Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения



Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения
Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения
Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения
Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения

 


Владельцы патента RU 2440819:

Дивелэпмэнт Сентэ фо Байэутекнолэджи (TW)

Изобретение относится к медицине. Осуществляют контактирование сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus. Затем его концентрируют с получением концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus и обрабатывают методом разделения перемешиванием. Производят разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем, объединение разведенного неочищенного экстракта с абсорбирующей смолой и перемешивание абсорбирующей смолы и разведенного неочищенного экстракта. После этого жидкую часть отбрасывают и экстрагируют смолу растворителем с декантированием экстракта. Затем проводят повторные стадии экстрагирования с уменьшением полярности растворителя. Экстракт Plectranthus amboinicus обладает активностью против кожных нарушений. Фармацевтическая композиция обладает акивностью против кожных нарушений, включает терапевтически активное количество экстракта Plectranthus amboinicus и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель. Изобретение позволяет упростить способ и повысить эффективность продуктов. 7 н. и 7 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к способу получения экстрактов трав, используемых в китайской медицине. В частности, настоящее изобретение относится к применению твердожидкостного разделения в сочетании со специальной обработкой для массового производства растительного экстракта для лечения кожных нарушений, включая стимуляцию заживления ран, особенно у больных диабетом.

Уровень техники

Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng, произрастающий в Малайзии и Индии, представляет собой декоративное лекарственное растение, обычно культивируемое в простых семьях. Лекарственной частью Plectranthus amboinicus является надземная часть. Plectranthus amboinicus известен также как кубинский ореган, индийский бурачник, индийская мята, мексиканская мята, мексиканский ореган или испанский тимьян. Индийцы используют Plectranthus amboinicus как душистое вещество для тканей, а англичане обнаружили его приятный аромат, когда импортировали ткани для шалей из Индии в 1820-е годы. Когда листья Plectranthus amboinicus кладут прямо в одежду, это имеет не только ароматический эффект, но также предохраняет одежду от порчи молью. Считают, что это полезно для дезинфекции, повышения полового возбуждения и предупреждения укусов насекомых. Кроме того, Plectranthus amboinicus можно использовать для лечения укусов ядовитых змей и облегчения таких симптомов, как головная боль, метеоризм, тошнота, диарея и повышение температуры. Более того, масло Plectranthus amboinicus является популярными духами в Азии, и его используют в ароматерапии для улучшения регенерации эпителия, лечения акне и облегчения симптомов экземы, эпидермофитии стопы и сухой трескающейся кожи. Более того, Plectranthus amboinicus представляет собой хороший транквилизатор и афродизиак, который может уменьшить тревогу и усилить половое желание.

Различные варианты применения Plectranthus amboinicus описаны в периодических журналах широкого профиля, но в литературе редко встречаются научные исследования Plectranthus amboinicus. Опубликованная патентная заявка США №2006/0099283 А1 раскрывает сок из листьев Plectranthus amboinicus, предназначенный для лечения рака и/или опухоли. Заявка на патент США с серийным номером 11/605178, относящаяся к настоящему изобретению, предусматривает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество неочищенных экстрактов/экстрактов Plectranthus amboinicus и терапевтически эффективное количество экстрактов Centella asiatica Urban.

Centella asiatica Urban (щитолистник) представляет собой растение, в естественных условиях произрастающее в прибрежных районах Мадагаскара и Индийского океана. Лекарственной частью Centella asiatica Urban семейства Apiaceae является целое высушенное растение. Centella asiatica Urban известна также как европейская водяная мята, готу кола, кола, индийский щитолистник, индийский женьшень, трава "конское копыто", пегага, мандукапарни, тигриная трава, "широкий лист" или тоно. Сотни лет считали, что Centella asiatica Urban используют в традиционной медицине Азии для улучшения заживления ран. Экстракты Centella asiatica Urban включают два основных соединения: азиатикозид и мадекассовую кислоту. Экстракты Centella asiatica Urban используют для лечения ожогов и травм и предупреждения послеоперационных спаек; способы получения экстрактов Centella asiatica Urban описаны в ряде патентных заявок. Например, патент США №4318906 и CN 1353972A раскрывают медицинское применение Centella asiatica Urban в качестве единственного активного ингредиента; патенты США №№6475536, US 6267996, а также CN 1313124А, CN 93110425.4 и CN 1089497А раскрывают применение Centella asiatica Urban в комбинации с другими веществами для косметического препарата, лечения ожогов или получения мази для лечения травм, и патенты США №№5834437, US 6417349, а также CN 1194154А раскрывают способы получения экстрактов Centella asiatica Urban.

Принятые способы разделения, предназначенные для выделения компонентов из смеси, включают контактирование смеси с неионной абсорбирующей смолой, такой как DIAION® HP20, DIAION® HP20SS, Sepabeads® SP207 (Mitsubishi Chemical Corporation), Amberlite™ XAD-2 (Rohm and Hass company), Amberlite™ XAD-4 и т.п. Стадии включают упаковку неионной абсорбирующей смолы в разделительную колонку, введение смеси в колонку и элюцию колонки растворителем. Когда данный способ используют для обработки большого количества смеси, он является очень трудоемким и условия элюции нелегко контролировать.

Сок из листьев, согласно опубликованной патентной заявке США №2006/0099283 А1, получают измельчением и удалением фрагментов и/или остатков тканей; различные фракции сока из листьев разделяют с помощью фильтрующих центрифуг.

Экстракты Plectranthus amboinicus, согласно заявке на патент США с серийным номером 11/605178, получают с использованием серии растворителей с различными полярностями с целью элюции экстрактов с хроматографической колонки. Данный способ является сложным и трудоемким. Все еще существует необходимость разработки способа получения активных ингредиентов Plectranthus amboinicus в больших количествах.

Неожиданно обнаружено, что способ на основе перемешивания может заместить традиционный способ разделения на колонке и его можно использовать для массового производства экстрактов Plectranthus amboinicus. Способ на основе перемешивания является быстрым, и условия элюции можно легко контролировать. Более того, экстракты Plectranthus amboinicus, полученные разделением путем перемешивания, более эффективны, чем экстракты, полученные колоночным хроматографическим разделением.

Раскрытие изобретения

Одна из целей настоящего изобретения состоит в разработке способа получения неочищенного экстракта и/или экстрактов Plectranthus amboinicus.

