Способ диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, экологии и может быть использовано для диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции. Производят отбор пробы крови у ребенка, в анамнезе которого имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция. Устанавливают в пробе крови содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома. Определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющие роль диагностических маркеров. В качестве функциональных показателей определяют: методом кардиоинтервалографии показатель вариационной пульсометрии (Мо), методом риноманометрии суммарный объемный поток (СОП), характеризующий степень выраженности нарушения носового дыхания, методом ультразвукового исследования структурные параметры небных миндалин; реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы и мезентериальных лимфоузлов и структуру и размеры печени. В качестве лабораторных показателей определяют: уровень моноцитов, содержание общего и прямого билирубина, уровень креатинфосфокиназы (КФК) и иммунологические показатели: абсолютный фагоцитоз, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу и IgG специфического к бензолу. При наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее чем в 1,3 раза, при наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек, выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см³/с, наличие структурных изменений небных миндалин, наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны, увеличение размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры; при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%, при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм³, при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³, при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм³, при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10⁹/дм³ - 2,41⋅10⁹/дм³, при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см³, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см³, при содержании уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³ и при наличии в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу и IgG специфического к бензолу диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции. Способ обеспечивает возможность информативной и доказательной диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, за счет комплекса функциональных и лабораторных диагностических факторов. 9 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины и экологии и может быть использовано для диагностики у детей, страдающих персистирующей герпес-вирусной инфекцией и пребывающих в неблагополучных условиях среды обитания, а именно, в условиях загрязнения атмосферного воздуха металлами и ароматическими соединениями, заболевания в виде хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки. Изобретение может быть использовано в целях установления экологически детерминированной патологии.

Следует пояснить, что к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям носоглотки относятся:

хронический тонзиллит (J35.0),

гипертрофия небных миндалин (J35.1),

аденоиды (J35.2).

В условиях загрязнения атмосферного воздуха металлами у 65,8% дошкольников диагностируются хронические заболевания лимфоидной ткани носоглотки. У детей начальной школы вероятность развития патологии лимфоидной ткани носоглотки увеличивается в 3,9-5,3 раза. Полученные результаты свидетельствуют, что высокий уровень антропогенного загрязнения воздушной среды способствует некоторому истощению адаптационных возможностей дыхательной системы детей.

Вместе с этим на заболевания носоглотки оказывает влияние и герпес-вирусная инфекция. Герпетическая инфекция считается заболеванием иммунной системы с нарушением интерферонообразования. По данным ВОЗ из всех известных герпесвирусов чаще у детей встречаются ЦМВ, ВЭБ, ВПГ 1-го, 2-го и 6-го типов. После попадания вируса в эпителий слизистой ротоглотки и верхних дыхательных путей происходит инфицирование лимфоцитарных клеток, что способствует развитию иммунных нарушений. Из анамнестических данных при герпесвирусной инфекции наиболее существенными представляются острые респираторные заболевания, протекающие длительно и волнообразно, с обструктивным синдромом, длительным субфебрилитетом или бактериальными осложнениями (ангины, отиты, гаймориты, бронхиты, пневмонии).

В тоже время, можно предположить, что хроническая экспозиция техногенных химических веществ и персистирующая гепертическая инфекция могут иметь общие механизмы развития заболеваний носоглотки. Выявление закономерностей формирования болезней органов дыхания, в том числе, заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным влиянием техногенных химических веществ атмосферного воздуха и персистирующей герпетической инфекции, может быть использовано для разработки патогенетически обоснованных профилактических мероприятий с целью минимизации риска развития и прогрессирования хронических заболеваний дыхательной системы.

Из уровня техники известен ряд технических решений, обеспечивающих диагностику разного вида воспалительных заболеваний носоглотки.

