Антитело, содержащее fc-вариантную часть (варианты), фармацевтическая композиция, содержащая антитело, и способ лечения млекопитающего

Изобретение относится к антителам, проявляющим модулированное связывание с FcγR, причем антитело содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в Fc-районе исходного Fc-полипептида, в частности, человеческого происхождения. Указанная модуляция выражается в увеличении аффинности указанного антитела в отношении FcγR. Сконструированы различные варианты антител, например, проявляющие модулированную эффекторную функцию, антитела, содержащие агликозилированный Fc-вариант исходного Fc-полипептида и имеющие улучшенную аффинность связывания с лигандом Fc по сравнению с агликозилированной формой исходного Fc-полипептида. Полученные антитела используют в составе фармацевтической композиции, обладающей модулированным связыванием с FcγR, и в способе лечения млекопитающих, имеющих соответствующие нарушения. Изобретение позволяет повысить аффинность полученных антител в 5-300 раз по сравнению с аффинностью исходного Fc-полипептида. 11 н. и 56 з.п. ф-лы, 44 ил., 66 табл.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Антитело, проявляющее модулированное связывание с FcγR в сравнении с антителом, содержащим исходный Fc-полипептид, причем указанное антитело содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в Fc-районе указанного исходного Fc-полипептида.

2. Антитело по п.1, где указанной модуляцией является увеличение аффинности указанного антитела в отношении указанного FcγR.

3. Антитело по п.1, где указанная, по меньшей мере, одна замена аминокислоты находится в положении аминокислоты, соответствующем положению аминокислоты в аминокислотной последовательности Fc-полипептида человека, выбранному из группы, состоящей из: 234, 235, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 247, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 269, 296, 297, 298, 299, 313, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 332, 333 и 334.

4. Антитело по п.1, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в положении аминокислоты, соответствующем положению в аминокислотной последовательности Fc-полипептида человека, выбранному из группы, состоящей из: 240, 244, 245, 247, 262, 263, 266, 299, 313, 325, 328 и 332.

5. Антитело по п.1, где указанный Fc-вариант содержит замену аминокислоты в положении 332.

6. Антитело по п.1, где, по меньшей мере, одна замена аминокислоты находится в положении аминокислоты, выбранном из группы, состоящей из: 239, 264, 297 и 330, при условии, что, если указанная последовательность является, по существу, человеческой, указанная замена аминокислоты не является S239A, V264A, N297A, N297Q, A330D, A330Q, А330К или A330S.

7. Антитело по п.1, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты, выбранную из группы, состоящей из:

234D, 234Е, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234Y, 234I, 234V, 234F, 235D, 235S, 235N, 235Q, 235Т, 235Н, 235Y, 235I, 235V, 235F, 239D, 239Е, 239N, 239Q, 239F, 239Т, 239Н, 239Y, 240I, 240A, 240T, 240M, 241W, 241L, 241Y, 241E, 241R, 243W, 243L, 243Y, 243R, 243Q, 244H, 245A, 247V, 247G, 262I, 262A, 262T, 262E, 263I, 263A, 263T, 263M, 264L, 264I, 264W, 264T, 264R, 264F, 264M, 264Y, 264E, 265G, 265N, 265Q, 265Y, 265F, 265V, 265I, 265L, 265H, 265T, 266I, 266A, 266T, 266M, 267Q, 267L, 269H, 269Y, 269F, 269R, 296E, 296Q, 296D, 296N, 296S, 296T, 296L, 296I, 296H, 297S, 297D, 297E, 298H, 299I, 299L, 299A, 299S, 299V, 299H, 299F, 299E, 313F, 325Q, 325L, 325I, 325D, 325E, 325A, 325T, 325V, 325H, 327N, 327L, 328M, 328D, 328E, 328N, 328Q, 328F, 328I, 328V, 328T, 328H, 328A, 329F, 330L, 330Y, 330V, 330I, 330F, 330R, 330H, 332D, 332E, 332N, 332Q, 332T, 332H, 332Y и 332А.

