Глазные капли в форме раствора, содержащего производное бензопирана или его фармацевтически приемлемую соль
Группа изобретений относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначена для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна. Композиция глазных капель в форме раствора содержит (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль, пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента и регулирующий pH агент в водной среде. Указанные компоненты используются в заявленных количествах. Композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0. Также представлен фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, полученный путем помещения указанной композиции глазных капель в светонепроницаемую тару. Использование группы изобретений позволяет повысить стабильность композиции глазных капель. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 ил., 17 табл., 13 пр.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[1] Настоящее изобретение относится к композиции глазных капель в форме раствора, содержащего производное бензопирана или его фармацевтически приемлемую соль. Точнее говоря, настоящее изобретение относится к композиции глазных капель в форме раствора, не только содержащего производное бензопирана или его фармацевтически приемлемую соль и особый стабилизирующий агент, но и характеризующегося определенным диапазоном pH.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[2] Производное бензопирана Формулы 1 с химическим наименованием (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран известно как соединение, обладающее терапевтическим действием при раке, ревматоидном артрите и т.д. (патент Кореи № 10-0492252).
[3] Формула 1
[4] 
[5] Кроме того, соединение Формулы 1 может быть получено в виде композиции глазных капель на основе низкомолекулярного материала; и с пользой применено для профилактики и лечения дегенеративных процессов желтого пятна, без инъекции напрямую в пораженную область, как в случае с терапией с инъекцией антител (опубликованная патентная заявка Кореи № 10-2012-0112162). В опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162 раскрыта композиция глазных капель в форме раствора или суспензии. Например, в опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162 раскрыта композиция глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 в концентрациях 0,06 масс./об.% и 0,09 масс./об.%, изготовленное с использованием полиэтиленгликоля и глицерина в качестве растворителя.
[6] Между тем, для эффективного лечения дегенеративных процессов желтого пятна необходима композиция глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 в высокой концентрации, например, в концентрации 0,3 масс./об.% и выше (то есть в концентрации 3,0 мг/мл и выше). Однако, поскольку соединение Формулы 1 плохо растворяется в воде, недостаток композиции глазных капель в форме раствора, раскрытой в опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162, заключается в том, что соединение Формулы 1 не может быть растворено в высокой концентрации 3,0 мг/мл и более. Кроме того, соединение Формулы 1 характеризуется низкой стабильностью в водной среде. Таким образом, если соединение Формулы 1 содержится в высокой концентрации 3,0 мг/мл и более, существенно возрастает образование продуктов распада.
РАСКРЫТИЕ
Техническая задача
[7] Авторами настоящего изобретения выполнены различные исследования с целью разработки композиции глазных капель в форме раствора, не только содержащего соединение Формулы 1 в высокой концентрации (например, в концентрации 3,0 мг/мл и более) в водной среде, но и обладающего повышенной стабильностью. В итоге авторы настоящего изобретения обнаружили, что, контролируя pH раствора в определенном диапазоне (то есть, pH в диапазоне от 4,0 до pH 5,0) и используя особый стабилизирующий агент (то есть пропиленгликоль), можно получить композицию глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 в высокой концентрации и обладающего превосходной стабильностью. Кроме того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что если поместить полученную композицию глазных капель в светонепроницаемую тару, можно получить фармацевтический продукт, пригодный для хранения в течение длительного времени.
[8] Таким образом, задачей настоящего изобретения является разработка технологии получения композиции глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль, а также пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента, в котором композиция глазных капель имеет рН в диапазоне от 4,0 до 5,0.
[9] Другой задачей настоящего изобретения является получение фармацевтического продукта для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, получаемого путем помещения полученной композиции глазных капель в светонепроницаемую тару.
Техническое решение
[10] Первым объектом настоящего изобретения является композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S) -6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента и регулирующий pH агент, в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.
[11] В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в концентрации 3 мг/мл и более, предпочтительно в концентрации от 3 мг/мл до 10 мг/мл. При этом пропиленгликоль может присутствовать в концентрации от 1 мг/мл до 20 мг/мл, предпочтительно от 5 мг/мл до 17 мг/мл, более предпочтительно от 10 мг/мл до 15 мг/мл. Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может иметь pH, предпочтительно, в диапазоне от 4,2 до 4,7, более предпочтительно, примерно 4,5.
[12] Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может также содержать одно или несколько вспомогательных веществ из группы, содержащей вспомогательный стабилизирующий агент, буферный агент и консервант. Вспомогательный стабилизирующий агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соли и трометамин. Буферный агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей тетраборнокислый натрий, борную кислоту, фосфатную соль, лимонную кислоту, цитрат натрия и аминокапроновую кислоту. Консервант может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей хлорид бензалкония, глюконат хлоргексидина, сорбиновые кислоты, хлорбутанол и парабены.
