В других воплощениях подходящие соли представляют собой основные соли, такие как соли щелочных металлов, например натрия, соли щелочно-земельных металлов, например кальция или магния, соли органических аминов, например триэтиламина, морфолина, N-метилпиперидина, N-этилпиперидина, прокаина, дибензиламина, холина, N,N-дибензилэтиламина, или аминокислот, таких как лизин.

Еще один аспект изобретения представляет собой способ получения соединений по изобретению, причем этот способ включает в себя следующие стадии:

а) получение Вос-защищенного гидразина в соответствии с одной из процедур, показанных на следующей схеме:

б) связывание указанного Вос-защищенного гидразина и циклизация продукта в соответствии со способом следующей схемы с образованием соединения в соответствии со структурной формулой I:

где CMC представляет собой 1-циклогексил-3-(2-морфолиноэтил)карбодиимида мето-р-толуолсульфонат;

“R/H/D” группа представляет собой “-A-D” группировку структурной схемы I;

и в вышеупомянутом способе:

R₁ такой, как определено для структурной формулы I.

Для применения соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для терапевтического лечения, которое может включать в себя профилактическое лечение, боли у млекопитающих, которые могут являться людьми, соединение может быть изготовлено в соответствии со стандартной фармацевтической практикой, в виде фармацевтической композиции.

Подходящие фармацевтические композиции, которые содержат соединение по изобретению, можно вводить обычными путями, например путем перорального, местного, парентерального, трансбуккального, назального, вагинального или ректального введения или путем ингаляции. Для этих целей соединение по изобретению может быть изготовлено в форме, например, таблеток, капсул, водных или масляных растворов, суспензий, эмульсий, кремов, мазей, гелей, назальных спреев, суппозиториев, тонко измельченных порошков или аэрозолей для ингаляции и стерильных водных или масляных растворов или суспензий или стерильных эмульсий для парентерального применения (включая внутривенное, внутримышечное или инфузию) способами, известными в данной области техники. Предпочтительным путем введения является пероральный путь с помощью таблетки или капсулы.

Кроме соединения по настоящему изобретению фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может также содержать один или более чем один другой фармакологически активный агент, либо такая фармацевтическая композиция может быть одновременно или последовательно введена совместно с одним или более чем одним другим фармакологически активным агентом.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению должны быть в норме введены так, чтобы субъект получал уменьшающую боль эффективную суточную дозу. Суточная доза может быть дана в разделенных дозах, как необходимо, при этом точное количество получаемого соединения и путь введения зависят от массы, возраста и пола пациента, которого лечат, и от конкретного заболевания, которое лечат, в соответствии с правилами, известными в данной области техники. Предпочтительный режим дозирования составляет один раз в сутки.

В дополнительном воплощении изобретения предложена фармацевтическая композиция, которая содержит соединение структурной формулы I, как определено здесь, или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемой добавкой, такой как эксципиент или носитель.

В еще одном воплощении изобретения предложено применение соединения структурной формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, в производстве лекарственного средства, полезного для связывания с сайтом глицина NMDA рецептора у теплокровного животного, такого как человек.

В еще одном воплощении изобретения предложен способ связывания соединения по изобретению с сайтом глицина NMDA рецептора теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в лечении боли, при котором указанному животному вводят эффективное количество соединения структурной формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли.

Определения:

Когда используется здесь, термин “алкил” включает в себя алкильные группы как с прямой, так и с разветвленной цепью, но ссылки на конкретные алкильные группы, такие как “пропил”, относятся к группировке с прямой цепью.

Когда используется здесь, термин “галогено” обозначает фторо, хлоро, бромо и йодо.

Когда используется здесь, термин “арил” обозначает ненасыщенное углеродное кольцо или его бензпроизводное. Конкретно арил обозначает фенил, нафтил или бифенил. Более конкретно арил обозначает фенил.

Когда используется здесь, термин “гетероарил” или “гетероарильное кольцо” обозначает, если не указано иначе, моноциклическое, бициклическое или трициклическое 5-14-членное кольцо, которое является ненасыщенным или частично насыщенным, с кольцевыми гетероатомами в количестве вплоть до пяти, выбранными из азота, кислорода и серы, причем -СН₂- группа, возможно, может быть заменена -С(O)-, а кольцевой атом азота может быть, возможно, окислен с образованием N-оксида. Примеры таких гетероарилов включают в себя тиенил, фурил, пиранил, пирролил, имидазолил, пиразолил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, пиридил, пиридил-N-оксид, оксопиридил, оксохинолил, пиримидинил, пиразинил, оксопиразинил, пиридазинил, индолинил, бензофуранил, бензимидазолил, бензотиазолил, хинолил, изохинолинил, хиназолинил, ксантенил, хиноксалинил, индазолил, бензофуранил и циннолинолил.

Когда используется здесь, термин “гетероциклил” или “гетероциклическое кольцо” обозначает, если не указано иначе, моно- или бициклическое- 5-14-членное кольцо, которое является полностью насыщенным, с кольцевыми гетероатомами, в количестве вплоть до пяти, выбранными из азота, кислорода и серы, причем -CH₂- группа, возможно, может быть заменена -С(O)-. Примеры таких гетероциклилов включают в себя морфолинил, пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, гомопиперидинил, гомопиперазинил и хинуклидинил.

Когда используется здесь, если возможные заместители выбраны из “одной или более чем одной” группы, следует понимать, что это определение включает в себя соединения, где все заместители выбраны из одной из указанных групп, и соединения, где заместители выбраны из более чем одной из указанных групп.

Обычно в способах, процессах и примерах, описанных здесь:

концентрирования осуществляли путем выпаривания с помощью роторного испарителя in vacuo;

операции осуществляли при температуре окружающей среды, то есть в диапазоне 18-26° С, и в атмосфере азота;

колоночную хроматографию (с помощью флэш-процедуры) осуществляли на кремнеземе Merck Kieselgel (Art. 9385), если не указано иначе;

выходы приведены только для иллюстрации и не обязательно являются максимально достижимыми;

структуру конечных продуктов формулы I обычно подтверждали с помощью ЯМР и масс-спектральных методик, спектры протонного магнитного резонанса определяли в DMSO-d₆, если не указано иначе, с использованием спектрометра Varian Gemini 2000, работающего при напряженности поля 300 МГц; химические сдвиги приведены в частях на миллион по отношению к тетраметилсилану в качестве внутреннего стандарта (δ шкала), и пиковые мультиплетности показаны таким образом: s, синглет; bs, широкий синглет; d, дублет; АВ или dd, дублет дублетов; t, триплет, dt, дублет триплетов; m, мультиплет; bm, широкий мультиплет; масс-спектральные данные бомбардировки быстрыми атомами (FAB) получали, используя спектрометр Platform (снабженный Micromass), работающий в электроспрее, и, как подходит, собирали данные либо положительных ионов, либо отрицательных ионов, в данной заявке приведены (М+Н)⁺; данные ИК получали с помощью Nicolet Avatar 360 FT-IR;

промежуточные соединения обычно полностью не охарактеризовывали, и чистоту обычно оценивали масс-спектральным (МС) или ЯМР анализом.

Использовали следующие обозначения и определения, имеющие следующие значения:

CDCl₃ обозначает дейтерированный хлороформ;

CMC обозначает 1-циклогексил-3-(2-морфолиноэтил)карбодиимида мето-р-толуолсульфонат;

DCM обозначает дихлорметан

DCU обозначает дициклогексилмочевину;

DHC обозначает 1,3-дициклогексилкарбодиимид;

DMAP обозначает 4-(диметиламино)пиридин;

DMF обозначает N,N-диметилформамид

DMSO обозначает диметилсульфоксид

м/с обозначает масс-спектроскопию

NMP обозначает N-метилпирролидинон

ЯМР обозначает ядерный магнитный резонанс

р.о. обозначает per os (перорально)

THF обозначает тетрагидрофуран

t.i.d. обозначает три раза в сутки

Примеры и тесты, описанные здесь, предназначены для иллюстрации, но не для ограничения изобретения.

Примеры:

Пример 1:

7-Хлор-4-гидрокси-2-(4-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дионаметансульфонат (трет-Бутокси)-N-[(4-пиридилметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору тpeт-бутилкарбазата (174 г, 1,36 моль) и безводного DMF (400 мл) в атмосфере азота добавляли триэтиламин (108 мл, 0,78 моль) с последующим добавлением 4-пиколилхлорида гидрохлорида (40,0 г, 0,243 моль). Реакционную смесь затем нагревали при 75° С в течение 5 ч и давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой (2 л), и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (4× 500 мл). Объединенные этилацетатные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток растворяли в диэтиловом эфире (1 л). Полученный раствор промывали последовательно водой (3× 400 мл) и солевым раствором (400 мл), а затем сушили над Na₂SO₄. Nа₂SO₄ отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением янтарного масла (130,4 г). Этот продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гексан:этилацетат (1:1) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердой кремовой пены (24,46 г, 45%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.36 (s, 9H), 3.90 (d, 2H, J=4,0 Гц), 5.04 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7.34 (d, 1 H, J=4,5 Гц), 8.48 (d, 1 H, J=4,5 Гц).