Известен способ диагностики воспалительных и не воспалительных процессов в глоточной миндалине у детей (Патент РФ №2567033). Для этого в венозной крови определяют субпопуляции Т-лимфоцитов, несущих маркеры CD3⁺CD4⁺, CD3⁺CD8⁺, CD47CD8⁺, CD3⁺CD16⁺CD56⁺, CD3+HLA-DR⁺, В-лимфоцитов, естественных киллерных лимфоцитов с маркером CD3" CD16⁺CD56⁺, иммуноглобулины классов А, М, G (IgA, IgM, IgG), фагоцитарный индекс (ФИ), фагоцитарное число (ФЧ), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК), определяют в секреции фракции лимфоцитов уровни концентраций интерлейкина-1β (ИЛ-1β) и интерлейкина-4 (ИЛ-4), фактора некроза опухолей-α (ФНО-α) и определяют суммарный воздушный поток (Fl R+L), суммарное сопротивление воздушному потоку (Res R+L). Задают три канонические дискриминантные функции и оценивают нормированные коэффициенты канонических дискриминантных функций для показателей (b_jj) и константы линейной модели дискриминантной функции (a_j0) для пациентов с прогнозируемой гипертрофией глоточной миндалины I, II и III степени: D_j=a_j0+b_j1x₁+bj₂x₂+…+b_jpx_p, где D - линейная дискриминантная функция; j - индикатор группы, j=1…, k-1, k - количество групп; x_i - дискриминантные переменные; i - индикатор переменной, i=1…, р; р - количество дискриминантных переменных; a_j0 - константа дискриминации; b_ji - коэффициент i-й дискриминантной переменной для j-й группы. Пациента относят к группе, для которой линейная дискриминантная функция принимает максимальное значение. При максимальном показателе линейной дискриминантной функции среди показателей трех линейных дискриминантных функций в пределах 79,495-104,965 диагностируют у пациента гипертрофию глоточной миндалины I степени, что соответствует не воспалительному процессу в глоточной миндалине. При максимальном показателе в пределах 120,222-132,774 диагностируют гипертрофию глоточной миндалины II степени, что соответствует воспалительному процессу. При максимальном показателе D в пределах 135,360-296,243 диагностируют гипертрофию глоточной миндалины III степени, что соответствует воспалительному процессу в глоточной миндалине с признаками обострения хронического аденоидита. В промежуточных интервалах 104,965-120,222 и 132,774-135,360 проводят диагностирование воспалительных и не воспалительных процессов в глоточной миндалине у детей через 30-90 суток.

Однако данный известный способ ограничивается морфометрической диагностикой и не учитывает модифицирующего влияния вредных химических факторов среды обитания на формирование хронических воспалительных процессов в носоглотке у детей.

Также известен способ дифференциальной диагностики хронического аденоидита и гипертрофии глоточной миндалины у детей (Патент РФ №2328745). Сущность способа: в мазках периферической крови методом световой микроскопии определяют интенсивность нейтрофильного и моноцитарного ауторозеткообразования. При увеличении содержания моноцитарных розеток до 4,7±1,3% и нейтрофильных до 9,4±2,0% диагностируют гипертрофию глоточной миндалины. При увеличении моноцитарных розеток до 3,1±0,1% и снижении нейтрофильных до 3,1±0,1% диагностируют хронический аденоидит.

Из патента РФ №2569054 известен способ диагностики этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов у детей раннего и дошкольного возраста. Его сущность заключается в том, что производят определение в назальном секрете провоспалительных и проаллергических интерлейкинов, а именно интерлейкина-1-бэта (IL-1beta), интерлейкина-4 (IL-4), рецепторного антагониста интерлейкина-1 (IL-1RA), интерферона-альфа (INF-alpha) и фактора некроза опухоли - альфа (TNF-alpha), и при увеличении содержания INF-alpha, TNF-alpha и IL-1beta более чем в 2 раза по отношению к нормальным значениям диагностируют вирусную этиологию рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов, а увеличение содержания IL-4 выше 26 нг/мл и IL-1RA выше 1000 нг/мл является диагностическим критерием для инфекционно-аллергической этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов.

Однако указанные известные способы также не учитывают модифицирующего влияния вредных химических факторов среды обитания и наличие герпесной инфекции на формирование хронических воспалительных процессов в носоглотке у детей.

