Фосфорилсодержащие четвертичные соли аммония с высшими алкильными заместителями, обладающие бактерицидной и фунгицидной активностью

Изобретение относится к области фосфорорганической химии и предназначено для применения в области медицины, ветеринарии, и сельского хозяйства в качестве бактерицидных и фунгицидных средств. В частности, изобретение относится к фосфорилсодержащим четвертичным солям аммония, а именно – N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромидам общей формулы (I), где n: 10, 12, 14, 16, 18. Технический результат: обеспечение высокой бактерицидной и фунгицидной активности при низких концентрациях. 2 ил., 6 пр.

(I)

 

Изобретение относится к области фосфорорганической химии, в частности, к фосфорилсодержащим четвертичным солям аммония, а именно N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромидам общей формулы (I) :

(I),

где n: 10, 12, 14, 16, 18, обладающим высокой бактерицидной и фунгицидной активностью при низких концентрациях, которые могут найти применение в области медицины, ветеринарии, и сельского хозяйства в качестве лекарственных и дезинфицирующих средств.

Из исследованного уровня техники выявлены лекарственные препараты, содержащие фрагменты четвертичных аммониевых солей.

Так, известен мирамистин ((бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]-аммонийхлорид моногидрат) - соединение с низкой токсичностью и обладающее широким спектром бактерицидного действия в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий, патогенных грибов, простейших и некоторых видов вирусов, например, ретровирусов (ВИЧ), парамиксовирусов (корь, паротит) и др. [Агафонов А.П., Скарнович М.О., Петрищенко В.А. и соавт. Изучение in vitro антивирусных свойств Мирамистина® в отношении вирусов кори и паротита // Антибиотики и химиотерапия. - 2005. - Вып. 50.- № 5-6. - С. 17-19., Криворутченко Ю.Л. Дозозависимая инактивация мирамистином внеклеточного вируса иммунодефицита человека // Вопр. вирусол. - 1998. - № 3. - С. 122-124.].

Антимикробная и фунгицидная активность 0,01 % мирамистина также позволяют лечить больных с инфекционно-воспалительными заболеваниями.

Однако при двукратном разбавлении эффективность препарата значительно падает, поэтому его длительное применение в комплексной терапии воспалительных заболеваний кожи и слизистых оболочек значительно ухудшается.

[Багаева В.В., Попова В.М., Пашкова Г.С., Исаджанян К.Е., Никитин В.В., Жиленков Е.Л. Изучение эффективности и безопасности применения антимикробных средств // Research'n Practical Medicine Journal. – 2015. – Т.2. - №3. – С. 35-42].

Известен аналог по назначению – бензалкония хлорид (алкилдиметилбензиламмония хлорид) - соединение, активное в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий [Янгсон Р.М. Медицинский энциклопедический словарь (Collins), М.: АСТ Астрель, 2006, 1375 с.].

Однако имеются сведения о его цитотоксическом действии на кожно-мышечные и легочные фибропласты эмбриона человека в культуре. [Еропкина Е.М., Афиногенов Г.Е., Еропкин М. Ю. Сравнительное исследование антимикробного и цитотоксического действия антисептиков in vitro с применением модели культуры эмбриональных фибробластов человека // Токсикологический вестник. – 1997. – Т. 2. – С. 12–17.]

Известен аналог по назначению хлорид деквалиния – антимикробное средство с широким бактерицидным и фунгицидным действием. [Mendling W, Weissenbacher E.R., Gerber S.,V. Prasauskas, P Grob Use of locally delivered dequalinium chloride in the treatment of vaginal infections: a review // Arch Gynecol Obstet. – 2016. – V. 293, №3. – P. 469–84]. Антимикробный механизм действия деквалиния хлорида заключается в повышении проницаемости клеточной стенки микроорганизмов и разрушении их ферментативных систем. [Доброхотова Ю.Э., Озолиня Л.А., Бондаренко К.Р., Лапина И.А., Дворников А.С. Современные аспекты лечения вагинальных инфекций в период гестации // Гинекология. – 2016 . – Т. 18. - № 3. – С. 9-15].

