Способ мутагенной обработки семян ячменя

Авторы патента:

A01H1/06 - способы изменения наследственных признаков, например путем обработки химикалиями или облучением (мутации или генная инженерия C12N 15/00)

Владельцы патента RU 2425485:

Федеральное государственное учреждение высшего профессионального образования "Вятская государственная сельскохозяйственная академия" (ФГОУ ВПО ВГСХА) (RU)

Изобретение относится к биотехнологии. Для получения исходного материала для селекции ячменя методом экспериментального мутагенеза в качестве мутагена применяют раствор препарата альбит. Во втором поколении под действием препарата проявляются хлорофилльные мутации и морфофизиологические изменения ячменя. Формы с морфофизиологическими мутациями оценивают по комплексу хозяйственно ценных признаков и при наличии ценности используют для дальнейшей селекции. Способ мутагенной обработки семян ячменя позволяет получить за короткий период времени достаточно большое количество разнообразных форм растений ячменя для использования в селекции. 4 табл.

Предлагаемое изобретение относится к области генетики и селекции и может быть использовано для получения наследственных изменений при создании исходного материала для селекции сельскохозяйственных растений.

Для получения мутаций применяются гамма- и рентгеновские лучи, лазерное излучение, химические вещества, в т.ч. и регуляторы роста (эпин, тур, кампозан, абсцизовая кислота) [1, 2].

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ обработки семян с помощью химического мутагена - регулятора роста эпин [3]. Семена обрабатывались водным раствором препарата эпин различных концентраций за 24 часа до посева. В первом поколении (M₁) наблюдалось положительное влияние препарата на рост и развитие растений ячменя.

Однако при существующем способе обработки во втором поколении (М₂) независимо от концентраций препарата наблюдается низкий уровень выхода хлорофильных мутаций - средняя частота 0,32%. Выход морфофизиологических изменений в М₂ на уровне - 5,5%, узкий спектр новообразований.

Предлагаемый способ обработки семян включает в себя обработку семян зерновых за сутки до посева водным раствором препарата альбит из расчета 3…300 г/т.

Препарат альбит зарегистрирован в реестре пестицидов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации в качестве фунгицида. Биопрепарат альбит, разработанный в научном центре при РАН РФ, успешно применяется на 47 сельскохозяйственных культурах в 36 регионах РФ. Альбит - это комплексный препарат, обладающий свойствами регулятора роста, фунгицида, удобрения и антидота [4, 5].

Характеристика предлагаемого способа.

Семена ярового ячменя сорта Биос-1 обрабатывались водным раствором препарата альбит в дозах 3,30 и 300 г препарата на тонну семян при расходе рабочего раствора 10 л/т. Контролем служили семена, обработанные дистиллированной водой в дозе 10 л/т.

В M₁ в каждом варианте обрабатывалось и высевалось по 500 семян, повторность опыта четырехкратная (по 125 зерен на делянку площадью 1 м²).

Наблюдения за динамикой развития растений в M₁ показали, что в вариантах с применением альбита наступление всех фаз развития растений опережало показатели контроля на 1-2 дня.

Применение препарата альбит повлияло на значение элементов продуктивности растений ячменя (табл.1).

Таблица 1
Влияние альбита на элементы продуктивности растений ячменя в M₁
Вариант	Продуктивная кустистость, шт	Длина колоса, см	Число колосков в колосе, шт	Число зерен в колосе, шт
Контроль	2,70±0,17	7,83±0,13	21,80±0,25	20,62±0,30
Альбит 3 г/т	3,23±0,21	8,40±0,20*	22,65±0,39	20,42±0,41
Альбит 30 г/т	4,52±0,28***	8,02±0,15	21,62±0,37	21,57±0,31*
Альбит 300 г/т	4,40±0,34***	8,07±0,17	22,90±0,31**	19,50±0,43*
Примечание: * - уровень вероятности Р>0,95 - уровень вероятности Р>0,99 * - уровень вероятности Р>0,999

Препарат альбит оказал стимулирующее действие на растения ячменя, в варианте альбит 3 г/т достоверно увеличилась длина колоса, в вариантах альбит 30 и 300 г/т существенно возросла продуктивная кустистость и число зерен в колосе. Достоверного снижения значений элементов продуктивности от применения препарата альбит не зафиксировано.