Другой целью настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции для лечения кожных нарушений (включая стимуляцию заживления ран у больных диабетом), включающей терапевтически эффективное количество неочищенных экстрактов и/или экстрактов Plectranthus amboinicus. Фармацевтическая композиция может далее включать терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urbans.

Еще одной целью настоящего изобретения является получение перевязочного материала для ран, содержащего фармацевтическую композицию, соответствующую данному изобретению.

Следующая цель настоящего изобретения состоит в разработке способа лечения кожного нарушения, включающего введение фармацевтической композиции, соответствующей данному изобретению.

Настоящее изобретение детально описано в последующих разделах. Другие признаки, цели и преимущества настоящего изобретения легко можно обнаружить в детальных описаниях и формуле изобретения.

Краткое описание чертежей

На фигуре 1 показан хроматографический спектр экстракта Plectranthus amboinicus (PA-W4), изготовленного с помощью разделения смешиванием. Спектр был определен с помощью обращеннофазовой ВЭЖХ при детектировании на длине волны 270 нм.

На фигуре 2 показан хроматографический профиль Plectranthus amboinicus (PA-C4), изготовленный с помощью разделения колоночной хроматографией. Спектр был определен с помощью обращеннофазовой ВЭЖХ при детектировании на длине волны 270 нм.

На фигуре 3 показано закрытие ран у мышей с индуцированным стрептозотоцином (STZ) диабетом. Группа 1: на раны наносили мазь, содержащую 1% Centella asiatica Urbans экстрактов (S1); группа 2: на раны наносили CGS-21680 (10 мкг/мл); группа 4: на раны наносили Regranex; группа 5: на раны наносили DCB-WH1-C (мазь, включающая 1% S1 и 0,25% PA-C4); группа 6: на раны наносили DCB-WH1-W (мазь, включающая 1% S1 и 0,25% PA-W4).

На фигуре 4 показано закрытие ран у мышей с индуцированным стрептозотоцином диабетом. Группа 1: на раны наносили плацебо (мазь без лекарственного средства); группа 2: на раны наносили мазь, содержащую 1% Centella asiatica Urbans экстрактов (S1); группа 3: на раны наносили мазь, включающую 0,25% PA-W4; группа 4: на рану наносили DCB-WH1-W (мазь, включающую 1% S1 и 0,25% PA-W4); группа 5: на раны наносили мазь, содержащую 1% PA-W4.

Осуществление изобретения

Пока в данном контексте не определено иначе, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, будут иметь значения, которые обыкновенно имеют в виду под ними обычные специалисты в области техники. Значение и объем терминов должны быть ясными; однако в случае какой-либо возможной неоднозначности определения, представленные в данном контексте, имеют приоритет относительно любого словаря или определения во внешнем источнике.

Как используют в соответствии с настоящим описанием, следует иметь в виду, что следующие термины, пока не указано иначе, имеют следующие значения.

Термин "кожные нарушения", как используют в данном контексте, включает раны и язвы. В одном варианте осуществления кожные нарушения включают порезы, рваные раны, ссадины, колотые раны или другие подобные кожные повреждения, предпочтительно раны больных диабетом; язвы, включая пролежни.

Термин "лечение" или "стимуляция", как используют в данном контексте, означает улучшение симптомов.

Термин "пациенты", как используют в данном контексте, означает животных, в частности млекопитающих. В одном предпочтительном варианте осуществления термин "пациенты" означает "человек".

Термин "терапевтически эффективное количество", как используют в данном контексте, относится к количеству фармацевтической композиции, используемой в виде монотерапии или в комбинации с другими лекарственными средствами для лечения нарушений, которые проявляют терапевтическую эффективность.

Термин "носитель" или "фармацевтически приемлемый носитель" относится к разбавителям, наполнителям, акцепторам или аналогам, которые хорошо известны обычным специалистам в области изготовления фармацевтических композиций.

Термин "экстракты Centella asiatica Urban" означает экстракты высушенных целых растений Centella asiatica Urban, в которых основные активные компоненты включают азиатикозид и мадекассовую кислоту. Предпочтительно, когда он является лекарственным компонентом, имеющимся на рынке, который в основном включает азиатикозид и мадекассовую кислоту, и его чистота составляет больше чем 70%.

Термин "неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus" означает экстракт, полученный из надземной части Plectranthus amboinicus, и неочищенный экстракт можно далее сконцентрировать.

Термин "экстракт Plectranthus amboinicus" означает экстракт, полученный из неочищенного экстракта путем дальнейшего разделения(ий).

Термин "высокополярный растворитель" означает растворитель, который имеет самую высокую полярность среди растворителей, используемых в способе получения. Высокополярный растворитель включает, но без ограничения перечисленным, воду, метанол, этанол или смесь двух или более перечисленных растворителей.

Термин "низкополярный растворитель" означает растворитель, который имеет самую низкую полярность среди растворителей, используемых в способе получения. Низкополярный растворитель включает, но без ограничения перечисленным, хлороформ, изопропанол, ацетон, этилацетат, смесь двух или более из предшествующих растворителей с одним или более растворителей, которые имеют более высокую полярность.

Термин "растворитель повышенной полярности" означает растворитель, который имеет полярность ниже, чем высокополярный растворитель, используемый в способе получения, но выше, чем полярность растворителя средней полярности, используемого в способе получения. Растворители повышенной полярности можно получить смешиванием высокополярного растворителя с растворителем, имеющим более низкую полярность, в соотношении (об.:об.) от приблизительно 30:70 до приблизительно 70:30, предпочтительно от приблизительно 60:40 до приблизительно 40:60.

Термин "растворитель средней полярности " означает растворитель, который имеет полярность ниже, чем у растворителя повышенной полярности, используемого в способе получения, но выше, чем у низкополярного растворителя, используемого в способе получения. Растворители средней полярности можно получить смешиванием высокополярного растворителя с растворителем, имеющим более низкую полярность, в соотношении (об.:об.) от приблизительно 30:70 до приблизительно 5:95, предпочтительно от приблизительно 15:85 до приблизительно 5:95.

Пока из контекста не следует иначе, термины в единственном числе будут включать множественное число и термины во множественном числе будут включать единственное число.

Способы получения

Настоящее изобретение характеризуется использованием разделения твердое вещество-жидкость (разделение путем перемешивания) в комбинации со специальной обработкой для массового получения экстрактов Plectranthus amboinicus ускоренным образом с более высоким выходом. Разделение путем перемешивания включает перемешивание абсорбирующей смолы, такой как DIAION, в экстракте Plectranthus amboinicus и выделение различных фракций из экстрактов Plectranthus amboinicus с помощью различных стадий разделения с использованием различных растворителей. Кроме повышенной производительности, экстракт Plectranthus amboinicus, полученный способом, соответствующим настоящему изобретению, более эффективен, чем полученный колоночным хроматографическим разделением.