При этом в некоторых источниках сообщается о токсичности известного соединения [G. Gamboa-Vujicic, D. A. Emma, S. Y. Liao, C. Fuchtner, A. Manetta Toxicity of the Mitochondria1 Poison Dequalinium Chloride in a Murine Model System // J. Pharm. Sci. 1993. – V. 82. – P. 231-235, Tischer M., Pradel G., Ohlsen K., U. Holzgrabe Quaternary Ammonium Salts and Their Antimicrobial Potential: Targets or Nonspecific Interactions? // J. Chem. Med. Chem. – 2012. – V. 7, Iss. 1. – P. 22-31].

Известен аналог по назначению – цетилпиридиния хлорид, который является часто используемым антимикробным препаратом из группы четвертичных соединений аммония, который оказывает бактерицидное действие на грамположительные и грамотрицательные бактерии, а также эффективен в отношении некоторых вирусов и грибов. Высокая поверхностная активность позволяет ему проникать в труднодоступные места глотки и способствует формированию достаточной концентрации в очаге воспаления. [Свистушкин В.М., Никифорова Г.Н., Шевчик Е.А., Топоркова Л.А. Эффективность топических препаратов в лечении больных острыми воспалительными заболеваниями глотки // Вестник оториноларингологии. – 2019. – Т. 84. - № 6. – С.112-117.] Он используется в композициях, запатентованных фирмой Проктер Энд Гембл, предназначенных для лечения состояний полости рта (зубной налет, кариес, воспаление десен и др.) [Композиции для ухода за полостью рта, содержащие четвертичные аммониевые антимикробные реагенты с повышенными уровнями биологической доступности / ДЗЕ ПРОКТЕР ЭНД ГЕМБЛ КОМПНИ // Патент №2325899, опубл. 10.06.2008, Бюл № 16].

При этом известное соединение обладает недостатками, а именно – выработка к нему резистентности и достаточно высокая токсичность – ЛД 50 цетилпиридиния хлорида на мышах при пероральном введении, которая составляет 108 мг/кг, что соответствует 2 классу токсичности по Измерову [Н.Ф. Измеров, И. В. Саноцкий, К.К. Сидоров Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии / Москва: Медицина, 1977. – 240 с., Bodor N. Labile quaternary ammonium salts as soft antimicrobials // J. Med. Chem. – 1980. – V.23, Is. 5. – P. 469 – 474].

Известен аналог по назначению – препарат «Биодез–Экстра ДВУ», содержащий в качестве действующих веществ смесь четвертичных аммониевых солей, состоящую из дидецилдиметиламмоний хлорида, дидецилдиметиламмоний бромида и алкилдиметилбензиламмоний хлорида. Результаты опытов по обеззараживанию тест-поверхностей из дерева, нержавеющей стали, оцинкованного железа, кафельной и метлахской плитки, а также бетона контаминированных Escherichia coli, Staphylococous aureus показало зависимость эффективности действия от типа материала поверхности.

При этом золотистый стафилококк Staphylococous aureus оказался более устойчивым к действию средства «Биодез-Экстра ДВУ» по сравнению с кишечной палочкой Escherichia coli. [Койчуев А.У. Изучение дезинфекционной эффективности средства «Биодез–Экстра ДВУ» в лабораторных условиях / А.У. Койчуев., Н.И. Попов // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. – 2014. – № 1(11). – С. 53-56].

Известен аналог по назначению – четвертичные аммониевые соли, содержащие фрагмент производных витамина В₆, обладающие выраженной антибактериальной активностью по отношению к штаммам грамположительных микроорганизмов Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Micrococus luteus, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa [Антибактериальные средства на основе четвертичных аммониевых солей / Ю.Г. Штырлин, Н.В. Штырлин, С.В Сапожников, Е.В. Никитина, А.Г. Иксанова, А.Р. Каюмов / Патент РФ. №2607522 опубл. 29.12.2016]

При этом необходимо отметить, что все четвертичные соединения аммония связываются с цитоплазматической мембраной микробов, разрушают ее, что и приводит к гибели паразита.