[13] Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, получаемый путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару. Предпочтительно, фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна согласно настоящему изобретению может быть получен путем помещения полученной композиции глазных капель в светонепроницаемую тару и последующей упаковки полученного продукта в картонную коробку.
Технические результаты ИЗОБРЕТЕНИЯ
[14] Рецептура глазных капель в форме раствора согласно настоящему изобретению может содержать соединение Формулы 1 в высокой концентрации, а также характеризуется высокой стабильностью. Кроме того, фармацевтический продукт согласно настоящему изобретению может храниться в течение длительного времени. Таким образом, рецептура глазных капель в форме раствора и фармацевтический продукт согласно настоящему изобретению можно эффективно использовать для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна.
ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[15] На ФИГ. 1 показаны результаты оценки эффективности ингибирования транссудации, достигнутой при применении композиции глазных капель согласно настоящему изобретению, на животных с дегенеративными процессами желтого пятна.
[16] На ФИГ. 2 показаны результаты оценки эффективности ингибирования патологического ангиогенеза в сетчатке, достигнутой при применении композиции глазных капель согласно настоящему изобретению, на животных с дегенеративными процессами желтого пятна.
ЛУЧШИЙ ВАРИАНТ
[17] Настоящим изобретением предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)- N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.
[18] В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению водная среда включает стерильную воду для инъекций, стерильную очищенную воду, физиологический раствор и прочие вещества.
[19] В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению (2R,3R,4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран имеет химическую структуру Формулы 1, как раскрыто выше. Фармацевтически приемлемая соль соединения Формулы 1 может представлять собой, в частности, кислотно-аддитивную соль, соль щелочного металла или соль щелочноземельного металла, раскрытую в опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162. В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению соединение Формулы 1 может присутствовать в концентрации 3 мг/мл и более, предпочтительно в концентрациях от 3 до 10 мг/мл.
[20] Согласно настоящему изобретению, использование пропиленгликоля в качестве стабилизирующего вещества при получении соединения Формулы 1 позволяет существенно повысить стабильность полученной композиции глазных капель. Пропиленгликоль может присутствовать в концентрации от 1 мг/мл до 20 мг/мл, предпочтительно от 5 мг/мл до 17 мг/мл, более предпочтительно от 10 мг/мл до 15 мг/мл, в частности примерно 13 мг/мл (то есть от 12 мг/мл до 14 мг/мл).
[21] Кроме того, согласно настоящему изобретению при регулировании pH композиции глазных капель в форме раствора в определенном диапазоне (то есть от 4,0 до 5,0) соединение Формулы 1 может быть растворено в высокой концентрации без образования осадка. Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может иметь pH, предпочтительно, в диапазоне от 4,2 до 4,7, более предпочтительно, примерно 4,5 (то есть от 4,4 до 4,6). Регулирование рН может осуществляться с использованием обычного средства регулирования рН, применяемого в области технологии получения глазных капель, например, в частности, хлороводородной кислоты и/или гидроксида натрия.
[22] Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может также содержать одно или несколько вспомогательных веществ из группы, содержащей вспомогательный стабилизирующий агент, буферный агент и консервант. Количество вспомогательных веществ может быть выбрано специалистами в данной области техники с учетом соответствующих функций.
[23] Вспомогательный стабилизирующий агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соль (например, натриевую соль) и трометамин. Например, вспомогательный стабилизирующий агент может использоваться, в частности, в концентрации от 0,05 мг/мл до 10,0 мг/мл, но не ограничен этим диапазоном.
[24] Буферный агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей тетраборнокислый натрий, борную кислоту, фосфатную соль (например, фосфат натрия, гидрофосфат натрия, фосфат калия и т.д.), лимонную кислоту, цитрат натрия и аминокапроновую кислоту. Например, буферный агент может использоваться, в концентрации от 0,05 до 18,0 мг/мл, в зависимости от вида буферного агента.
[25] Консервант может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей хлорид бензалкония, глюконат хлоргексидина, хлорбутанол, сорбиновые кислоты (например, сорбиновую кислоту, сорбат калия, сорбат натрия и т.д.) и парабены (например, метилпарабен, пропилпарабен и т.д.). Например, консервант может использоваться, в частности, в концентрации от 0,01 мг/мл до 0,5 мг/мл, но не ограничен этим диапазоном.
[26] При необходимости композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может быть стерильно отфильтрована, например, бактериальным фильтром, в частности, мембранным фильтром 0,2 мкм, с последующим розливом в соответствующую тару.