Диметил-7-хлор-4-гидроксихинолин-2,3-дикарбоксилат

Перемешиваемую смесь метил-2-амино-4-хлорбензоата (2,50 г, 13,5 ммоль) и диметилацетилендикарбоксилата (2,05 г, 14,4 ммоль) в трет-бутаноле (22 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 7 ч в атмосфере азота. После добавления дополнительного количества диметилацетилендикарбоксилата (1,16 г, 8,13 ммоль) и кипячения с обратным холодильником в течение еще 2,5 ч реакционной смеси давали охладиться до комнатной температуры и добавляли одной порцией mpem-бутоксид калия (1,56 г, 13,9 ммоль). Образовывался осадок и полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Данную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для отделения твердых веществ, которые промывали mpem-бутанолом и диэтиловым эфиром. Твердые вещества растворяли в воде и подкисляли 1 н. серной кислотой для образования осадка. Полученную смесь экстрагировали DCM, и объединенные экстракты промывали солевым раствором и водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением зеленого твердого вещества. Перекристаллизация этого материала из метанола давала соединение, указанное в заголовке (1,15 г, 47%), в виде твердого кремового вещества, т.пл.232-233° С; МС (Сl):296 (М+Н). Анализ для C₁₃H₁₀ClNO₅: вычислено: С, 52,81; Н, 3,41; N, 4,74; найдено: С, 52,75; Н, 3,47; N, 4,69.

3-Карбометокси-7-хлор-4-гидроксихинолин-2-карбоновая кислота

К перемешиваемой суспензии диметил-7-хлор-4-гидроксихинолин-2,3-дикарбоксилата (1,0 г, 3,38 ммоль) в воде (20 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (0,27 г, 6,75 ммоль). При добавлении суспензия растворялась. Реакционную смесь нагревали до 60° С в течение 1 ч. После этого времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и подкисляли концентрированной соляной кислотой. Продукт затем экстрагировали в диэтиловый эфир и этилацетат. Органические экстракты сушили над МgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества (900 мг). Этот материал очищали с помощью перекристаллизации, используя систему растворителей этилацетат/гексан, с получением соединения, указанного в заголовке (571 мг, 60%), в виде белого твердого вещества, т.пл.296° С (разлагается). МС (Cl)=238 (М+Н). Анализ для С₁₂Н₈NO₅Сl· 0,45 СН₃СO₂СН₂СН₃· 0,10 Н₂O: вычислено: С, 51,30; Н, 3,68; N, 4,34; найдено: С, 51,28; Н, 3,62; N, 3,97. ¹H-ЯМР 8.22 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7.28 (dd, J=8,7; 1,8 Гц, 1Н), 3.90 (s, 3Н).

3-Карбометокси-2-пирролидинокарбамид-7-хлор-4-гидроксихиноли

К суспензии 3-карбометокси-7-хлор-4-гидроксихинолин-2-карбоновой кислоты (2,25 г, 8,0 ммоль) в THF (20 мл) при температуре окружающей среды в атмосфере азота добавляли DHC (1,65 г, 8,0 ммоль) и пирролидин (0,596 г, 8,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч, после этого времени побочный продукт - мочевину - удаляли фильтрованием. Желаемый продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на колонке, используя 5% метанол в хлороформе, с получением соединения, указанного в заголовке (2,52 г, 94,3%), в виде твердого вещества рыжевато-коричневого цвета, т.пл.=215° С; МС (Cl): 335 (М+Н), 300 МГц ¹Н-ЯМР (DMSO-d₆): δ 8.12 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7.60 (d, 1H, J=1,8 Гц), 7,47 (dd, 1H, J=8,8; 2,0 Гц), 3,69 (s, 3Н), 3,40-3,49 (m, 2Н), 3.27-3,33 (m, 2H), 1,80-1,96 (m, 4H).

7-Хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновая кислота

К суспензии 3-карбометокси-2-пирролидинокарбамид-7-хлор-4-гидроксихинолина (2,52 г, 7,5 ммоль) в деионизированной воде (40 мл) добавляли по каплям раствор (20 мл) водного гидроксида калия (882 мг, 15,75 ммоль). При завершении добавления реакционную смесь нагревали до 60° С. Через 3 ч реакционную смесь фильтровали для удаления небольшого количества нерастворимого материала. Фильтрат затем подкисляли до рН 1, при этом образовался белый осадок. Твердое вещество выделяли путем фильтрования под вакуумом, промывали водой и сушили при 30° С в вакууме в течение 16 ч. При этом получали соединение, указанное в заголовке (1,5 г, 64%), в виде белого твердого вещества, т.пл.=225-8° С; МС (Сl): 321 (М+Н). 300 МГц ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): δ 8.28 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.77 (s, 1Н), 7,64 (d, 1H, J=8,7), 3,52-3,57 (m, 2H), 3,17-3,19 (m, 2H), 1,83-1,98 (m, 4H).

N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)1-N-(4-пиридилметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты (24,29 г, 75,73 ммоль) и безводного THF (1175 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (50,55 г, 119,34 ммоль) порциями (35 г, затем 15,55 г через 10 мин). После перемешивания реакционной смеси в течение дополнительных 20 мин быстро добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(4-пиридилметил)амино]карбоксамида (22,0 г, 98,5 ммоль) и THF (580 мл), и данную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали DCM (300 мл). Фильтрат и промывные воды объединяли и добавляли дополнительное количество DCM (800 мл). Полученный раствор промывали водой (2× 500 мл) и затем сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 28,90 г желтой пены. Эту пену обрабатывали диэтиловым эфиром (800 мл) и полученную смесь перемешивали и затем фильтровали. Осадок на фильтре сушили при 45° С в вакууме с получением желаемого соединения (24,3 г, 61%) в виде желтого порошка.

7-Хлор-4-гидрокси-2-(4-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

К перемешиваемой смеси N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(4-пиридилметил)карбоксамида (24,0 г, 45,62 ммоль) и безводного THF (960 мл) в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (120 мл, 177,7 г, 1,85 моль) всю сразу. Смесь перемешивали в течение ночи, а затем фильтровали для отделения твердых веществ. Собранные твердые вещества последовательно промывали THF (2× 100 мл), метанолом (2× 50 мл) и диэтиловым эфиром (100 мл). Осадок на фильтре (13,4 г) затем суспендировали в метаноле (250 мл), и полученную смесь обрабатывали ультразвуком в течение 20 минут, а затем фильтровали. Собранные твердые вещества промывали метанолом (2× 100 мл) и диэтиловым эфиром (100 мл), а затем сушили при 45° С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (12,1 г, 59%), в виде желтого порошка, т.пл.>250° С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 2.32 (s, 3H), 5.36 (s, 2H), 7,49 (dd, 1H, J=8,1 Гц; J=2,1 Гц), 7,86 (d, 1H, J=6,6 Гц), 8,06 (d, 1H, J=2,1 Гц), 8,12 (d, 1H, J=8,1 Гц), 8,82 (d, 1H, J=6,6 Гц), 12,6 (br s, 1H), 12,84 (br s, 1H). Вычислено для С₁₇Н₁₁СlN₄O₃· СН₃SО₃Н· 0,8Н₂O: С, 46,47; Н, 3,60; N, 12,04; найдено: С, 46,39; Н, 3,65; N,11,98.