Таким образом, анализ уровня техники, проведенный заявителем, показал, что структурных аналогов заявленных соединений общей формулы (I), на основе N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромидов, обладающих бактерицидной и фунгицидной активностью, из выявленного уровня техники на дату подачи настоящей заявки не выявлено, поэтому формула изобретения составлена без ограничительной чпсти.

Задачей и техническим результатом заявленного технического решения являются новые соединения – фосфорилсодержащие четвертичные соли аммония N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромиды (I), не требующие трудоемких процедур синтеза и обладающие одновременно высокой бактерицидной и фунгицидной активностью, расширяющие арсенал известных средств указанного назначения.

Сущностью заявленного технического решения являются фосфорилсодержащие четвертичные соли аммония N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромиды общей формулы (I)

(I),

где n: 10, 12, 14, 16, 18, обладающие высокой бактерицидной и фунгицидной активностью.

Заявленное техническое решение иллюстрируется Фиг.1 и Фиг.2.

На Фиг.1 приведена структура соединения (Ib), установленная методом рентгеноструктурного анализа.

На Фиг.2 приведена Таблица бактерицидной и фунгицидной активности заявленных N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромидов по сравнению с известными препаратами.

Далее заявителем приведено описание заявленного технического решения.

Заявленный технический результат достигается получением фосфорилсодержащих четвертичных солей аммония – N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил- N-алкиламмоний бромидов формулы (I), обладающих бактерицидной и фунгицидной активностью.

Заявленные соединения получают в два этапа (см. схему 1).

где n: 10 (Ia), 12 (Ib), 14 (Ic), 16 (Id), 18 (Ii)

Схема 1

1 этап: Водный 33% раствор диметиламина, параформ и п-толуолсульфокислоту в качестве катализатора смешивают и нагревают на водяной бане до полного растворения параформа при 55 °С, затем добавляют диизопропилфосфит и перемешивают при комнатной температуре в течение получаса. Затем добавляют бензол в качестве растворителя и греют при энергичном перемешивании в течение 3-х часов при 70 °С. Мольное соотношение диметиламин : парафом : диизопропилфосфит  = 1.1 : 1 : 1.

Полученный аминофосфонат (III) выделяют методом жидкость - жидкостной экстракции.

2 этап: Проводят алкилирование полученного на 1 этапе аминофосфоната (III) высшими алкилбромидами (IV). Для этого к аминофосфонату (III) добавляют алкилбромид в 10 мл пропанола-2 в мольном соотношении соединение  (III) : алкилбромид = 1 : 1 и нагревают при температуре 60 °С в течение пяти часов. Растворитель отгоняют на роторном испарителе, продукт декантируют петролейным эфиром, фильтруют и высушивают в вакуум-эксикаторе.

Получают заявленное соединение формулы (I).

Далее заявителем приведено описание исходных реагентов.

Диизопропилфосфит (II) является коммерчески доступным соединением [https://chimmed.ru/products/diisopropyl-phosphite-98-id=284079] или достаточно легко получаемым из пропанола-2 и треххлористого фосфора. Метод синтеза диалкилфосфитов описан в работе [Кормачев, В.В. Препаративная химия фосфора / В.В. Кормачев, М.С. Федосеев. Пермь: УрО РАН. 1992. – 457 с].

Высшие алкилбромиды (IV) являются коммерчески доступными соединениями [http://www.acros.com/DesktopModules/Acros_Search_Results/Acros_Search_Results.aspx?search_type=CatalogSearch&SearchString=decylbrom].

Диметиламин является коммерчески доступным соединением [https://himbaza.com/dimetilamin/].

Параформ является коммерчески доступным соединением [https://pcgroup.ru/products/paraformaldegid-91-n/].

Далее заявителем приведены примеры получения заявленных соединений.

Пример 1 . Получение N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-дециламмоний бромида (Ia) (схема 2).

Схема 2

1-й этап: Получение диизопропил((диметиламино)метил)фосфоната (III).

Водный 33% раствор диметиламина в количестве, например, 0.11 моль (в пересчете на диметиламин), 0.1 моль параформа и 1 ммоль п-толуолсульфокислоты смешивают и нагревают на водяной бане до полного растворения параформа (в течение, например, около 1 часа) при 55 °С, затем добавляют 0.1 моль диизопропилфосфита и перемешивают при комнатной температуре в течение получаса, затем добавляют, например, 50 мл бензола в качестве растворителя и нагревают при энергичном перемешивании в течение 3 часов при 70 °С.