Из патента РФ №2706126 известен Способ диагностики активности сочетанной инфекции у детей с острыми респираторными инфекциями. Согласно этому способу у детей с идиопатической лейкопенией и фебрильными судорогами в крови определяют наличие, активность и серотип вируса герпеса 6 типа, его количественные характеристики, выявляют иммуноглобулины IgM, IgG класса, определяют авидность иммуноглобулинов IgG класса. При наличии ДНК ВГЧ-6 в количестве не менее 10⁴ копий/мл, генотипа А, антител IgM, IgG с индексом авидности менее 40% диагностируют активный инфекционный герпесвирусный процесс.Изобретение обеспечивает повышение точности постановки диагноза за счет проведения комплексной последовательной вирусологической диагностики с оценкой активности ВГЧ-6, его генотипа и его участия в развитии и тяжести течения заболевания.

Также из Патента РФ №2315300 известен способ диагностики состояния лимфоидной ткани носоглотки и небных миндалин. Сущность способа: берут мазки-отпечатки для риноцитограммы и цитограмм из левой небной миндалины и левой щеки. Исследуют клеточный состав полученных мазков на бинокулярном микроскопе, определяют процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов в цитограммах в общем составе клеток. На основании полученных данных дифференцируют наличие хронического процесса в области носоглоточной миндалины, или наличие хронического процесса в области небных миндалин, или наличие хронического процесса в области лимфоидной ткани носоглотки в сочетании с гипертрофией небных миндалин без признаков воспаления, или наличие хронического процесса лимфоидной ткани носоглотки и небных миндалин. Использование способа позволяет повысить точность диагностики состояния лимфоидной ткани носоглотки и небных миндалин у детей при отсутствии травматичности.

Из патента РФ №2619873 известен способ диагностики у детей возраста 4-12 лет хронических воспалительных заболеваний носоглотки, ассоциированных с ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида. Для этого устанавливают в пробе крови каждого ребенка содержание бензола и формальдегида и при превышении этого содержания выше фонового уровня осуществляют определение функциональных и лабораторных показателей. При этом в качестве функциональных показателей определяют: объемно-скоростные показатели риноманометрии; аденоидные вегетации по данным рентгенографии носоглотки и признаки диффузного поражения печени при ультразвуковом исследовании. В качестве лабораторных показателей устанавливают: содержание в назальном секрете эозинофилов и эозинофильно-лимфоцитарный индекс; содержание иммуноглобулинов IgE, IgA, IgG. Определяют показатели фагоцитарной активности крови: процент фагоцитоза, фагоцитарное число, фагоцитарный индекс; количество В-лимфоцитов в крови; общую антиоксидантную активность крови и содержание в крови супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, каталазы, гидроперекисей липидов, малонового диальдегида МДА; число ретикулоцитов, количество эритроцитов, уровень аспартатаминотрансферазы АСАТ и аланинаминотрансферазы АЛАТ. При снижении объемно-скоростных показателей риноманометрии на 15% и более; наличии увеличенных аденоидных вегетаций по данным рентгенографии носоглотки; ультразвуковых признаках реактивного диффузного поражения печени и увеличении ее размеров на 10% и более; увеличении содержания в назальном секрете эозинофилов на 15% и более; повышении эозинофильно-лимфоцитарного индекса на 10% и более; увеличении содержания общего IgE на 20% и более; увеличении содержания в крови специфического IgE к формальдегиду; снижении количества IgA на 15% и более; повышении уровня содержания IgG к бензолу на 10% и более; снижении показателей фагоцитарной активности крови: процента фагоцитоза на 15% и более, фагоцитарного числа на 15% и более, фагоцитарного индекса на 15% и более; снижении В-лимфоцитов в крови в абсолютных числах и процентном отношении на 10% и более; повышении общей антиоксидантной активности крови на 10% и более; повышении супероксиддисмутазы на 20% и более; повышении глутатионпероксидазы на 20% и более; повышении каталазы на 20% и более; повышении уровня гидроперекисей липидов на 20% и более; повышении МДА на 20% и более; повышении числа ретикулоцитов на 10% и более; снижении эритроцитов на 10% и более; повышении АСАТ и/или АЛАТ на 15% и более, диагностируют у ребенка хроническое воспалительное заболевание носоглотки, обусловленное ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида. Использование данного способа позволяет диагностировать у детей хронические воспалительные заболевания носоглотки, ассоциированные с ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида, что способствует в последующем назначить адекватную терапию и предупредить развитие осложнений.