8. Антитело по п.1, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из: 264L, 264I, 241W, 241L, 243W, 243L, 241L/243L/262I/264I, 241W/243W, 241W/243W/262A/264A, 241L/262I,243L/264I, 243L/262I/264W, 241Y/243Y/262T/264T, 241E/243R/262E/264R, 241E/243Q/262T/264E, 241R/243Q/262T/264R, 241E/243Y/262T/264R, 328M, 328E, 328F, 332E, 328М7332Е, 244H, 245A, 247V, 313F, 244R/245A/247V, 247G, 264I/332E, 241E/243R/262E/264R/332E, 241E/243Q/262T/264E/332E, 241R/243Q/262T/264R/332E, 241E/243Y/262T/264R/332E, 298А/332Е, 239Е/332Е, 239Q/332E, 239Е, 265G, 265N, 239E/265G, 239E/265N, 239E/265Q, 296E, 296Q, 299Т, 327N, 267Q/327S, 267L/327S, 327L, 329F, 330L, 330Y, 332D, 297S, 297D, 297S/332E, 297D/332E, 297Е/332Е, 265Y/297D/332E, 265Y/297D/299L/332E, 265F/297E/332E, 328I/332E, 328Q/332E, 332N, 332Q, 264Т, 264F, 240I, 263I, 266I, 299А, 299S, 299V, 325Q, 325L, 325I, 239D, 239N, 239F, 239D/332D, 239D/332E, 239D/332N, 239D/332Q, 239E/332D, 239E/332N, 239E/332Q, 239N/332D, 239N/332E, 239N/332N, 239N/332Q, 239Q/332D, 239Q/332N, 239Q/332Q, 296D, 296N, 241Y/243Y/262T/264T/297D/332E, 330Y/332E, 264I/330Y/332E, 330L/332E, 264I/330L/332E, 234D, 234Е, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234Y, 234I, 234V, 234F, 235D, 235S, 235N, 235Q, 235Т, 235Н, 235Y, 235I, 235V, 235F, 239Т, 239Н, 239Y, 240А, 240Т, 240М, 263А, 263Т, 263М, 264М, 264Y, 266А, 266Т, 266М, 269Н, 269Y, 269F, 269R, 296S, 296Т, 296L, 296I, 298Н, 299Н, 330V, 330I, 330F, 330R, 330Н, 325D, 325Е, 325А, 325Т, 325V, 325H, 328D/332E, 328Е/332Е, 328N/332E, 328Q/332E, 328V/332E, 328Т/332Е, 328Н/332Е, 328I/332E, 328А, 332Т, 332Н, 332Y, 332А, 239E/264I/332E, 239Q/264I/332E, 239E/264I/330Y/332E, 239E/264I/298A/330Y/332E, 239D/297D/332E, 239E/297D/332E, 239D/265V/297D/332E, 239D/265I/297D/332E, 239D/265L/297D/332E, 239D/265F/297D/332E, 239D/265Y/297D/332E, 239D/265H/297D/332E, 239D/265T/297D/332E, 264E/297D/332E, 296D/297D/332E, 296E/297D/332E, 296N/297D/332E, 296Q/297D/332E, 296H/297D/332E, 296T/297D/332E, 297D/299V/332E, 297D/299I/332E, 297D/299L/332E, 297D/299F/332E, 297D/299H/332E, 297D/299E/332E, 297D/330Y/332E, 297D/298A/330Y/332E, 239D/330Y/332E, 239N/330Y/332E, 239D/330L/332E, 239N/330L/332E, 264I/298A/332E, 239D/298A/332E, 239N/298A/332E, 239D/264I/332E, 239D/264I/298A/332E и 239D/264I/330L/332E.

9. Антитело по п.7, где указанная Fc-вариантная часть дополнительно содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в положении аминокислоты, соответствующем положению в аминокислотной последовательности Fc-полипептида человека, выбранному из группы, состоящей из: 256, 270, 290, 298, 312, 322, 326, 329, 331, 333, 334 и 339.