Реакционную смесь переносят в делительную воронку и удаляют водную фазу. В оставшуюся бензольную фазу добавляют 50 мл 2.5 М соляной кислоты, энергично встряхивают и после расслоения удаляют бензольную фазу. Оставшуюся водную фазу нейтрализуют 50% водным раствором гидроксида натрия до синей реакции по лакмусовой бумаге и последовательно встряхивают с 50 мл бензола два раза. O,O-диизопропиламинометилфосфонат выделяют из бензольной фазы удалением растворителя. Выход 0.06 моль (60.0 %), бесцветная жидкость.

ИК-спектр, см^-1: 975 (P-О-С), 1240 (P=O).

С₉Н₂₂NО₃Р.

Спектр ЯМР ³¹Р, бензол δ м.д. 24.3.

2-й этап: Получение соединения (Ia).

К 0.01 моль O,O-диизопропиламинометилфосфоната, полученного на 1-м этапе, добавляют 0.01 моль децилбромида в 10 мл пропанола-2 и нагревают при температуре 60 °С в течение пяти часов. Растворитель отгоняют на роторном испарителе, продукт декантируют петролейным эфиром, фильтруют и высушивают в вакуум-эксикаторе.

Получают N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-дециламмоний бромид – соединение (Ia). Выход 3.32 г (75 %), бесцветный порошок.

ИК-спектр, см^-1: 994 (P-O-C), 1249 (Р=О).

Спектр ЯМР ¹Н (CDCl₃), δ, м.д.: 4.26 д. (2H, NCH₂P, ²J_РH 13.29 Гц), 0.82 т. (3Н, CH₂CH₃, ³J_НH 6.56 Гц), 1.34 д. (6Н, CHCH₃, ³J_НH 6.12 Гц), 1.37 д. (6Н, CHC’H₃, ³J_НH 6.19 Гц), 3.59 с. (6H, NCH₃), 1.18-1.39 м (16Н, (CH₂)₁₄CH₃), 3.71-3.78 м. (2Н, NCH₂CH₂), 4.77-4.89 м. (2Н, OCH).

Спектр ЯМР ¹³С{¹H} (CDCl₃), δ_С, м.д.: 14.00 с., 22.50 с., 22.97 с., 23.92 с., 23.96 с., 24.04 с., 25.93 с., 29.08 с., 29.11 с, 29.23 с., 31.67 с. (CH₃CH, CH₃(CH₂)₈), 53.08 д. (N(CH₃)₂, ³J_PC 4.60 Гц), 58.36 д. (PCH₂, ¹J_PC 147.97 Гц), 66.29 д. (NCH₂CH₂, ³J_PC 3.60 Гц), 73.42 д. (OCH, ²J_PC 6.54 Гц).

Спектр ЯМР ³¹Р{¹H} (CDCl₃): δ_Р 11.5 м.д.

C₁₉H₄₃BrNO₃P.

T_пл 84.7 °С.

Пример 2 . Получение N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-додециламмоний бромида (Ib).

1-й этап: Получение диизопропил((диметиламино)метил)фосфоната (III) – проводят аналогично Примеру 1 (см. схему 1, схему 2).

2 этап: Получение соединения (Ib) (Схема 3).

Схема 3

К 0.01 моль O,O-диизопропиламинометилфосфоната, полученного на 1-м этапе, добавляют 0.01 моль додецилбромида в 10 мл пропанола-2 и нагревают при температуре 60 °С в течение пяти часов. Растворитель отгоняют на роторном испарителе, продукт декантируют петролейным эфиром, фильтруют и высушивают в вакуум-эксикаторе.

Получают N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-додециламмоний бромид – соединение (Ib). Выход 3.82 г (80.9 %), бесцветные кристаллы.

ИК-спектр, см^-1: 988 (P-O-C), 1249 (Р=О).

