Средство для лечения инфекционных гепатитов, в том числе гепатита с

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и касается средства для лечения вирусного гепатита С, содержащего один или смесь нескольких сложных эфиров о-фталевой кислоты нормального или изостроения общей формулы (I), при этом n равно числу из интервала 2-10. Заявленное изобретение обеспечивает быстрое, эффективное и безопасное устранение клинических симптомов вирусного гепатита С, а также обеспечивает элиминацию вируса гепатита С и позволяет достичь устойчивого вирусологического ответа без каких-либо побочных действий, при отсутствии противопоказаний. Эффективность изобретения подтверждена клиническим исследованием. 9 з.п. ф-лы, 3 табл., 1 ил.

 

Изобретение относится к области фармацевтики и фармацевтической промышленности.

Хронический вирусный гепатит С - тяжелое заболевание, которым страдают до 2% населения Земного шара. Существующие способы лечения его дороги и недостаточно эффективны. Экспериментальные модели исследования гепатита С in vivo отсутствуют.

Известно средство для лечения хронического гепатита С, в котором действующим веществом является силибинин (легалон - ФРЮ, карсил - Болгария) (М.Д.Машковский. Лекарственные средства. ч.1. стр.450, Вильнюс, 1993), взятым в качестве аналога.

Недостатками аналога являются низкая эффективность, невозможность применения препарата на ранней стадии с первых дней заболевания, а целесообразность применения только в период реконвалесценции (выздоровления), наличие побочных эффектов. Таким образом, этот аналог может привести к уменьшению клинических симптомов гепатита С, но не приводит к элиминации вируса, не может дать вирусологический ответ.

Известно средство для лечения хронического гепатита С, в котором действующим веществом является фосфатидилхолин (эссенциале-форте) (М.Д.Машковский. Лекарственные средства. ч.2. стр.40, Вильнюс, 1993), взятым в качестве аналога.

Недостатки аналога: низкая эффективность, невозможность применения препарата на ранней стадии с первых дней заболевания, а целесообразность применения только в период реконвалесценции, наличие побочных эффектов. Аналог не обеспечивает быстрое и эффективное устранение клинических симптомов гепатита С. Элиминация вируса не возможна, имеет место лишь улучшение дезинтоксикационной функции и структуры печени (мембраны гепатоцита), а также обменных процессов, в основном липидного.

Известно средство для лечения хронического гепатита С комбинацией препаратов пролонгированных интерферонов (пегасис, пегинтрон) и аналогов нуклеозидов (рибавирин), взятых в качестве прототипа (И.С.Николаева, В.В.Петере. Химико-фармацевтический журнал, 2002, №5, с.55).

Недостатки прототипа: эффективность 45-65%, дороговизна препаратов, недоступность основной массе инфицированных больных (от 20 до 30 тыс. условных единиц), лечение от 6 мес до 1 года сочетанием инъекций и таблетированной формы препарата, значительное число противопоказаний, высокая частота побочных эффектов. Прототип может обеспечить элиминацию вируса, однако это небезопасно для здоровья из-за большого числа побочных действий. Прототип позволяет достичь устойчивый вирусологический ответ у 45-65% пациентов (с учетом противопоказаний).

Общим признаком заявляемого средства с прототипом является только назначение прототипа, а именно - применение при лечении хронического гепатита С.

Изобретение решает назревшую проблему создания препарата для лечения гепатита С, обладающего низкой токсичностью в широком диапазоне доз и не проявляющего мутагенных, тератогенных, аллергизирующих и других нежелательных действий на организм, с высокой безопасностью, отсутствием противопоказаний и побочных эффектов, хорошей переносимостью. Кроме этого, изобретение направлено на получение препарата для лечения широких масс больных, инфицированных любым генотипом вируса гепатита С (так как доступен по цене).

Технический результат изобретения заключается в обеспечении быстрого, эффективного и безопасного устранения клинических симптомов вирусного гепатита С и обеспечении элиминации вируса и достижения устойчивого вирусологического ответа без каких-либо побочных действий, а также отсутствие противопоказаний.

Технический результат изобретения достигается тем, что согласно изобретению средство для лечения инфекционных гепатитов, в том числе гепатита С, содержит один или смесь нескольких сложных эфиров о-фталевой кислоты нормального или изостроения общей формулы:

где n равно числу из интервала 2-10.

