Способ ранней диагностики алкогольной болезни печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя

Авторы патента:

G01N33/6893 - Исследование или анализ материалов особыми способами, не отнесенными к предыдущим группам

G01N33/68 - с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

G01N2800/085 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2792739:

федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный медицинский университет имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для ранней диагностики алкогольной болезни печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя. У пациента в сыворотке крови фотометрически определяют активность каталазы, с последующим перерасчетом активности каталазы в мкат/л по формуле: Е=(Ахол - Аопт)×V×t×К×100, где Е - активность каталазы в мкат/л; А - оптическая плотность холостой и опытной проб; V - объем вносимой пробы, 0,1 мл; t - время инкубации, 10 мин; К - коэффициент миллимолярной экстинции перекиси водорода, равный 22,2×10³ мм^-1×см^-1. При значении активности каталазы более 37 мкат/л диагностируют алкогольную болезнь печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя. При значении Е менее или равной 37 мкат/л - отсутствие алкогольной болезни печени. Способ обеспечивает возможность снижения травматичности, отсутствия риска осложнений, доступности, простоты исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности за счет определения активности каталазы в сыворотке крови фотометрическим методом. 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике и внутренним болезням, и может быть использовано для ранней диагностики алкогольной болезни печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя.

Известен лабораторный способ диагностики алкогольной болезни печени, основанный на прижизненном морфологическом исследовании биоптатов печени (Ивашкин В.Т., Маевская М.В., Павлов Ч.С., Сиволап Ю.П., Луньков В.Д., Жаркова М.С., Масленников Р.В. Клинические рекомендации Российского общества по изучению печени, по ведению взрослых пациентов с алкогольной болезнью печени. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2017; 27(6):20-40). Недостатки способа: трудоемкость, травматичность, способ требует специальных условий проведения, имеется техническая сложность получения материала и высокий риск развития тяжелых осложнений во время и после проведения манипуляции, охватывает только 0,2% печеночной паренхимы, низкая информативность о распределении инфильтратов, оценка гистологического строения органов достаточно продолжительна по времени, процедура субъективно неприятна.

Технический результат: снижение травматичности, отсутствие риска осложнений, доступность, простота исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности.

Указанный результат достигается путем определения активности каталазы в сыворотке крови у обследуемого пациента с синдромом зависимости от алкоголя при выполнении ранней диагностики алкогольной болезни печени.

Способ осуществляется следующим образом: у больного натощак осуществляют забор венозной крови из локтевой вены в количестве 5 мл в вакуумную пробирку с активатором свертывания. Далее центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин для получения сыворотки. Активность фермента антиоксидантной системы каталазы в сыворотке крови определяли методом Королюк М.А. фотометрически на КФК-3 (фотометр фотоэлектрический, Россия) при длине волны 410 нм (Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. №1. С. 16-19).

Метод определения активности фермента каталазы основан на способности перекиси водорода (Н₂О₂) образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс.Активность каталазы определяли по преобразованию ферментом субстрата (пероксида водорода), который способен к образованию окрашенного комплекса с солями молибдата аммония. Экстинция регистрируется при 410 нм. За единицу активности каталазы принимали то количество фермента, которое участвует в превращении 1 мкат Н₂О₂ за 1 секунду при заданных условиях. Расчет активности каталазы вели на 1 л сыворотки крови.

Необходимые реагенты:

1. 0,03% раствор перекиси водорода (H2O2), предназначенный для реагирования с ферментом в качестве субстрата.

2. 4% раствор молибдата аммония (производитель ООО «Биотех», Россия).