Спектр ЯМР ¹Н (CDCl₃), δ, м.д.: 4.28 д. (2H, NCH₂P, ²J_РH 13.31 Гц), 0.85 т. (3Н, CH₂CH₃, ³J_НH 6.73 Гц), 1.36 д. (6Н, CHCH₃, ³J_НH 6.15 Гц), 1.39 д. (6Н, CHC’H₃, ³J_НH 6.17 Гц), 3.61 с. (6H, NCH₃), 1.20-1.34 м (20Н,(CH₂)₁₀CH₃), 3.72-3.79 м. (2Н, NCH₂CH₂), 4.79-4.91 м. (2Н, OCH).

Спектр ЯМР ¹³С{¹H} (CDCl₃), δ_С, м.д.: 14.05 с., 22.60 с., 23.03 с., 23.99 с., 24.03 с., 24.11 с., 26.00 с., 29.18 с., 29.24 с, 29.32 с, 29.50 с., 29.57 с., 31.85 с. (CH₃CH, CH₃(CH₂)₁₀), 53.14 д. (N(CH₃)₂, ³J_PC 4.58 Гц), 58.50 д. (PCH₂, ¹J_PC 147.89 Гц), 66.44 д. (NCH₂CH₂, ³J_PC 3.57 Гц), 73.54 д. (OCH, ²J_PC 6.56 Гц).

Спектр ЯМР ³¹Р{¹H} (CDCl₃): δ_Р 11.4 м.д.

T_пл 98.3 °С.

Структура соединения (Ib) установлена также методом рентгеноструктурного анализа (см. Фиг.1).

Масс-спектр (HRMS-ESI) C₂₁H₄₇BrNO₃P.

Вычислено, [M]⁺ 392.3294.

Найдено, [M]⁺ 392.3294.

Пример 3 . Получение N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-тетрадециламмоний бромида (Ic):

1-й этап: Получение диизопропил((диметиламино)метил)фосфоната (III) – проводят аналогично Примеру 1 (см. схему 1, схему 2).

2 этап: Получение соединения (Iс) (Схема 4).

Схема 4

К 0.01 моль O,O-диизопропиламинометилфосфоната, полученного на 1-м этапе, добавляют 0.01 моль тетрадецилбромида в 10 мл пропанола-2 и нагревают при температуре 60 °С в течение пяти часов. Растворитель отгоняют на роторном испарителе, продукт декантируют петролейным эфиром, фильтруют и высушивают в вакуум-эксикаторе.

Получают N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-тетрадециламмоний бромид – соединение (Ic). Выход 3.86 г (77.2 %), бесцветный порошок.

ИК-спектр, см^-1: 987 (P-O-C), 1247 (Р=О).

Спектр ЯМР ¹Н (CDCl₃), δ, м.д.: 4.27 д. (2H, NCH₂P, ²J_РH 13.28 Гц), 0.88 т. (3Н, CH₂CH₃, ³J_НH 6.76 Гц), 1.39 д. (6Н, CHCH₃, ³J_НH 6.15 Гц), 1.42 д. (6Н, CHC’H₃, ³J_НH 6.15 Гц), 3.58 с. (6H, NCH₃), 1.22-1.37 м (24Н, (CH₂)₁₂CH₃), 3.70-3.78 м. (2Н, NCH₂CH₂), 4.82-4.93 м. (2Н, OCH).

Спектр ЯМР ¹³С{¹H} (CDCl₃), δ_С, м.д.: 14.12 с., 22.67 с., 23.09 с., 24.04 с., 24.08 с., 24.15 с., 26.06 с., 29.22 с., 29.34 с, 29.36 с., 29.42 с., 29.55 с., 29.61 с., 31.90 с. (CH₃CH, CH₃(CH₂)₁₂), 53.23 д. (N(CH₃)₂, ³J_PC 4.42 Гц), 58.78 д. (PCH₂, ¹J_PC 147.63 Гц), 66.82 д. (NCH₂CH₂, ³J_PC 3.52 Гц), 73.76 д. (OCH, ²J_PC 6.19 Гц).

Спектр ЯМР ³¹Р{¹H} (CDCl₃): δ_Р 11.4 м.д.

C₂₃H₅₁BrNO₃P.

T_пл 73.2 °С.