[27] Согласно одному из вариантов осуществления изобретения, предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3- гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль; этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соль; трометамин; тетраборнокислый натрий; борную кислоту; хлорид бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.
[28] В другом варианте осуществления изобретения предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего от 3 мг/мл до 10 мг/мл (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил) амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопирана или его фармацевтически приемлемой соли; от 1 мг/мл до 20 мг/мл пропиленгликоля; от 0,01 мг/мл до 1,0 мг/мл этилендиаминтетрауксусной кислоты или ее соли; от 0,05 мг/мл до 10,0 мг/мл трометамина; от 1,0 мг/мл до 11,0 мг/мл тетраборнокислого натрия; от 0,1 мг/мл до 18,0 мг/мл борной кислоты; от 0,01 мг/мл до 0,5 мг/мл хлорида бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.
[29] В еще одном варианте осуществления изобретения предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего от 3 мг/мл до 10 мг/мл (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил) амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопирана или его фармацевтически приемлемой соли; от 10 мг/мл до 15 мг/мл пропиленгликоля; 0,5 мг/мл этилендиаминтетрауксусной кислоты или ее соли; 0,35 мг/мл трометамина; от 5,8 мг/мл до 5,9 мг/мл тетраборнокислого натрия; от 0,5 мг/мл до 0,6 мг/мл борной кислоты; от 0,05 мг/мл до 0,15 мг/мл хлорида бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.
[30] Кроме того, настоящим изобретением предложен фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, получаемый путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару. Предпочтительно, фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна согласно настоящему изобретению может быть получен путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару и последующей упаковки полученного продукта в картонную коробку. К светонепроницаемой таре относится, в частности, непрозрачный контейнер из полиэтилена высокого давления (ПЭВД) и непрозрачный контейнер из полипропилена (ПП).
[31] Данное изобретение будет детально раскрыто со ссылкой на приведенные ниже примеры. Эти примеры приведены только для наглядности и не ограничивают защищаемый объем настоящего изобретения.
[32] В приведенных ниже примерах рецептуры, примерах и экспериментальных образцах препарата HL217 означает (2R,3R,4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1H-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2H-1-бензопиран.
[33] Пример изготовления 1: Оценка технологичности композиции глазных капель, отличающейся высокой концентрацией
[34] Технологичность композиции глазных капель в форме раствора оценивалась путем растворения HL217 одним и тем же образом, за исключением того, что использовали концентрацию 0,3 масс./об.% (то есть концентрации 3,0 мг/мл) HL217 в растворах глазных капель (0,06 масс./об.% и 0,09 масс./об.% растворов глазных капель), раскрытых в Примерах 1 и 2 композиций согласно опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162. Таким образом, в соответствии с компонентами и количествами, указанными в таблице 1, в стерильную очищенную воду при перемешивании добавили HL217, полиэтиленгликоль 400, глицерин, ЭДТК и борную кислоту. Уровень pН довели до 6,5 с использованием водного раствора хлористоводородной кислоты и/или водного раствора гидроксида натрия; после этого в раствор добавили стерильную очищенную воду до получения конечного объема. Количества в таблице 1 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.
[35] Таблица 1
| Компонент | Пример изготовления 1 (pH 6,5) |
| HL217 | 3,0 мг |
| Полиэтиленгликоль 400 | 150 мг |
| Глицерин | 120 мг |
| ЭДТК | 0,5 мг |
| Борная кислота | 10 мг |
| HCl | по необходимости |
| NaOH | по необходимости |
| Внешний вид | С осадком |
[36] Как показано выше, при увеличении концентрации активного вещества HL217 до 3,0 мг/мл выпадал осадок, в результате чего не удавалось изготовить раствор.
[37] Пример изготовления 2: Растворимость HL217 и оценка стабильности
[38] (1) Растворимость HL217
[39] В отношении растворения HL217 в высокой концентрации (в концентрации 0,3 масс./об.% и более) оценивались различные физико-химические факторы. Поскольку согласно правилам Управления по контролю за продуктами и лекарствами США предельно допустимая концентрация полиэтиленгликоля 400 в рецептуре глазных капель составляет 50 мг/мл, для оценки растворимости HL217 количество полиэтиленгликоля 400 было скорректировано до 1/10 (то есть 15,0 мг) а количество глицерина, соответственно, также было скорректировано до 1/10 (то есть 12,0 мг). По результатам оценки влияния различных физико-химических факторов обнаружилось, что рН раствора оказывает большое влияние на растворимость HL217. Таким образом, при регулировке рН в диапазоне 4,5±0,5 среди различных факторов был получен прозрачный раствор без выпадения осадка. В частности, в соответствии с компонентами и количествами, указанными в таблице 2, в стерильную очищенную воду при перемешивании добавили HL217, полиэтиленгликоль 400, глицерин, ЭДТК и борную кислоту. pН довели до уровня 4,5 с использованием водного раствора хлористоводородной кислоты и/или водного раствора гидроксида натрия; после этого в раствор добавили стерильную очищенную воду до получения конечного объема. Количества в таблице 2 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.