Однако указанный известный способ не позволяет установить заболевания носоглотки, ассоциированные одновременно и с воздействием химических токсикантов, и с наличием у ребенка вирусно-герпесной инфекции, что снижает его диагностическую ценность.

При этом из уровня техники не были выявлены известные способы диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.

Технический результат, достигаемый предлагаемым изобретением, заключается в создании информативного и доказательного способа диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.

Поставленный технический результат достигается предлагаемым способом диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, согласно которому производят отбор пробы крови у ребенка, в анамнезе которого имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, устанавливают в пробе крови содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома, определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющих роль диагностических маркеров, при этом в качестве функциональных показателей определяют: методом кардиоинтервалографии показатель вариационной пульсометрии (Мо), методом риноманометрии суммарный объемный поток (СОП), характеризующий степень выраженности нарушения носового дыхания, методом ультразвукового исследования структурные параметры небных миндалин; реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы и мезентериальных лимфоузлов и структуру и размеры печени; а в качестве лабораторных показателей определяют: уровень моноцитов, содержание общего и прямого билирубина, уровень креатинфосфокиназы (КФК), и иммунологические показатели: абсолютный фагоцитоз, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу и IgG специфического к бензолу, при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза, при наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек, выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см³/с, наличие структурных изменений небных миндалин, наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны в крови, увеличении размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры; при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%, при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм³, при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³, при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм³, при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10⁹/дм³ - 2,41⋅10⁹/дм³, при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см³, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см³, при содержании уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³, и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, и IgG специфического к бензолу, диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.

Указанный технический результат обеспечивается за счет следующего: использования определенной совокупности диагностических маркеров;

- применения при реализации предлагаемого способа расширенной системы взаимосвязей диагностических маркеров (функциональных и лабораторных показателей) между собой и их взаимосвязи как с химическими соединениями, представляющими опасность для развития заболеваний носоглотки, так и с наличием у ребенка, подвергающегося воздействию указанных химических токсикантов, персистирующей герпес-вирусной инфекции.

Для выявления особенностей и закономерностей диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки в этих условиях, оценивались причинно-следственные связи, полученные с помощью методов статистического анализа.

При проведении моделирования методом регрессионного анализа оценку адекватности и достоверности моделей осуществляли с помощью однофакторного дисперсионного анализа по величине критерия Фишера (F) с 95% уровнем значимости, коэффициенту детерминации (R²) и t-критерию Стьюдента для уровня значимости p≤0,05.

Для понимания существа вопроса, следует пояснить, что проблема оценки влияния промышленного загрязнения окружающей среды на здоровье детского населения является актуальной для многих стран мира, в том числе и для России. Детская популяция представляет собой группу высокого риска, так как дети имеют ряд физиологических особенностей, характеризуются наличием критических периодов развития, большей чувствительностью к влиянию токсичных веществ.

Доказано, что распространенность аденотонзиллярной патологии значительно выше у детей, проживающих в условиях экологического неблагополучия, показатели распространенности которой достигают 85,6%. У детей, проживающих на территории относительного экологического благополучия, эта патология регистрируется статистически значимо реже (р<0,05). Хронический аденотонзиллит выявляется достоверно чаще у детей, проживающих на промышленно развитых территориях, где его распространенность составляет 28,5-57,1% (р<0,05), гипертрофия небных миндалин встречается в 2,5 раза чаще (р<0,05). Наличие морфологических нарушений со стороны миндалин может свидетельствовать о напряжении компенсаторных механизмов при воздействии неблагоприятных факторов, большей нагрузке на ЛОР-органы, о напряжении функции иммунной системы, и является показателем возможности более тяжелого течения заболеваний ЛОР-органов и органов дыхания в целом. Многие исследователи подтверждают, что хронический компенсированный тонзиллит диагностируется уже при гипертрофии небных миндалин I степени.

В качестве еще одного неблагоприятного фактора причины проявления заболеваний носоглотки могут также выступать хронические герпесвирусные инфекции, в результате чего индуцируемые ими иммунодефицитные состояния являются причиной повторных эпизодов острых инфекций органов дыхания и носоглотки. Вместе с этим у часто болеющих детей с хронической герпесвирусной инфекцией имеет место гипертрофия небных и глоточных миндалин, увеличение печени и селезенки, патология со стороны сердечно-сосудистой и других систем.