Соответствующий настоящему изобретению способ получения экстрактов Plectranthus amboinicus включает стадии:

- контактирования сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;

- концентрирования неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus и

- обработки концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus с использованием способа разделения путем перемешивания с получением экстракта Plectranthus amboinicus.

Согласно настоящему изобретению способ разделения путем перемешивания включает следующие стадии:

(a) разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем, смешивание разведенного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus с абсорбирующей смолой и перемешивание абсорбирующей смолы и разведенного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;

(b) удаление жидкой части, экстракцию смолы дистиллированной водой и сбор первого экстракта;

(c) экстракцию смолы растворителем повышенной полярности и сбор второго экстракта;

(d) экстракцию смолы растворителем средней полярности и сбор третьего экстракта и

(e) экстракцию смолы растворителем низкой полярности и сбор четвертого экстракта.

В одном предпочтительном варианте осуществления способ получения экстрактов Plectranthus amboinicus включает стадии:

1) контактирования сухих листьев Plectranthus amboinicus экстрагирующим листья растворителем в течение от приблизительно 30 до приблизительно 100 часов с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;

2) концентрирование неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;

3) разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем и смешивание разведенного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus с абсорбирующей смолой путем перемешивания в течение от приблизительно 10 до приблизительно 30 часов;

4) удаление жидкой части;

5) погружение смолы в дистиллированную воду в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением первого экстракта (PA-W1);

6) смешивание и перемешивание смолы с растворителем повышенной полярности в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением второго экстракта (PA-W2);

7) смешивание и перемешивание смолы с растворителем средней полярности в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением третьего экстракта (PA-W3);

8) смешивание и перемешивание смолы с низкополярным растворителем в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением четвертого экстракта (PA-W4).

Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, растворитель, экстрагирующий листья, выбран, но без ограничения перечисленными, из воды и спиртов. В предпочтительном варианте осуществления спирт представляет собой этанол. Соотношение объема растворителя, экстрагирующего листья, и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 6:1 до приблизительно 15:1, предпочтительно приблизительно 10:1.

Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, экстракт листьев, полученный на стадии 1, можно сконцентрировать любым из принятых способов концентрирования растворов, например с использованием роторного испарителя, понижающего давление.

Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, абсорбирующая смола выбрана, но без ограничения перечисленным, из DIAION® HP20, DIAION® HP20SS, Sepabeads® SP207, Amberlite™ XAD-2, Amberlite™ XAD-4 и т.п., предпочтительно серии DIAION®. В одном предпочтительном варианте осуществления абсорбирующая смола представляет собой DIAION® HP20. Кроме того, смола DIAION® HP20 может быть предварительно обработана метанолом.

Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, соотношение объема высокополярного растворителя и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно от приблизительно 5:1; соотношение объема растворителя повышенной полярности и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно приблизительно 5:1; соотношение объема растворителя средней полярности и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно приблизительно 5:1, и соотношение объема низкополярного растворителя и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно приблизительно 5:1.

Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, период экстракции на стадии 1 составляет от приблизительно 30 до приблизительно 100 часов, предпочтительно от приблизительно 50 до приблизительно 80 часов и наиболее предпочтительно больше чем приблизительно 72 часа. Период абсорбции на стадии 3 составляет от приблизительно 10 до приблизительно 30 часов, предпочтительно от приблизительно 17 до приблизительно 25 часов и наиболее предпочтительно больше чем приблизительно 20 часов. Период экстракции на стадии 5 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час. Период экстракции на стадии 6 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час. Период экстракции на стадии 7 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час. Период экстракции на стадии 8 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час.

Более того, согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, перемешивание проводят при скорости от приблизительно 3 до приблизительно 15 об/мин, предпочтительно от приблизительно 5 до приблизительно 10 об/мин и наиболее предпочтительно 7 об/мин.

Способ, соответствующий настоящему изобретению, представляет собой высокоэффективный способ массового получения экстрактов Plectranthus amboinicus. Способ приблизительно в пять раз быстрее способов колоночного хроматографического разделения с целью экстракции активных фракций из Plectranthus amboinicus.

Фармацевтические композиции

Настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus, полученного способом разделения, соответствующим настоящему изобретению. Другой вариант осуществления, соответствующий настоящему изобретению, предусматривает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus, полученного способом разделения, соответствующим настоящему изобретению, в комбинации с терапевтически эффективным количеством экстракта Centella asiatica Urban.

Фармацевтическую композицию, соответствующую настоящему изобретению, можно нанести местно на раны, и она может быть приготовлена в виде спрея или препарата, отличного от спрея. Форма спрея включает спрей или раствор; форма, отличная от спрея, может быть полутвердой или твердой, предпочтительно твердой формой, имеющей кинематическую вязкость больше, чем у воды. Подходящие препараты включают, но без ограничения перечисленным, суспензии, эмульсии, кремы, мази, линименты и т.п. При необходимости их можно стерилизовать или смешивать с любыми фармацевтически приемлемыми носителями, такими как стабилизаторы, смачивающие агенты и т.п. Предпочтительно, когда фармацевтическая композиция, соответствующая изобретению, приготовлена в виде мазей, в которых предпочтительные фармацевтически приемлемые носители включают, но без ограничения перечисленным, высшие жирные кислоты, воски, липиды, глицерин, высшие спирты или синтетические липиды. Фармацевтическая композиция, соответствующая настоящему изобретению, независимо от формы, в которой она приготовлена, может далее включать смягчающие вещества, отдушки или красители с целью повышения приемлемости для различных вариантов применения.

Терапевтически эффективные количества неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban раскрыты в USSN 11/605178, патенте США №4318906, CN 1353972A, патенте США №6475536, патенте США №6267996, CN 1313124А, CN 93110425.4 и CN 1089497А, в связи с чем описания заявок включены в данном контексте посредством ссылки во всей полноте.

Фармацевтические композиции, соответствующие настоящему изобретению, могут быть получены обычными специалистами в области техники при использовании принятых способов. Один вариант осуществления, соответствующий настоящему изобретению, включает способ получения мази, включающий следующие стадии:

- нагревание мазевой основы в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения;

- добавление размягченной мазевой основы в свою очередь в химический стакан, содержащий замороженный обезвоженный неочищенный экстракт и/или экстракт Plectranthus amboinicus;

- доводка количества мазевой основы и неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus для приготовления мази с неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus и

- хранение мази при 4°С в холодильнике.