10. Антитело по п.1, где указанный FcγR является FcγRIIIa.

11. Антитело по п.10, где указанный FcγRIIIa является V158- или F158-аллотипом FcγRIIIa.

12. Антитело по п.2, где указанный исходный Fc-полипептид является, по существу, человеческим и указанная аффинность является приблизительно в 5 раз более высокой, чем аффинность указанного исходного Fc-полипептида.

13. Антитело по п.12, где указанный исходный Fc-полипептид является, по существу, человеческим и указанная аффинность является приблизительно в 5 раз - приблизительно в 300 раз более высокой, чем аффинность указанного исходного Fc-полипептида.

14. Антитело по п.12, где указанная Fc-вариантная часть содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в положении аминокислоты, соответствующем положению в аминокислотной последовательности Fc-полипептида человека, выбранному из группы, состоящей из 234, 235, 239, 240, 243, 264, 266, 328, 330, 332 и 325.

15. Антитело по п.14, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты, выбранную из группы, состоящей из: 234Е, 234Y, 234I, 235D, 235S, 235Y, 235I, 239D, 239Е, 239N, 239Q, 239Т, 240I, 240М, 243L, 264I, 264Т, 264Y, 266I, 328М, 328I, 328Q, 328D, 328V, 328Т, 330Y, 330L, 330I, 332D, 332Е, 332N, 332Q и 325Т.

16. Антитело по п.15, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из: 264I, 243L/264I, 328М, 332Е, 328М/332Е, 264I/332E, 298А/332Е, 239Е/332Е, 239Q/332E, 239Е, 330Y, 332D, 328I/332E, 328Q/332E, 264Т, 240I, 266I, 239D, 239D/332D, 239D/332E, 239D/332N, 239D/332Q, 239E/332D, 239E/332N, 239E/332Q, 239N/332D, 239N/332E, 239Q/332D, 330Y/332E, 264I/330Y/332E, 330L/332E, 264I/330L/332E, 234Е, 234Y, 234I, 235D, 235S, 235Y, 235I, 239Т, 240М, 264Y, 330I, 325Т, 328D/332E, 328V/332E, 328Т/332Е, 328I/332E, 239E/264I/332E, 239Q/264I/332E, 239E/264I/330Y/332E, 239D/330Y/332E, 239N/330Y/332E, 239D/330L/332E, 239N/330L/332E, 264I/298A/332E, 239D/298A/332E, 239N/298A/332E, 239D/264I/332E, 239D/264I/298A/332E и 239D/264I/330L/332E.

17. Антитело по п.15, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в положении, выбранном из группы, состоящей из 256, 270, 290, 298, 312, 322, 326, 329, 331, 333, 334 и 339.

18. Антитело по п.1 или 2, где указанный исходный Fc-полипептид является, по существу, человеческим, по существу, мышиным, по существу, крысиным, или, по существу, обезьяньим.

19. Антитело по п.1 или 2, где связывание с одним или несколькими лигандами Fc является неизмененным.

20. Антитело по п.19, где указанный лиганд Fc выбран из группы, состоящей из Clq, FcRn, белка А и белка G.

21. Антитело по п.1 или 2, где CDC является незатронутой.

22. Антитело по п.1 или 2, где связывание с одним или несколькими лигандами Fc является измененным.

23. Антитело по п.1, где указанный Fc-вариант имеет отношение кратность по связыванию с FcγRIIIa: кратность по связыванию с FcγRIIb большее, чем 1.

24. Антитело по п.23, где указанный Fc-вариант имеет отношение кратность по связыванию с FcγRIIIa: кратность по связыванию с FcγRIIb больше, чем приблизительно 11:1.

25. Антитело по п.24, где указанный Fc-вариант имеет отношение кратность по связыванию с FcγRIIIa: кратность по связыванию с FcγRIIb между приблизительно 11:1 и приблизительно 86:1.