Пример 2: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(3-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат (трет-Бутокси)-N-[(3-пиридилметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору mpem-бутилкарбазата (203,6 г, 1,54 моль) и безводного DMF (300 мл) в атмосфере азота добавляли триэтиламин (128 мл, 0,92 моль), а затем 3-пиколилхлорида гидрохлорид (50,0 г, 0,30 моль) в виде суспензии в DMF (300 мл). Реакционную смесь нагревали при 75° С в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (2,4 л). Полученную смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3× 800 мл). Водный слой насыщали солью и экстрагировали диэтиловым эфиром (3× 800 мл). Объединенные экстракты промывали водой (1× 1 л), солевым раствором (1× 1 л), а затем сушили над Na₂SO₄ Na₂SO₄ отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя диэтиловым эфиром, с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердого кремового вещества (23,3 г, 34%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.36 (s, 9H), 3.88 (d, 2H, J=4,0 Гц), 4,96 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7,33 (dd, 1H, J=7,7 Гц, J=4,8 Гц), 7,71 (d, 1H, J=7,7 Гц), 7,44 (d, 1H, J=4,7 Гц), 8,49 (s, 1H).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(3-пиридилметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (20 г, 62,4 ммоль) и THF (800 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (40,0 г, 94,4 ммоль). Быстро добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(3-пиридилметил)амино]карбоксамида (20,9 г, 93,6 ммоль) и THF (450 мл), и данную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали THF, суспендировали с DCM и фильтровали. Фильтраты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением пены. Эту пену перемешивали с диэтиловым эфиром (200 мл) и фильтровали. Осадок на фильтре обрабатывали ультразвуком с диэтиловым эфиром (200 мл), фильтровали, промывали диэтиловым эфиром и сушили при 40° С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде кремового порошка (32,8 г, 100%).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(3-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

К перемешиваемому раствору N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(3-пиридилметил)карбоксамида (32,8 г, моль) и THF (1 л) в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (150 мл, 222 г, 2,31 моль) в течение 10 мин. Данную смесь перемешивали в течение ночи, а затем фильтровали для отделения твердых веществ. Собранные твердые вещества промывали THF. Осадок на фильтре суспендировали в метаноле, обрабатывавали ультразвуком (30 мин) и фильтровали. Твердые вещества ресуспендировали в метаноле, обрабатывавали ультразвуком (30 мин) и фильтровали. Собранные твердые вещества промывали метанолом, а затем сушили при 100° С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (19,4 г, 66%), в виде белого твердого вещества, т.пл.>300° С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 2,33 (s, 3Н), 5,29 (s, 2H), 7,46 (dd, 1H, J=9,0 Гц; J=2,1 Гц), 7.94 (dd, 1H, J=9,0 Гц, J=5,6 Гц), 8,04 (d, 1H, J=1,8 Гц), 8,16 (d, 1H, J=8,7 Гц), 8,37 (d, 1H, J=8,1 Гц), 8,82 (d, 1H, J=4,8 Гц), 8,89 (s, 1H). Вычислено для С₁₇Н₁₁СlNО₃· СН₃SО₃Н· H₂О: С, 46,11; Н, 3,66; N, 11,95; найдено: С, 46,34; Н, 3,61; N, 11,94.

Пример 3:

7-Хлор-4-гидрокси-2-(2-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат (трет-Бутокси)-N-[(2-пиридилметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору mpem-бутилкарбазата (174 г, 1,53 моль) и безводного DMF (400 мл) в атмосфере азота добавляли триэтиламин (130 мл, 0,94 моль), а затем 2-пиколилхлорида гидрохлорид (54,0 г, 0,33 моль). Реакционной смеси давали перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 1 ч, затем нагревали при 70° С в течение 3 ч и давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли смесью этилацетата и диэтилового эфира (1:1) и промывали солевым раствором и экстрагировали. За водным слоем наблюдали с помощью ТСХ (элюент: 100% диэтиловый эфир) и экстрагировали несколько раз этилацетатом (200 мл) до тех пор, пока продукт не исчез. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением янтарного масла (-100 г), которое кристаллизовалось. Материал растирали со смесью диэтиловый эфир/гексаны (1:1), фильтровали и сушили при пониженном давлении с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердого кремового вещества (33,4 г, 45% выход). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1,38 (s, 9H), 3,96 (d, 2H, J=4,0 Гц), 4,98 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7,24 (dd, 1Н, J=7,8 Гц, J=7,8 Гц), 7,48 (d, 1H), 7,74 (dd, 1H, J=7,5 Гц, J=7,8 Гц), 8,32 (s, br, 1H),8,47(d,1H,J=4,8 Гц).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)1-N-(2-пиридилметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (17,5 г, 54,7 ммоль) и безводного THF (900 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (35,7 г, 81,2 ммоль) порциями (25,0 г, затем 10,7 г через 10 мин). После перемешивания реакционной смеси в течение дополнительного часа добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(2-пиридилметил)амино]карбоксамида (16,5 г, 73,9 ммоль) и THF (400 мл), и данную смесь энергично перемешивали в течение ночи. За реакцией наблюдали с помощью ТСХ (10% метанол/DCM) и определяли ее завершение. Для отделения осажденных твердых веществ реакционную смесь фильтровали, и собранные твердые вещества промывали THF. Фильтрат и промывные воды объединяли и концентрировали в вакууме. Осадок на фильтре суспендировали в водном бикарбонате и солевом растворе и экстрагировали DCM (3× 300 мл). Эти экстракты объединяли с ранее концентрированными органическими экстрактами и промывали бикарбонатом, солевым раствором (3х) и сушили над Na₂SO₄ Nа₂SO₄ отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 5% изо-пропанолом в хлороформе. После концентрирования желаемых фракций в вакууме соединение, указанное в заголовке, выделяли в виде светлого рыжевато-коричневого порошка (24,3 г, 61% выход).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(2-пиридилметил)-1.2.5.10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

К перемешиваемой смеси N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(2-пиридилметил)карбоксамида (24,0 г, 0,045 моль) и безводного THF (800 мл) в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (100 мл, 148 г, 1,54 моль) всю сразу. Данную смесь перемешивали в течение ночи, а затем фильтровали для отделения твердых веществ. Собранные твердые вещества последовательно промывали THF (2× 100 мл) и диэтиловым эфиром (2× 100 мл). Осадок на фильтре (15,8 г) затем суспендировали в метаноле (250 мл), и полученную смесь обрабатывали ультразвуком в течение 30 мин, а затем фильтровали. Собранные твердые вещества промывали метанолом (2× 100 мл) и диэтиловым эфиром (100 мл), а затем сушили при 35° С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (12,1 г, 59%), в виде оранжевого порошка, т.пл.>300° С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 2,33 (s, 3H), 5,35 (s, 2H), 7,46 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7,64 (d, 1H, J=7,8 Гц), 7,68 (dd, 1H, J=4,8 Гц, J=6,6 Гц), 8,02 (s, 1H), 8,14 (d, 1H, J=8,7 Гц), 8,19 (dd, 1H, J=6,6 Гц, J=7,8 Гц), 8,73 (d, 1H, J=4,8 Гц), 10,06 (s, br, 1H), 12,84 (s, br, 1H). Вычислено для С₁₇Н₁₁СlN₄O₃· СН₃SO₃Н: С, 47,95; Н. 3,35; N, 12,43; найдено: С, 47,93; Н, 3,42; N, 12.01.

Пример 4: 7-xлop-4-гидрокси-2-бензо[d]фуран-2-илметил-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

N-(1-aзa-2-бензо[d]фуран-2-илвинил)(тpeт-бутокси)кapбoкcaмид

К раствору бензофуран-2-карбоксальдегида (5,0 г, 34 ммоль) в THF (200 мл) добавляли mpem-бутил-карбазат (4,5 г, 34 ммоль), затем концентрированную HCl (10 капель) при комнатной температуре при перемешивании. Реакционную смесь перемешивали 24 ч, в это время THF удаляли в вакууме, и полученное твердое вещество растирали с гексанами и фильтровали с получением соединения, указанного в заголовке (9 г, 100%), в виде белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11,12 (br s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,67 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,62 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,37 (dd, J=7,6; 7,6 Гц, 1H), 7,27 (dd, J=7,6; 7,6 Гц, 1H), 7,21 (s, 1H); 1,48 (s, 9H).

N-[(бeнзo[d]фvpaн-2-илмeтил)aминo](тpem-бvтoкcи)кapбoкcaмид

К раствору N-(1-аза-2-бензо[d]фуран-2-илвинил)(трет-бутокси)карбоксамида (4,0 г, 15 ммоль) в метаноле (75 мл) добавляли цианоборгидрид натрия (7,2 г, 115 ммоль) и уксусную кислоту (10 мл). Данную смесь нагревали до 65° С в течение 4 ч. ТСХ анализ (1:1, гексаны : этилацетат) показал, что исходный материал остался, и добавляли дополнительное количество цианоборгидрида натрия (примерно 2 г). Еще через 2 ч никакого исходного материала не осталось, и реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и метанол удаляли в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате и промывали последовательно насыщенным водным NаНСО₃, водой и солевым раствором и затем сушили над Na₂SO₄. Данную смесь фильтровали и концентрировали с получением соединения, указанного в заголовке (3,4 г, 13 ммоль, 85%), в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹ Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 8,36 (s, 1H), 7,57 (d, J=7,0 Гц, 1H), 7,51 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,22 (m, 2Н), 6,74 (s, 1H), 5,01 (brs, 1H), 4,00 (s, 2H), 1,37 (s, 9H).