Содержание неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus составляет приблизительно от 1% до 15% по массе мази. Содержание экстракта Plectranthus amboinicus составляет приблизительно от 0,1% до 5% по массе мази.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения включает способ получения мази, включающий следующие стадии:

- нагревание мазевой основы в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения;

- добавление размягченной мазевой основы в свою очередь в химический стакан, содержащий замороженные обезвоженные неочищенные экстракты и/или экстракт Plectranthus amboinicus для приготовления мази с неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus;

- однородное перемешивание мази с неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus и экстрактом Centella asiatica Urban для приготовления мази с экстрактом Centella asiatica Urban и неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus и

- хранение мази при 4°С в холодильнике.

Содержание неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 0,5% до приблизительно 5% по массе мази, и содержание экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 20% по массе мази. Содержание экстракта Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 0,05% до приблизительно 2% по массе мази, и содержание экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 20% по массе мази. Соотношение масс неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 1:40 до приблизительно 1:4. Соотношение масс экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 1:60 до приблизительно 1:4.

Согласно настоящему изобретению мазь, содержащая четвертый экстракт Plectranthus amboinicus (PA-W4), полученный способом разделения путем перемешивания, представленным в изобретении, и мазь, содержащая PA-W4 в комбинации с экстрактом Centella asiatica Urban, показывает более высокую эффективность в плане стимуляции заживления ран, чем мазь, содержащая экстракт Centella asiatica Urban в виде монокомпонента, мазь, содержащая экстракты Plectranthus amboinicus, полученные традиционным колоночным хроматографическим способом разделения, в комбинации с экстрактом Centella asiatica Urban или другими принятыми лекарственными препаратами для стимуляции заживления ран (показано в примерах ниже). Количества четвертого экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban в мази составляют приблизительно по меньшей мере 0,01% и приблизительно по меньшей мере 0,1% по массе, соответственно. Предпочтительно, когда количество четвертого экстракта Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 0,01% до приблизительно 5%, более предпочтительно от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%, наиболее предпочтительно от приблизительно 0,25% до приблизительно 1% по массе мази. Количество экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, более предпочтительно от приблизительно 0,5% до приблизительно 9%, наиболее предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 3% по массе мази. Предпочтительно, когда соотношение масс четвертого экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica составляет от приблизительно 1:60 до приблизительно 1:4.

Применение

Фармацевтические композиции, соответствующие настоящему изобретению, можно использовать для лечения нарушений, включая, но без ограничения перечисленным, раны и язвы. В одном предпочтительном варианте осуществления данные нарушения представляют собой обычные травмы и пролежни, более предпочтительно рану у больного диабетом.

У специалистов в области техники не должно быть трудностей в выборе подходящих путей и доз для лекарственных препаратов. Согласно настоящему изобретению предпочтительным путем является местное применение. Доза будет зависеть от природы и состояния нарушения, возраста и состояния здоровья пациента, пути введения и любого предшествующего лечения. Специалисты в области техники должны знать, что доза может варьировать в зависимости от возраста, размера, состояния здоровья субъекта и других подобных факторов.

Фармацевтические композиции, соответствующие настоящему изобретению, можно удобно использовать для изготовления перевязочного материала для ран, включающего терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus и необязательно терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urban, причем указанный перевязочный материал для ран включает, но без ограничения перечисленным, повязку с липким слоем, наклейку пластыря и т.п.

Следующие примеры представлены, чтобы помочь специалистам в области техники в практической реализации настоящего изобретения. Даже в таком случае примеры не следует истолковывать как необоснованно ограничивающие настоящее изобретение, поскольку обычными специалистами в области техники могут быть сделаны модификации и изменения в вариантах осуществления, обсуждаемых в данном контексте, не выходя из сущности и объема настоящего раскрытия изобретения.

ПРИМЕРЫ

Материалы

А. Мазевая основа

Мазевую основу (основу бетаметазоновой мази), используемую в примерах, приобретают в фирме Sinphar, Taiwan. Мазевую основу используют для получения мазей, включающих экстракт Centella asiatica Urban и/или экстракты Plectranthus amboinicus, а также в качестве плацебо в биологических анализах.

В. CGS-21680

CGS-21680 (Sigma, номер партии 093K4615) представляет собой лекарственный препарат, проходящий клинические испытания для заживления ран. 5 мг CGS-21680 вводят в 500 мл дистиллированной воды для получения раствора 10 нг/мл CGS-21680. Раствор CGS-21680 используют в качестве сравнительного лекарственного препарата в примерах.

С. Regranex

0,01% гель Regranex включает бекаплермин, рекомбинантный фактор роста, выделенный из человеческих тромбоцитов (fh-PDGF-BB), в концентрации 100 мкг/г (0,01%). Он представляет собой одобренный FDA (Управление по контролю за продуктами и лекарствами) лекарственный препарат для лечения глубоких невропатических диабетических ножных язв. Regranex используют в качестве сравнительного лекарственного препарата в примерах.

D. Экстракт Centella asiatica Urban и содержащая его мазь

Способ получения экстракта Centella asiatica Urbans и активный компонент в фармацевтической композиции, соответствующей настоящему изобретению, хорошо известны обычным специалистам в области экстракции растительных лекарственных средств. Предпочтительный способ включает:

- экстракцию Centella asiatica путем экстракции этанолом при нагревании с обратным холодильником в течение 2 часов и ее повторение 2-3 раза;

- конденсацию жидкостей этанольного экстракта с целью получения экстрактов;

- восстановление этанольных экстрактов, смешивание и растворение экстрактов в воде;

- экстракцию раздельно петролейным эфиром, хлороформом, этилацетатом и затем водой, насыщенной н-бутанолом;

- восстановление растворителя н-бутанольных экстрактов при пониженном давлении с целью получения кремообразной субстанции и растворение субстанции в маленьком количестве метанола;

- добавление безводного ацетона, нескольких объемов, к раствору для осаждения желтоватого неочищенного общего глюкозида, сушку и взвешивание осадков;

- добавление маленького количества метанола для растворения неочищенного общего глюкозида, смешивание надлежащим образом с силикагелем и сушку смеси;

- влажную упаковку колонки силикагелем для хроматографии и нагрузку силикагеля образцом;

- элюцию хлороформом, метанолом и водой (однородная смесь 16:6:1) и поочередный сбор 18 компонентов, причем каждый компонент представляет собой 50 мл и компоненты подвергают тонкослойной хроматографии при нанесении пятном с целью сравнения с известными контролями;

- объединение компонентов 9-15, концентрирование и последующую очистку на колонке с использованием хлороформа, метанола и воды (однородная смесь 14:6:1) для элюции и

- концентрирование этих же компонентов и повторную кристаллизацию метанолом с целью получения азиатикозида в виде игольчатых кристаллов белого цвета.