26. Антитело по п.23, где указанная Fc-вариантная часть содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты в положении, соответствующем положению аминокислоты в последовательности Fc-полипептида человека, выбранному из группы, состоящей из: 234, 235, 239, 240, 264, 296, 330 и 332.

27. Антитело по п.26, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты, выбранную из группы, состоящей из: 234Y, 234I, 235I, 239D, 239Е, 239N, 239Q, 240А, 240М, 264I, 264Y, 296Q, 330L, 330Y, 330I, 332D и 332Е.

28. Антитело по п.27, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из: 332Е, 264I/332E, 239Е/332Е, 239Q/332E, 296Q, 330L, 330Y, 332D, 239D, 239D/332E, 330Y/332E, 264I/330Y/332E, 330L/332E, 264I/330L/332E, 234Y, 234I, 235I, 240А, 240М, 264Y, 330I, 239D/330L/332E, 239D/298A/332E, 239N/298A/332E, 239D/264I/332E, 239D/264I/298A/332E и 239D/264I/330L/332E.

29. Антитело по п.26, где указанный Fc-вариант дополнительно содержит одну или несколько замен в положении, выбранном из группы, состоящей из: 256, 270, 290, 298, 312, 322, 326, 329, 331, 333, 334 и 339.

30. Антитело по п.1, где указанный Fc-вариант связывается, по меньшей мере, с одним FcγR с уменьшенной аффинностью относительно исходного Fc-полипептида.

31. Антитело по п.30, где указанным FcγR является FcγRIIIa.

32. Антитело по п.31, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты, выбранную из группы, состоящей из: 234D, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234V, 234F, 235N, 235Q, 235Т, 235Н, 235V, 235F, 239Е, 239N, 239Q, 239F, 239Н, 239Y, 240А, 240Т, 241W, 241L, 241Y, 241Е, 241R, 243W, 243L, 243Y, 243R, 243Q, 244Н, 245А, 247V, 247G, 262I, 262А, 262Т, 262Е, 263I, 263А, 263Т, 263М, 264L, 264I, 264W, 264Т, 264R, 264F, 264М, 264Е, 265G, 265N, 265Q, 265Y, 265F, 265V, 265I, 265L, 265H, 265T, 266A, 266T, 266M, 267Q, 267L, 269H, 269Y, 269F, 269R, 296E, 296Q, 296D, 296N, 296S, 296T, 296L, 296I, 296H, 297S, 297D, 297E, 298H, 299T, 299L, 299A, 299S, 299V, 299H, 299F, 299E, 313F, 325Q, 325L, 325T, 325D, 325E, 325A, 325V, 325H, 327N, 327L, 328M, 328E, 328N, 328Q, 328F, 328H, 328A, 329F, 330L, 330V, 330F, 330R, 330H, 332N, 332Q, 332T, 332H, 332Y и 332A.

33. Антитело по п.31, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из: 264L, 241W, 241L, 243W, 243L, 241L/243L/262I/264I, 241W/243W, 241W/243W/262A/264A, 241L/262I, 243L/262I/264W, 241Y/243Y/262T/264T, 241E/243R/262E/264R, 241E/243Q/262T/264E, 241R/243Q/262T/264R, 241E/243Y/262T/264R, 328М, 328Е, 328F, 244Н, 245А, 247V, 313F, 244H/245A/247V, 247G, 241E/243R/262E/264R/332E, 241E/243Y/262T/264R/332E, 265G, 265N, 239E/265G, 239E/265N, 239E/265Q, 296Е, 296Q, 299I, 327N, 267Q/327S, 267L/327S, 327L, 329F, 330L, 297S, 297D, 297S/332E, 332N, 332Q, 264F, 263I, 299А, 299S, 299V, 325Q, 325L, 325I, 239N, 239F, 239N/332N, 239N/332Q, 239Q/332N, 239Q/332Q, 296D, 296N, 234D, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234V, 234F, 235N, 235Q, 235T, 235H, 235V, 235F, 239H, 239Y, 240A, 263T, 263M, 264M, 266A, 266T, 266M, 269H, 269Y, 269F, 269R, 296S, 296T, 296L, 296I, 298H, 299H, 330V, 330F, 330R, 330H, 325D, 325E, 325A, 325V, 325H, 328E/332E, 328N/332E, 328Q/332E, 328H/332E, 328A, 332T, 332H, 332Y и 332А.