N-{N-(бeнзo[d]фуран-2-илметил)[7-xлop-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)1карбониламино}(трет-бутокси)карбоксамид

К перемешиваемой суспензии 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (4,1 г, 13 ммоль) в THF (75 мл) добавляли 1-циклогексил-3-(2-морфолиноэтил)-карбодиимида мето-пара-толуолсульфонат (10,8 г, 26 ммоль). К данной перемешиваемой ярко-желтой смеси добавляли раствор N-[(бензо[d]фуран-2-илметил)амино](трет-бутокси)карбоксамида (3,3 г, 13 ммоль) и N,N-диметиламинопиридина (230 мг, 1,9 ммоль) в THF (25 мл) при перемешивании. Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 4 ч, затем охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением твердой желтой пены, которую хроматографировали на силикагеле (10% метанол в CH₂Cl₂) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бледно-желтого твердого вещества. Этот материал использовали на следующей стадии без идентификации.

7-Хлор-4-гидрокси-2-бензо[d]фуран-2-илметил-1.2.5.10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1.10-дион

К смеси N-{N-(бензо[d]фуран-2-илметил)[7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-карбониламино}(трет-бутокси)карбоксамида (6,2 г, 11 ммоль) в THF (150 мл) добавляли раствор метансульфоновой кислоты комнатной температуры (29 мл, 44 ммоль) в THF (70 мл). Этот раствор перемешивали в течение ночи, после чего добавляли воду (~500 мл), чтобы индуцировать осаждение продукта. Твердое вещество кремового цвета собирали и промывали водой и диэтиловым эфиром. Данный материал сушили при 30° С при 500 м Торр (66,65· 10^-3 КПа) в течение ночи с получением соединения, указанного в заголовке, в виде грязно-белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 12.74 (br s, 1H), 11.96 (br s, 1H), 8.15 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8.04 (d, J=1.6 Гц, 1Н), 7.59 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 7.53 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7.44 (dd, J=2,0;8,9 Гц, 1H), 7.25 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 5.27 (s, 2H). Вычислено для С₂₀Н₁₂N₃O₄Сl-0,1Н₂O-0,3СН₃SO₃Н: С, 57,45; Н, 3,18; N, 9,90; найдено: С, 57.61;H, 3,20; N, 9,91.

Пример 5: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(хинолин-4-илметил)-1.2.5.10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1.10-дион

Соединение, указанное в заголовке, синтезировали способом по Примеру 4, используя хинолин-4-карбоксальдегид в качестве исходного материала. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 12.87 (br s, 1H), 12.10 (br s, 1H), 9.16 (d, J=5,4 Гц, 1H), 8.61 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8.30 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8.19-8.15 (m, 2H), 8.08 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8.01 (dd, J=7,5; 7,8 Гц, 1H), 7.74 (d, J=5,4 Гц, 1H), 7.47 (dd, J=1,8; 8,7 Гц, 1H),5.84(s,1H).

Пример 6: 7-хлор-4-гидрокси-2-(пиразин-2-илметил)-1.2.5.10-тетрагидропиридазино[4.5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

2-Хлорметилпиразин

2-Метилпиразин (1,0 мл, 22 ммоль) в тетрахлориде углерода (80 мл) обрабатывали N-хлорсукцинимидом (4,27 г, 31,5 ммоль) и бензоил-пероксидом (0,26 г, 1,1 ммоль). Данную смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение 7 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Твердые вещества фильтровали через кизельгур и промывали DCM. Фильтрат промывали водным тиосульфатом натрия (насыщенный, 1х), водным бикарбонатом натрия (насыщенный, 1х), водой (1х) и водным хлоридом натрия (насыщенный, 1х). Органический слой, который содержит 5-10% а,а-дихлорированного материала, сушили над Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и использовали непосредственно в следующей реакции. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 5 4.88 (s, 2H), 8.65-8.68 (m, 2H),8.85(s,1H).

(трет-Бутокси)-N-[(пиразин-2-илметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору 2-хлорметилпиразина (1,2 г, 93 ммоль) и безводного DMF (16 мл) добавляли mpem-бутилкарбазат (6,3 г, 48 ммоль) и триэтиламин (2,6 мл, 19 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь затем нагревали при 75° С в течение 17 ч и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали диэтиловым эфиром (5х). Объединенные эфирные экстракты промывали солевым раствором и сушили над Na₂SO₄. Na₂SO₄ отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого масла (1 г). Масло подвергали флэш-хроматографии (силикагель, 2-5% градиент метанола в DCM) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде коричневого воскообразного твердого вещества (1,64 г, 79%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆, TFA (трифторуксусная кислота) встряхивание): δ 1.44 (s, 9Н), 4.53 (s, 2H), 8.71-8.78 (m, 2H), 8,81 (s, 1H).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(пиразин-2-илметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (2,3 г, 7,2 ммоль) и безводного THF (100 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (4,56 г, 10,8 ммоль). После перемешивания 20 мин реакционную смесь обрабатывали раствором (трет-бутокси)-N-[(пиразин-2-илметил)амино] карбоксамида (1,6 г, 7,1 ммоль) и DMAP (46 мг, 0,4 ммоль) в THF (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 суток и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали THF. Объединенный фильтрат и промывные воды концентрировали с получением коричневой пены (4,9 г). Эту пену подвергали флэш-хроматографии (силикагель, 2% метанол/DCM) с получением соединения, указанного в заголовке (3,1 г, 82%).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(пиразин-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

К перемешиваемой смеси N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(пиразин-2-илметил)карбоксамида (3,1 г, 5,9 ммоль) и безводного THF (100 мл) в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (13,5 мл, 0,21 моль). Данную смесь перемешивали в течение ночи, фильтровали, и собранное твердое вещество промывали THF. Твердое вещество обрабатывали метанолом, и данную смесь обрабатывали ультразвуком в течение 1 ч. Твердое вещество снова собирали путем фильтрования, промывали метанолом и сушили при 50° С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (2,0 г, 80%), в виде белого порошка, т.пл.235-245° С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 2.38 (СН₃СО₂Н, s, 3Н), 5.27 (s, 2H), 7.44 (dd, 1H, J=1,8; 8,7 Гц), 8.04 (d, 1H, J=1,8 Гц), 8.14 (d, 1H, J=8,7 Гц), 8.58 (dd, 2H, J=2,4; 7,5 Гц), 8.63 (s, 1H). Вычислено для C₁₆H₁₀ClN₅O₃· CH₃SO₃H· H₂O: С, 43,46; Н, 3,43; N, 14,90; найдено: С, 43,28; Н, 3,34; N, 15,17.

Пример 7: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(5-изоксазолино)метил-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дионтpeт-Бутиловый эфир N’-изоксазол-5-илметил-гидразинкарбоновой кислоты

Смесь 5-бромметил-изоксазола (1,62 г, 10 ммоль), mpem-бутил-карбазата (5,29 г, 40 ммоль) и карбоната натрия (2,76 г, 20 ммоль) в DMF (25 мл) нагревали до 80° С в атмосфере азота в течение 6 ч. Данную смесь охлаждали и разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (200 мл). Органический слой промывали солевым раствором (3× 50 мл) и сушили над MgSO₄. Растворитель удаляли с помощью роторного испарителя. Оставшийся DMF и избыток тpeт-бутилкарбазата удаляли путем перегонки под вакуумом (50 мТорр (6,665· 10^-3 КПа), 80° С). Остаток подвергали хроматографии (силикагель, смесь 1/1 этилацетат/гексан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (1,01 г, 49%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.38 (s, 9H), 4.01 (s, 2H), 5.13 (bs, 1H), 6.38 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.48 (s,1H).

трет-Бутиловый эфир N’-[7-хлор-4-гидрокси-2-(пирролидин-1-карбонил)-хинолин-3-карбоксил]-N’-изоксазол-5-илметил-гидразинкарбоновой кислоты

К перемешиваемой суспензии 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (1,51 г, 4,7 ммоль) в THF (50 мл) добавляли CMC (4,24 г, 10 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение пяти минут. К данной смеси добавляли раствор трет-бутилового эфира N’-изоксазол-5-илметил-гидразинкарбоновой кислоты (1,0 г, 4,7 ммоль) и DMAP (0,06 г, 0,5 ммоль) в THF (10 мл). Данную смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение 1,5 ч, затем оставляли стоять при комнатной температуре в течение 16 ч. Твердые вещества отфильтровывали и промывали DCM (2× 50 мл). Объединенный фильтрат упаривали досуха с помощью роторного испарителя. Оставшееся твердое вещество подвергали хроматографии (силикагель, смесь 1/9 метанол/DCM) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде кремовой пены (2,09 г, 86%). МС (Cl) m/z 514/516.

