Жидкий экстракт гиностеммы пятилистной, обладающей адаптогенной активностью



Жидкий экстракт гиностеммы пятилистной, обладающей адаптогенной активностью
Жидкий экстракт гиностеммы пятилистной, обладающей адаптогенной активностью
Жидкий экстракт гиностеммы пятилистной, обладающей адаптогенной активностью
Жидкий экстракт гиностеммы пятилистной, обладающей адаптогенной активностью

Владельцы патента RU 2769666:

федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению растительного препарата в качестве средства с адаптогенной активностью. Применение жидкого экстракта травы гиностеммы пятилистной, полученного перколяцией 70% спиртом этиловым в соотношении 1:1, в качестве средства с адаптогенной активностью. Вышеописанное применение жидкого экстракта травы гиностеммы пятилистной, полученного перколяцией 70% спиртом этиловым в соотношении 1:1 обеспечивает выраженное антигипоксическое и антиоксидантное действие, повышение физической выносливости, увеличение активности ферментов антиоксидантной защиты – каталазы. 4 табл.

 

Предлагаемое изобретение относится к фармации, а именно к лекарственным препаратам растительного происхождения, применяемым в качестве лечебно-профилактических адаптогенных средств.

В настоящее время основу адаптогенных, общетонизирующих лекарственных препаратов составляют лекарственные средства из таких лекарственных растений, как: женьшень настоящий, лимонник китайский, элеутерококк колючий, левзея сафлор овидная, родиола розовая, произрастающих на территории Дальнего Востока, Сибири [Шабанов П.Д. Адаптогены и антигипоксанты // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2003. - Т. 2. - №3. - С. 50-81]. В связи с этим стоит вопрос расширения ассортимента лекарственных средств адаптогенного действия и внедрение в практику ранее малоизученных видов лекарственного растительного сырья за счет поиска новых интродуцированных видов. Одной из таких перспективных культур, адаптированных к условиям Республики Башкортостан, является гиностемма пятилистная {Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) из семейства Тыквенные (Cucurbitaceae).

Широко распространенным фитоадаптогеном является женьшень настоящий. В Государственный реестр лекарственных средств России по состоянию на 2021 год входят средства растительного происхождения на основе женьшеня настоящего, обладающие общетонизирующим действием: «Женьшеня настойка», «Гербион женьшень», «Доппельгерц Женьшень», «Женьшень с витамином С» [Государственный реестр лекарственных средств [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/default.aspx. Дата доступа: 10.05.2021].

Прототипом изобретения является известный препарат «Женьшеня настойка» из корней женьшеня настоящего, который имеет ряд недостатков в плане заготовки сырья: средняя масса сырья должна быть не менее 10,0 г; возраст растения у дикорастущего 25-30 лет, у культивируемого - 5-8 лет.

Задачей изобретения является расширение ассортимента адаптогенных средств растительного происхождения.

Технический результат при использовании изобретения - получение средства, обеспечивающего повышение физической выносливости, антигипоксическое и антиоксидантное действия.

Сущность изобретения: применение жидкого экстракта травы гиностеммы пятилистной, полученного перколяцией 70% спиртом этиловым в соотношении 1:1, в качестве средства с адаптогенной активностью.

Технология получения. Жидкий экстракт получали методом перколяции. Для этого точную навеску растительного сырья измельчали до размера частиц 3,0 мм и заливали равным объемом по отношению к навеске 70% спиртом этиловым и оставляли для смачивания сырья на сутки. Затем сырье, плотно утрамбовывая, загружали в перколятор, заливали 70% спиртом этиловым до «зеркала» и оставляли для экстрагирования на 48 часов для достижения равновесной концентрации. Далее перколировали со скоростью 1/48 части рабочего объема в час. При этом первую порцию продукта собирали в отдельную емкость в количестве 85% по отношению к массе сырья. Затем перколяцию вели в другую емкость до полного истощения сырья, пока вытекающий раствор не станет бесцветным. Вторую порцию получаемого продукта упаривали под вакуумом при температуре 50-60°С до 15% по отношению к массе сырья. Оба продукта объединяли и получали вытяжку в соотношении 1:1 [Алексеев, К.В. Фармацевтическая технология / К.В. Алексеев, С.А. Кедик. - М.: АО ИФТ, 2019. - 570 с.].