Пример 4 . Получение N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-гексадециламмоний бромида (Id).

1-й этап: Получение диизопропил((диметиламино)метил)фосфоната (III) – проводят аналогично Примеру 1 (см. схему 1, схему 2).

2 этап: Получение соединения (Id) (Схема 5).

Схема 5

К 0.01 моль O,O-диизопропиламинометилфосфоната, полученного на 1-м этапе, добавляют 0.01 моль гексадецилбромида в 10 мл пропанола-2 и нагревают при температуре 60 °С в течение пяти часов. Растворитель отгоняют на роторном испарителе, продукт декантируют петролейным эфиром, фильтруют и высушивают в вакуум-эксикаторе.

Получают N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил- N-гексадециламмоний бромид – соединение (Id). Выход 4.03 г (76.3 %), бесцветный порошок.

ИК-спектр, см^-1: 995 (P-O-C), 1250 (Р=О).

Спектр ЯМР ¹Н (CDCl₃), δ, м.д.: 4.25 д. (2H, NCH₂P, ²J_РH 13.36 Гц), 0.88 т. (3Н, CH₂CH₃, ³J_НH 6.77 Гц), 1.40 д. (6Н, CHCH₃, ³J_НH 6.15 Гц), 1.43 д. (6Н, CHC’H₃, ³J_НH 6.15 Гц), 3.56 с. (6H, NCH₃), 1.23-1.38 м (28Н, (CH₂)₁₄CH₃), 3.70-3.77 м. (2Н, NCH₂CH₂), 4.83-4.93 м. (2Н, OCH).

Спектр ЯМР ¹³С{¹H} (CDCl₃), δ_С, м.д.:14.13 с., 22.69 с., 23.11 с., 24.05 с., 24.09 с., 24.15 с., 26.06 с., 29.22 с., 29.36 с, 29.43 с., 29.51 с., 29.56 с., 29.62 с., 29.66 с., 29.68 с., 31.85 с. (CH₃CH, CH₃(CH₂)₁₄), 53.24 д. (N(CH₃)₂, ³J_PC 4.21 Гц), 58.90 д. (PCH₂, ¹J_PC 148.48 Гц), 66.98 д. (NCH₂CH₂, ³J_PC 3.84 Гц), 73.82 д. (OCH, ²J_PC 6.39 Гц).

Спектр ЯМР ³¹Р{¹H} (CDCl₃): δ_Р 11.2 м.д.

C₂₅H₅₅BrNO₃P.

T_пл 85.4 °С.

Пример 5 . Получение N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-октадециламмоний бромида (Ii):

1-й этап: Получение диизопропил((диметиламино)метил)фосфоната (III) – проводят аналогично Примеру 1 (см. схему 1, схему 2).

2 этап: Получение соединения (Ii) (Схема 6).

Схема 6

К 0.01 моль O,O-диизопропиламинометилфосфоната, полученного на 1-м этапе, добавляют 0.01 моль октадецилбромида в 10 мл пропанола-2 и нагревают при температуре 60 °С в течение пяти часов. Растворитель отгоняют на роторном испарителе, продукт декантируют петролейным эфиром, фильтруют и высушивают в вакуум-эксикаторе.

Получают N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-октадециламмоний бромид – соединение (Ii). Выход 4.34 г (78.0 %), бесцветный порошок.

ИК-спектр, см^-1: 994 (P-O-C), 1249 (Р=О).

Спектр ЯМР ¹Н (CDCl₃), δ, м.д.: 4.27 д. (2H, NCH₂P, ²J_РH 13.16 Гц), 0.88 т. (3Н, CH₂CH₃, ³J_НH 6.77 Гц), 1.40 д. (6Н, CHCH₃, ³J_НH 6.15 Гц), 1.43 д. (6Н, CHC’H₃, ³J_НH 6.15 Гц), 3.56 с. (6H, NCH₃), 1.20-1.38 м (32Н, (CH₂)₁₆CH₃), 3.68-3.78 м. (2Н, NCH₂CH₂), 4.80-4.94 м. (2Н, OCH).