[40] Таблица 2
| Компонент | Пример изготовления 2-1 (pH 4,5) |
Пример изготовления 2-2 (pH 4,5) |
Пример изготовления 2-3 (pH 4,5) |
| HL217 | 3,0 мг | 3,0 мг | 3,0 мг |
| Полиэтиленгликоль 400 | 15,0 мг | - | 15,0 мг |
| Глицерин | 12,0 мг | 12,0 мг | 12,0 мг |
| ЭДТК | 0,5 мг | 0,5 мг | 0,5 мг |
| Борная кислота | 10,0 мг | 10,0 мг | 10,0 мг |
| HCl | по необходимости | по необходимости | по необходимости |
| NaOH | по необходимости | по необходимости | по необходимости |
| Внешний вид | Прозрачный раствор | Прозрачный раствор | Прозрачный раствор |
[41] Как следует из результатов, приведенных в таблице 2, несмотря на то, что количество вспомогательных стабилизирующих веществ (то есть полиэтиленгликоля 400 и глицерина) составило 1/10, удалось получить прозрачные растворы без осадка при условии pH 4,5.
[42] (2) Оценка стабильности
[43] Растворы в Примерах изготовления 2-1, 2-2 и 2-3 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5%) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада. Количество продуктов распада измерялось как максимальное количество продуктов распада и общее количество продуктов распада с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) при следующих условиях.
[44] Условия ВЭЖХ
[45] - Детектор: спектрофотометр ультрафиолетовой и видимой области спектра (длина волны: 254 нм)
[46] - Колонка: Luna C8 (4,6 * 250 мм, 5 мкм)
[47] - Расход: 1,0 мл/мин.
[48] - Объем впрыска: 20 мкл
[49] - Мобильная фаза: буферный раствор формиата аммония: ацетонитрил = 50 : 50
[50] (буферный раствор формиата аммония получили путем приведения pH раствора формиата аммония (10 мМ) к pH 5,5 с применением фосфорной кислоты)
[51] - Температура колонки: примерно 30ºС
[52] - Температура образца: примерно 4ºС
[53] Результаты, полученные раскрытым выше способом измерения количества продуктов распада, приведены ниже в таблицах 3-5.
[54] Таблица 3
Количество продуктов распада раствора в Примере изготовления 2-1
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | 0,32% | 0,99% | 1,24% |
| Общее кол-во продуктов распада | 0,38% | 1,61% | 1,80% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | 0,32% | 1,37% | 2,16% |
| Общее кол-во продуктов распада | 0,38% | 2,23% | 3,61% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | 0,32% | 2,14% | 2,61% |
| Общее кол-во продуктов распада | 0,38% | 3,33% | 4,00% |
[55] Таблица 4
Количество продуктов распада раствора в Примере изготовления 2-2
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,65% | 1,08% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 1,15% | 1,53% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,98% | 1,54% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 1,56% | 2,85% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 1,75% | 2,54% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 2,53% | 3,38% |
[56] Таблица 5
Количество продуктов распада раствора в Примере изготовления 2-3
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | 0,36% | 1,10% | 1,35% |
| Общее кол-во продуктов распада | 0,42% | 1,10% | 1,71% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | 0,36% | 1,52% | 1,79% |
| Общее кол-во продуктов распада | 0,42% | 1,97% | 2,71% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | 0,36% | 2,54% | 3,01% |
| Общее кол-во продуктов распада | 0,42% | 3,78% | 4,36% |
[57] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 3-5, растворы в Примерах изготовления 2-1, 2-2 и 2-3 демонстрируют значительное увеличение количества продуктов распада при любых условиях через 2 и 4 недели и потому не соответствуют допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и меньше, общее количество продуктов распада: 2% и меньше).