Полученный жидкий экстр акт представлял собой зеленовато-бурую жидкость с пряно-травянистым запахом. Готовый экстракт помещали в плотно укупоренные склянки темного стекла и хранили в защищенном от света месте при температуре от 15 до 25°С [Государственная фармакопея Российской Федерации. - XIV изд. - М., 2018. - Т. 2 - 3262 с.].

Известно применение спиртового экстракта гиностеммы пятилистной для лечения метаболических заболеваний, таких как ожирение, диабет или гиперлипидемия [CN 102470155, 2012].

В доступной научно-медицинской и патентной литературе сведений об известности применения жидкого экстракта травы гиностеммы пятилистной, полученного перколяцией 70% спиртом этиловым в соотношении 1:1, в качестве средства с адаптогенной активностью не обнаружено.

Предварительно полученный жидкий экстракт и препараты сравнения, используемые в ниже перечисленных методиках, деалкоголизировали с последующим растворением сухого остатка в дистиллированной воде для получения водного экстракта.

Адаптогенное действие жидкого экстракта травы гиностеммы пятилистной изучали на 48 белых беспородных мышах-самцах массой 18,0-25,0 г. в двух модельных системах.

В первой модельной системе формировалась нормобарическая гипоксия с гиперкапнией. Животных одинакового веса помещали по одному в герметически закрываемые банки объемом 250 см3. Регистрировали время выживания (резервное время) животных в условиях гипоксии и высчитывали процент увеличения резервного времени относительно контроля. По окончании эксперимента животных декапитировали, извлекали головной мозг, взвешивали и гомогенизировали в 3 мл холодного трис-НСl-буфера (рН 7,4). Биохимические исследования проводили немедленно. Для определения антиоксидантного статуса в гомогенатах измеряли уровень малонового диальдегида (нмоль/г сырой ткани), и уровень каталазы (мкат/г сырой ткани).

Вторая модель основывалась на оценивании работоспособности по продолжительности плавания мышей с нагрузкой (7% от массы животного). Для этого на 15-й день эксперимента мышей заставляли плавать с прикрепленным к спине грузом до полного утомления (до погружения животного под воду и отказ от плавания), затем, мышей обсушивали и через час снова повторяли плавание с нагрузкой. Для снижения стрессовой составляющей теста, мышей предварительно приучали к воде в режиме вынужденного плавания без нагрузки (3 раза, с интервалом 3 дня, продолжительность нахождения в воде 1 мин). Температура воды в сосуде поддерживалась на уровне 26-28°С (термонейтральная для мышей).

Животных раздел или на три группы:

№1 - опытная группа, в которой животных поили водным экстрактом перколята травы гиностеммы пятилистной;

№2 - группа сравнения, в которой животных поили водным экстр актом из известного препарата «Женьшеня настойка», включенного в государственный реестр лекарственных средств;

№3 - контрольная группа, в которой животных поили только дистиллированной водой.

Водные экстракты из исследуемого растительного сырья вводили мышам-самцам пер орально в течение 14 дней по 3 капли. Объем извлечения рассчитывали, исходя из рекомендуемой суточной дозы для взрослого человека массой 70 кг - 30 капель три раза в день: 30 кап*3=90 кап в сутки, 90 кап/70 кг=1,29 кап/кг. Суточная доза мышам весом 20,0 г равна 0,026 кап. Для удобства дозирования жидкий экстракт (1:1) разводили в 100 раз. Следовательно, мышам весом 20,0 г вводили 3 кап.

Согласно полученным данным, экстракт гиностеммы пятилистной увеличивал продолжительность жизни мышей в условиях нормобарической гипоксии в 1,3 раза (Р<0,042285) относительно группы контроля. Опытный экстракт не уступал по активности экстракту женьшеня (Р<0,011387 относительно контроля). В опытных группах уровень малонового диальдегида выше, чем у контроля, что, вероятно, объясняется большей продолжительностью жизни в условиях гипоксии. При увеличении деструктивных процессов в клетке, увеличивается активность ферментов антиоксидантной защиты, в частности, каталазы, что можно наблюдать у животных контрольной группы и группы гиностеммы. В то же время, в группе женьшеня повышения уровня каталазы не отмечено (табл. 1).