Для практического применения эфиры наносятся на адсорбент, пригодный для таблетирования или гранулирования, и используются в виде таблеток, гранул или капсул перорально или растворяются в жидких пищевых и/или фармакопейных маслах и даются сублингвально.

Таким образом, заявляемое средство, содержащее один или смесь нескольких сложных эфиров о-фталевой кислоты нормального или изостроения общей формулы:

где n равно числу из интервала 2-10, и содержащее в качестве инертных связующих добавок принятые в фармацевтической промышленности инертные фармацевтические добавки, например, крахмал, лактозу и другие, представляет собой капсулы, таблетки или гранулы для перорального применения.

Кроме того, заявляемое средство для перорального применения, содержащее один или смесь нескольких сложных эфиров о-фталевой кислоты нормального или изостроения общей формулы:

где n равно числу из интервала 2-10, дополнительно содержащее траву солянки холмовой Salsola collina Pall, подвергнутую измельчению до размера частиц меньше 500 мкм, представляет собой капсулы, таблетки или гранулы.

При сублингвальном использовании заявляемое средство, содержащее один или смесь нескольких сложных эфиров о-фталевой кислоты нормального или изостроения общей формулы:

где n равно числу из интервала 2-10, представляет собой их раствор в жидких пищевых маслах, например, в оливковом, и/или фармакопейных маслах, например, касторовом, чаульмугровом.

Отличие заявляемого средства от прототипа состоит в том, что в качестве основного действующего вещества, способствующего лечению гепатитов, применяются один или смесь эфиров о-фталевой кислоты нормального или изостроения общей формулы:

где n равно числу из интервала 2-10, лечебное действие которых ранее не было известно.

В заявляемом средстве измельченная до микрометровых размеров трава солянки холмовой Salsola collina наряду с функцией адсорбента проявляет себя как мощное гепатозащитное лечебное и профилактическое средство, способствующее регенерации поврежденного болезнью органа (А.С.Саратиков, А.И.Венгеровский, В.С.Чучалин. "Экстракт солянки холмовой - эффективная защита печени". Томск, 2000, 115 с.), а эфиры о-фталевой кислоты действуют как стимуляторы защитных сил организма, что ведет к угнетению репликации вируса.

Сложные эфиры о-фталевой кислоты представляют собой высококипящие жидкости. Физико-химические константы сложных эфиров о-фталевой кислоты представлены в табл.1.

Таблица 1 Строение и свойства диалкиловых эфиров о-фталевой кислотыx
Формула	Название	Молекулярная масса	Внешний вид, плотность	Темп.кипения, °С. (мм рт.ст.)
C6H4(COOCH3)2	Диметилфталат	194	Бц.ж.; 1,189	282
C6H4(COOC2H5)2	Диэтилфталат	222	Бц.ж.; 1,118	296
C6H4(COOC4H9)2	н-Дибутилфталат	278	Бц.масл.ж.; 1,046	340
C6H4(COOC4H9)2	Изобутилфталат	278	1,054	310 (10)
C6H4(COOC6H13)2	н-Гексилфталат	334	1,006	210 (15)
C6H4(COOC8H17)2	2-(этилгексил) фталат	390	0,950	225 (4)
C6H4(COOC8H17)2	н-Октилфталат	390	0,983	229 (4,5)
C6H4(COOC10H21)2	н-Децилфталат	446	0,957	215-255 (1)
x - Справочник химика, т.2, 1963, Л-М, 1062; К.Тиниус «Пластификаторы», 1964, М-Л, 736.

Известна очень низкая токсичность алкиловых эфиров о-фталевой кислоты (таблица 2). Учитывая эти данные и успешное и безопасное применение фталатосодержащих традиционных средств были проведены клинические исследования на добровольцах, страдающих хроническим вирусным гепатитом С. Они показали, что испытанные эфиры о-фталевой кислоты обладают хорошими лечебными свойствами.

Таблица 2 Токсические свойства* диалкил о-фталатов, ЛД50 г/кг
Количество С-атомов	Животные	Общепринятая классификация безопасности (А.П.Нечаев и соавт. "Пищевые добавки". М.: Колос-пресс, 2002, с.16)
Мыши	Крысы
1	6,2	7,8	Практически нетоксичные
2	6,2	9,5
4	5,3-21,5	10,0-17,9
Изо-4		20-25	Практически безвредные
6		20
7-9 (норм- и изо-)	36	60

* "Вредные вещества в промышленности". /Под ред. Лазарева Н.В. Л., 1976, т.2, с.194-7; Штейфель В.О. "Вредные вещества в промышленности". М.: Химия, 1991, с.223-4; "Вредные вещества в промышленности". /Под ред. Э.Н.Левиной. Л.: Химия, 1985, с.1424).