Кроме того, лекарственная субстанция экстракта Centella asiatica Urbans, содержащая азиатикозид и мадекассовую кислоту чистотой больше чем 70%, имеется на рынке. Коммерческий продукт Очищенный экстракт Centella asiatica можно приобрести на фирме NuLiv Science, Inc., Taiwan. Мазь с 1% экстрактом Centella asiatica Urban (S1) получают следующим образом:

- нагревают мазевую основу в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения;

- смешивают 99 г размягченной мазевой основы с 1 г экстракта Centella asiatica Urban (S1);

- хранят мазь при 4°С в холодильнике.

Мазь с 1% S1 используют в примерах в качестве сравнительного лекарственного препарата.

Е. Экстракты Plectranthus amboinicus

Экстракты Plectranthus amboinicus, используемые в биологических анализах, готовят способом получения, соответствующим настоящему изобретению (способ разделения путем перемешивания), и способом колоночного хроматографического разделения. Детали получения описаны в следующих примерах получения.

Пример 1. Получение экстрактов Plectranthus amboinicus разделением путем перемешивания

Способ

800 г сухих листьев Plectranthus amboinicus погружают в 95% спирт, объем которого в десять раз превосходит общую массу сухих листьев, на 72 часа, и затем фильтруют экстракт листьев. Процедуру экстракции повторяют. Два экстракта листьев смешивают, получая неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus, и неочищенный экстракт концентрируют с помощью роторного испарителя с пониженным давлением (Heidolph LABOROTA 4000, серия Eleya N-N) для уменьшения объема неочищенного экстракта до приблизительно 5% от исходного объема (т.е. до приблизительно половины исходной массы сухих листьев).

Неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus разбавляют высокополярным растворителем до объема, в десять раз превышающего исходный. Разбавленный неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus вносят в контейнер, похожий на ведро, содержащий смолу DIAION® HP20, которую предварительно обрабатывают с использованием метанола. Смолу и экстракт в контейнере перемешивают со скоростью 3-10 об/мин в течение ночи. Затем жидкость выливают из контейнера. Дважды дистиллированную воду объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, добавляют в контейнер. Смолу погружают в воду, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Собранную жидкость (PA-W1) концентрируют и сушат, получая 2,4 г сухого продукта с выходом 0,3%.

Затем растворитель повышенной полярности объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, вносят в контейнер со смолой. Смолу погружают в растворитель, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Процесс повторяют дважды. Экстрагированные жидкости смешивают (PA-W2) и затем концентрируют и сушат, получая 4 г сухого продукта с выходом 0,5%.

Затем растворитель средней полярности объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, вносят в контейнер со смолой. Смолу погружают в растворитель, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Процесс повторяют дважды. Экстрагированные жидкости смешивают (PA-W3) и затем концентрируют и сушат, получая 6 г сухого продукта с выходом 0,75%.

Затем низкополярный растворитель объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, вносят в контейнер со смолой. Смолу погружают в растворитель, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Процесс повторяют дважды. Экстрагированные жидкости смешивают (PA-W4) и затем концентрируют и сушат, получая 7,52 г сухого продукта с выходом 0,94%.

Пример 2. Получение экстрактов Plectranthus amboinicus колоночным хроматографическим способом разделения

Смолу DIAION массы, идентичной массе сухих листьев Plectranthus amboinicus, погружают в метанол и упаковывают в хроматографическую колонку. Затем упакованную смолу DIAION промывают 1-2-кратным объемом метанола относительно общей массы смолы DIAION и затем промывают дважды дистиллированной водой объемом, в пять-шесть раз превышающим общую массу смолы DIAION.

800 г сухих листьев Plectranthus amboinicus погружают в 95% спирт, объем которого в десять раз превосходит общую массу сухих листьев, на 24 часа. После фильтрации листья снова погружают в 95% спирт, объем которого в десять раз превосходит общую массу сухих листьев, на 24 часа. Жидкости экстракта Plectranthus amboinicus смешивают и концентрируют с помощью роторного испарителя с пониженным давлением для уменьшения объема до приблизительно 2-3% от исходного объема.

Экстракт, полученный на предшествующих стадиях, разбавляют дистиллированной водой и нагружают на колонку со смолой DIAION. Колонку элюируют высокополярным растворителем объемом, в десять раз превышающим общую массу сухих листьев. Элюированную фракцию (РА-С1) собирают, и выход составляет 0,38%.

Затем колонку элюируют растворителем повышенной полярности объемом, в пять-десять раз превышающим общую массу сухих листьев.

Элюированную фракцию (РА-С2) собирают, и выход составляет 0,5%. Колонку снова элюируют растворителем средней полярности объемом в пять-десять раз превышающим общую массу сухих листьев. Элюированную фракцию (РА-С3) собирают, и выход составляет 0,78%.

Наконец, колонку элюируют низкополярным растворителем объемом, в пять-десять раз превышающим общую массу сухих листьев. Элюированную фракцию (РА-С4) собирают, и выход составляет 0,67%.

Пример 3. Анализ композиции экстрактов Plectranthus amboinicus

Приборы и оборудование

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) Spectra System/Thermo.

Насос: Spectra-Physics P4000.

Детектор: UV/VIS Spectra-PhysicsSpectra System UV600OLP.

Автоматический пробоотборник: Thermo Separation Products AS3500.

Пакет программ: Thermo Separation Products ChromQuest System.

Контроллер: Thermo Separation Products SN4000.

Условия для жидкой фазы ВЭЖХ.

Хроматографическая колонка: Phenomenex, 4,6×250 нм, Luna 5 мкм диоксид кремния (2).

Скорость потока: 1,0 мл/мин. Предел давления: 250 кг-сила/см2.

Количество образца: 10 мкл.

Условия PDA: Период отбора образца: 0,64 с.

Интервал длины волны: 190-370 нм.

Каналы: 270,320 нм.