[58] Примеры 1 и 2: Получение стабильных композиций глазных капель в форме раствора, содержащего HL217
[59] (1) Получение композиций глазных капель в форме раствора
[60] В соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 6, были получены композиции глазных капель в форме раствора, содержащего пропиленгликоль вместо полиэтиленгликоля / глицерина. То есть в соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 6, в стерильную очищенную воду при перемешивании добавили HL217, пропиленгликоль, стабилизирующий агент или агенты (ЭДТК и/или трометамин), буферные агенты (борную кислоту и тетраборнокислый натрий) и хлорид бензалкония. pН довели до уровня 4,5 с использованием водного раствора хлористоводородной кислоты и/или водного раствора гидроксида натрия; после этого в раствор добавили стерильную очищенную воду до получения конечного объема. Количества в таблице 6 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.
[61] Таблица 6
| Компонент | Пример 1 (pH 4,5) |
Пример 2 (pH 4,5) |
| HL217 | 3,0 мг | 3,0 мг |
| Пропиленгликоль | 13,0 мг | 13,0 мг |
| ЭДТК | 0,5 мг | 0,5 мг |
| Трометамин | - | 0,35 мг |
| Борная кислота | 5,82 мг | 5,82 мг |
| Тетраборнокислый натрий | 0,588 мг | 0,588 мг |
| Хлорид бензалкония | 0,1 мг | 0,1 мг |
| HCl | по необходимости | по необходимости |
| NaOH | по необходимости | по необходимости |
| Внешний вид | Прозрачный раствор | Прозрачный раствор |
[62] (2) Оценка стабильности
[63] Растворы в Примерах 1 и 2 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5% ) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада, выполняемого аналогично пункту (2) Примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблицах 7 и 8.
[64] Таблица 7
Количество продуктов распада раствора в Примере 1
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | 0,03% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | 0,03% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,06% | 0,16% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,09% | 0,21% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,34% | 0,79% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,66% | 1,62% |
[65] Таблица 8
Количество продуктов распада раствора в примере 2
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | 0,04% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | 0,04% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,07% | 0,18% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,10% | 0,23% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,36% | 0,88% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,64% | 1,60% |
[66] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 6-8, при использовании пропиленгликоля и приведении рН раствора к рН 4,5 были получены прозрачные растворы без выпадения осадка, а образование продуктов распада заметно снижалось при любых условиях (то есть в охлажденном состоянии, при комнатной температуре и в условиях ускоренных испытаний). Таким образом, композиции глазных капель соответствуют допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и менее, общее количество продуктов распада: 2% и менее). Кроме того, раствор, полученный с дополнительным добавлением трометамина в качестве стабилизирующего вещества, характеризовался незначительным повышением стабильности в условиях ускоренных испытаний по сравнению с раствором, в который трометамин не добавлялся, хотя это и не имеет значения.
[67] Примеры 3 и 4: Получение стабильных композиций глазных капель в форме раствора, содержащего HL217
[68] (1) Получение композиций глазных капель в форме раствора
[69] В соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 9, были получены композиции глазных капель в форме раствора. То есть композиции глазных капель в форме раствора были получены аналогично Примеру 2 с увеличением концентрации HL217 до 5,0 мг/мл и 10,0 мг/мл соответственно. Количества в таблице 9 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.
[70] Таблица 9
| Компонент | Пример 3 (pH 4,5) |
Пример 4 (pH 4,5) |
| HL217 | 5,0 мг | 10,0 мг |
| Пропиленгликоль | 13,0 мг | 13,0 мг |
| ЭДТК | 0,5 мг | 0,5 мг |
| Трометамин | 0,35 мг | 0,35 мг |
| Борная кислота | 5,82 мг | 5,82 мг |
| Тетраборнокислый натрий | 0,588 мг | 0,588 мг |
| Хлорид бензалкония | 0,1 мг | 0,1 мг |
| HCl | по необходимости | по необходимости |
| NaOH | по необходимости | по необходимости |
| Внешний вид | Прозрачный раствор | Прозрачный раствор |
[71] (2) Оценка стабильности
[72] Растворы в Примерах 3 и 4 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5%) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада, выполняемого аналогично пункту (2) примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблицах 10 и 11.
[73] Таблица 10
Количество продуктов распада раствора в Примере 3
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,03% | 0,04% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,03% | 0,04% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,08% | 0,16% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,10% | 0,22% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,35% | 0,79% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,67% | 1,63% |
[74] Таблица 11
Количество продуктов распада раствора в Примере 4
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,03% | 0,04% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,07% | 0,05% | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,07% | 0,15% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,10% | 0,23% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,33% | 0,89% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,62% | 1,71% |
[75] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 9-11, при использовании пропиленгликоля и приведении рН раствора к рН 4,5 были получены прозрачные растворы, содержащие HL217 в высокой концентрации (например, 10 мг/мл) и соответствующие допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и менее, общее количество продуктов распада: 2% и менее) при любых условиях (то есть в охлажденном состоянии, при комнатной температуре и в условиях ускоренных испытаний).
