Способ получения биокомпозита на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, обладающего кровоостанавливающими свойствами

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины, а именно к способу получения биокомпозита на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, обладающего кровоостанавливающими свойствами. Способ заключается в получении гель-пленки бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой, отделении полученной гель-пленки бактериальной целлюлозы от культуральной среды и ее очищении, механическом измельчении очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы в течение 10 мин, получении гидрогеля а) бактериальная целлюлоза-хитозан в соотношениях 80:20 путем смешения 2%-го раствора хитозана в 1%-й уксусной кислоте, гидрогеля бактериальной целлюлозы, 25%-го глутарового альдегида, с добавлением фузидина натрия в комбинации с одним или более дополнительными компонентами, или б) бактериальная целлюлоза:хитозан:желатин:трансглютаминаза в соотношении 5:5:15:5 соответственно, с добавлением фузидина натрия в комбинации с одним или более дополнительными компонентами, причем дополнительные компоненты выбраны из физиологически активных соединений полифенольной природы - дегидрокварцетина или ресвератрола, низкомолекулярных пептидов - тинростима, и/или факторов свертывания крови - тромбина или трансглутаминазы, получении аэрогеля путем замораживания в низкотемпературном холодильнике в течение суток и затем проведения лиофильного высушивания. Изобретение обеспечивает расширение ассортимента раневых покрытий на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы с усиленными гемостатическими свойствами и антимикробным действием. 16 пр.

 

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины, а именно к способу получения биокомпозита на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, используемого, например, в качестве раневого покрытия с антибактериальными и гемостатическими свойствами.

Современные перевязочные средства направлены не только на предотвращение распространения раневой инфекции, но и на улучшение процесса заживления ран и остановки кровотечения, особенно в экстремальных ситуациях. В зависимости от типа раны и фазы заживления повязка требует наличия различных терапевтических и фармакологических функций. Повязки должны поддерживать влажность в ране, обеспечивать диффузию газов, удалять избыток экссудата, защищать рану от микроорганизмов, осуществлять механическую защиту, обеспечивать простое и безболезненное удаление из раны, быть эластичными, экономически эффективными и обладать отсутствием побочных эффектов.

Рынок перевязочных материалов значительно вырос за последние 10 лет, однако только небольшое количество таких материалов обладает всеми необходимыми свойствами, обеспечивающими защиту и заживление ран. Природные полимеры представляют особый интерес благодаря высокой абсорбционной и набухающей способности, нецитотоксичности, кроме того, в этих полимерах могут быть иммобилизованы различные активные соединения. Природные полимеры также являются подходящей матрицей для иммобилизации и функционализации фермента.

Известно достаточно много разнообразных покрытий для лечения ран и остановки кровотечения, в которых на основу природного происхождения или на синтетический материал нанесены лекарственные препараты.

Известно также раневое покрытие, обладающее выраженным гемостатическим действием, на основе хитозана и фибрина-мономера, используемого в качестве активного вещества. С целью придания губке антисептического и антибактериального эффектов в базовый раствор могут быть добавлены антисептики (до 3%) и антибиотики широкого спектра действия (до 10%) от общей массы смеси (RU 2618896, МПК A61K 9/18, A61L 15/28, A61L 15/32, A61L 15/20, A61L 15/44, А61Р 7/04, опубл. 05.11.2017).

Недостатком данного решения является отсутствие конкретных антисептических средств и антибиотиков, позволяющих придать полученному композиту антибактериальное свойства.

Также известно раневое покрытие, содержащее в качестве основы альгинат натрия, а в качестве активного вещества - сульфат железа. Данное изобретение обеспечивает расширение ассортимента гемостатических губок с выраженным гемостатическим действием и исключением прямого неблагоприятного воздействия активного вещества на раневую поверхность и окружающие ее ткани за счет фармакологической формы губки (RU 2627855 МПК A61K 33/26, A61K 31/715, A61K 31/717, A61K 31/722, A61K 31/197, А61Р 7/04, опубл. 14.08.2017).