Во втором поколении (М₂) проводили отбор хлорофилльных мутаций. Все хлорофилльные мутации классифицировали [6].

Таблица 2
Частота и спектр хлорофилльных мутаций в М₂
Вариант	Проанализировано семей, шт	Число семей с мутациями, шт	Частота хлорофилльных мутаций, p±Sp	Спектр мутаций
Контроль	258	0	0	-
Альбит 3 г/т	266	2	0,75±0,53	Albina Claroviridis
Альбит 30 г/т	307	3	0,98±0,56	Claroviridis Flavoviridis Claroviridis
Альбит 300 г/т	247	2	0,81±0,57	Claroviridis Viridoxanthostriata

Наибольшее количество семей с хлорофилльными мутациями отмечено в варианте альбит 30 г/т - 3 семьи. Спектр мутаций во всех вариантах с применением альбита ограничен двумя видами мутаций. Чаще других встречались хлорофилльные мутации типа Claroviridis - светло-зеленая окраска растений, по одной семье встречались мутации типа flavoviridis - желтовато-зеленые растения, albina - белые растения, viridoxanthostriata - растения, на листовых пластинках которых чередуются желтые и зеленые полосы.

Кроме хлорофилльных мутантов ячменя в M₂ отмечены и формы растений с морфофизиологическими отклонениями от исходного сорта контроля. Частота таких изменений в М₂ представлена в таблице 3.

Таблица 3
Частота морфофизиологических изменений ячменя в М₂
Вариант	Число проанализированных семей	Число семей с морфофизиологическими изменениями	Частота морфофизиологических изменений, p±Sp
Вариант	258	3	1,16±0,67
Альбит 3 г/т	266	10	3,76±1,17
Альбит 30 г/т	307	13	4,23±1,15*
Альбит 300 г/т	247	15	6,07±1,52**
Примечание: * - уровень вероятности Р>0,95 ** - уровень вероятности Р>0,99

С увеличением концентрации препарата альбит происходит увеличение частоты выхода измененных форм. Наибольшее количество семей с изменениями - 15 семей отмечено в варианте альбит 300 г/т.

Для практической селекции наряду с частотой мутаций крайне важен и спектр мутационной изменчивости. Из таблицы 4 видно, что в целом спектр морфофизиологических новообразований представлен 7…13 типами. Наибольшее количество новообразований отмечено в варианте альбит 300 г/т - 13 типов, наименьшее число - 7 типов в варианте альбит 30 г/т.

Наиболее распространенными типами были новообразования по длине стебля и длине колоса. Наименее распространены изменения, связанные с ранним наступлением кущения и позднеспелостью. Не встречались в опытах следующие типы морфофизиологических изменений ячменя: раннее кущение, ранний выход в трубку, высокая масса зерна с колоса, низкая продуктивная кустистость, отсутствие воскового налета на листьях.

Таким образом препарат альбит является мутагенным факторам с такой правильностью, что при увеличении нормы расхода препарата увеличивается его мутагенная активность. В сравнении с прототипом препарат альбит дает большое количество хлорофилльных мутаций и дает более широкий спектр морфофизиологических изменений в М₂.

Описание мутантов с хозяйственно полезными признаками.

Мутант 7-5 создан при воздействии альбита 3 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный желто-серый, длиной 9,3 см, плотность низкая, 10,3 членика на 4 см длины колосового стержня. Длина соломины выше, чем у родительской формы, и составляет - 73,6 см. Куст прямостоячий.