Спектр ЯМР ¹³С{¹H} (CDCl₃), δ_С, м.д.:14.06 с., 22.62 с., 23.04 с., 24.00 с., 24.03 с., 24.07 с., 24.12 с., 26.01 с., 29.20 с., 29.30 с, 29.34 с., 29.39 с., 29.51 с., 29.57 с., 29.63 с., 29.69 с., 31.85 с. (CH₃CH, CH₃(CH₂)₁₆), 53.15 д. (N(CH₃)₂, ³J_PC 4.61 Гц), 58.51д. (PCH₂, ¹J_PC 147.89 Гц), 66.45 д. (NCH₂CH₂, ³J_PC 3.60 Гц), 73.55 д. (OCH, ²J_PC 6.60 Гц).

Спектр ЯМР ³¹Р{¹H} (CDCl₃): δ_Р 11.3 м.д.

C₂₇H₅₉BrNO₃P.

T_пл 78.4 °С.

Пример 6. Исследование бактерицидной и фунгицидной активности соединений формулы (I).

Бактерицидную и фунгицидную активность солей четвертичного аммония формулы (I) исследовали на тест-культурах: Escherichia coli (E. coli), Bacillus cereus (B.cereus), Pseudomonas aeruginosa (Ps.Aeruginosa), Staphylococcus aureus (S.aureus), Candida albicans, по известному методу [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии. // Москва: Медицина, 1971. – 245 с.].

Для оценки бактерицидной и фунгицидной активности заявленные соединения формулы (I) вносили в лунки агаризированной питательной среды. О бактерицидной и фунгицидной активности судили по наличию зоны ингибирования роста тест-культур, которая образуется вокруг лунок с исследуемым веществом.

Результаты исследования бактерицидной и фунгицидной активности N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромидов формулы (I) представлены в Таблице на Фиг.2.

В качестве контроля исследованы аналоги: мирамистин, клотримазол и бензалкония хлорид.

Из данных, приведенных в Таблице 1, видно, что все заявленные соединения формулы (I) были активны как и в отношении грамположительных, так и в отношении грамотрицательных бактерий, а также грибов Candida albicans. При этом соединения Iа, Ib и Ic показали бактерицидную и фунгицидную активность выше, чем у известных аналогов, а соединения Id и Ii – активность, сопоставимую с известными аналогами. Соединение Ib показало высокую фунгицидную активность в отношении Candida albicans, двукратно превышающую известный препарат клотримазол.

При этом бактерицидная и фунгицидная активность заявленных соединений достигает максимума при длине алкильной цепи при атоме азота C12.

Таким образом, из описанного выше можно сделать вывод, что заявителем достигнуты поставленные задачи и заявленный технический результат, а именно: получены новые фосфорилсодержащие четвертичные соли аммония – N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромиды формулы (I), не требующие трудоемких процедур синтеза, расширяющие арсенал известных средств указанного назначения. Преимуществами заявленных соединений является то, что они обладают высокой бактерицидной и одновременно высокой фунгицидной активностью по отношению как к грамположительным, так и к грамотрицательным штаммам микроорганизмов.

Заявленное техническое решение соответствует условию патентоспособности «новизна» предъявляемому к изобретениям, т.к. из исследованного уровня техники не выявлено средство, обладающее совокупностью заявленных в формуле изобретения признаков, позволяющих получить заявленный технический результат, а именно – фосфорилсодержащие соли аммония с высшими алкильными заместителями, обладающие одновременно высокой бактерицидной и фунгицидной активностью, расширяющие арсенал известных средств указанного назначения.

Заявленное техническое решение соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень», предъявляемому к изобретениям, т. к. совокупность заявленных признаков обеспечивает получение неочевидных для специалиста технических результатов, а именно – получение неизвестных из уровня техники соединений.

Заявленное техническое решение соответствует условию патентоспособности «промышленная применимость» предъявляемому к изобретениям, так как может быть осуществлено на стандартном оборудовании с использованием известных реагентов.

Фосфорилсодержащие четвертичные соли аммония N-((диизопропоксифосфорил)метил)-N,N-диметил-N-алкиламмоний бромиды общей формулы (I)

(I),

где n: 10, 12, 14, 16, 18, обладающие высокой бактерицидной и фунгицидной активностью.