Известно раневое покрытие на основе коллаген-хитозанового комплекса для восстановления дефектов кожи в виде губки, геля, коллоидного раствора, пленки. Использование предлагаемого раневого покрытия при закрытии плоскостных раневых дефектов позволяет улучшить качественные и количественные характеристики восстанавливаемых раневых дефектов кожи рубцовой и околорубцовой зон, приводит к полноценному восстановлению эпидермально-дермального комплекса, соответствующего здоровой коже (RU 2254145 МПК A61L15/28, A61L15/32, A61L26/00, опубл. 20.06.2005).

Недостатком заявленного решения является отсутствие у композита ярко-выраженных гемостатических свойств, позволяющих предотвращать кровотечения, а также узкая функциональность.

Наиболее близким техническим решением к заявленному является раневое покрытие, обладающее гемостатическим действием, содержащее бактериальную целлюлозу, синтезированную с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12 в виде губки, содержащее до 10% гемостатических и до 3% антимикробных средств по отношению к бактериальной целлюлозе. В качестве гемостатического компонента содержит фибрин-мономер, тромбин, факторы свертывания крови VIII и IX, железную соль полиакриловой кислоты, например, феракрил. В качестве антимикробного компонента содержит диоксидин или хлоргексидин, или серебро, или раствор «доктор Чистотелофф», антибиотики широкого спектра действия, например, цефипим или азитромицин (RU 2624242, МПК A31L 15/18, A61L 15/44, A61L 15/28, A61F 13/00, опубл. 03.07.2017).

Недостатком известного решения является использование симбиотической культуры непостоянного состава, отсутствие у раневого покрытия регенерационных свойств и использование в качестве антимикробного компонента антибиотиков широкого спектра действия цефипима или азитромицина, эффективность которых доказана при пероральном применении.

Технический результат заявленного изобретения заключается в расширении ассортимента раневых покрытий на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы с усиленными гемостатическими свойствами и антимикробным действием.

Сущность изобретения заключается в том, что способ получения биокомпозита на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, обладающего кровоостанавливающими свойствами, заключается в получении гель-пленки бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой, отделении полученной гель-пленки бактериальной целлюлозы от культуральной среды и ее очищении, механическом измельчении очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы в течение 10 мин с получением гидромодуля с соотношением 1:3, получении гидрогеля бактериальная целлюлоза-хитозан в соотношениях 80:20 путем смешения 2%-го раствора хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогеля бактериальной целлюлозы, 25%-го глутарового альдегида. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.Также получают аэрогель бактериальная целлюлоза:хитозан:желатин:трансглютаминаза в соотношении 5:5:15:5 соответственно и добавлением фузидина натрия, физиологически активных соединений полифенольной природы в виде дегидрокварцетина или ресвератрола, низкомолекулярных пептидов (тинростима), факторов свертывания крови типа тромбина, трансглутаминазы.

Штамм бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans Н-110 выделен на кафедре биотехнологии Мордовского госуниверситета из чайного гриба с последующей селекцией на основе естественного отбора. Культура идентифицирована до вида с помощью анализа генов, кодирующих 16S рРНК в ФГУПГосНИИГенетика. Штамм бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans Н-110 депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под регистрационным номером: В-11267. Штамм бактерий не является зоопатогенным, фитопатогенным и не представляет опасности по другим причинам.

Способ получения бактериальной целлюлозы описан в изобретениях заявителя (RU 2536973, МПК C12N 1/20, опубл. 27.12.2014, RU 2536257, МПК C12N 1/20, опубл. 20.12.2014).

В заявленном изобретении используется антибиотик фузидин натрия, эффективность которого доказана при наружном применении, в частности в лечении системных и местных стафилококковых инфекций кожи и мягких тканей.

Фузидовая кислота обладает бактериостатической, а в высоких дозах и бактерицидной активностью преимущественно против грамположительных бактерий. Механизм действия связан с быстрым подавлением синтеза белка микроорганизмов. Она продуцируется грибами Fusidium coccineum и является единственным, используемым в клинической практике, представителем класса фузиданов. Наибольшей активностью фузидовая кислота обладает против стафилококков и стрептококков. Грамотрицательные бактерии в подавляющем большинстве резистентны к фузидовой кислоте (Salmonella spp., Proteus spp., Escherichia coli). Спектр антимикробной активности фузидовой кислоты узкий, т.к. в пределах одного рода различные виды микроорганизмов могут обладать различной чувствительностью к препарату. Фармакологический профиль фузидовой кислоты: хорошая переносимость, низкий уровень резистентности и отсутствие перекрестной резистентности с другими антибиотиками, а также возможность ступенчатой терапии к более широкому применению, особенно при инфекциях, вызванных S. aureus.