[76] Примеры с 5 по 7: Получение стабильных композиций глазных капель в форме раствора, содержащего HL217
[77] (1) Получение композиций глазных капель в форме раствора
[78] В соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 12, были получены композиции глазных капель в форме раствора. То есть композиции глазных капель в форме раствора были получены аналогично Примеру 2 с изменением концентрации пропиленгликоля до 1,0 мг/мл, 5,0 мг/мл и 20,0 мг/мл соответственно. Количества в таблице 12 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.
[79] Таблица 12
| Компонент | Пример 5 (pH 4,5) |
Пример 6 (pH 4,5) |
Пример 7 (pH 4,5) |
| HL217 | 3,0 мг | 3,0 мг | 3,0 мг |
| Пропиленгликоль | 1,0 мг | 5,0 мг | 20,0 мг |
| ЭДТК | 0,5 мг | 0,5 мг | 0,5 мг |
| Трометамин | 0,35 мг | 0,35 мг | 0,35 мг |
| Борная кислота | 5,82 мг | 5,82 мг | 5,82 мг |
| Тетраборнокислый натрий | 0,588 мг | 0,588 мг | 0,588 мг |
| Хлорид бензалкония | 0,1 мг | 0,1 мг | 0,1 мг |
| HCl | по необходимости | по необходимости | по необходимости |
| NaOH | по необходимости | по необходимости | по необходимости |
| Внешний вид | Прозрачный раствор | Прозрачный раствор | Прозрачный раствор |
[80] (2) Оценка стабильности
[81] Растворы в примерах с 5 по 7 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5% ) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада, выполняемого аналогично пункту (2) Примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблицах 13-15.
[82] Таблица 13
Количество продуктов распада раствора в Примере 5
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | Не обнаружено |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | Не обнаружено | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,07% | 0,16% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,09% | 0,21% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,35% | 0,87% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,64% | 1,66% |
[83] Таблица 14
Количество продуктов распада раствора в Примере 6
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | Не обнаружено |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | Не обнаружено | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,06% | 0,16% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,09% | 0,22% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,34% | 0,79% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,64% | 1,57% |
[84] Таблица 15
Количество продуктов распада раствора в Примере 7
| Условия хранения | Начальное состояние | 2 недели | 4 недели | |
| Охлажденное состояние | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | Не обнаружено |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | Не обнаружено | Не обнаружено | |
| Комнатная температура | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,08% | 0,16% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,14% | 0,20% | |
| Условия ускоренных испытаний | Макс. кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,33% | 0,83% |
| Общее кол-во продуктов распада | Не обнаружено | 0,62% | 1,56% |
[85] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 12-15, при использовании пропиленгликоля в концентрациях от 1 мг/мл до 20 мг/мл были получены прозрачные растворы без выпадения осадка, соответствующие допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и менее, общее количество продуктов распада: 2% и менее) при любых условиях (то есть в охлажденном состоянии, при комнатной температуре и в условиях ускоренных испытаний).
[86] Экспериментальный пример 1: Испытание на светоустойчивость
[87] Светоустойчивость композиции глазных капель оценивали с использованием прозрачной тары [PurellPE1810E natural (GERRESHEIMER)] из прозрачного полиэтилена низкой плотности (ПЭНП), непрозрачной тары [PurellPE1810E white (GERRESHEIMER)] из непрозрачного ПЭНП и картонной коробки, соответственно. То есть композицию глазных капель, полученная согласно Примеру 2, хранили в условиях, указанных в нижеследующей таблице 16. Каждую испытуемую группу помещали в светооблучаемую камеру и подвергали воздействию света ультрафиолетового спектра в течение 40 часов при 5 Вт/м2 или видимого спектра в течение 40 часов при 30000 люкс/ч. После воздействия в течение 40 часов, количество продуктов распада измеряли аналогично пункту (2) Примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблице 17.