Экспериментальным путем были установлены достоверные причинно-следственные связи между уровнем загрязнения атмосферного воздуха бензолом, ксилолом, формальдегидом, марганцем и хромом в количестве 130% и более фоновых (референтных) уровней и возникновению у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки (коэффициент детерминации R²=0,18-0,81; критерий Фишера F 37,72≤F≤1224,58; вероятность р=0,0001).

Таким образом, в результате проведенного последовательного моделирования «химический фактор/маркер герпесвируса→индикаторный показатель→заболевание» установлены вероятности развития у детей лимфопролиферативных заболеваний органов носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции у ребенка.

Длительное низкоуровневое воздействие техногенных химических соединений атмосферного воздуха и наличие персистирующей герпесвирусной инфекции приводит к дисбалансу окислительных процессов и антиоксидантной защиты на клеточном уровне, развитию гиперпластических и иммуноаллергических воспалительных процессов в слизистой оболочке дыхательных путей, нарушению вегетативной и иммунной регуляции, что способствует формированию хронической патологии дыхательной системы.

Выявленные индикаторные и маркерные показатели и закономерности формирования негативных эффектов могут служить научно-методическим обоснованием для разработки принципов и программ профилактики, направленных на снижение уровня распространенности у детей заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпесвирусной инфекции.

Определение показателя вариационной пульсометрии (Мо) вызвано тем, что это позволяет оценить вегетативную регуляцию и уровень функционирования сердечно-сосудистой системы.

Суммарный объемный поток (СОП) риноманомерии характеризует проходимость носовых ходов и указывает на степень выраженности нарушения носового дыхания.

Определение уровня общего и прямого билирубина и КФК в пробе крови для целей диагностирования вызвано тем, что токсиканты обладают цитотоксическим действием, а также подвергаются биотрансформации в печени.

Определение иммунологических показателей и уровня моноцитов в пробе крови для целей диагностирования вызвано тем, что токсиканты оказывают местное раздражающее действие на органы дыхания, угнетают иммунную систему, а хронические герпетические инфекции приводят к вторичной иммунной недостаточности.

Благодаря расширению в предлагаемом способе диагностических информационных показателей и будет обеспечена достоверность оценки влияния как указанных токсикантов, так и других факторов, на диагностику указанной патологии.

Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что поставленный технический результат обеспечивается за счет совокупности всех операций предлагаемого способа, их последовательности и режимов его реализации.

При реализации предлагаемого способа осуществляют следующие операции в нижеуказанной последовательности:

1. проводят отбор детей, проживающих на территории с неблагополучными условиями окружающей среды и в анамнезе которых имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция. Для последующих результатов проводили исследование маркеров герпесвирусов (вирус простого герпеса 1,2 типа - HHV1,2; вирус герпеса 6 типа - HHV6; вирус Эпштейна-Барр - EBV) в образцах биологического материала (кровь, буккальный эпителий) методами иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени на приборе BioRADCFX 96 (Сингапур) в программе TaqMAN.

2. устанавливают в пробе крови содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома. При этом химическо-аналитическое исследование содержания указанных элементов в крови проводили следующим образом:

- формальдегида в соответствии с методическими указаниями МУК 4.1.2111-06 «Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии»;

- ароматических углеводородов (бензола и ксилола) - в соответствии с МУК 4.1.765-99 «Газохроматографический метод количественного определения ароматических углеводородов (бензол, толуол, этилбензол, о-, м-, п-ксилол) в биосредах (кровь)»;

- металлов (марганца, хрома) - в соответствии с МУК 4.1.3230-14 «Измерение массовых концентраций химических элементов в биосредах (кровь, моча) методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой».