Тест на работоспособность показал, что при повторном плавании с нагрузкой, продолжительность плавания увеличилась во всех группах. Дольше продержались животные из группы гиностеммы, их время увеличилось почти в 2 раза относительно времени первого плавания, в группе женьшеня – в 1,3 раза и в группе контроля - в 1,2 раза (табл. 2).

В группе женьшеня продолжительность плавания в обо их заплывах была наименьшей, по сравнению с другими группами: животные очень быстро приобретали вертикальное положение, зависали в воде и тонули.

Острую токсичность водного экстракта травы гиностеммы пятилистной проводилось на 24 белых беспородных мышах мужского и женского пола весом 18,0-25,0 г. путем перорального введения водного экстракта травы гиностеммы пятилистной в дозах: 5000, 7500, 10000 мг/кг массы животных в пересчете на сухой вес.

Предварительно животных подготавливали к исследованию по схеме: голодание, маркировка, взвешивание, разделение по группам (4 группы по 6 голов). Затем после однократного введения настоя на протяжении двух недель наблюдали за состоянием лабораторных животных: внешний вид, поведенческая реакция, активность, частота дыхания.

При введении исследуемых доз водного экстракта травы гиностеммы пятилистной не было отмечено никаких признаков интоксикации, все животные были живы, подвижны, имели хороший аппетит и летальных исходов не наблюдалось. Максимальная доза введения настоя 10000 мг/кг (табл. 3). Дальнейшие токсикологические исследования не проводились из-за явной не токсичности изучаемых видов сырья. Таким образом, по классификации ГОСТ 12.1.007.76, трава гиностеммы пятилистной была отнесена к классу малотоксичных соединений, что позволяет судить о безопасности данных видов сырья [ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности].

Антиоксидантную активность водного экстракта устанавливали двумя методами.

Первый метод заключался в исследовании водного экстракта различных концентраций in vitro хемилюминесцентным методом. В качестве референс-препарата использовали 0,05% раствор аскорбиновой кислоты.

Водный экстракт (0,01-1 мл) вносили в модельные системы, в которых формировалось образование активных форм кислорода (АФК) и протекали реакции перекисного окисления липидов (ПОЛ), являющиеся наиболее распространенными процессами свободно-радикального окисления. В качестве первой модельной системы использовали 20 мл фосфатного буфера с добавлением цитрата натрия и люминола (рН 7,5). Добавляли 1 мл 50 мМ раствора сернокислого железа, как инициатора процесса окисления. Окисление солей железа обуславливает появление кислородных радикалов и сопровождается хемилюминесценцией, усиливающейся в присутствии люминола. Регистрацию свечения проводили в течение 5 минут.

В качестве второй модельной системы использовали липопротеиновые комплексы, сходные с липидами крови, приготовленные из куриного желтка. Желток смешивали с фосфатным буфером в соотношении 1:5 и гомогенизировали. В качестве инициатора процесса окисления ненасыщенных жирных кислот добавляли 1 мл 50 мМ раствора сернокислого железа. Контролем служили модельные системы без добавления исследуемых извлечений. Регистрацию свечения проводили на приборе «ХЛМ-003». Антиоксидантную активность оценивали по снижению интенсивности свечения (табл. 4).

Выявлено, что водный экстракт обладает выраженной антиоксидантной активностью и влияет как на образование активных форм кислорода, так и на скорость перекисного окисления липидов.

Второй метод основывался на способности адреналина к аутоокислению в щелочной среде, с образованием продукта, имеющего максимум поглощения при 347 нм. К 2 мл бикарбонатного буфера (рН=10,56) добавляли 0,1 мл 0,1% раствора адреналина гидрохлорида (раствор контроля) и через 10 минут определяли оптическую плотность при длине волны 347 нм в кювете толщиной 10 мм на спектрофотометре ShimadzuUV1800 (D1). К 2 мл бикарбонатного буфер а добавляли 0,03 мл исследуемого раствора и 0,1 мл 0,1% раствора адреналина гидрохлорида, через 10 минут определяли оптическую плотность (D2).

Антиоксидантную активность рассчитывали по формуле:

AOA=(D1-D2)*100/D1

Величина АОА более 10% свидетельствует о наличии антиоксидантной активности. При определении АОА также учитывалось, что исследуемый экстр акт имеет собственную окраску, которая поглощает определенную длину волны в видимой области спектра. Величина антиоксидантной активности при определении составила 50,5%.