Преимущество перед прототипом, а также перед аналогом состоит в том, что с помощью заявляемого средства достигается более быстрое, эффективное и безопасное устранение симптомов гепатита С без каких-либо побочных действий. Заявляемые составы в широком диапазоне доз обладают низкой токсичностью, не проявляют мутагенных, тератогенных, аллергизующих и других нежелательных действий на организм.

Для установления механизма влияния на организм человека сложных эфиров о-фталевой кислоты авторами были проведены испытания. Исследование растений, содержащих в своем составе сложные эфиры о-фталевой кислоты, показали, что эти вещества не обладают прямым противовирусным, противомикробным и противогрибковым действием. Поэтому возникло предположение, что лечебный эффект традиционных средств на основе растений рода Hedysarum, таких как Hedysarum setigerum, H. alpinum, H. polybotrus, H. theinum, обязан мобилизации защитных механизмов организма. В связи с этим было проведено экспресс-тестирование способности эфиров о-фталевой кислоты стимулировать гуморальный иммунитет. Оно выявило, что действительно, алкиловые эфиры о-фталевой кислоты обладают способностью стимулировать гуморальные иммунные реакции, подавленные действием иммуносупрессора. Это показано графиком, представленным на чертеже, изображающим зависимость способности эфиров о-фталевой кислоты восстанавливать супрессированный гуморальный иммунитет у животных от длины алкильной цепи у эфиров о-фталевой кислоты. Из графика следует, что наиболее эффективны алкиловые эфиры о-фталевой кислоты нормального и изостроения с длиной цепи от С2 до С10.

Известно гиполипидемическое, анальгетическое, антибактериальное, противоопухолевое действие амидов и гидразидов о-фталевой кислоты (В.О.Кузьминых, Хим.-фарм. журн., 2002, №8, с.40, С.И.Завьялов, О.В.Дорофеева, Е.Е.Румянцева, А.С.Куликова, Г.И.Ежова, Н.Е.Кравченко, А.Г.Завозин, Хим.-фарм. журн., 2006, №1, с.9), однако эти свойства не выражены в достаточной мере, чтобы представлять практический интерес.

Известно также использование эфиров о-фталевой кислоты в технике как пластификаторов пластических масс (К.Тиниус. "Пластификаторы". М.-Л.: Химия, 1964) различного назначения, в том числе применяемых в пищевой и фармацевтической областях промышленности.

Таким образом, из уровня техники не следует явным образом способность эфиров о-фталевой кислоты проявлять лечебное действие при терапии вирусных гепатитов, в том числе гепатита С. Следовательно, заявляемое средство соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».

Изобретение поясняется графиком, где на чертеже представлена зависимость способности восстанавливать супрессированный гуморальный иммунитет у животных от длины алкильной цепи у эфиров о-фталевой кислоты.

Достижение технического результата заявляемого средства подтверждается следующими примерами.

Пример 1

Этиловый и н-бутиловый эфиры о-фталевой кислоты промышленного производства (ТУ 64-19-134-91 и ГОСТ 8728-88 соответственно) с целью очистки подвергали перегонке в вакууме. Другие алкиловые и изоалкиловые эфиры получали по стандартной методике (Вейганд-Хильгетаг. Методы эксперимента в органической химии. М.: «Химия», 1969, с.345) нагреванием о-фталевой кислоты с соответствующими спиртами (C_nH_2n+1OH, где n=3-10) в присутствии серной кислоты с последующей вакуумной перегонкой. Чистоту веществ контролировали рефрактометрически и методом ЯМР (чистота конечного продукта составляла 99.9%).

Пример 2

90 г бутилового эфира о-фталевой кислоты и 20 г этилового эфира о-фталевой кислоты растворяли в 900 г оливкового масла (Olive Line, S.L.Orense 85, Madrid, Spain R.S.I №40 00018178/M) и фасовали в пенициллиновые флаконы по 10 мл. Применяли для лечения больных гепатитом С, сублингвально, по 1 мл, один раз в день.