[88] Таблица 16
| Условия хранения | |
| Испытуемая группа 1 | Глазные капли согласно примеру 2 хранили в прозрачной таре из ПЭВД. |
| Испытуемая группа 2 | Глазные капли согласно примеру 2 хранили в непрозрачной таре из ПЭВД. |
| Испытуемая группа 3 | Глазные капли согласно примеру 2 поместили в прозрачную тару из ПЭВД, после чего хранили в картонной коробке. |
| Испытуемая группа 4 | Глазные капли согласно примеру 2 поместили в непрозрачную тару из ПЭВД, после чего хранили в картонной коробке. |
[89] Таблица 17
| Свет ультрафиолетового спектра | Свет видимого спектра | |||||||
| Испытуемая группа 1 | Испытуемая группа 2 | Испытуемая группа 3 | Испытуемая группа 4 | Испытуемая группа 1 | Испытуемая группа 2 | Испытуемая группа 3 | Испытуемая группа 4 | |
| Макс. кол-во продуктов распада | 0,30% | 0,10% | 0,03% | 0,03% | 0,72% | 0,03% | 0,03% | 0,03% |
| Общее кол-во продуктов распада | 1,11% | 0,13% | 0,03% | 0,06% | 3,43% | 0,04% | 0,06% | 0,04% |
[90] Как следует из результатов, приведенных в таблице 17, предпочтительна фасовка композиции глазных капель с содержанием HL217 в непрозрачную тару; более предпочтительна фасовка глазных капель с содержанием HL217 в непрозрачную тару с последующим хранением в картонной коробке.
[91] Экспериментальный пример 2: Тестирование эффективности на животных
[92] Эффективность ингибирования дегенеративных процессов желтого пятна продемонстрирована на мышах с нокаутом гена рецептора липопротеинов очень низкой плотности (vldlr) (мыши C57B1/6, Jackson Laboratory, США) в качестве животной модели возрастных дегенеративных процессов желтого пятна (AMD). Инъекция LucentisTM (Norvatis, Базель, Швейцария) использовалась для положительного контроля.
[93] В контрольной группе в каждый глаз нормальной мыши (n=8) закапывали по 1 капле стерильного физиологического раствора два раза в день в течение 3 недель. В группе с индуцированным AMD в каждый глаз мыши с нокаутом гена vldlr (мышь vldlr) закапывали по 1 капле стерильного физиологического раствора два раза в день в течение 3 недель. В группе положительного контроля в каждый глаз мыши vldlr вводили 1 мкл LucentisTM (содержащую ранибизумаб в количестве 50 нг/мкл) однократно интравитреально с использованием шприца Hamiltion (компания Hamilton, Рино, Невада, США). В испытуемой группе в каждый глаз мыши vldlr закапывали по 1 капле глазных капель согласно Примеру 2 два раза в день в течение 3 недель.
[94] Для оценки любых аномалий сосудов сетчатки, в частности, образования ангиогенеза и аномальной проницаемости кровеносных сосудов, были проведены следующие эксперименты. При аутопсии выполнили анестезию внутрибрюшинной инъекцией золазепама (Zoletil, Virbac, Карро, Франция) в количестве 10 мг/кг и ксилазина гидрохлорида (Rumpun, Bayer, Франкфурт, Германия) в количестве 10 мг/кг. Для фиксации сердца разрезали брюшную полость и грудная клетку; после чего в левый желудочек ввели 50 мг/мл меченого флуоресцеином декстрана (молекулярная масса 10 кДа, Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) и 10 мг/мл красителя Hoechst 33342 (Sigma) в стерильном фосфатно-солевом буфере (1 мл). По истечении 10 минут глаз извлекли и зафиксировали в 4% параформальдегиде на 2 часа для изоляции сетчатки. Изолированную сетчатку поместили на стекло, покрыли каплей водной заливочной среды (Fluoromount™, Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), после чего наблюдали под флуоресцентным микроскопом. Для количественного анализа красителя из сердца взяли кровь через 10 минут после инъекции красителя со стерильным фосфатно-солевым буфером, предназначенным для удаления остаточного красителя из кровеносных сосудов, после чего извлекли глаза для изоляции сетчатки глаз. Изолированную сетчатку гомогенизировали 100 мкл фосфатно-солевого буфера, после чего центрифугировали для получения надосадочной жидкости, в которой спектрофлуорофотометром измерили количество FITC-декстрана. Интенсивность флуоресценции измерили в условиях возбуждения 485 нм и излучения 530 нм, и рассчитали с помощью калибровки значений флуоресценции FITC и концентрации ретиналевого белка в крови. Результаты представлены на ФИГ. 1.
[95] Кроме того, для оценки субретинального ангиогенеза были проведены следующие эксперименты. Изолированную ткань сетчатки зафиксировали 4% параформальдегидом на 1 час, после чего в течение 2 часов ввели в реакцию с конъюгированным Griffonia bandeiraea simplicifolia изолектином В4 (IB4 Alexa Fluor 594, разбавление 1:100; молекулярные зонды, США). После достаточного промывания фосфатно-солевым буфером ткань сетчатки поместили на стекло и покрыли каплями водной заливочной среды (FluoromountTM, Sigma, Сент-Луис, Миссури, США). После достаточной просушки продукт реакции наблюдали под флуоресцентным микроскопом и фотографировали. Разрез сетчатки окрасили гематоксилин–эозином, после чего с помощью программного обеспечения ImageJ (Национальный институт здоровья Бетесда, Мэриленд, США) провели анализ субретинальной реваскуляризации. Результаты представлены на ФИГ. 2.
