Способ повышения резистентности организма в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для повышения резистентности организма, в том числе при проведении противоопухолевой химиотерапии. Для этого проводят забор 0,7-1,0 мл крови из вены, филграстим в дозе 10 мг/кг веса инкубируют с этой кровью 45 минут при 37°С, после чего осуществляют реинфузию. Способ обеспечивает общее повышение сопротивляемости организма за счет стимуляции образования не только нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов, но и эритроцитов, а также снижения числа тучных клеток и ретикулярных клеток стромы, снижает токсичность противоопухолевых химиопрепаратов. 1 табл.

 

Изобретение относится к медицине, точнее к способам и средствам повышения резистентности организма при различных патологических состояниях или осложнениях, вызванных применением видов лечения, проявляющих побочное токсическое действие, при лучевой терапии и химиотерапии, в частности.

Известен способ повышения резистентности организма путем улучшения качественного состава крови с применением лекарственных препаратов, таких как «Ферковен», «Феррум Лек» (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, изд.14, М.: Новая волна, 2003).

Применение этих препаратов дает несомненное положительное воздействие на состав крови, а в конечном счете на резистентность организма.

Однако использование этих лекарственных средств имеет ряд ограничений, которые делают их применение не всегда возможным. Помимо длительности применения есть еще и противопоказания, такие как заболевания печени, коронарная недостаточность, гипертопическая болезнь II-III ст.

Известен способ улучшения качественного и количественного состава периферической крови и повышения резистентности организма, когда используют для этого нейпоген (филграстим), раствор которого вводят подкожно в рекомендованных дозах. («Регистр лекарственных средств России», выпуск 9, 2002, М., ООО «РЛС-2002»).

Однако, несмотря на положительную сторону использования нейпогена (филграстима) есть и отрицательные качества, препятствующие его применению. К ним относятся сопутствующая костная патология, заболевания почек и печени. Кроме того, при проведении химиотерапии злокачественных новообразований, он не снимает таких побочных ее проявлений как анемия и тромбоцитопения.

Целью настоящего изобретения является улучшение качества крови и кроветворения.

Поставленная цель достигается тем, что производят забор 0,7-1 мл аутокрови, соединяют ее с нейпогеном (филграстимом) в дозе 10 мкг/кг, инкубируют в течение 45 минут при 37°С, после чего вводят внутривенно.

Проведенный сопоставительный анализ известных способов повышения резистентности организма и заявляемого позволяет говорить о новизне и существенных отличиях последнего.

Новизна предлагаемого «Способа повышения резистентности организма в эксперименте» заключается в том, что нейпоген вводят в организм, предварительно растворив его в аутокрови и подвергнув инкубации.

В известных открытых источниках информации России, стран СНГ и за рубежом аналогов предлагаемому способу не обнаружено.

«Способ повышения резистентности организма в эксперименте» является промышленно применимым. Он может быть воспроизведен и многократно повторен в эксперименте и в клинике в специализированных лечебных учреждениях.

Имеющийся немногочисленный опыт клинической апробации полученных в эксперименте положительных результатов, дает основание говорить о возможном использовании нейпогена в разработанном варианте в клинической практике. Клиническая апробация способа у 3-х больных распространенным раком молочной железы с метастазами в подмышечные лимфоузлы позволила нивелировать токсические побочные проявления противоопухолевой неоадъювантной химиотерапии и провести ее полным курсом. Анализы крови и костного мозга проведенные «до» и «после» курса химиотерапии показали значительное улучшение состояния крови и миелограммы.

Способ осуществляется следующим образом.

У белой беспородной крысы-самца производят забор 0,7-1 мл аутокрови, далее соединяют ее с филграстимом (нейпогеном) в дозе 10 мкг/кг веса животною, затем раствор инкубируют в течение 45 минут при 37°С и вводят животному внутривенно. Через два дня после введения раствора животное декапитируют, извлекают костный мозг из бедренной кости животного. На предметном стекле фиксируют мазки кусочков костного мозга, окрашивают краской Май-Грюнвальда-Романовского, исследуют под микроскопом, подсчитывают количество каждого вида клеток и составляют миелограмму.

Пример конкретного выполнения способа.

У крысы-самца, белого, беспородного, весом 200 г производили забор 0,7-1 мл крови и соединяли ее с нейпогеном (филграстимом) из расчета 10 мкг/кг, затем инкубировали смесь в течение 45 минут при 37°С, после чего вводили той же крысе внутривенно. Через два дня после введения инкубированной смеси нейпогена и аутокрови, животное декапитировали, извлекали костно-мозговое вещество из бедренной кости, готовили на предметном стекле мазки костного мозга, обрабатывали их красителем-фиксатором Май-Грюнвальда-Романовского. Далее проводили микроскопический анализ мазков костного мозга и подсчет количества каждого вида клеток в поле зрения, составляли миелограмму. Результаты, представленные в миелограмме показали, что предлагаемый способ введения нейпогена (филграстима) стимулирует не только образование нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов, но и эритроцитов, а снижение числа плазматических, тучных клеток и ретикулярных клеток стромы указывает, что метод не оказывает какого-либо токсического или аллергизирующего влияния.

Технико-экономическая эффективность заявляемого «Способа повышения резистентности организма в эксперименте» состоит в возможности:

- повысить общую сопротивляемость организма за счет улучшения кроветворения;

- свести к минимуму или исключить вообще токсические побочные проявления противоопухолевых химиопрепаратов.

Табл.1 Миелограмма (%)
Вид клеток	Контроль, п=10	Внутривенно нейпоген на 5% глюкозе, п=7	Внутривенно нейпоген на аутокрови, п=7
Миелобласты	2,8±0,19	3,31±0,21	2,99±0,16
Промиелоциты	3,91±0,28	4,25±0,26	4,03±0,25
Миелоциты	6,03±0,4	6,52±0,44	5,98±0,34
Метамиелоциты	6,09±0,52	7,26±0,51	7,01±0,48
Палочкоядерные лейкоциты	21,22±2,78	22,13±2,11	21,8±1,89
Сегментоядерные лейкоциты	19,6±1,19	19,55±1,74	18,17±1,53
В том числе эозинофилы	6,44±0,36	6,0±0,42	5,45±0,37
Эритробласты, пронормоциты	1,91±0,12	1,83±0,13	2,16±0,17
Нормоциты базофильные	6,67±0,44	5,09±0,32*	7,15±0,54**
Нормоциты полихроматофильн.	12,23±1,07	8,59±0,54*	13,38±1,09**
Нормоциты оксифильные	0,82±0,04	0,33±6,01*	0,46±0,02* **
Лимфоциты и их бласты	13,25±1,05	13,86±1,07	12,35±1,05
Моноциты и их бласты	2,53±0,14	3,55±0,16*	2,81±0,12**
Плазматические клетки, бласты	0,4±0,02	0,48±0,02	0,23±0,01* **
Мегакарциоциты	0,96±0,05	0,5±0,02*	0,47±0,02*
Ретикулярные клетки стромы	0,79±0,03	0,73±0,04	0,02±0,01* **
Макрофаги	0,71±0,05	1,91±0,15*	0,98±0,06*
Тучные клетки	0,08±0,01	0,11±0,01	0,01±0,01* **
* - достоверно отличается от контрольной группы, р<0,05
** - достоверно отличается от обычного введения препарата на 5%-ной глюкозе, р<0,05

Способ повышения резистентности организма в эксперименте, заключающийся в том, что проводят забор 0,7-1,0 мл крови из вены, филграстим в дозе 10 мг/кг веса инкубируют с этой кровью 45 мин при 37°С, после чего осуществляют реинфузию.