7-Хлор-4-гидрокси-2-(5-изоксазолино)метил-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

К раствору тpeт-бутилового эфира N’-[7-хлор-4-гидрокси-2-(пирролидин-1-карбонил)-хинолин-3-карбоксил]-N’-изоксазол-5-илметил-гидразинкарбоновой кислоты (1,0 г, 1,94 ммоль) в THF (50 мл) добавляли метансульфоновую кислоту (5,2 мл). Через 18 ч растворитель удаляли с помощью роторного испарителя, и продукт осаждали путем добавления воды (100 мл). Твердое вещество собирали путем фильтрования под вакуумом и промывали водой (2× 50 мл), затем сушили в вакууме (500 мТорр (66,65· 10^-3 КПа), 30° С) в течение 16 ч. Твердое вещество суспендировали в диэтиловом эфире (45 мл) и метаноле (5 мл) и обрабатывали ультразвуком в течение 10 минут. Твердое вещество собирали путем фильтрования под вакуумом, промывали диэтиловым эфиром (2× 30 мл) и сушили в вакууме (500 мТорр (66,65· 10^-3 КПа), 30° С) в течение 18 ч. В результате получили соединение, указанное в заголовке, в виде желтого твердого вещества (0,54 г, 81%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 5.27 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 7.45 (dd, 1H, J₀=8,7 Гц, J_m=1,8 Гц), 8.03 (d, 1Н, J_m=1,8 Гц), 8.15 (d, 1H, J₀=8,7 Гц), 8.53 (s, 1H, J_m=1,8 Гц), 11.99 (s, 1H), 12.82 (s, 1H). Вычислено для C₁₅H₉ClN₄O₄· 0,4 H₂O: С, 51,20; Н, 2,81; N, 15,92; найдено: С, 51,48-51,33; Н, 2,79-2,77; N, 15,60-15,57.

Пример 8; 7-Хлор-4-гидрокси-2-(пиримидин-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

Соединение, указанное в заголовке, синтезировали способом Примера 7, используя 4-хлорметилпиримидин, полученный как описано Barnes, J.H., et al Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther. 1988, 23, 211-216, в качестве исходного материала. ¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 12.77 (br s, 1H), 9.12 (d, J=1,2 Гц, 1Н), 8.74 (d, J=5,4 Гц, 1H), 8.15 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8.05 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7.45 (dd, J=2,1; 8,7 Гц, 1H), 7.40 (d, J=5,1 Гц, 1H), 5.20 (s, 2H).

Пример 9: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(Фуран-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

N-1-Аза-2-(2-фуранил)винил)(тpeт-бутокси)карбоксамид

К перемешиваемой суспензии тpeт-бутил-карбазата (131,5 г, 0,99 моль) в гексане (1000 мл) добавляли 2-фуральдегид (91,9 г, 0,95 моль). Суспензию кипятили с обратным холодильником в течение 2,5 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Полученное рыжевато-коричневое твердое вещество фильтровали, сушили и использовали без дальнейшей очистки в следующей реакции (200 г, 99%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.52 (s, 9H). 6.45 (dd, 1H, J=3,3; 1,2 Гц), 6.71 (d, 1H, J=3,3 Гц), 7.47 (d, 1H, J=1,2 Гц), 7.91 (s, 1H).

(тpeт-Бутокси)-N-[(2-Фуранилметил)амино]карбоксамид

Литровую трехгорлую круглодонную колбу снабжали дополнительной воронкой, впускным отверстием для азота и верхней механической мешалкой. Аппарат сушили в вакууме и промывали равномерным потоком газообразного азота. Колбу загружали гидридом лития алюминия (7,75 г, 0,20 моль) и THF (30 мл). N-1-Аза-2-(2-фуранил)винил)(тpeт-бутокси)карбоксамид (20 г, 0,095 моль) растворяли в THF (250 мл) и затем медленно добавляли к перемешиваемой суспензии гидрида лития алюминия в течение 30 мин. Любой остаток, оставшийся в дополнительной воронке, смывали в колбу путем промывания THF (2× 30 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, охлаждали на ледяной бане, а затем осторожно гасили насыщенным водным раствором Na₂SO₄. Полученную смесь фильтровали, и собранные твердые вещества промывали THF. Объединенный фильтрат и промывные воды концентрировали до масла, которое перемешивали в течение 18 ч с гексанами (примерно 600 мл). Полученную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали с получением желаемого материала в виде желтого масла (10,0 г, 50%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.46 (s, 9H), 3.99 (d, 2H, J=4,9 Гц), 4.21 (br s, 1H), 6.17 (br s, 1H), 6.24 (d, 1H, J=3,0 Гц), 6.32 (dd, 1H, J=3,0; 1,2 Гц), 7.38 (d, 1H. J=1.2 Гц).

(+/-)-N-[(тpeт-Бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(2-фуранилметил)карбоксамид

К перемешиваемой суспензии 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (26,99 г, 84,3 ммоль) в THF (1300 мл) добавляли ди-изо-пропилкарбодиимид (13,94 г, 110 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. К данной смеси добавляли по каплям раствор (трет-бутокси)-N-[(2-фуранилметил)амино]карбоксамида (22,9 г, 103 ммоль) в THF (200 мл). После перемешивания реакционной смеси в течение 18 ч ее концентрировали в вакууме до коричневой смолы, которую растирали с хлороформом. Полученную смесь фильтровали, промывали хлороформом и сушили. Этот материал использовали без дальнейшей очистки в следующей реакции (масса материала примерно 30 г).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(2-фуранилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

К перемешиваемому раствору (+/-)-N-[(тpeт-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(2-фуранилметил)карбоксамида (29,00 г, 56,3 ммоль) в THF (1000 мл) добавляли метансульфоновую кислоту (118 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали на 3 л ледяной воды, и полученную смесь фильтровали с получением кремового твердого вещества. Этот материал растворяли в горячем THF (примерно 1 л) и затем концентрировали до половины объема. Полученную суспензию выливали на ледяную воду (2 л), и через 20 мин данную смесь фильтровали. Собранный материал сушили с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (14,4 г, 74%; т.пл.>265° С). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 5.08 (s, 2H), 6.37 (d, 1H, J=3,0 Гц), 6.42 (dd, 1H, J=3,0; 1,5 Гц), 7.43 (d, 1H, J=7,8 Гц), 7.54 (s, 1H), 8.00 (d, 1H, J=1,5 Гц), 8.14 (d, 1H, J=8,7 Гц). Вычислено для С₁₆Н₁₀СlN₃O₄: С, 55,91; Н, 2,93; N, 12,23; найдено: С, 56,10; Н, 2,98; N, 12,03.

Пример 10: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(фуран-3-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

N-1-Аза-2-(3-фурил)винил)(тpeт-бутокси)карбоксамид

К раствору фуран-3-карбоксальдегида (2,0 г, 21 ммоль) в THF (100 мл) добавляли трет-бутил-карбазат (2,8 г, 21 ммоль) и концентрированную HCI (5 капель). Данный раствор перемешивали в течение 6 ч и концентрировали. Полученное твердое вещество растирали с гексанами с получением соединения, указанного в заголовке (4,2 г, 20 ммоль, 97%), в виде твердого вещества персикового цвета. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 10.77 (br s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.71 (dd, J=1,5; 1,5 Гц, 1H), 6.77 (d, J=1,5 Гц, 1Н), 1.45 (s, 9H).

(тpeт-Бутокси)-N-[(3-фурилметил)амино]карбоксамид

К раствору N-1-аза-2-(3-фурил)винил)(тpeт-бутокси)карбоксамида (2,0 г, 9,5 ммоль) в метаноле (50 мл) добавляли цианоборгидрид натрия (3,0 г, 48 ммоль) и уксусную кислоту (6 мл). Раствор нагревали до 65° С в течение 1 ч. Данную смесь затем охлаждали до комнатной температуры, гасили водой и метанол удаляли в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате и промывали насыщенным бикарбонатом натрия, водой и солевым раствором и затем сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (4:1 гексаны:этилацетат) с получением соединения, указанного в заголовке (930 мг, 4,4 ммоль, 46%), в виде прозрачного масла. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 8.26 (br s, 1H). 7.58 (dd, J=1,5; 1,5 Гц, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.42 (d, J=1,2 Гц, 1H), 4.64 (br s, 1H), 3.69 (s, 2H), 1.39(s,9H).