Ход определения. Опытная проба - 2 мл 0,03% раствора Н₂О₂+0,1 мл сыворотки. Холостая проба - вместо сыворотки вносили 0,1 мл дистиллированной воды. Для коррекции результатов готовили контрольную пробу - вместо перекиси добавляли 2,0 мл дистиллированной воды. Пробы инкубировали 10 минут при 37°С в термостате. Затем останавливали реакцию путем добавления 1,0 мл 4% раствора молибдата аммония. После этого пробы центрифугировали в течение 10 минут при 3000 об/мин. Оптическую плотность холостой и опытной проб измеряли против контроля на КФК-3 при длине волны 410 нм. После проводили расчет активности каталазы по формуле:

Е=(Ахол - Аопт)^×V^×t^×К^×100, где

Е - активность каталазы, мкат / л;

Ахол - оптическая плотность холостой пробы;

Аопт - оптическая плотность опытной пробы;

V - объем вносимой пробы, 0,1 мл;

t - время инкубации, 10 мин;

К - коэффициент миллимолярной экстинции перекиси водорода, равный 22,2^×10³ мм-1^×см-1.

При значении активности каталазы более 37 мкат/л диагностируют алкогольную болезнь печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя, при активности каталазы менее или равной 37 мкат/л - отсутствие алкогольной болезни печени.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Пациентка Н., 35 лет обратилась к наркологу в ГБУЗ ПК «Пермский краевой клинический наркологический диспансер» с целью лечения синдрома зависимости от алкоголя с жалобами на диспепсию, умеренно выраженную слабость. В анамнезе имелись данные о систематическом приеме алкоголя в среднем 1 бутылку водки в неделю. При сборе анамнеза было установлено, что пациентка страдает хроническим алкоголизмом в течение 10 лет.

При объективном осмотре выявлено: умеренно выраженная потливость рук, лица, легкий тремор рук. Кожные покровы и видимые слизистые физиологической окраски. Телосложение нормостеническое. Печень выступает из - под края реберной дуги на 1 см, умеренной плотности, гладкая, безболезненная. Биохимическое исследование: АЛТ 30 Ед/л, ACT 26 Ед/л, общий билирубин 10 мкмоль/л, ХС 5,0 ммоль/л, ТГ 0,9 ммоль/л, ХС-ЛПВП 3,56 ммоль/л, ХС-ЛПНП 3,9 ммоль/л. Производим расчет активности каталазы в сыворотке крови:

Е=(0,00000073-0,00000039)*0,1*600*22,2^×10³ мм-1^×см-1*100=45,33 мкат/л

Активность каталазы в сыворотке крови составляет 45,33 мкат/л.

Таким образом, предлагаемым способом подтвержден диагноз «алкогольная болезнь печени».

Пример 2.

Пациент 45 лет, стоит на учете в ГБУЗ ПК «Пермский краевой клинический наркологический диспансер» с диагнозом «Синдром зависимости от алкоголя» в течение 16 лет. Пациент пришел на очередной прием к наркологу. Жалобы на дискомфорт, тупую боль в правом подреберье, эпигастрии, снижение аппетита. Объективный статус: кожные покровы, видимые слизистые физиологической окраски. Телосложение астеническое. Печень выступает из-под края реберной дуги на 2 см, умеренной плотности, гладкая, с закругленным краем. Биохимическое исследование: АЛТ 25 Ед/л, ACT 29 Ед/л, общий билирубин 15 мкмоль/л, ХС 4, ммоль/л, ТГ 0,9 ммоль/л, ХС-ЛПВП 3,1 ммоль/л, ХС-ЛПНП 3,8 ммоль/л.

Производим расчет активности каталазы в сыворотке крови:

Е=(0,00000073-0,00000027)*0,1*600*22,2^×10³ мм-1^×см-1*100=61,33 мкат/л

Активность каталазы в сыворотке крови составляет 61,33 мкат/л.

Таким образом, предлагаемым способом подтвержден диагноз «алкогольная болезнь печени».

Пример 3.

Пациентка, 39 лет, впервые обратилась на прием к наркологу в ГБУЗ ПК «Пермский краевой клинический наркологический диспансер». При тщательном сборе алкогольного анамнеза установлено, что пациентка регулярно, в течение 12 лет принимает около 60 г этанола в сутки. Жалобы на ощущение умеренно выраженного дискомфорта после приема пищи, снижение аппетита. Объективный статус: кожные покровы, видимые слизистые физиологической окраски. Телосложение нормостеническое. Печень на 1 см ниже края реберной дуги, гладкая, плотная. Биохимическое исследование: АЛТ 31 Ед/л, ACT 21 Ед/л, общий билирубин 16 мкмоль/л, ХС 5,0 ммоль/л, ТГ 0,9 ммоль/л, ХС-ЛПВП 3,56 ммоль/л, ХС-ЛПНП 3,9 ммоль/л.