34. Антитело, содержащее вариант исходного Fc-полипептида, содержащий модификацию, по меньшей мере, одной аминокислоты в Fc-районе указанного исходного Fc-полипептида, где указанный Fc-полипептид модулирует эффекторную функцию в сравнении с исходным Fc-полипептидом.

35. Антитело по п.34, где указанной эффекторной функцией является ADCC.

36. Антитело по п.35, где указанный Fc-вариант улучшает ADCC в сравнении с указанным исходным Fc-полипептидом.

37. Антитело по п.36, где указанное улучшение ADCC является приблизительно в 5 раз большим, чем улучшение, вызываемое указанным исходным Fc-полипептидом.

38. Антитело по п.37, где указанное улучшение ADCC находится между приблизительно 5-кратным и 50-кратным улучшением в сравнении с улучшением, вызываемым указанным исходным Fc-полипептидом.

39. Антитело по п.37, где указанная Fc-вариантная часть содержит, по меньшей мере, одну замену в положении, соответствующем положению в последовательности человека, выбранному из группы, состоящей из: 234, 235, 239, 240, 243, 264, 266, 328, 330, 332 и 325.

40. Антитело по п.39, где указанный Fc-вариант содержит по меньшей мере одну замену, выбранную из группы, состоящей из: 234Е, 234Y, 234I, 235D, 235S, 235Y, 235I, 239D, 239Е, 239N, 239Q, 239Т, 240I, 240М, 243L, 264I, 264Т, 264Y, 266I, 328М, 328I, 328Q, 328D, 328V, 328T, 330Y, 330L, 330I, 332D, 332Е, 332N, 332Q и 325Т.

41. Антитело по п.39, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из: 264I, 243L/264I, 328М, 332Е, 328М/332Е, 264I/332E, 298А/332Е, 239Е/332Е, 239Q/332E, 239Е, 330Y, 332D, 328I/332E, 328Q/332E, 264Т, 240I, 266I, 239D, 239D/332D, 239D/332E, 239D/332N, 239D/332Q, 239E/332D, 239E/332N, 239E/332Q, 239N/332D, 239N/332E, 239Q/332D, 330Y/332E, 264I/330Y/332E, 330Е/332Е, 264I/330Е/332Е, 234Е, 234Y, 234I, 235D, 235S, 235Y, 235Т, 239Т, 240М, 264Y, 330I, 325Т, 328D/332E, 328V/332E, 328Т/332Е, 328I/332E, 239E/264I/332E, 239Q/264I/332E, 239E/264I/330Y/332E, 239D/330Y/332E, 239N/330Y/332E, 239D/330L/332E, 239N/330L/332E, 264I/298A/332E, 239D/298A/332E, 239N/298A/332E, 239D/264I/332E, 239D/264I/298A/332E и 239D/264I/330E/332E.

42. Антитело по п.39, где указанный Fc-вариант дополнительно содержит, по меньшей мере, одну замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 256, 270, 290, 298, 312, 322, 326, 329, 331, 333, 334 и 339.

43. Антитело по п.39, где указанный исходный Fc-полипептид является, по существу, человеческим, по существу, мышиным, по существу, крысиным, или, по существу, обезьяньим.

44. Антитело по п.35, где указанный Fc-вариант уменьшает ADCC в сравнении с указанным исходным Fc-полипептидом.