Критериями оценки концентраций химических соединений в биосредах детей служили региональные фоновые уровни содержания анализируемых соединений в крови детского населения, проживающего на экологически благополучных территориях

3. определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющих роль диагностических маркеров:

- в качестве функциональных показателей определяют:

- показатель вариационной пульсометрии (Мо) (определяли методом кардиоинтервалографии (КИГ) на компьютерном электрокардиографе «Поли-Спектр-8/EX» (Нейрософт, Россия) с использованием кардиоритмографической программы по стандартной методике с оценкой показателей временного, спектрального анализов и вариационной пульсометрии по P.M. Баевскому);

- суммарный объемный поток (СОП), характеризующий степень выраженности нарушения носового дыхания (носовое дыхания изучали методом передней активной риноманометрии - система ринометрии SRE 2000 с датчиком Rhinostream, Interacoustics A/S, Дания); функцию внешнего дыхания - методами спирографии (СПГ на спирометре Schiller PS spirometry с применением датчика SP-1 (Schiller AG, Швейцария) по стандартной методике.)

- методом ультразвукового исследования (УЗИ) структурные параметры небных миндалин (оценка размеров, эхогенности ткани и структуры, наличие патологических включений); реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы и мезентериальных лимфоузлов и регионарных лимфоузлов (оценка количества, размеров, формы, индекса Солбиати, эхогенности ткани, эхоструктуры, выраженности коркового слоя, характера сосудистого рисунка) на аппарате экспертного класса «Vividiq» (GE Medical systems, Китай) с использованием линейного датчика (4,0-13,0 МГц);

- структуру и размеры печени (эхоструктура, эхогенность паренхимы, размеры долей, диаметры печеночных сосудов) по стандартной методике на ультразвуковом сканере экспертного класса «Vividq» (GE Vingmed Ultrasound AS, Норвегия), с использованием конвексного датчика);

4. определяют у ребенка лабораторные показатели: уровень моноцитов, содержание общего и прямого билирубина, уровень креатинфосфокиназы (КФК); иммунологические показатели: абсолютный фагоцитоз, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу, уровень специфического IgG к бензолу. При этом указанное клинико-лабораторное исследование выполнялось стандартными унифицированными методами с использованием следующего оборудования: автоматического гематологического анализатора DREW-3 (Biocode Hycel Holdings SAS, Франция), микроскопов «PrimoStar» (Zeiss, Германия), DM 1000 (Leica Microsystem, Германия), автоматического и полуавтоматического биохимических анализаторов Keylab (BPC+Biosed, Италия) и Humalyzer 2000 (Human GmbH, ФРГ), спектрофотометра ПЭ-5300 В (Экохим, Россия), анализатора электролитов крови Easy Lyte Calcium (Medica Corp, США), автоматического аппликатора SAS-lplusn окрашивателя SAS-2 (Helena, Великобритания), иммуноферментных анализаторов Infinite F50 и Sunrise (Тесап, Австрия), проточного цитометра FACS Calibur фирмы «Весгоп Dickinson» с универсальной программой Cell Quest PrO, прибора Bio RADCFX96 (Сингапур) в программе TaqMAN.

5. диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпесвирусной инфекции, в том случае, если ребенок одновременно характеризуется следующими маркерами:

- при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза,

- при наличии совокупности следующих показателей:

- уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек,

- выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см³/с,

- наличие структурных изменений небных миндалин,

- наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны,

- увеличение размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры;

- при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%,

- при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм³,

- при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³,

- при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм³,

- при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10⁹/дм³ -2,41⋅10⁹/дм³,

- при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см³, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см³,

- при содержании уровня IgE общего выше 124,66-205,18 МЕ/см³

- и при наличии в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, и IgG специфического к бензолу.

На основании полученных результатов делается вывод, что такой ребенок нуждается в дополнительном наблюдении и лечении.

Для выделения маркерных показателей был проведен сравнительный анализ внутренних связей в системе «маркер экспозиции - лабораторный и функциональный показатель ответа» отдельно для группы наблюдения и группы сравнения.

При этом группу наблюдения составили 206 детей с заболеваниями органов дыхания, в анамнезе которых был диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, проживающих на территории с многокомпонентным аэрогенным загрязнением, (50% мальчиков и 50% девочек; средний возраст 10,88±0,47 лет).

В группу сравнения вошли 158 детей с респираторной патологией, проживающих в условиях относительного санитарно-гигиенического благополучия (поселок городского типа Пермского края) (55,06% мальчиков и 44,94% девочек; средний возраст 10,61±0,54 лет), в анамнезе которых отсутствовал диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция.

Группы были сопоставимы по поло-возрастному составу (р=0,167-0,706).