Производим расчет активности каталазы в сыворотке крови:

Е=(0,00000073-0,00000031)*0,1*600*22,2^×10³ мм-1^×см-1*100=55,99 мкат/л

Активность каталазы в сыворотке крови составляет 55,99 мкат/л.

Таким образом, предлагаемым способом подтвержден диагноз «алкогольная болезнь печени».

Пример 4.

Пациентка, 48 лет. Алкоголь употребляет около 4 раз в месяц (примерно 20 г 11% сухого вина). Жалоб не предъявляет.АЛТ 15 Ед/л, ACT 17 Ед/л, общий билирубин 9 мкмоль/л, ХС 4,1 ммоль/л, ТГ 0,9 ммоль/л, ХС-ЛПВП 3,56 ммоль/л, ХС-ЛПНП 3,1 ммоль/л.

Производим расчет активности каталазы в сыворотке крови:

Е=(0,00000061-0,0000005)*0,1*600*22,2^×10³ мм-1^×см-1*100=14,66 мкат/л.

Активность каталазы 14,66 мкат/л. Алкогольная болезни печени у женщины исключена. Данный пример иллюстрирует результат предлагаемого способа диагностики.

Положительный эффект от использования данного способа заключается в своевременном выявлении алкогольной болезни печени на ранней стадии, значительном снижении экономических затрат на лечение, на оплачивание больничных листов.

Способ ранней диагностики алкогольной болезни печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя, заключающийся в том, что у пациента в сыворотке крови фотометрически определяют активность каталазы с последующим перерасчетом активности каталазы в мкат/л по формуле:

Е=(Ахол - Аопт)×V×t×К×100,

где Е - активность каталазы в мкат/л; А - оптическая плотность холостой и опытной проб; V - объем вносимой пробы, 0,1 мл; t - время инкубации, 10 мин; К - коэффициент миллимолярной экстинции перекиси водорода, равный 22,2×10³ мм^-1×см^-1, и при значении активности каталазы более 37 мкат/л диагностируют алкогольную болезнь печени у пациентов с синдромом зависимости от алкоголя, при значении Е менее или равной 37 мкат/л - отсутствие алкогольной болезни печени.

Изобретение относится к области наноматериалов, а именно к соединению общей формулы II, где R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей COOR5; R3 и R4 независимо выбраны из группы, включающей H; C1-С6 алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C1-С6 алкила, C3-С7 циклоалкила, C1-С6 алкилокси и галогена; арил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C1-С6 алкила, C3-С7 циклоалкила, C1-С6 алкилокси и галогена; R5 выбирают из группы, включающей H; C1-С6 алкил; C3-С7 циклоалкил; C1-С6 алкилокси и галоген; X– представляет собой анион, выбранный из группы, включающей галогенид, нитрат, тозилат, трифлат, ацетат, гексахлорфосфат, тетрафторборат и гексахлороплатинат; n принимает значение от 3 до 12.

Способ дифференциальной диагностики меланомы хориоидеи центральной локализации и поздней стадии возрастной макулярной дегенерации // 2792554

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики меланомы хориоидеи (MX) центральной локализации и поздней стадии возрастной макулярной дегенерации (ВМД). В слезной жидкости больного глаза определяют содержание цитокинов МСР-1/CCL2 и Eotaxin/ССL11.

Способ оценки орексигенного действия питьевых минеральных вод // 2792396

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки орексигенного действия питьевых минеральных вод. Для выявления орексигенного действия питьевой минеральной воды проводится измерение концентрации грелина в крови натощак и после приема 200 мл исследуемой питьевой минеральной воды комнатной температуры.