45. Антитело по п.44, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из: 234D, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234V, 234F, 235N, 235Q, 235Т, 235Н, 235V, 235F, 239E, 239N, 239Q, 239F, 239H, 239Y, 240A, 240T, 241W, 241L, 241Y, 241E, 241R, 243W, 243L, 243Y, 243R, 243Q, 244H, 245A, 247V, 247G, 262I, 262A, 262T, 262E, 263I, 263A, 263T, 263M, 264L, 264I, 264W, 264T, 264R, 264F, 264M, 264E, 265G, 265N, 265Q, 265Y, 265F, 265V, 265I, 265L, 265H, 265T, 266A, 266T, 266M, 267Q, 267L, 269H, 269Y, 269F, 269R, 296E, 296Q, 296D, 296N, 296S, 296T, 296L, 296I, 296H, 297S, 297D, 297E, 298H, 299I, 299L, 299A, 299S, 299V, 299H, 299F, 299E, 313F, 325Q, 325L, 325T, 325D, 325E, 325A, 325V, 325H, 327N, 327L, 328M, 328E, 328N, 328Q, 328F, 328H, 328A, 329F, 330L, 330V, 330F, 330R, 330H, 332N, 332Q, 332T, 332H, 332Y и 332А.

46. Антитело по п.44, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из: 264L, 241W, 241L, 243W, 243L, 241L/243L/262I/264I, 241W/243W, 241W/243W/262A/264A, 241L/262I, 243L/262I/264W, 241Y/243Y/262T/264T, 241E/243R/262E/264R, 241E/243Q/262T/264E, 241R/243Q/262T/264R, 241E/243Y/262T/264R, 328M, 328E, 328F, 244H, 245A, 247V, 313F, 244H/245A/247V, 247G, 241E/243R/262E/264R/332E, 241E/243Y/262T/264R/332E, 265G, 265N, 239E/265G, 239E/265N, 239E/265Q, 296E, 296Q, 299I, 327N, 267Q/327S, 267L/327S, 327L, 329F, 330L, 297S, 297D, 297S/332E, 332N, 332Q, 264F, 263I, 299A, 299S, 299V, 325Q, 325L, 325I, 239N, 239F, 239N/332N, 239N/332Q, 239Q/332N, 239Q/332Q, 296D, 296N, 234D, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234V, 234F, 235N, 235Q, 235Т, 235Н, 235V, 235F, 239H, 239Y, 240A, 263T, 263M, 264M, 266A, 266T, 266M, 269H, 269Y, 269F, 269R, 296S, 296T, 296L, 296I, 298H, 299H, 330V, 330F, 330R, 330H, 325D, 325E, 325A, 325V, 325H, 328Е/332Е, 328N/332E, 328Q/332E, 328Н/332Е, 328A, 332T, 332H, 332Y и 332А.

47. Антитело, содержащее агликозилированный Fc-вариант исходного Fc-полипептида, содержащий модификацию, по меньшей мере, одной аминокислоты в Fc-районе указанного исходного Fc-полипептида, где указанный агликозилированный Fc-вариант имеет улучшенную стабильность, растворимость или аффинность связывания с лигандом Fc относительно агликозилированной формы указанного исходного Fc-полипептида.

48. Антитело по п.47, где указанный агликозилированный Fc-вариант имеет улучшенную аффинность связывания с лигандом Fc в сравнении с агликозилированной формой исходного Fc-полипептида.

49. Антитело по п.48, где указанным лигандом Fc является FcγR.

50. Антитело по п.49, где указанным FcγR является FcγRIIIa.

51. Антитело по п.48, где указанная улучшенная аффинность связывания находится в пределах 0,4-кратной в сравнении с афинностью связывания гликозилированной формы исходного Fc-полипептида.

52. Антитело по п.47, где указанная Fc-вариантная часть содержит, по меньшей мере, одну замену в положении, соответствующем положению последовательности человека, выбранному из группы, состоящей из: 239, 241, 243, 262, 264, 265, 296, 297, 330 и 332.

53. Антитело по п.52, где указанный Fc-вариант содержит одну или несколько замен, выбранных из группы, состоящей из: 239D, 239Е, 241Y, 243Y, 262Т, 264Т, 264Е, 265Y, 265Н, 296N, 297D, 330Y и 332Е.