Содержание в крови детей различных групп химических веществ, приведены в таблице 1.

Данные, приведенные в таблице 1, показывают, что в крови детей группы наблюдения содержание бензола в 1,6 раза превышает содержание в крови детей группы сравнения, ксилола в 1,2 раза, марганца в 1,1 раза, формальдегида в 1,3 раза, хрома в 1,1 раза.

Данные о частоте встречаемости отклонений в диагностических маркерах у детей группы наблюдения и группы сравнения, а также об установленном относительном риске (OR) встречаемости диагностических маркеров и критериев, ассоциированных с воздействием химических элементов техногенного происхождения и наличием вирусной герпесной инфекции, приведены в таблице 2.

Таким образом, результаты исследования, приведенные в таблице 2, показывают, что диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, в том случае, если ребенок одновременно характеризуется следующими обстоятельствами:

- при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза,

- при наличии совокупности следующих показателей:

- уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек,

- выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см³/с,

- наличие структурных изменений небных миндалин,

- наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны в крови,

- увеличении размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры;

- при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%,

- при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм³,

- при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³,

- при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм³,

- при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10⁹/дм³ - 2,41⋅10⁹/дм³,

- при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см³, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см³,

- при содержании уровня IgE общего выше 124,66-205,18 МЕ/см³,

- и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, и IgG специфического к бензолу.

Причинно-следственная связь указанных диагностических критериев заболеваний носоглотки с химическими элементами в крови ребенка и с наличием вирусно-герпесной инфекцией дополнительно подтверждается результатами, приведенными в таблицах 3-9 (результаты для детей группы наблюдения).

Таким образом, данные, приведенные в таблицах 1-9, являются доказательствами того, что предлагаемым способом у детей, страдающих вирусно-герпесной инфекцией и в крови которых имеются в наличии указанные вредные химические элементы, не менее, чем в 1,3 раза превышающие референтную концентрацию, действительно верно будет поставлен диагноз развития хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, т.к.:

- доказано превышение в пробе крови детей содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза;

- показана причинно-следственная связь этого уровня указанных химических элементов, с рядом функциональных и лабораторных показателей, характеризующих связь хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки с наличием антител вирусно-герпесной инфекции (что доказывает достоверность и точность предлагаемого способа), а также с превышением/снижением от количественных значений заявленных функциональных и клинико-лабораторных показателей.

Ниже приводим пример двух пациентов из группы наблюдения, которым поставлен диагноз развития хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки.

Пример 1.

Больной К., 8 лет, проживающий на территории промышленного города, с диагнозом «Гипертрофия небных миндалин I степени».

Жалобы: на длительную заложенность носа и повторные простудные заболевания (более 5 раз в год).

При проведении клинико-лабораторного обследования выявлено наличие в крови HSV1,2 IgG - 2,18 у.е., EBV-NA IgG - 95,22 у.е. По данным химико-аналитического исследования содержание бензола в крови составило 0,0019 мг/дм³, п-м-ксилола - 0,0048 мг/дм³, формальдегида - 0,031 мг/дм³, марганца - 0,011 мг/дм³, хрома - 0,0022 мг/дм³. В общем анализе крови содержание моноцитов составило 7,25%, в биохимическом анализе крови уровень общего билирубина составил 23,2 мкмоль/дм³, прямого билирубина -5,55 мкмоль/дм³, креатинфосфокиназы - 148,2 Е/дм³. Иммунологическое обследование показало, что абсолютный фагоцитоз был 2,29⋅10⁹/дм³, уровень ИЛ-4 - 2,91 пг/см³, ИЛ-10 - 8,12 пг/см³, IgE общего выше 128,5 МЕ/см³, выявлены в крови IgE специфического к формальдегиду (0,209 МЕ/см³), марганцу (0,216 МЕ/см³) и IgG специфического к бензолу (0,753 у.е.).

При проведении риноманометрии отмечено снижение показателя суммарной общей скорости носового потока (СОП) с обеих сторон до 423,79 см³/с. Оценка показателей вариационной пульсометрии показала у ребенка наличие ваготонического исходного вегетативного тонуса и нормальной вегетативной реактивности, при этом показатель Мо составил 0,78 сек.