Мутант 7-10 получен в варианте альбит 3 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный желтый, длинный (10,2 см), что на 2,3 см выше, чем у Биос-1. Куст прямостоячий. Средняя длина стебля 78,7 см. Имеет высокое число зерен в колосе, отличается ранним колошением.

Мутант 6-7 выделен при обработке альбитом 30 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный, желтый с сероватым оттенком, длиной 8,7 см. Стебель высокий (71 см). Высокая продуктивная кустистость 3,8 продуктивных стебля на одно растение.

Мутант 5-1 получен в варианте альбит 300 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный желтый, длинный (9,3 см), что на 1,4 см выше, чем у Биос-1. Куст прямостоячий. Средняя длина стебля 76,3 см. Имеет высокую продуктивную кустистость.

Источники информации

1. Дудин Г.П. Мутагенное действие излучения гелий-неонового лазера на яровой ячмень // Генетика. 1983, №10, с.1693-1699.

2. Соколова Е.В., Ленточкин A.M. Сравнительтная мутабильность ячменя к регуляторам роста // Адаптивные технологии в растениеводстве - итоги и перспективы: материалы всероссийской научно-практической конференции, посвященной 60-летию кафедры растениеводства ИжГСХА. - Ижевск: Изд-во ИжГСХА, 2003. - С.115-118.

3. Черемисинов М.В., Дудин Г.П. Изменчивость ярового ячменя во втором и третьем поколениях под влиянием протравителей семян // Селекция и семеноводство сельскохозяйственных культур: сборник материалов VIII Всероссийской научно-практической конференции. - Пенза: РИО ПГСХА, 2004. - С.43-45.

4. Мелькумова А. Биопрепарат Альбит для повышения урожая и защиты сельскохозяйственных культур. - М.: ВНИИ защиты растений МСХ РФ. - 2006 г.

5. Алехин В.Г. Биопрепарат Альбит: результаты и особенности применения (Комплексный препарат, обладающий свойствами регулятора роста, фунгицида, удобрения и антидота) // Гл. агроном, - 2007. - №3. - с.55-59.

6. Калам Ю., Орав Т. Хлорофилльная мутация. - Таллин: Валгус, 1974. - 59 с.

Способ получения мутантных растений ячменя, заключающийся в замачивании семян ячменя в водном растворе препарата Альбит из расчета 30-300 г препарата на тонну семян и выращивании из обработанных семян растений второго поколения.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции растений, и может быть использовано в мутационной генетике для создания новых сортов растений. .

Способ получения крупнозерных форм у апомиктичных гибридов кукурузы // 2379882

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при возделывании гибридов кукурузы. .

Способ получения двухнулевых линий-восстановителей фертильности brassica napus, имеющих хорошее агрономическое качество // 2373698

Изобретение относится к способу получения двухнулевых линий-восстановителей фертильности рапса Brassica napus с цитоплазматической мужской стерильностью (ЦМС) Ogura, представляющего собой интрогрессию редьки, несущую ген-восстановитель фертильности Rfo, вырезанный из аллели Pgi-2 редьки и рекомбинированный с геном Pgi-2 Brassica oleracea, имеющих хорошее агрономическое качество, отличающееся женской фертильностью, хорошим уровнем переноса Rfo и высокой вегетационной мощностью.

Масло, семена и растения подсолнечника с модифицированным распределением жирных кислот в молекуле триацилглицерина // 2337530

Рекомбинантная полинуклеотидная последовательность, характеризующая уникальный трансформационный акт между генетической конструкцией, включающей ген cryiiia, и геномной днк картофеля сорта луговской, ее применение и содержащие эту последовательность клетка, трансгенное растение и его потомство // 2337529

Изобретение относится к области генетической инженерии и направлено на получение устойчивого к колорадскому жуку и отвечающего условиям биологической и пищевой безопасности трансгенного картофеля на основе высокопродуктивного отечественного сорта и разработку надежного средства для идентификации соответствующего трансформационного события в геноме растения.