(тpeт-Бутокси)-N-{[7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-3-(фурилметил)карбониламино}карбоксамид

К перемешиваемой суспензии 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (1,4 г, 4,4 ммоль) в THF (25 мл) добавляли CMC (3,7 г, 8,8 ммоль). К данной перемешиваемой ярко-желтой смеси добавляли раствор (тpeт-бутокси)-N-[(3-фурилметил)амино]карбоксамида (930 мг, 4,4 ммоль) и N,N-диметиламинопиридина (80 мг, 660 мкмоль) в THF (20 мл) при перемешивании. Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 3 ч, затем охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением твердой желтой пены, которую хроматографировали на силикагеле (10% метанол-СН₂Сl₂) с получением соединения, указанного в заголовке (2,1 г, 4,1 ммоль, 93%), в виде бледно-желтого твердого вещества. Этот материал использовали непосредственно на следующей стадии.

7-Хлор-4-гидрокси-2-(фуран-3-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

К смеси (тpeт-бутокси)-N-{[7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-3-(фурилметил)карбониламино}карбоксамида (1,4 г, 2,8 ммоль) в THF (30 мл) добавляли раствор метансульфоновой кислоты комнатной температуры (7,2 мл, 110 ммоль) в THF (25 мл). Этот раствор перемешивали в течение ночи, в это же время добавляли воду, чтобы индуцировать осаждение продукта. Твердое вещество собирали, промывали водой и диэтиловым эфиром и обрабатывали ультразвуком в течение 15 мин в 50 мл 10% метанола в растворе диэтилового эфира. Полученное желтое твердое вещество собирали, промывали диэтиловым эфиром и сушили при 30° С и 50 мТорр (6,665· 10^-3 кПа) в течение 3 ч с получением соединения, указанного в заголовке (750 мг, 2,1 ммоль, 75%), в виде бледно-желтого твердого вещества. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 12.63 (br s, 1H), 11.91 (s, 1H), 8.13 (d, J=8,7 Гц, 1H), 8.02 (d, J=1.5 Гц, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.61 (d, J=1,5 Гц, 1Н), 7.43 (dd, J=1,8; 8,7 Гц, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.92 (s, 2H). Вычислено для С₁₆Н₁₀N₃O₄Сl· 0,1 Н₂O: С, 55,62; Н, 2,98; N, 12,16; найдено: С, 55,67; Н, 3,15; N. 11,77.

Пример 11: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(тиен-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

Соединение, указанное в заголовке, синтезировали способом Примера 4, используя тиофен-2-карбоксальдегид в качестве исходного материала. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 12.71 (br s, 1H), 11.91 (s, 1H), 8.14 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 8.02 (s, 1H), 7.42-7.45 (m, 2H), 7.10 (d, J=3,0 Гц, 1H), 6.98 (dd, J=3,6; 5,1 Гц, 1H), 5.23 (s, 2H).

Пример 12: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(тиен-3-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

Соединение, указанное в заголовке, синтезировали способом Примера 4, используя тиофен-3-карбоксальдегид в качестве исходного материала. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 12.64 (brs, 1H), 11.92 (brs, 1H), 8.14 (d, J=8,7 Гц, 1H), 8.02 (d, J=1,5 Гц, 1H), 7.48-7.54 (m, 1H), 7.43 (dd, J=1,2; 8,7 Гц, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.08 (d, J=4,5 Гц,1H), 5.08(s, 2H).

Пример 13: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(бензо[b]тиен-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

Бензо[b]тиофен-2-карбальдегид

К раствору бензо[b]тиофена (10 г, 74,5 ммоль) в безводном THF (12 мл) при -78° С добавляли 65 мл 1,6 М н-бутиллития в гексанах. Через 10 мин добавляли DMF (23 мл, 298 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и затем кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. THF выпаривали, и остаток выливали в 1 н. HCl и лед. Кислый раствор экстрагировали диэтиловым эфиром (2х). Объединенный эфирный экстракт промывали 1 н. HCl (3х), насыщенным NаНСО₃ (1х), солевым раствором (1х), а затем сушили с помощью MgSO_4. MgSO₄ отфильтровывали, и фильтрат концентрировали до масла, которое обрабатывали NaHSO₃. Полученное твердое вещество собирали, обрабатывали водным NаНСО₃, затем экстрагировали DCM. Раствор DCM сушили над MgSO₄ и упаривали с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого масла (3,2 г, 26% выход). ¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 7.44 (dd, 1H, J=6,9; 7,2 Гц), 7.51 (dd, 1H. J=6,9; 8,1 Гц), 7.91 (d, 1H, J=8,1 Гц), 7.95 (d, 1H, J=7,8 Гц), 8.04 (s, 1H), 10.12 (s, 1H).

(трет-Бутокси)-N-(1-аза-2-бензо[b]тиен-2-илвинил)карбоксамид

К перемешиваемому раствору бензо[b]тиофен-2-карбальдегида (3,2 г, 19,7 ммоль) и тpeт-бутилкарбазата (2,6 г, 19,7 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли 3 капли концентрированной HCl. Через 30 мин данную смесь фильтровали, твердое вещество промывали диэтиловым эфиром и сушили в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (3,8 г, 70% выход). ¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 1.54 (s, 9H), 7.30-7.36 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.71-7.74 (m, 1H), 7.78-7.81 (m, 1H), 7.89 (s, 1H), 8.31 (brs, 1H).

(трет-Бутокси)-N-[(бензо[b]тиен-2-илметил)амино]карбоксамид

К суспензии (трет-бутокси)-N-(1-аза-2-бензо[b]тиен-2-илвинил)карбоксамида (1,8 г, 6,5 ммоль) в THF (6 мл) добавляли цианоборгидрид натрия (0,75 г, 11,9 ммоль). Раствор пара-толуолсульфоновой кислоты (1,86 г, 9,8 ммоль) в THF (6 мл) добавляли по каплям. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным NaHCO₃ (1x) и насыщенным NaCl (1x). Раствор этилацетата сушили над К₂СО_3. К₂СО₃ отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество обрабатывали насыщенным NaHCO₃ в течение ночи и экстрагировали DCM. Раствор DCM сушили над Na₂SO_4. Na₂SO₄ отфильтровывали, и фильтрат концентрировали с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (1,7 г, 76% выход). ¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 1.44 (s, 9H), 4.68 (s, 2H), 7.36-7.45 (m, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.78-7.86 (m, 2H).

тpeт-Бутиловый эфир N’-бензо[b]тиен-2-илметил-N’-[7-хлор-4-оксо-2-(пирролидин-1-карбонил)-1,4-дигидрохинолин-3-карбонил]гидразинкарбоновой кислоты

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (1,59 г, 5,0 ммоль) и безводного THF (60 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (3,19 г, 7,0 ммоль). Затем добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(бензо[b]тиен-2-илметил)амино]карбоксамида (1,37 г, 5,0 ммоль) и диметиламинопиридина (27,8 мг, 0,21 ммоль) в THF (15 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи, и данную смесь фильтровали. Концентрированный фильтрат очищали с помощью хроматографии (MeOH/CH₂Cl₂, 5/95, об/об) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (771 мг, 24% выход).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(бензо[b]тиен-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

К перемешиваемой смеси mpem-бутилового эфира N’-бензо[b]тиен-2-илметил-N’[7-хлор-4-оксо-2-(пирролидин-1-карбонил)-1,4-дигидрохинолин-3-карбонил]гидразинкарбоновой кислоты (760 мг, 1,3 ммоль) и безводного THF (16 мл) при 0° С в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (3,0 мл, 4,44 г, 46,2 ммоль). После перемешивания в течение ночи THF выпаривали, и остаток охлаждали в ледяной бане. Добавляли воду, и полученный осадок собирали, обрабатывали ультразвуком с метанолом и сушили в вакууме, с получением соединения, указанного в заголовке, в виде кремового твердого вещества (470 мг, 88% выход), т.пл.>300° С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 5.38 (s, 2H), 7.30-7.38 (m, 2Н), 7.40 (s, 1H), 7.44 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7.90 (d, 1H, J=7,2 Гц), 7.82 (d, 1H, 7.2 Гц), 8.06 (s, 1H), 8.15 (d, 1H, J=8,7 Гц). Вычислено для С₂₀Н₁₂СlN₃О₃S: С, 58,61; Н, 2,95; N, 10,25; найдено: С, 58,42; Н, 3,19; N, 10,20.