Таким образом, использование изобретения обеспечивает адаптогенное действие за счет повышения физической выносливости, антигипоксического и антиоксидантного действия, и позволяет расширить ассортимент лекарственных средств растительного происхождения на Российском фармацевтическом рынке.

Применение жидкого экстракта травы гиностеммы пятилистной, полученного перколяцией 70% спиртом этиловым в соотношении 1:1, в качестве средства с адаптогенной активностью.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к устройствам и способам проведения процессов обезвоживания различных компонентов из твердых веществ с помощью растворителей. Установка содержит расположенные последовательно по потоку твердой и жидкой фаз емкость с нагревателями для основы для экстракции, сосуд для экстракции с краном в нижней части для выпуска полученного продукта распада, конденсатор с емкостью для сбора конденсата, насос, перекачивающий конденсат в емкость для основы, трубопроводы, связывающие все элементы установки в одноконтурную систему.

Изобретение относится к устройствам и способам проведения процессов обезвоживания различных компонентов из твердых веществ с помощью растворителей. Установка содержит расположенные последовательно по потоку твердой и жидкой фаз емкость с нагревателями для основы для экстракции, сосуд для экстракции с краном в нижней части для выпуска полученного продукта распада, конденсатор с емкостью для сбора конденсата, насос, перекачивающий конденсат в емкость для основы, трубопроводы, связывающие все элементы установки в одноконтурную систему.

Изобретение относится к способу и устройству для экстракции лития из литийсодержащих руд. Литийсодержащую руду измельчают до среднего размера частиц от 0,1 до 1000 мкм с получением измельченной сырой руды, после чего проводят обжиг при температуре прокаливания более чем 900°C с получением прокаленной измельченной сырой руды.