[96] Как показано на ФИГ. 1, у нормальных мышей граница кровеносных сосудов была четкой, и нормальная целостность сосудов поддерживалась на должном уровне. Однако у мышей vldlr флуоресцентный краситель, введенный в кровеносные сосуды, вытекал из кровеносных сосудов (белая стрелка) с увеличением интенсивности флуоресценции сетчатки. Кроме того, из кровеносных сосудов вытек окрашивающий материал Hoechst 33342, вызывающий синюю флуоресценцию, вследствие чего были отмечены многочисленные случаи транссудации; наблюдались области субретинальной реваскуляризации (красная стрелка). Тем не менее, в глазах, обработанных глазными каплями согласно примеру 2, транссудации и патологический ангиогенез были ингибированы. Группа положительного контроля показала значительную эффективность только на второй неделе введения препарата.
[97] Как показано на ФИГ. 2, при анализе окрашивания изолектином В4 у мышей vldlr были обнаружены субретинальные неоваскулярные пучки (белая стрелка) в разных местах, однако их площадь уменьшалась при введении глазных капель согласно Примеру 2. Кроме того, при анализе окрашивания разрезов сетчатки гематоксилин–эозином у мышей vldlr были обнаружены многочисленные аномальные реваскуляризации в субретинальной области (область стрелки), уменьшавшиеся при введении глазных капель согласно Примеру 2.
1. Композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран в концентрации 3 мг/мл и более или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль в концентрации от 1 до 20 мг/мл в качестве стабилизирующего агента; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.
2. Композиция глазных капель по п. 1, в которой (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в концентрации в диапазоне от 3 мг/мл до 10 мг/мл.
3. Композиция глазных капель по п. 1, в которой пропиленгликоль присутствует в концентрации от 5 мг/мл до 17 мг/мл.
4. Композиция глазных капель по п. 1, в которой пропиленгликоль присутствует в концентрации от 10 мг/мл до 15 мг/мл.
5. Композиция глазных капель по п. 1, которая имеет pH в диапазоне от 4,2 до 4,7.
6. Композиция глазных капель по п. 1, которая имеет pH примерно 4,5.
7. Композиция глазных капель по п. 1, дополнительно содержащая одно или несколько вспомогательных веществ из группы, содержащей вспомогательный стабилизирующий агент, буферный агент и консервант.
8. Композиция глазных капель по п. 7, в которой вспомогательный стабилизирующий агент представляет собой одно или несколько веществ из группы, содержащей этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соль и трометамин.
9. Композиция глазных капель по п. 7, в которой буферный агент представляет собой одно или несколько веществ из группы, содержащей тетраборнокислый натрий, борную кислоту, фосфатную соль, лимонную кислоту, цитрат натрия и аминокапроновую кислоту.
10. Композиция глазных капель по п. 7, в которой консервант представляет собой одно или несколько веществ из группы, содержащей хлорид бензалкония, глюконат хлоргексидина, сорбиновые кислоты, хлорбутанол и парабены.
11. Композиция глазных капель по п. 1, содержащая от 3 до 10 мг/мл (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопирана или его фармацевтически приемлемой соли; от 1 мг/мл до 20 мг/мл пропиленгликоля; от 0,01 мг/мл до 1,0 мг/мл этилендиаминтетрауксусной кислоты или ее соли; от 0,05 мг/мл до 10,0 мг/мл трометамина; от 1,0 мг/мл до 11,0 мг/мл тетраборнокислого натрия; от 0,1 мг/мл до 18,0 мг/мл борной кислоты; от 0,01 мг/мл до 0,5 мг/мл хлорида бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде.
12. Композиция глазных капель по п. 1, содержащая от 3 до 10 мг/мл (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопирана или его фармацевтически приемлемой соли; от 10 мг/мл до 15 мг/мл пропиленгликоля; 0,5 мг/мл этилендиаминтетрауксусной кислоты или ее соли; 0,35 мг/мл трометамина; от 5,8 мг/мл до 5,9 мг/мл тетраборнокислого натрия; от 0,5 мг/мл до 0,6 мг/мл борной кислоты; от 0,05 мг/мл до 0,15 мг/мл хлорида бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде.
13. Фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, полученный путем помещения композиции глазных капель по любому одному из пп. 1-12 в светонепроницаемую тару.
14. Фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна по п. 13, причем фармацевтический продукт изготовлен путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару и последующей упаковки полученного продукта в картонную коробку.