Пример 3

К 690 г травы солянки холмовой (Salsola collina), измельченной до размера частиц менее 300 микрометров, прибавляли смесь 90 г бутилового эфира о-фталевой кислоты и 20 г этилового эфира о-фталевой кислоты и размешивали до состояния сыпучей однородной массы. Равномерность распределения определяли с помощью количественной спектрофотометрии. Полученную массу фасовали в желатиновые капсулы и помещали во флаконы. Применяли для лечения больных инфекционными гепатитами, в том числе гепатитом С, в дозе 800 мг на человека в день.

Пример 4

Массу, полученную как в примере 3, прессовали в таблетки по 200 мг в каждой. Применяли для лечения больных инфекционными гепатитами, в том числе гепатитом С, в дозе 800 мг на человека в день.

Пример 5

Действие исследуемых веществ на показатели гуморального иммунитета было протестировано на животных, находящихся в состоянии иммунодепрессии, вызванной классическим иммунодепрессантом азатиоприном. Вещества вводили в дозе 5 мг/кг внутрибрюшинно в масляном растворе. В качестве иммунодепрессанта использовали азатиоприн в дозе 50 мг/кг, который вводили перорально в объеме 0,1 мл на мышь в течение 5 дней. Состояние гуморального иммунитета оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК), определяемых методом локального гемолиза по A.J.Cunnigham (1965). Результаты представлены в виде графика на чертеже, где на оси ординат в процентах указана зависимость способности эфиров о-фталевой кислоты восстанавливать супрессированный гуморальный иммунитет у животных от длины алкильной цепи у эфиров о-фталевой кислоты, а на оси абсцисс - число С-атомов в алкильной цепи (n) эфиров о-фталевой кислоты.

Пример 6

Исследовалось лечебное действие состава из этилового и бутилового эфиров о-фталевой кислоты в соотношении 2:9 под названием "Сольвир С".

Всего под наблюдением находилось 33 больных. Из них 3 человека с острым вирусным гепатитом С, желтушной формой инфекции и среднетяжелым течением болезни, 2 мужчин и 1 женщина, средний возраст - 36,4±0,8 лет, в разработку не вошли в силу малого количества равновозрастных пациентов. Для проведения анализа было взято 30 человек с хроническим вирусным гепатитом С: 3 человека с желтушной и 24 - с безжелтушной формой, среднетяжелым течением болезни, 16 мужчин и 11 женщин, средний возраст - 29±0,7 лет.

В качестве группы контроля в исследование было включено 25 пациентов с аналогичной формой и течением острого и хронического вирусного гепатита С с сопоставимой поло-возрастной группой, которым назначалась традиционная патогенетическая терапия без добавления «Сольвира С».

Способ применения: один раз в день 1 мл масляного раствора «Сольвира С» с помощью шприца или пипетки помещается под язык и выдерживается примерно минуту до рассасывания. Курс лечения один месяц. У всех пролеченных больных в динамике исследовались биохимические анализы: общий билирубин (прямая и непрямая фракции), тимоловая проба, щелочная фосфатаза, активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT) и гамма-глутамилтрансферазы (ГТТ), серологические анализы (маркеры вирусного гепатита С). Кратность исследования указанных показателей: до начала лечения (исходные данные), через 10-20-30 дней.

Методики определения. Для исследования уровней билирубина, трансаминаз, щелочной фосфатазы, гамма-глутамилтрансферазы у пациентов брали венозную кровь из локтевой вены и проводили исследования на биохимическом анализаторе Cobas MIRL PLUS производства Швейцарии. Тимоловая проба определялась методом Хуарге и Ноппера. Для идентификации антител класса Ig М и Ig G к вирусу гепатита С в сыворотке крови методом ИФА (HLISA) использовались коммерческие диагностические тест-системы "РекомбиБест-анти-ВГС-стрип".

Результаты. Сравнительный анализ полученных данных показал имеющиеся различия в эффективности лечения больных с применением «Сольвира С» со стандартным базисным лечением хронического вирусного гепатита С по прототипу. Сравнительные данные биохимических анализов больных, пролеченных «Сольвиром С», и больных, находящихся на стандартной терапии представлены в таблице 3.

Выводы. Результаты исследований выявили динамику более быстрой нормализации биохимических показателей (общий билирубин - прямая и непрямая фракции, тимоловая проба, щелочная фосфатаза, аланинаминотрансфераза - АЛТ, аспартатаминотрансфераза - ACT и гамма-глутамилтрансфераза - ГГТ) в опытной группе по сравнению с контрольной уже к 10 дню исследования. Эта тенденция сохранялась до конца курса терапии.