Способ стимуляции митотической активности клеток растений // 2332841

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для повышения митотической активности меристем однодольных и двудольных растений. .

Способ индукции эпигенетической изменчивости у мягкой пшеницы // 2322801

Изобретение относится к области генетики и селекции и может быть использовано при создании исходного материала для селекции сельскохозяйственных растений. .

Способ получения фотомутантов сельскохозяйственных культур // 2312482

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекционной работе. .

Способ получения генетически модифицированных растений капусты белокочанной // 2286669

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения генетически модифицированных растений капусты белокочанной. .

Рекомбинантная полинуклеотидная последовательность, характеризующая уникальный трансформационный акт между генетической конструкцией, включающей ген cryiiia, и геномной днк картофеля сорта невский, ее применение и содержащие эту последовательность клетка, трансгенное растение и его потомство // 2286386

Изобретение относится к области генетической инженерии, в частности к получению устойчивого к колорадскому жуку и отвечающего условиям биологической и пищевой безопасности трансгенного картофеля.

Способ мутагенной обработки растений ячменя // 2456796

Способ мутагенной обработки семян ячменя // 2464779

Изобретение относится к области генетики и селекции и может быть использовано для индукции мутаций при создании исходного материала для селекции сельскохозяйственных культур

Растения томата, обладающие повышенными уровнями устойчивости к botrytis // 2469094

Изобретение относится к области биотехнологии

Гибридный инсектицидный белок, молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая такой белок, трансгенные растения и их семена, содержащие такой белок, способ получения белка и его применение // 2497830

Группа изобретений относится к области белковой инженерии, молекулярной биологии растений и борьбы с вредителями и касается гибридного инсектицидного белка и его применений. Описанный гибридный инсектицидный белок включает от N-конца до С-конца N-концевой участок белка Cry3A, слитого с С-концевым участком белка Cry1Ab, причем позиция кроссинговера белка Cry3A и белка Cry1Ab расположена в консервативном блоке 2, в консервативном блоке 3 или в консервативном блоке 4 и обладает активностью против западного кукурузного корневого жука. Также представлены молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие новые белки, способы получения белков, способы их применения, а также трансгенные растения и их семена, содержащие такие белки. Группа изобретений позволяет получить экономически выгодные средства для борьбы с жуками рода Diabrotica. 13 н. и 26 з.п. ф-лы, 8 ил., 9 табл., 46 пр.

Масло, семена и растения подсолнечника с модифицированным распределением жирных кислот в молекуле триацилглицерина // 2502793

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения семян подсолнечника, которые содержат эндогенное масло, содержащее по меньшей мере 12% стеариновой кислоты от общего содержания жирных кислот, в котором содержание олеиновой кислоты выше содержания линолевой кислоты и в котором коэффициент распределения насыщенных жирных кислот α между положениями sn-1 и sn-3 составляет по меньшей мере 0,28. Раскрыто масло семян подсолнечника, имеющее по меньшей мере 12% стеариновой кислоты от общего содержания жирных кислот, более высокое содержание олеиновой кислоты, чем линолевой кислоты, и коэффициент распределения насыщенных жирных кислот α между положениями sn-1 и sn-3, составляющий по меньшей мере 0,28, а также пищевой продукт его содержащий. Также раскрыт способ получения растения подсолнечника, образующего семена, содержащие эндогенное масло, содержащее по меньшей мере 12% стеариновой кислоты от общего содержания жирных кислот, и в котором коэффициент распределения насыщенных жирных кислот α между положениями sn-1 и sn-3 составляет по меньшей мере 0,38. Изобретение позволяет эффективно получать масло, содержащее по меньшей мере 12% стеариновой кислоты от общего содержания жирных кислот, более высокое содержание олеиновой кислоты, чем линолевой кислоты, и коэффициент распределения насыщенных жирных кислот α между положениями sn-1 и sn-3, составляющий по меньшей мере 0,28. 5 н. и 7 з.п. ф-лы, 3 ил., 8 табл., 3 пр.