Пример 14: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(1,3-тиазо-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

(тpeт-Бутокси)-N-[(1,3-тиазол-2-илметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору тиазол-2-карбальдегида (0,95 г, 8,42 ммоль) и трет-бутилкарбазата (1,17 г, 8,87 ммоль) в этаноле (15 мл) добавляли 1,10 мл ледяной уксусной кислоты, затем цианоборгидрид натрия (2,18 г, 34,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50° С и перемешивали в течение 72 ч. Реакцию гасили 2 н. NaOH (30 мл), и полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3× 30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (40 мл), затем сушили над Na₂SO_4. Na₂SO₄ отфильтровывали, и фильтрат очищали с помощью хроматографии на силикагеле (этилацетат : DСМ, 25:75, об/об , с получением соединения, указанного в заголовке (0,62 г, 32% выход) в виде грязно-белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.38 (s, 9H), 4.15 (d, 2H, J=3,9 Гц), 5.34 (d, 1H, J=3,9 Гц), 7.63 (d, 1H, J=3,3 Гц), 7.70 (d, 1H, J=3,3 Гц), 8.42 (br s, 1H).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(1,3-тиазол-2-илметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (0,90 г, 2,80 ммоль) и безводного THF (60 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (1,45 г, 3,42 ммоль), а затем раствор (трет-бутокси)-N-[(1,3-тиазол-2-илметил)амино]карбоксамида (0,5 г, 2,20 ммоль) и диметиламинопиридина (79,1 мг, 0,65 ммоль) в THF (15 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи и после охлаждения реакционную смесь фильтровали. Концентрированный фильтрат очищали с помощью хроматографии на силикагеле (MeOH:CH₂Cl₂, 5:95, об/об) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (0,97 г, 83% выход).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(1,3-тиазо-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

К перемешиваемой смеси N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(1,3-тиазол-2-илметил)карбоксамида (760 мг, 1,3 ммоль) и безводного THF (40 мл) при 0° С в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (5,4 мл, 7,99 г, 83,2 ммоль). После перемешивания в течение ночи THF выпаривали, и остаток охлаждали в ледяной бане. Добавляли воду и полученный осадок собирали, озвучивали с метанолом. Твердое вещество собирали путем всасывающего фильтрования и сушили в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде кремового твердого вещества (648 мг, 78% выход), т.пл.>300° С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 5.38 (s, 2H), 7.45 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7.70 (d, 1H, J=3,3), 7.76 (d, 1H, J=3,3 Гц), 8.04 (s, 1H), 8.15 (d, 1H, 8,7 Гц). Вычислено для С₁₅Н₁₀СlN₄O₃S· Н₂O· Н₃СSO₃Н: С, 40,38; Н, 3,39; N, 11,77; найдено: С, 40.63; Н, 2,98; N.11,39.

Пример 15: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(имидазол-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

N-(1-Аза-2-имидазол-2-илвинил)(трет-бутокси)карбоксамид

2-Имидазолкарбоксальдегид (10,2 г, 106 ммоль) растворяли в THF. К этому раствору добавляли трет-бутил-карбазат, затем две капли концентрированной соляной кислоты. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, концентрировали и растирали с гексанами с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (22 г, 99%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.47 (s, 9H), 7.08 (s, 2H). 7.92 (s, 1H), 10.93 (br s,1H), 12.58 (brs,1H).

(трет-Бутокси)-N-[(имидазол-2-илметил)амино]карбоксамид

Смесь 10% палладия на угле (0,50 г) и N-(1-аза-2-имидазол-2-илвинил)(трет-бутокси)карбоксамида (3,0 г, 14,0 ммоль) в метаноле (40 мл) и концентрированной соляной кислоте (1,15 мл, 14,0 ммоль) гидрогенизировали (40 psi (275,79 КПа)) при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали через кизельгур, и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением масла. Масло нейтрализовали добавлением гидроксида натрия (5 н., 5,8 мл) и затем разбавляли этилацетатом (80 мл). Слой этилацетата промывали водой (1× 20 мл) и хлоридом натрия (нас. водный, 1× 20 мл), а затем сушили над Na₂SO₄. Этилацетат удаляли с получением соединения, указанного в заголовке, в виде масла (2,42 г, 80%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 1.36 (s, 9H), 3.84 (d, 2H, J=4,2 Гц), 4.82 (br s, 1H), 6.91 (S, 2H), 8.25 (br s, 1 H), 11.84 (br S, 1 Н).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(имидазол-2-илметил)карбоксами

Смесь 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (2,42 г, 7,54 ммоль), (трет-бутокси)-N-[(имидазол-2-илметил)амино]карбоксамида (2,0 г, 9,43 ммоль) и CMC (4,14 г, 9,80 ммоль) в THF (50 мл, безводный) кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали, и твердые вещества собирали. Твердые вещества промывали водой, а затем диэтиловым эфиром.

Этот материал сушили в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (1,0 г, 25%).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(имидазол-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дион

К перемешиваемому раствору N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(имидазол-2-илметил)карбоксамида (1,0 г, 1,94 ммоль) в THF (30 мл) добавляли метансульфоновую кислоту (5 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и к оставшемуся маслу добавляли диэтиловый эфир (200 мл). Данную смесь перемешивали в течение 10 мин, а затем давали осесть в два слоя: эфирный слой и слой коричневого масла. Эфир декантировали, и к коричневому маслу добавляли воду (5 мл). Через короткое время образовывался осадок, который собирали путем вакуумного фильтрования. Осадок промывали диэтиловым эфиром (3× 20 мл), а затем обрабатывали ультразвуком в 20 мл 10/1 диэтилового эфира/метилового спирта в течение 15 мин. Материал фильтровали, промывали диэтиловым эфиром и сушили в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (0,24 г, 25%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 2.31 (СН₃SО₃Н), 5.41 (s, 2H), 7.42 (d, 1Н, J=8,7 Гц), 7.67 (s, 2H), 7.99 (s, 1H), 8.15 (d, 1Н, J=8,7 Гц), 12.7 (br s, 1H). 11.98 (br s), 12.93 (br s, 1H), 14.28 (br s, 1H). Вычислено для С₁₅Н₁₀СlN₄O₃· 1,6 СН₃SО₃Н: С, 40,08; Н, 3,32; N, 14,08; найдено: С, 40,37; Н, 3,12; N, 14,34.

Тесты биологической функции

Тест А: ингибирование связывания [³H]-MDL105,519:

Связывание соединений с сайтом глицина NMDA рецептора может быть оценено путем измерения способности тестируемых соединений ингибировать связывание тритированного MDL105,519 с мембранами головного мозга, несущими рецептор.

Мембраны головного мозга крыс: мембраны головного мозга крыс, использованные в этих экспериментах, получали от Analytical Biological Services Inc., и готовили по существу в соответствии со способом В.М.Baron et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 250, 162 (1989). Кратко свежую ткань головного мозга, включая кору головного мозга и гиппокамп, от самцов крыс линии Sprague Dawley гомогенизировали в 0,32 М сахарозе и центрифугировали при низкой скорости для отделения клеточных мембран от других клеточных компонентов. Мембраны затем промывали 3 раза с использованием деионизированной воды, затем обрабатьвали 0,04% Triton X-100. Наконец, мембраны промывали шесть раз в 50 мМ Трис-цитратном буфере, рН 7,4, и замораживали при -80° С до использования.

[³H]-MDL105,519 (72 Ки/ммоль) закупали у Amersham. Холодный MDL 105,519 закупали у Sigma/RBI. Анализы связывания осуществляли по существу в соответствии с протоколом В.М. Baron et al., J. Pharmacol. Exp. Тhеr. 279, 62 (1996) следующим образом. В день эксперимента мембраны головного мозга размораживали при комнатной температуре и суспендировали в 50 мМ трис-ацетатном буфере, рН 7,4 (“TAB”). Семьдесят пять микрограмм на миллилитр белка (путем использования красителя BioRad) использовали для конкурентного связывания. Эксперименты осуществляли, используя 96-луночные планшеты. Мембраны инкубировали с 20 мкл соединений в различных концентрациях и 1,2 нМ [³H]-MDL105,519 в течение 30 мин при комнатной температуре в общем объеме 250 мкл. Неспецифическое связывание определяли путем использования 100 мкМ немеченого MDL 105,519. Немеченый MDL105,519 и соединения растворяли в виде 12,5 мМ маточных растворов в DMSO. Конечную концентрацию DMSO в каждой лунке поддерживали ниже 1%, причем было обнаружено, что эта концентрация не изменяет результатов связывания. После инкубации несвязавшийся [³Н]-MDL105,519 удаляли путем фильтрования на планшеты GF/B Unifilter, используя харвестер Packard. Фильтры промывали четыре раза охлажденным на льду TAB (в сумме 1,2 мл буфера). Планшеты сушили в течение ночи при комнатной температуре, и связанную радиоактивность измеряли на Packard TopCount после добавления 45 мкл на лунку MICROSCINT О.