Система и способ для оперативного определения теплотворной способности текучих сред // 2792287

Раскрывается система и способ для оперативного определения теплотворной способности текучих сред. Способ использует компьютер (200), имеющий процессор (210), выполненный с возможностью выполнять команды на основе данных, сохраненных в запоминающем устройстве (220), причем процессор (210) реализует этапы модуля (204) логического вывода, сохраненные в запоминающем устройстве (220), при этом способ содержит этап определения, посредством модуля (204) логического вывода, логически выводимой взаимосвязи посредством анализа взаимосвязи между известными измерениями, по меньшей мере, одной измеренной теплотворной способности, по меньшей мере, одной текучей среды и, по меньшей мере, одного соответствующего измеренного значения типа, идентичного типу, по меньшей мере, одной измеренной величины, при этом логически выводимая взаимосвязь имеет член (B) плотности, при этом, по меньшей мере, одна из измеренной величины представляет собой измеренную плотность (ρ), и член (B) плотности имеет обратную плотность (1/ρ), причем член (B) плотности представляет обратную взаимосвязь между плотностью (ρ) и логически выведенным энергосодержанием, и при этом измеренная плотность (ρ) не представляет собой плотность (ρair) воздуха.

Способ прогнозирования развития массивного коронарного тромбоза инфаркт-ответственной коронарной артерии при инфаркте миокарда с подъемом сегмента st // 2792252

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования развития массивного коронарного тромбоза инфаркт-ответственной коронарной артерии при инфаркте миокарда с подъемом сегмента ST. Осуществляют проведение клинического, биохимического анализов крови, а также получение данных коагулограммы и ангиографии и выявление предикторов развития массивного коронарного тромбоза.

Способ прогнозирования течения светлоклеточного почечно-клеточного рака // 2792250

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для прогнозирования течения светлоклеточного почечно-клеточного рака. Определяют концентрации растворимых форм рецептора программируемой гибели клеток sPD-1 и его лиганда sPD-L1 в сыворотке крови.

Способ выявления туморогенных клеток в первичной культуре фибробластов человека // 2792061

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам изготовления биомедицинских клеточных продуктов и способам оценки безопасного применения входящего в их состав клеточного компонента, и предназначено для экспресс-оценки туморогенного потенциала клеток, планируемых к применению в составе биомедицинского клеточного продукта.

Способ определения активности цемента // 2791976

Изобретение относится к технологии изготовления строительных материалов с применением цемента, а именно к контролю качества цемента, и может быть использовано в качестве экспресс-метода определения активности цемента. Способ определения активности цемента по предварительно построенной калибровочной зависимости заключается в том, что опытные образцы изготавливают в виде запрессовок испытуемого цементного порошка, на образцы наносят каплю рабочего раствора, измеряют краевой угол смачивания, рассчитывают его косинус и по предварительно построенной калибровочной зависимости прочности на сжатие, определенной для балочек из цемента разных марок, от значения косинуса краевого угла смачивания поверхности порошков цемента рассчитывают линейное уравнение, по которому определяют значение активности испытуемого цемента.

Метод подбора адсорбента // 2791740

Изобретение относится к области сельского хозяйства. Предложен способ подбора адсорбента, используемого в кормах для сельскохозяйственных животных, согласно которому из пробы исследуемого образца корма отбирают пробы, причем количество проб соответствует количеству видов адсорбентов, помещают их в отдельные емкости и заливают нетоксичным растворителем.

Новые анти-cd19-антитела // 2791445

Настоящее изобретение относится к анти-CD19-антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, выделенной полинуклеотидной последовательности, кодирующей их, вектору экспрессии, содержащему выделенный полинуклеотид, клетке-хозяину для получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, способу экспрессии антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, конъюгату антитело-лекарственное средство, фармацевтической композиции для лечения CD19-связанного заболевания или состояния, способу лечения CD19-связанного заболевания или патологического состояния, химерному антигенному рецептору, молекуле последовательности нуклеиновой кислоты, вектору экспрессии, содержащему последовательность нуклеиновой кислоты, выделенной Т-клетке, способу стимуляции Т-клеточного иммунного ответа, набору для детекции наличия или количества CD19 в образце или для диагностики CD19-связанного заболевания или состояния у индивида.