Способ стабилизации транскрипции хлоропластных генов рапса в условиях хлоридного засоления // 2514641

Изобретение относится к области биотехнологии и сельского хозяйства. В способе растения обрабатывают раствором биологически активного вещества, в качестве которого используют 24-эпибрассинолид. При этом через 3 недели культивирования растений рапса на жидкой питательной среде последующие две недели растения подвергают хлоридному засолению 125 мМ с однократным внесением в раствор 24-эпибрассинолида в концентрации 10-8 М в начале засоления. Способ позволяет повысить устойчивость растений рапса к повреждающему действию интенсивного хлоридного засоления и экологическую безопасность производимой продукции. 4 ил., 1 табл., 1 пр.

Белок-фактор транскрипции dst с доменом "цинковые пальцы" риса и его применение для регуляции устойчивости к засухе и к действию солей // 2558249

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способам получения растения с повышенной устойчивостью к засухе и действию солей по сравнению с диким видом растения путем снижения экспрессии/функции белка-фактора транскрипции у растения. Также изобретение относится к растению с повышенной устойчивостью к засухе и действию солей, полученное вышеуказанным способом. Изобретение позволяет эффективно получать растения с повышенной устойчивостью к засухе и действию солей по сравнению с диким видом растения. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 ил., 1 табл., 6 пр.

Способ предпосевной стимуляции семян и устройство для его осуществления // 2565822

Группа изобретений относится к сельскому хозяйству, в частности к методам предпосевной стимуляции семян низкоинтенсивным лазерным излучением в инфракрасной и красной областях оптического диапазона. Способ характеризуется тем, что на проклюнувшиеся семена после суточного замачивания однократно воздействуют при освещении 10-15 лк низкоинтенсивным сканирующим лазерным излучением сначала инфракрасного диапазона излучения лазером типа ADL-85502-TL. После чего проклюнувшие семена подвергают воздействию излучения лазером типа HLDH-660-A-50-01 в красном диапазоне излучения, дополнительно промодулированным пространственным модулятором. Устройство включает контейнерный блок, соединенные в технологической последовательности блок формирования управляющей программы, блок формирования потока излучения, установленный на вращающейся каретке и имеющий два лазера, пространственный модулятор. Последний размещен в контейнерном блоке и представляет собой многослойную анизотропную квазижидкокристаллическую дифракционную решетку, заключенную между двумя прозрачными пластинами, для образования в каждой точке падения промодулированного лазерного луча интерференционного лазерного поля со своей спекл-структурой. Группа изобретений обеспечивает повышение эффективности и качества стимуляции за счет обеспечения условий согласования пространственного распределения интенсивности поля лазерного излучения со структурой обрабатываемых семян. 2 н.п. ф-лы, 1 пр., 1 табл., 4 ил.

Способы полива растений с помощью 1-мср // 2615442

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу увеличения устойчивости к засухе сельскохозяйственного растения путем полива. Способ включает внесение 1-метилциклопропена в воде для полива растений на сельскохозяйственную культуру при расходе от 1-20 г на гектар, где концентрация 1-метилциклопропена в воде для полива составляет от 200 до 500 ppm. Изобретение позволяет эффективно увеличивать устойчивость сельскохозяйственных растений к засухе. 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 9 пр.

Способ получения безмаркерных трансгенных растений каланхоэ перистого, экспрессирующих ген цекропина р1 // 2631929

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения безмаркерных трансгенных растений каланхоэ перистого, экспрессирующих ген цекропина Р1. Изобретение обеспечивает получение и тестирование безмаркерных растений каланхоэ с повышенными антибиотическими свойствами за короткий промежуток времени для использования в фармакологии и медицине. 8 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 12 пр.