При проведении ультразвуковой диагностики выявлено наличие детрита в небных миндалинах, признаки реактивной гиперплазии югуло-дигастрального лимфоузла верхней яремной группы; увеличение размеров печени (косой вертикальный размер левой доли печени составил 46,0 мм), умеренно выраженная реактивная гиперплазия лимфоузлов мезентериальной зоны.

В данном случае, у пациента были выявлены отклонения как функциональных, так и лабораторных показателей, которые предлагается использовать как диагностические критерии в заявляемом способе. Таким образом, была доказана достоверность и точность предлагаемого способа.

Пример 2.

Больная П., 12 лет, проживающая на территории с многокомпонентным загрязнением атмосферного воздуха техногенными химическими веществами, с диагнозом «Хронический тонзиллит».

Жалобы: периодическую заложенность носа, частые простудные заболевания, быструю утомляемость.

По данным клинико-лабораторного обследования выявлено наличие в крови HSV1,2 IgG - 5,88 у.е., EBV-NA IgG - 16,79 у.е. Химико-аналитическое исследования показало, что содержание бензола в крови составило 0,0023 мг/дм³, п-м-ксилола - 0,0028 мг/дм³, формальдегида -0,034 мг/дм³, марганца - 0,015 мг/дм³, хрома - 0,0072 мг/дм³. В общем анализе крови содержание моноцитов составило 7,58%, в биохимическом анализе крови уровень общего билирубина составил 23,7 мкмоль/дм³, прямого билирубина - 5,6 мкмоль/дм³, креатинфосфокиназы - 144,1 Е/дм³. Иммунологическое обследование показало, что абсолютный фагоцитоз был 2,189⋅10⁹/дм³, уровень ИЛ-4 - 2,94 пг/см³, ИЛ-10 - 4,96 пг/см³, IgE общего выше 125,4 МЕ/см³, выявлен в крови IgE специфического к формальдегиду (0,261 МЕ/см³), марганцу (0,249 МЕ/см³) и IgG специфического к бензолу (0,654 у.е.).

По результатам риноманометрии отмечено снижение показателя суммарной общей скорости носового потока с обеих сторон до 408,62 см³/с. По данным кардиоинтервалографии показатель Мо составил 0,79 сек.

Ультразвуковая диагностика выявила увеличение размеров небных миндалин и наличие детрита в них, признаки реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; увеличение размеров печени (косой вертикальный размер левой доли печени составил 63,0 мм), наличие реактивных изменений структуры печени; наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов мезентериальной зоны.

В данном случае, у пациента были выявлены отклонения как функциональных, так и лабораторных показателей, которые предлагается использовать как диагностические маркеры в заявляемом способе. Таким образом, была доказана достоверность и точность предлагаемого способа.

Предлагаемый способ применяется с целью выявления контингента детей, в отношении которых необходимо осуществление дополнительной специализированной лечебной и профилактической программы.

Разработанный способ диагностики позволяет получить достоверные и точные данные, не требует дефицитных реактивов, прост в исполнении, экономичен и не имеет противопоказаний.

Способ диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, характеризующийся тем, что производят отбор пробы крови у ребенка, в анамнезе которого имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, устанавливают в пробе крови содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома, определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющие роль диагностических маркеров, при этом в качестве функциональных показателей определяют: методом кардиоинтервалографии показатель вариационной пульсометрии (Мо), методом риноманометрии суммарный объемный поток (СОП), характеризующий степень выраженности нарушения носового дыхания, методом ультразвукового исследования структурные параметры небных миндалин; реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы и мезентериальных лимфоузлов и структуру и размеры печени; а в качестве лабораторных показателей определяют: уровень моноцитов, содержание общего и прямого билирубина, уровень креатинфосфокиназы (КФК) и иммунологические показатели: абсолютный фагоцитоз, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу и IgG специфического к бензолу, при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее чем в 1,3 раза, при наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек, выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см³/с, наличие структурных изменений небных миндалин, наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны, увеличение размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры; при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%, при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм³, при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³, при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм³, при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10⁹/дм³ - 2,41⋅10⁹/дм³, при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см³, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см³, при содержании уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³ и при наличии в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу и IgG специфического к бензолу диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.