Хитозан - природный биополимер, полисахарид, продукт деацетилирования хитина, является объектом изучения и активно применяется в практической медицине благодаря уникальным физико-химическим, биологическим, экологическим и физиологическим свойствам, а именно: биосовместимостью, биоразлагаемостью, устойчивостью в природной среде, отсутствием токсичности, высокой биологической активностью, экономической доступностью. Установлены противовирусная, антибактериальная активность хитозана, подтверждено иммуностимулирующее, адъювантное, адаптогенное, антигипоксическое, холестрическое, радиопротекторное, гемостатическое действия. Физико-химические и биологические свойства данного полимера позволяют рассматривать хитозан и его производные в качестве перспективного сырья для получения лекарственных препаратов с различным фармакотерапевтическим действием. Хитозан обладает большим количество водородных связей, которые определяют его способность связывать большое количество органических водорастворимых веществ.

Дигидрокверцетин (ДГКВ) относится к группе фенольных соединений, обладающих высокой антиоксидантной активностью. ДГКВ тормозит процессы перекисного окисления липидов клеточных мембран, препятствует повреждающему действию свободных радикалов, замедляет преждевременное старение клеток и развитие различных заболеваний. Для проявления антиоксидантного действия ДГКВ вносят в различные мази. В лечебной практике ДГКВ используется как противовоспалительное, антирадиационное, онкопротекторное средство. Способствует поддержанию функций иммунной системы, оказывает антитоксическое действие. Обладает гастропротективной активностью: стимулирует процессы регенерации слизистых оболочек.

Ресвератрол - природное биологически активное вещество из группы полифенолов, выделенное из винограда темных сортов и виноградных косточек, обладающее доказанными антиканцерогенными, гепатопротекторными и противовоспалительными свойствами. Ресвератрол, антиоксидантное вещество винограда обладает кардиопротективными свойствами, усиливает постнекротическую регенерацию кардиомиоцитов, повышает уровень липопротеидов высокой плотности и уменьшает концентрацию фибриногена в крови и агрегацию тромбоцитов.

Низкомолекулярные пептиды, содержащиеся в различных органах и тканях макроорганизма, имеют название цитомединов. Роль этих пептидов в организме заключается в регуляции функций гомеостаза, а сами они обладают антиоксидантным, антиканцерогенным, иммуномодулирующим и другими биологически активным свойствами. Одним из таких соединений является тинростим.

Способ получения биокомпозита на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, обладающего кровоостанавливающими свойствами, осуществляют следующим образом.

Пример 1. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия и 0,03% тромбина. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 2. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 0,03% тромбина и 0,1% ресвератрола. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 3. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 0,03% тромбина и 2% дегидрокварцетина. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 4. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают.Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 0,03% тромбина и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 5. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия и 10% раствор трасглютаминазы. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 6. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 10% раствор трансглютаминазы и 0,1% ресвератрола. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 7. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 10% раствор трансглютаминазы и 2% дегидрокварцетина. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 8. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 10% раствор трансглютаминазы и 0,1%) тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 9. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 0,03%) тромбина, ОД % ресвератрола и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 10. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 0,03%) тромбина, 2% дегидрокварцетина и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 11. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 10% раствор трансглютаминазы, 0,1% ресвератрола и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 12. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения композита «бактериальная целлюлоза-хитозан» в соотношении 80:20 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, гидрогель бактериальной целлюлозы, 25%-ный глутаровый альдегид (2%, об./об.) и вносят 0,06%-ный фузидин натрия, 10% раствор трансглютаминазы, 2% дегидрокварцетина и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 13. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения гидрогеля в соотношении 5:5:15:5 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, 10%-ный раствор желатина, 20%-ный раствор трансглютаминазы и гидрогель бактериальной целлюлозы и вносят 0,06% фузидина натрия, 0,1% ресвератрола и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 14. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения гидрогеля в соотношении 5:5:15:5 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, 10%-ный раствор желатина, 20%-ный раствор трансглютаминазы и гидрогель бактериальной целлюлозы и вносят 0,06% фузидина натрия, 2% дегидрокварцетина и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 15. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения гидрогеля в соотношении 5:5:15:5 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, 10%-ный раствор желатина, 20%-ный раствор трансглютаминазы и гидрогель бактериальной целлюлозы и вносят 0,06% фузидина натрия, 0,1% ресвератрола, 0,03% тромбина и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Пример 16. Получают гель-пленку бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой. Для удаления клеток и компонентов культуральной среды полученную гель-пленку бактериальной очищают. Проводят механическое измельчение очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы с получением гидромодуля с соотношением 1:3.