Мембраны головного мозга человека: мембраны головного мозга человека получали от Analytical Biological Services Inc., и анализы осуществляли, как описано для оболочек крыс.

Анализ данных: данные анализировали, используя таблицу Microsoft Excel и программное обеспечение GraphPad Prizm, и эффективность соединений выражали как Ki (нМ).

Тест Б: тест с формалином

Тест с формалином представляет собой анализ, который оценивает способность соединения ингибировать формалин-индуцированные ноцицептивные поведения у крыс (D. Dubuisson, etal., Pain 4, 161-174 (1977); Н. Wheeler-Aceto et al., Psychopharmacofogy 104, 35-44 (1991); T.J.Coderre, et al., Pain 54, 43-50 (1993)). В данном тесте наблюдают две различные фазы формалин-индуцированных поведений. Первая фаза ответа, вызванная острой ноцицепцией на химическое вещество (формалин), инъецированное в лапу, имеет место между нулем и пятью минутами. Следует период покоя между 5-15 минутами после инъекции. После периода покоя вторая фаза ответа, вызванная сенсибилизацией центральных нейронов в заднем роге, имеет место через 15 мин и продолжается вплоть до 60 мин. Сенсибилизация центральных нейронов в позвоночном столбе увеличивает вредный афферентный вход и вызывает более сильную блокаду боли, которая должна передаваться в головной мозг. Следовательно, ингибирование второй фазы ответа указывает на центральный механизм действия лекарства.

Процедура для теста с формалином следующая: самцов крыс помещают в камеру из органического стекла и наблюдают в течение 30-45 мин за их исходной активностью. Животных предварительно обрабатывают либо носителем либо различными дозами тестируемого соединения. Животным дают дозы носителя либо тестируемого соединения за 3 ч до инъекции 0,05 мл стерильного 1% формалина под дорсальную кожу задней лапы. Число отдергиваний лапы (ответов) во время первой фазы (0-5 мин) и второй фазы (20-35 мин) подсчитывают и записывают. Ответное отдергивание сравнивают со средней оценкой группы с физиологическим раствором в качестве контроля и вычисляют как процент ингибирования. ЭД₅₀ представляет собой дозу соединения, которая дает 50% ингибирования ноцицептивного ответа на первой или второй фазе ответа. Первые фазы ответов могут быть ингибированы соединениями, которые действуют периферически, и соединениями, которые действуют центрально. Вторая фаза ответа ингибируется центрально действующими соединениями: % ингибирования ноцицептивного ответа =

100 × (число ответов в группе носителя - число ответов в группе соединения)/(число ответов в группе носителя)

Т-критерий Стьюдента использовали для статистического анализа, чтобы определить значимость эффектов соединений. Данные приводятся в виде дозы, которая дает некий % ингибирования ответа.

Тест В: модель невропатической боли (хроническое повреждение сокращения):

Анти-гипералгезические свойства соединения могут быть протестированы с помощью модели хронического повреждения сокращения (Chronic Constriction Injury, CCl). Этот тест представляет собой модель невропатической боли, связанной с повреждениями нервов, которые могут возникать непосредственно от травмы и сдавления, либо опосредованы широким рядом заболеваний, таких как инфекция, рак, метаболические состояния, токсины, дефициты питательных веществ, иммунологическая дисфункция и мышечно-скелетные изменения. В данной модели одностороннюю периферическую гипералгезию продуцируют у крыс путем наложения лигатуры на нерв (G.J.Bennett, etal., Pain 33, 87-107 (1988)).

Методически крыс линии Sprague-Dawley (250-350 г) анестезировали пентобарбиталом натрия, и общий седалищный нерв экспонировали на уровне середины бедра путем тупого рассечения через двуглавую мышцу бедра. Срез нерва (примерно 7 мм), проксимальный к трифуркации седалищного нерва, освобождали от ткани, и накладывали лигатуру в четырех положениях с помощью хромированного кетгута. Шов завязывали примерно с 1 мм расстоянием между лигатурами. Разрез закрывали слоями, и животным давали оправиться. Термальную гипералгезию измеряли, используя тест отдергивания лапы (К. Hargreaves, et al, Pain 32, 77-88 (1988)). Чтобы осуществить данный тест, животных приучали к стеклянному полу с повышенной температурой. Нагреватель, выделяющий тепловую энергию за счет излучения, был нацелен на середину подошвы задней лапы (территория седалищного нерва) через стеклянный пол с 20 сек. перерывами, используемыми для предотвращения повреждения кожи. Записывали время латентного состояния для рефлекса отдергивания в обеих задних лапах.

Поврежденные лапы с лигированными нервами показали более короткие периоды латентного состояния для отдергивания лапы по сравнению с неповрежденными или симулированно оперированными лапами. Ответы на тестируемые соединения оценивали в различные моменты времени после перорального введения для определения начала и продолжительности эффекта соединения. При осуществлении данного теста группы ССl крыс получали либо носитель либо тестируемое соединение, перорально три раза в сутки в течение 5 дней. Периоды латентного состояния для отдергивания лапы измеряли каждые сутки за 10 мин до и через 2 или 3 ч после первой суточной дозы. Эффективность соединения выражали как средний процент уменьшения гипералгезии по сравнению с таковым у животных, которым давали носитель, и вычисляли следующим образом:

(среднее значение группы носителя - среднее значение группы соединения)х100/(среднее значение группы носителя).

Анализ данных осуществляли с помощью теста сравнения множества значений (тест Дьюннета (Dunnett)), и результаты выражали и эффективности соединений выражали в виде МЭД (минимальной эффективной дозы) в мг/кг/сутки, которая дает процент (%) уменьшения гипералгезии, который статистически значим.

В таблице показаны результаты тестов А, Б и В для некоторых соединений по изобретению. Если данные в таблице отсутствуют, данный тест не осуществлялся.

Формула изобретения

1. Способ лечения субъекта, страдающего от боли, при котором вводят уменьшающее боль эффективное количество любого соединения в соответствии со структурной формулой I

где А представляет собой (CH₂)n, где n имеет значение, выбранное из 1, 2 или 3;

D выбран из 5- или 6-членной гетероарильной группировки или ее бензпроизводного, имеющих 1 или 2 кольцевых атома, выбранных из кислорода, азота или серы;

R¹ представляет собой галогено.

2. Способ по п.1, при котором вводят уменьшающее количество боль эффективное количество соединения в соответствии со структурной формулой I, где D выбран из пиридила, хинолила, пиразинила, пирадизинила, фуранила, бенз[b]фуранила, имидазолила, оксазолила, тиенила, бенз[b]тиенила и тиазолила.

3. Способ по п.1, при котором вводят уменьшающее боль эффективное количество соединения в соответствии со структурной формулой II

где А и D такие, как определено в п.1.

4. Способ по п.3, при котором вводят уменьшающее боль эффективное количество соединения в соответствии со структурной формулой II, где D выбран из пиридила, хинолила, пиразинила, пирадизинила, фуранила, бенз [b]фуранила, имидазолила, оксазолила, тиенила, бенз[b]тиенила и тиазолила.

5. Способ по п.3, при котором вводят уменьшающее боль эффективное количество соединения, выбранного из

7-хлор-4-гидрокси-2-(4-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(3-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(2-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-бензо[d]фуран-2-илметил-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(хинолин-4-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-диметилкарбамоил-2-пиридин-4-илметил-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(пиразин-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(5-изоксазолино)метил-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(пиримидин-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(фуран-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(3-фурилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(тиен-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(тиен-3-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5,b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2-(бензо[b]тиен-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона;

7-хлор-4-гидрокси-2(1,3-тиазо-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона и

7-хлор-4-гидрокси-2-(имидазол-2-илметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона.

6. Фармацевтическая композиция, содержащая уменьшающее боль эффективное количество соединения в соответствии со структурной формулой I вместе с фармацевтически приемлемым эксципиентом или разбавителем

где А представляет собой (СН₂)n, где n имеет значение, выбранное из 1, 2 или 3;

D выбран из 5- или 6-членной гетероарильной группировки или ее безпроизводного, имеющих 1 или 2 кольцевых атома, выбранных из кислорода, азота или серы;

R¹ представляет собой галогено.

Приоритет по пунктам:

23.12.1999 по пп.1-5;

29.09.2000 по п.6.

MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 20.12.2007

Извещение опубликовано: 20.07.2010        БИ: 20/2010

---