54. Антитело по п.52, где указанный Fc-вариант выбран из группы, состоящей из группы: 297D/332E, 241Y/243Y/262T/264T/297D/332E, 239D/297D/332E, 239E/297D/332E, 239D/265Y/297D/332E, 239D/265H/297D/332E, 264E/297D/332E, 296N/297D/332E и 297D/330Y/332E.

55. Антитело по п.53, где указанная агликозилированная Fc-вариантная часть содержит, по меньшей мере, одну замену в положении, соответствующем положению последовательности человека, выбранному из группы, состоящей из: 256, 270, 290, 298, 312, 322, 326, 329, 331, 333, 334 и 339.

56. Антитело по п.1, содержащее Fc-слитый белок, содержащий указанный Fc-вариант.

57. Антитело по п.1 или 56, где указанное антитело дополнительно содержит сконструированную гликоформу.

58. Антитело по п.57, где указанная сконструированная гликоформа улучшает эффекторную функцию.

59. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по п.1, и фармацевтически приемлемый носитель.

60. Способ лечения млекопитающего, нуждающегося в указанном лечении, предусматривающий введение антитела по п.1.

61. Антитело, содержащее Fc-вариант, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из 332D, 332E, 332N или 332Q, где указанные положения соответствуют положению последовательности человека, причем указанное антитело имеет специфичность в отношении антигена-мишени, выбранного из группы, состоящей из: CD20, CD22, CD33, CD52, Her2/neu, EGFR, EpCAM, MUC1, GD3, СЕА, СА 125, HLA-DR, TNFα и VEGF.

62. Антитело, содержащее Fc-вариант, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из: 264I, 264Т или 264Y, где указанные положения соответствуют положению последовательности человека, причем указанное антитело или Fc-слияние имеет специфичность в отношении антигена-мишени, выбранного из группы, состоящей из: CD20, CD22, CD33, CD52, Her2/neu, EGFR, EpCAM, MUC1, GD3, СЕА, СА 125, HLA-DR, TNFα и VEGF.

63. Антитело, содержащее Fc-вариант, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из: 239D, 239Е, 239N, 239Q или 239Т, где указанные положения соответствуют положению последовательности человека, причем указанное антитело или Fc-слияние имеет специфичность в отношении антигена-мишени, выбранного из группы, состоящей из: CD20, CD22, CD33, CD52, Her2/neu, EGFR, EpCAM, MUC1, GD3, СЕА, СА 125, HLA-DR, TNFα и VEGF.

64. Антитело, содержащее Fc-вариант, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из: 330Y, 330L или 330I, где указанные положения соответствуют положению последовательности человека, причем указанное антитело или Fc-слитый белок имеет специфичность в отношении антигена-мишени, выбранного из группы, состоящей из: CD20, CD22, CD33, CD52, Her2/neu, EGFR, EpCAM, MUC1, GD3, СЕА, СА 125, HLA-DR, TNFα и VEGF.

65. Антитело, содержащее Fc-вариант, где указанный Fc-вариант содержит, по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из 240I или 240М, где указанные положения соответствуют положению последовательности человека, причем указанное антитело или Fc-слияние имеет специфичность в отношении антигена-мишени, выбранного из группы, состоящей из: CD20, CD22, CD33, CD52, Her2/neu, EGFR, EpCAM, MUC1, GD3, СЕА, СА 125, HLA-DR, TNFα и VEGF.

66. Антитело, содержащее Fc-вариант, где указанный Fc-вариант содержит одну замену, состоящую из 297D, где указанное положение соответствует положению последовательности человека, причем указанное антитело или Fc-слитый белок имеет специфичность в отношении антигена-мишени, выбранного из группы, состоящей из: CD20, CD22, CD33, CD52, Her2/neu, EGFR, EpCAM, MUC1, GD3, СЕА, СА 125, HLA-DR, TNFα и VEGF.

67. Антитело по пп.61-65 или 66, где указанный Fc-вариант дополнительно содержит замену 298А.