Профиль элюции:

Время (мин)
Подвижная фаза 0 15 45 50
н-гексан 95% 85% 30% 95%
Этилацетат 5% 15% 70% 5%

Хроматографический спектр экстракта PA-W4, полученного разделением путем перемешивания, и экстракта РА-С4, полученного колоночным хроматографическим разделением, представлены на Фигурах 1 и 2, соответственно. PA-W4 имеет пики ВЭЖХ в следующее время удерживания:

Пик Время удерживания (мин)
1 5,5
2 9,6
3 20,0
4 22,5
5 23,5
6 24,8
7 27,7
8 27,8
9 28,6
10 28,9
11 29,7
12 31,0
13 31,9
14 36,6
15 37,8

Пример 4. Получение мазей, содержащих экстракты Plectranthus amboinicus, и мазей, содержащих экстракт Centella asiatica Urban (S1) и экстракты Plectranthus amboinicus

Отмеряют подходящие количества мазевой основы, экстракта PA-W4 и экстракта РА-С4. Мазевую основу предварительно нагревают в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения и добавляют в химические стаканы, содержащие экстракт PA-W4 и экстракт РА-С4 для получения мазей 0,25% PA-W4 и мази 0,25% РА-С4. Соотношение масс мазевой основы и экстрактов Plectranthus amboinicus составляет 99,75:0,25. Затем полученные мази смешивают с экстрактом Centella asiatica Urban (S1) в соотношении масс 99:1 для получения мази DCR-WH1-W (1% S1+0,25% PA-W4) и мази DCR-WH1-C (1% S1+0,25% РА-С4).

Биологические анализы

Пример 5. Эксперименты на животных в отношении закрытия ран у крыс с диабетом

Эксперименты на животных

Индукция у животных высокого уровня сахара в крови

Крысам с массой тела более 300 г вводят стрептозотоцин (STZ, 65 мг/кг, внутрибрюшинно) с целью индукции высокого уровня сахара в крови. Крыс с успешно индуцированным высоким уровнем сахара в крови (более 300 мг/дл) отбирают для проведения тестов на закрытие ран через два месяца после появления синдромов высокого уровня содержания сахара в крови.

Травматические хирургические вмешательства у животных с диабетом

1. Животных с высоким уровнем содержания сахара с массой тела ниже чем 300 г исключают и остальных случайным образом делят на 6 групп.

2. Животных анестезируют пентобарбиталом и удаляют шерсть на хирургическом поле (в области спины). Затем области хирургического вмешательства и инструменты стерилизуют перед операцией 75% спиртом.

3. Кожу в областях середины спины (4, 6 и 8 см от средней точки между двумя лопатками) вырезают (полной толщины), используя режущее по кругу лезвие диаметром 1 см.

Измерение ран, нанесение тестируемых материалов и предупреждение расчесывания ран

1. Перед ранами помещают стандартную линейку и делают фотографии.

2. На каждую рану наносят тонкий слой тест-материалов, приготовленных в виде мазей, и 0,05 мл раствора CGS-21680.

3. Раны покрывают марлей и надевают колпачки на шею крыс.

Тест-материалы наносят крысам два раза в день (утром и вечером) и измеряют раны в каждой точке времени.

После окончания экспериментов регенерированные участки кожи берут для биохимического и гистологического анализа.

Анализ области раны

Когда делают фотографии, перед ранами помещают стандартную линейку. Длину ран стандартизируют в соответствии со шкалой стандартной линейки на фотографиях перед анализом ран с помощью пакета программ обработки изображений Image-Pro (Media Cybernetics, Inc.), чтобы избежать ошибок, обусловленных различными расстояниями при фотографировании.

Данные анализа и статистика

Площади трех ран на спинах крыс анализируют с помощью Image-Pro. Площади ран в день нуль представляют собой исходные площади ран. Исходные площади ран за вычетом площадей в различные точки времени делят на исходные площади ран, чтобы получить процент закрытия ран. Среднее по трем результатам в процентах закрытия ран для каждой крысы представляет закрытие раны каждой крысы. Для каждого из тест-материалов используют от четырех до семи крыс/группу. Данные представляют как среднее ± стандартная ошибка (SEM). р-значение результатов теста рассчитывают с помощью t-критерия при использовании пакета программ по статистике sigma statis (Systat software Inc.). P<0,05 означает, что имеется существенное различие, и его отмечают * на статистических графиках или в таблицах. Р<0,01 означает, что имеется очень существенное различие, и его отмечают ** на статистических графиках или в таблицах. Р<0,001 означает, что имеется чрезвычайно существенное различие, и его отмечают *** на статистических графиках или в таблицах.

Пример 6. Сравнение эффективностей 1% S1, CGS-21680, Regranex, DCB-WH1-C и DCB-WH1-W в отношении закрытия ран у крыс с индуцированным STZ диабетом

Целью данного примера является сравнение эффективности композиции, соответствующей настоящему изобретению, и композиции из коммерчески доступных продуктов в отношении закрытия ран. Эксперименты по закрытию ран на животных проводят в соответствии с примером 5. В день 0, 4, 6, 8, 10 и 12 после лечения плацебо (Группа 1), мазью 1% S1 (Группа 2), CGS-21680 (Группа 3), Regranex (Группа 4), DCB-WH1-C (Группа 5) и DCB-WH1-W (Группа 6) измеряют площади ран во всех экспериментальных группах и рассчитывают проценты закрытия ран и значения CT50 (время, необходимое для 50% закрытия раны). Результаты представлены на фигуре 3 и в таблице 1. Р-значения парного сравнения процентов закрытия ран в экспериментальных группах показаны в таблице 2.