Для получения гидрогеля в соотношении 5:5:15:5 смешивают 2%-ный раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, 10%-ный раствор желатина, 20%-ный раствор трансглютаминазы и гидрогель бактериальной целлюлозы и вносят 0,06% фузидина натрия, 2% дегидрокварцетина, 0,03% тромбина и 0,1% тинростима. С целью получения аэрогелей, полученный образец замораживают в низкотемпературном холодильнике в течение суток, далее лиофильно высушивают.

Антибактериальные свойства заявленного биокомпозита определяют методом, основанном на способности антибиотических веществ диффундировать в агаровых средах и образовывать зоны, в которых не развиваются чувствительные к этим антибиотикам микроорганизмы. В качестве тест-микроорганизма используют бактерии Staphylococcus aureus 209 Р. В центр чашки Петри, засеянной тест культурой, помещают диск биокомпозита с антибиотиком. Об антибактериальных свойствах, полученных биокомпозитов судят по диаметру зон задержки роста тест-культуры. Зона отсутствия роста тест-культуры при использовании биокомпозитов, полученных на основе аэрогелей бактериальной целлюлозы, хитозана и фузидина натрия, а также физиологически активных соединений полифенольной природы (дегидрокварцетин, ресвератрол),

низкомолекулярных пептидов (тинростим), факторов свертывания крови (тромбин, трансглутаминаза) составляет 23,3±2,1 мм.

Таким образом, разработан биокомпозит на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, обладающий способностью останавливать кровотечения, содержащий в качестве гемостатического средства и антимикробного средства хитозан, в качестве усилителя антимикробного действия фузидовую кислоту, физиологически активные соединения полифенольной природы (дегидрокварцетин, ресвератрол),

низкомолекулярные пептиды (тинростим). Полученный биокомпозит на основе гидрогеля бактериальной целлюлозы обладает высокой антибиотической активностью в отношении бактерий Staphylococcus aureus, гемостатическими свойствами и может быть использован в медицине в качестве раневых покрытий.

Способ получения биокомпозита на основе аэрогеля бактериальной целлюлозы, обладающего кровоостанавливающими свойствами, заключающийся в получении гель-пленки бактериальной целлюлозы путем культивирования штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans ВКПМ В-11267 в статических условиях на среде с мелассой, отделении полученной гель-пленки бактериальной целлюлозы от культуральной среды и ее очищении, механическом измельчении очищенной гель-пленки бактериальной целлюлозы в течение 10 мин, получении гидрогеля а) бактериальная целлюлоза-хитозан в соотношениях 80:20 путем смешения 2%-го раствора хитозана в 1%-й уксусной кислоте, гидрогеля бактериальной целлюлозы, 25%-го глутарового альдегида, с добавлением фузидина натрия в комбинации с одним или более дополнительными компонентами, или б) бактериальная целлюлоза:хитозан:желатин:трансглютаминаза в соотношении 5:5:15:5 соответственно, с добавлением фузидина натрия в комбинации с одним или более дополнительными компонентами, причем дополнительные компоненты выбраны из физиологически активных соединений полифенольной природы - дегидрокварцетина или ресвератрола, низкомолекулярных пептидов - тинростима, и/или факторов свертывания крови - тромбина или трансглутаминазы, получении аэрогеля путем замораживания в низкотемпературном холодильнике в течение суток и затем проведения лиофильного высушивания.