Группа изобретений относится к области сельского хозяйства, а именно к ветеринарной гельминтологии, и может быть использована в качестве моллюскоцидного средства в борьбе и профилактике пастбищных гельминтозов. Способ получения моллюскоцидного средства включает сбор растения, сушку, растирание пестиком в ступке высушенного сырья до состояния порошка, помещение его в сосуд для экстракции в течение 24 часов в соотношении 1 г к 100 мл растворителя, перемешивание с частотой 100±1 об/мин, концентрирование полученной надосадочной жидкости в роторном испарителе при давлении 4±2 кПа, 280 об/мин, досушивание в течение суток в вакуум-эксикаторе при давлении 10 кПа, при этом корни, листья, стебли, цветки и семена Смолевки белой (Silene latifolia) экстрагируют н-бутанолом при постоянной температуре 30±2°С, перемешивают верхнеприводной мешалкой, отделяют экстракт центрифугированием при 8000 об/мин в течение 180 секунд, концентрируют при температуре 60±2°С.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения экстракта листьев гинкго билоба. Способ получения сухого экстракта листьев гинко билоба, включающий в себя ультразвуковую экстракцию спиртом этиловым 70%, перед экстракцией листья гинкго билоба измельчают до величины частиц размером 2 мм, экстрагируют сырье в ультразвуковом экстракторе при соотношении сырье:экстрагент 1:5, в течение 90 минут с частотой ультразвуковых колебаний 22 кГц при удельном расходе энергии 22,2 Вт/л и непрерывном охлаждении холодной водой, подаваемой в охлаждающую рубашку аппарата; по истечении времени полученный экстракт сливают, удаляют путем перегонки спирт этиловый; остаток концентрируют в шаровом выпарительном аппарате до содержания влаги 40-50%; полученную массу сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50-55°С, а затем превращают в порошок в шаровой мельнице.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения экстракта из зерен киноа. Способ получения экстракта из зерен киноа включает измельчение и просеивание зерен через сито с размерами пор 0,35 мм, затем 2-этапное экстрагирование: на первом этапе измельченные зерна экстрагируют 500 мл 20-60%-ным раствором этилового спирта и в соотношении 1:20 г/мл соответственно, при комнатной температуре в течение 1 ч, осветляют центрифугированием в течение 30 мин на центрифуге BEKMAN J-6B при скорости 4000 об/мин и отбирают супернатант, на втором этапе полученный осадок экстрагируют 250 мл 20-60%-ным раствором этилового спирта в аналогичных условиях, в соотношении 1:10 г/мл соответственно, при комнатной температуре в течение 45-60 мин, с последующим центрифугированием, отбирают супернатант и объединяют с полученным на первом этапе, ультрафильтрацию проводят через мембрану с размером пор 10 кД, со сбором низкомолекулярной фракции, которую затем подвергают обратноосмотическому концентрированию с последующим удалением этанола под вакуумом на роторном испарителе, пропусканием этого концентрата через колонку с гидрофобным сорбентом, отмывкой сорбента водой и последующей десорбцией фитоэкдистероидов, флавоноидов и полифенолов 70-75% этиловым спиртом, удалением этанола из спиртового смыва под вакуумом на роторном испарителе и лиофильным высушиванием.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активных веществ фенольной природы из растительного сырья. Способ получения экстракта, содержащего биологически активные соединения фенольной природы, из гречихи посевной, заключается в том, что растительное сырье первый раз экстрагируют растворителем в соотношении 1:10-1:20 при 60°С под давлением 0,8 кгс/см2 25 мин при постоянном перемешивании, полученный экстракт сливают, повторно экстрагируют при тех же условиях, добавляя к оставшейся массе 50% растворителя от первоначального объема, экстракты объединяют, выпаривают жидкую часть экстракта в вакуумно-выпарном аппарате при температуре 60°С в вакууме 0,8 кгс/см2, концентрированный экстракт охлаждают до 4°С, далее концентрат фильтруют или центрифугируют, при этом в качестве растительного сырья используют вегетативную массу или солому гречихи посевной, измельченную до 6 мм, при первой экстракции в качестве растворителя используют диэтиловый эфир, при повторной экстракции в качестве растворителя используют 70%-ный водно-спиртовой раствор.
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к области получения веществ, пригодных для обработки растений. Способ извлечения гликоалкалоидов из очищенной кожуры мытого картофеля при производстве картофелепродуктов для использования в качестве инсектицида и подавления патогенной микрофлоры при вегетации сельскохозяйственных растений предусматривает экстракцию гликоалкалоидов минеральной или органической кислотой концентрацией от 0,01 до 7,0% при продолжительности процесса экстракции 0,1-6 ч при температуре 10-50°С при соотношении кожура : растворитель от 1:1 до 1:10, нейтрализацию смеси раствором щелочи до рН 5,5-7,5, отделение экстракта от экстрагируемой кожуры и концентрирование экстракта гликоалкалоидов выпариванием.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к лечению рака, выбранного из рака мочевого пузыря, рака груди, аденокарциномы легкого, рака поджелудочной железы или рака предстательной железы, композицией, полученной из цельного растения Ambrosia maritime или Ambrosia hispida.

Изобретение относится к области химии, а именно к способу получения каротиноидного комплекса из морских звезд вида Patiria pectinifera. Способ включает экстрагирование сырья из морских звезд Patiria pectinifera водным раствором органической или неорганической пищевой кислоты при рН 1-2 при соотношении сырье:кислота 1:1-1,2 в течение определенного времени, затем повторное экстрагирование сырья пищевой кислотой, объединение полученных экстрактов, центрифугирование при определенных условиях и фильтрование, добавление в полученный фильтрат, содержащий водорастворимый белок-каротиноидный комплекс, раствора органической или неорганической пищевой кислоты до достижения рН 1-2 и пропускание фильтрата через колонку с полихромом-1, уравновешенным водным раствором той же пищевой кислоты рН 1-2, промывание колонки последовательно водой и градиентом этилового спирта, элюирование целевого продукта этиловым спиртом, упаривание элюата в вакууме, растворение полученного концентрата в этиловом спирте, отстаивание, центрифугирование и упаривание спиртового раствора в вакууме.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан препарат для лечения метахроматической лейкодистрофии, включающий рекомбинантный аденоассоциированный вирус 9 серотипа, содержащий кодон-оптимизированную последовательность гена ARSA, представленную SEQ ID NO: 1, препарат для лечения метахроматической лейкодистрофии, состоящий из мезенхимных стволовых клеток, генетически модифицированных рекомбинантным аденоассоциированным вирусом 9 серотипа, содержащим кодон-оптимизированную последовательность гена ARSA, представленную в SEQ ID NO: 1, и способ лечения метахроматической лейкодистрофии.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2021-07-13 2022-09-02T16:43:21
Наверх