Таблица 1
Проценты закрытия ран и СТ50 экспериментальных групп, леченных плацебо, 1% мазью S1, CGS-21680, Regranex, DCB-WH1-C и DCB-WH1-W
Группы Тест-материалы Процент закрытия раны (%) CT50 (день)
День 4 День 6 День 8 День 10 День 12
1 Плацебо -99,6±13,3 -107,6±10,5 -45,14±13 19,9±5,3 61,5±3,1 11,4
2 1% S1 -62,7±6,0 -51,4±6,0 -18,2±9,7 45,2±5,9 77,7±2,3 10,3
3 CGS-2168 -21,3±4,8 -27,38±3,2 -2,4±4,1 46,7±6,0 71,7±2,4 10,3
4 Regranex -21,0±10,4 2,7±8,1 1,46±6,7 59,9±2,6 78,0±4,8 9,7
5 DCB-WH1-C -19,2±7,0 -13,6±6,7 18,3±6,6 59,9±2,9 84,8±3,0 9,5
6 DCB-WH1-W 4,1±2,9 22,3±2,7 56,0±2,5 84,5±1,8 93,9±0,7 7,65
Таблица 2
Р-значения парного сравнения процентов закрытия раны в экспериментальных группах
День Группа относительно Группы Р-значения
4 2 3 0,000289 ***
4 2 4 0,0054565 **
4 2 5 0,0004544 ***
4 2 6 0,000001203 ***
4 3 4 0,9788
4 3 5 0,5697
4 3 6 0,00075098 ***
4 4 5 0,7119
4 4 6 0,0276 *
4 5 6 0,0157 *
6 2 3 0,0055961 **
6 2 4 0,00039598 ***
6 2 5 0,001875 **
6 2 6 0,0000005765 ***
6 3 4 0,0049146 **
6 3 5 0,0947
6 3 6 0,000000339 ***
6 4 5 0,1504
6 4 6 0,0356 *
6 5 6 0,0005663 ***
8 2 3 0,1659
8 2 4 0,1454
8 2 5 0,0113 *
8 2 6 0,000023634 ***
8 3 4 0,62
8 3 5 0,0238 *
8 3 6 0,0000002486 ***
8 4 5 0,1087
8 4 6 0,000016991 ***
8 5 6 0,00031843 ***
10 2 3 0,8675
10 2 4 0,0954
10 2 5 0,0509
10 2 6 0,000084357 ***
10 3 4 0,1274
10 3 5 0,0740
10 3 6 0,00011665 ***
10 4 5 0,9934
10 4 6 0,000055221 ***
10 5 6 0,000026694 ***

В день 4 проценты закрытия ран в Группах 3, 4, 5 или 6 существенно выше, чем в Группах 1 и 2 (Р<0,01), и процент закрытия ран в Группе 6 даже существенно выше, чем в Группах 3, 4 и 5 (Р<0,05). В день 6 проценты закрытия ран в Группах 3, 4, 5 или 6 существенно выше, чем в Группах 1 и 2 (Р<0,01 и Р<0,001, соответственно), и процент закрытия ран в Группе 6 даже существенно выше, чем в Группах 3, 4 или 5 (Р<0,05 или Р<0,001). В день 8 проценты закрытия ран в Группах 5 и 6 существенно выше, чем в Группах 2 (Р<0,05), и процент закрытия ран в Группе 6 даже существенно выше, чем в Группах 3, 4 и 5 (Р<0,001). В день 10 процент закрытия ран в Группе 6 существенно выше, чем в других группах (Р<0,001). CT50 для Групп 1-6 составляют 11,4, 10,3, 10,36, 9,4, 9,5 и 7,65 дней, соответственно.

Подводя итог, мазь DCB-WH1-W, соответствующая настоящему изобретению, имеет эффективность, превышающую другие тест-материалы, т.е. мазевую основу, мазь 1% S1, CGS-21680, Regranex и DCB-WH1-C.

Пример 7. Сравнение эффективностей 1% S1, 0,25% PA-W4, DCB-WH1-W и 1% PA-W4 в отношении закрытия ран у крыс с диабетом, индуцированным STZ

Целью данного примера является сравнение эффективности DCB-WH1-W с эффективностью ее активных ингредиентов в отношении закрытия ран. Тест-материалы представляют собой плацебо (Группа 1), мазь 1% S1 (Группа 2), мазь 0,25% PA-W4 (Группа 3), DCB-WH1-W (Группа 4) мазь 1% PA-W4 (Группа 5). Эксперименты по закрытию ран на животных проводят в соответствии с примером 5. В день 0, 4, 6, 9, 11 и 13 после лечения тест-материалами измеряют площади ран во всех экспериментальных группах и рассчитывают проценты закрытия ран и значения СТ50. Результаты представляют на фигуре 4 и в таблице 3. Р-значения парного сравнения процентов закрытия ран в экспериментальных группах показаны в таблице 4.

Таблица 3
Проценты закрытия ран и CT50 экспериментальных групп, леченных плацебо, 1% мазью S1, 0,25% мазью PA-W4, DCB-WH1-W и 1% мазью PA-W4
Группы Тест-материалы Процент закрытия раны (%) CT50 (день)
День 4 День 9 День 11 День 13
1 Плацебо -65,07±9,5 -19,6±13,4 35,7±11,1 79,8±4,9 11,7
2 1% S1 -62,55±8,9 16,8±7,5 59,1±5,1 93,2±1,7 10,6
3 0,25% PA-W4 -46,1±13,8 29,9±9,8 77,9±2,3 95,2±1,0 9,9
4 DCB-WH1-W -3,51±1,7 59,7±6,6 87,9±3,1 97,42±1,0 8,25
5 1% PA-W4 -16,5±10,9 62,2±7,4 88,45±3,3 98,59±0,8 8,25
Таблица 4
Р-значения парного сравнения процентов закрытия раны в экспериментальных группах
День Группа относительно Группы Р-значения
4 1 2 0,8505
4 1 3 0,2822
4 1 4 0,0001 ***
4 1 5 0,0047 **
4 2 4 0,3391
4 2 5 0,0001 ***
4 2 6 0,0052 **
4 3 5 0,0094 **
4 3 6 0,1015
4 4 6 0,1874
9 1 3 0,0714
9 1 4 0,0239 *
9 1 5 0,0004 ***
9 1 6 0,000965 ***
9 2 4 0,3126
9 2 5 0,0010 **
9 2 6 0,00159 **
9 3 5 0,0173 *
9 3 6 0,0274 *
9 4 6 0,8053
11 1 3 0,0847
11 1 4 0,0041 **
11 1 5 0,0008 ***
11 1 6 0,00244 **
11 2 4 0,0075 **
11 2 5 0,0003 ***
11 2 6 0,0012 **
11 3 5 0,0073 **
11 3 6 0,02011 *
11 4 6 0,5970
13 1 3 0,0271 *
13 1 4 0,0117 *
13 1 5 0,0092 **
13 1 6 0,00727 **
13 2 4 0,3247
13 2 5 0,0444 *
13 2 6 0,0199 *
13 3 5 0,0800
13 3 6 0,02141 *
13 4 6 0,56224

В день 4 проценты закрытия ран в Группах 4 или 5 существенно выше, чем в Группах 1 и 2 (Р<0,01). В день 9 проценты закрытия ран в Группах 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 1 (Р<0,001), Группе 2 (Р<0,01) и Группе 3 (Р<0,05), и процент закрытия ран в Группе 3 также существенно выше, чем в Группе 1 (Р<0,05). В день 11 проценты закрытия ран в Группах 3, 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 2 (Р<0,01), и проценты закрытия ран в Группах 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 3 (Р<0,05). В день 13 процент закрытия ран в Группах 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 1 (Р<0,01) и Группе 2 (Р<0,05), и процент закрытия ран в Группе 5 существенно выше, чем в Группе 3 (Р<0,05). Отсутствует существенная разница между группами 4 и 5 в дни 4, 9, 11 и 13. СТ50 для Групп 1-5 составляют 11,7, 10,6, 9,9, 8,25 и 8,25 дней, соответственно.