Возможно, что эффективность включения «Сольвира С» в схему комплексного лечения больных вирусным гепатитом С связана с механизмом индукции эндогенных интерферонов, но для уточнения данного свойства необходимо провести дополнительные иммунологические исследования (определение субпопуляций лимфоцитов, интерфероновый статус и т.д.).

Может быть рекомендован прием состава из этилового и бутилового эфиров о-фталевой кислоты в соотношении 2:9 («Сольвира С») в качестве дополнительного средства, повышающего эффективность терапии до нормализации биохимических показателей или стойкой тенденции исчезновения клинической симптоматики (исчезновение желтухи, нормализация размеров печени и селезенки, восстановление и улучшении аппетита, улучшение субъективного самочувствия, которое выражалось в уменьшении диспептических явлений, болей в правом подреберье, снижении слабости, утомляемости и повышении работоспособности, при хорошей переносимости препарата «Сольвира С» и отсутствии побочных явлений).

Таблица 3 Динамические показатели биохимических анализов у больных с хроническим вирусным гепатитом С
Тесты	Нормальные значения, мкмоль/л	Исходные показатели	10 день болезни	20 день болезни	30 день болезни
Контроль	Опыт	Контроль	Опыт	Контроль	Опыт	Контроль	Опыт
Общий билирубин	4,2-20,5	77,7±2,9	84,3±2,5	62,9±0,8	60,5±0,5	48,1±0,3	46,6±0,5	27,9±0,3	26,6±0,5
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
Прямой билирубин	*	25,9±0,5	25,4±0,6	24,7±0,4	23,4±0,5	11,9±0,7	10,4±0,3	5,8±0,2	4,9±0,3
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
Непрямой билирубин	*	66,1±1,7	71,3±2,5	45,9±0,9	43,5±0,8	32,9±1,0	30,2±0,9	20,8±0,4	21,8±0,3
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
АЛТ	Ж. до 32 М. до 42	82,9±4,7	79,5±3,8	71,0±2,4	62,5±2,3	42,8±1,5	37,4±1,6	43,1±1,2	38,6±1,3
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
ACT	Ж. до 31 М. до 37	87,3±3,9	79,2±4,5	74,9±2,9	66,5±2,8	64,4±3,0	54,8±2,7	48,3±1,2	44,6±1,3
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
Тимоловая проба	0,5-4 ед.	9,4±0,4	7,2±0,1	6,1±0,1	5,6±0,2	4,0±0,1 1	3,5±0,2	4,1±0,1	3,6±0,2
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
Щелочная фосфатаза	100-130	175,9±11,5	139,5±11,3	150,6±9,9	119,6±9,8	131,9±6,4	110,5±6,3	138,9±1,5	134,6±1,4
Р<0,05	Р0,05	Р<0,05
ГТТ	Ж. 7-32 М. 11-50	58,8±4,7	56,5±3,5	51,3±2,9	43,2±2,8	41,1±2,3	34,3±2,2	36,9±1,5	32,4±1,5
Р<0,05	Р<0,05	Р<0,05
* Нормы не установлены

1. Средство для терапии инфекционного гепатита С, содержащее в своем составе один или смесь нескольких сложных эфиров о-фталевой кислоты нормального или изо-строения общей формулы (I) и фармацевтически приемлемую инертную добавку, при этом n равно числу из интервала 2-10.

2. Средство по п.1, отличающееся тем, что преимущественно используют сложные эфиры о-фталевой кислоты нормального или изо-строения с числом атомов углерода в радикале от 2 до 6.

3. Средство по п.1 или 2, отличающееся тем, что оно представляет собой капсулы для перорального применения.

4. Средство по п.1 или 2, отличающееся тем, что оно представляет собой таблетированную форму.

5. Средство по п.1 или 2, отличающееся тем, что оно представляет собой гранулы.

6. Средство по п.1, отличающееся тем, что дополнительно содержит траву солянки холмовой Salsola collina Pall, подвергнутую измельчению до размера частиц меньше 500 мкм.

7. Средство по п.6, отличающееся тем, что оно представляет собой капсулы для перорального применения.

8. Средство по п.6, отличающееся тем, что оно представляет собой таблетированную форму.

9. Средство по п.6, отличающееся тем, что оно представляет собой гранулы.

10. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой раствор в жидких пищевых, например в оливковом, и/или фармакопейных маслах, например касторовом, чаульмугровом.