Подводя итоги, эффективность мази, включающей 1% PA-W4 (мазь 1% PA-W4), в отношении закрытия ран эквивалентна эффективности мази DCB-WH1-W (1% S1+0,25% PA-W4). Мази 1% PA-F4 и DCB-WH1-W, соответствующие настоящему изобретению, обладают более высокой эффективностью относительно мазевой основы, мази 1% S1 и мази 0,25% PA-W4.

1. Способ получения экстрактов Plectranthus amboinicus, включающий контактирование сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus, который затем концентрируют с получением концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus, который обрабатывают методом разделения перемешиванием, включающим разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем, объединение разведенного неочищенного экстракта с абсорбирующей смолой и перемешивание абсорбирующей смолы и разведенного неочищенного экстракта, после чего жидкую часть отбрасывают и экстрагируют смолу растворителем с декантированием экстракта, затем проводят повторные стадии экстрагирования с уменьшением полярности растворителя.

2. Способ по п.1, в котором для экстракции абсорбирующей смолы используют следующие растворители, перечисленные по мере убывания полярности: растворитель высокой полярности, растворитель повышенной полярности, растворитель средней полярности и растворитель низкой полярности.

3. Экстракт Plectranthus amboinicus, обладающий активностью против кожных нарушений, полученный способом по п.1.

4. Экстракт по п.3, который характеризуется следующими пиками в условиях высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (по времени удерживания в мин): 5,5, 9,6, 20,0, 22,5, 23,5, 24,8, 27,7, 27,8, 28,6, 28,9, 29,7, 31,0, 31,9, 36,6, 37,8; при этом указанную ВЭЖХ проводят посредством хроматографической колонки Phenomenex, 4,6×250 мм, Luna 5 мкм с диоксидом кремния (2) при скорости потока 1,0 мл/мин, предельном давлении 250 кг-сил/см2 и количестве образца 10 мкл, образцы отбирают с периодичностью 0,64 с, поглощения детектируют в интервале длин волн 190-370 нм в каналах 270 и 320 нм, а элюцию проводят н-гексаном в этилацетате от 95 до 85 об.% 15 мин, от 85 до 30 об.% 30 мин, от 30 до 95 об.% 5 мин.

5. Неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus, обладающий активностью против кожных нарушений, полученный при контактировании сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем либо при концентрировании неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus.

6. Фармацевтическая композиция, обладающая акивностью против кожных нарушений, включающая терапевтически активное количество экстракта Plectranthus amboinicus по п.3 и выборочно фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

7. Композиция по п.6, которая дополнительно включает терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urban.

8. Композиция по п.7, в которой соотношение масс экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban составляет от 1:60 до 1:4.

9. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью против кожных нарушений, включающая терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus по п.5 и выборочно фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

10. Композиция по п.9, которая дополнительно включает терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urban.

11. Перевязочный материал для ран, включающий фармацевтическую композицию по любому из пп.6-10.

12. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.6-10 при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения.

13. Применение по п.12, в котором кожное нарушение представляет собой общую травму или пролежни.

14. Применение по п.12, в котором кожное нарушение представляет собой раны у больного диабетом.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, в частности к дерматологии, и представляет собой гидрогелевую композицию для лечения ожогов, содержащую иммобилизированные активный и вспомогательные ингредиенты и гелеобразующий компонент, отличающуюся тем, что в качестве активного ингредиента содержит лекарственную субстанцию 2-аллилоксиэтанола в количестве от 0,1 до 10,0 мас.%, в качестве вспомогательных ингредиентов содержит лекарственную субстанцию лидокаина в количестве от 0,1 до 5,0 мас.% или лекарственные субстанции лидокаина в количестве от 0,1 до 5,0 мас.% и дезоксината в количестве от 0,1 до 5,0 мас.%, в качестве гелеобразующего компонента содержит гидроксипропилцеллюлозу в количестве от 0,1 до 5,0 мас.%.

Изобретение относится к области медицины и фармакологии и представляет собой мазь для лечения инфицированных ран в гнойно-некротической фазе раневого процесса, содержащую в качестве действующих веществ противомикробное средство и лидокаин, и мазевую основу, отличающуюся тем, что дополнительно содержит в качестве действующего вещества дибунол, в качестве противомикробного средства содержит фурацилин, а в качестве мазевой основы сополимер стирола с малеиновым ангидридом, лутрол F-127 и воду очищенную, причем компоненты в мази находятся в определенном соотношении в мас.%.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности. .
Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и медицины. .

Изобретение относится к новым карбостирильным соединениям, представленным общей формулой (1) или к их солям с обычными фармацевтически приемлемыми кислотами или фармацевтически приемлемыми основными соединениями, обладающим активностью в отношении промотирования продукции TFF2, к фармацевтической композиции на их основе, к средству на основе предлагаемых соединений, применяемому при расстройстве, на которое повышающая регуляция TFF оказывает профилактический и/или терапевтический эффект, к применению предлагаемых соединений для изготовления данного средства и к способу получения предлагаемых соединений.

Изобретение относится к химико-фармацевтической области, а именно к созданию средства, обладающего репаративным и ранозаживляющим действием. .

Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедической стоматологии, и касается адгезивной композиции для съемных зубных протезов. .
Изобретение относится к лекарственным формам, которые могут применяться для лечения мужской и женской половой дисфункции. .
Изобретение относится к лекарственным формам, которые могут применяться для лечения мужской и женской половой дисфункции. .
Изобретение относится к лекарственным формам, которые могут применяться для лечения мужской и женской половой дисфункции. .
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения пасты из гидролизного лигнина. .
Изобретение относится к области экспериментальной биологии. .

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для профилактики или лечения рака
Наверх