Способ получения антистафилококкового гипериммунного гаммаглобулина

 

Союз Советскик

Социалистических

Республик (и)374895

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительттое к 887. сеид-ву (22) Заявлено 150667 (21) 1164804/31-16 с присоелииеиием заявки .Ж г (53) Я, Кл.

A 6i К 35/14 (23) Приорнтет.(43) Опубликовано 0503785толлетеиь И 9 (45) Дата опубликования описания 0702.78

ГеераретееллнИ аеватет

Сеаете QltNNcTpcl CCCP ее лелея азееретеааа а етарнтй (53j УДК 615,373.9 (088.8) А, Е..Киселев, С. В., Скурковнч, Т. В. Голосова, A. A. Ôðîì, Г. Ф. Папко| Л. С. Шенкман и Т. П. Аникина (72) Авторы изобретения (73) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИСТАФИЛОКОККОВОЦО ГИПЕРИИИУННОГО

ГАИИАГЛОБУЛИНА

Изобретение относится к области медицины, к производству лекарствен» ных препаратов.

Известен способ получения донорского гаммаглобулина путем его спиртово» 5 го фракционирования нэ. плазмы, полученной методом плаэмафореза.

ПолучЕнный известным образом гам- маглобулин малоэффективей для лечения стафилококковых заболеваний в связи .10 с тем, что он содержит низкий титр антистафилококковых, антитоксических и антимикробных антител °

Целью предложенного изобретения является получение препарата с высо- 15 ким содержанием противостафнлококко-вых, антимикробных и антитоксических антител. цель достигается тем., что. доноров предварительно иммуниэируют атафило- @ кокковым анатоксином, подкожно, троекратно в-дозах 0,5-1 0-1,0 мл иативным стафилококковым анатоксином| а затем три-четыре раза адсорбированным стафилококковым аиатоксином в дозе

1,0 мл c интервалами между инъекциями

7-10 дней.

Пример. Для получения предложенного препарата. подбирают контингент доноров, преимущественна иалодого воз- З) 2 раста (20-35 лет),согласно инструкции о медицинском освидетельствовании,учете и порядке получения крови от доноров службы переливания крови (утверждена Министерством здравоохранения СССР

27.(l.1957 ã.). Доноров активно иммунизируют нативным н адсорбированным ста.филококковым анатоксином; изготовлен ным институтом эпидемиологии и микробиологии имени академика Н. Ф. Гамалея, сериями 9 66-2 и 63-2 по разработанной схеме.

Принципиальная схема иммунизации

Натнвный стафилококковый.анатоксин вводят подкожно трехкратно в дозах

0,5-1,0-1,0 мп с интервалом мех;цу инъекциямй 7-10 дней, затем вводят адсорбированный стафнлококковый анйтоксин в дозах 1,0 мл интервалом 7-, 10 дней от одной до трех-четырех инъекций, в зависимости от содержания титра

AE в сыворотке иммунных доноров.

В процессе итатуниэацни доноры на» ходятся под систематическим врачебным клннико-морфологкческнм, биохимнческИМ н иммунологическим контролем.

Доноры, содержащие в 1 мл снворотхн крови 40 и выше антитоксических едините (АЕ), считаются иммунноактнвщями, 374895 и агглютинины против стафилококков в титре 1:20480.

Полученный антистафилококковый ги» периммунный человеческий гаммаглобулин. направленного действия проверяют на стерильность, пирогенность и токсичность, Ьнтистафилококковый гаммаглобулин хранят в темном прохладном месте при температуре 3-10 С, лучше. всего в обычном холодильнике.

Препарат является прозрачным или слегка опалесцирующим 10%-ным раствором гаммаглобулиновой фракции плазмы человеческ эй крови, он обладает вы" раженным специфическим антитоксическим и антимикробным действием. Выпускается в ампулах по 3 мл (одна доза).

,Лнтистафилококковый гипериммунный человеческий гаммаглобулин предназначен для лечения больных, страдающих стафилококковыми заболеваниями,в частности.стафилококковым сепсисом ново-. рожденных, послеродовым, посттравматическим, послеоперационным стафйлококковым сепсисом и локализованными ост» рыми гнойными стафилококковыми иифек циями. дозу антистафилококкового гипериммунного человеческого гаммаглобули на для лечения больных устанавливают в зависимости от возраста больного, клинического течения. болезни и наличия Осложнений, Препарат вводят внут» римышечно.

Препарат можно вводить. больному ежедневно или через день, на курс ле" чення 3 5 и более раз, в зависимости от состояния больного,. течения болезни и лечебного. эффекта.

Имйунных доноров подвергают сиате» матическому плазмафореэу два раза в месяц по методике, согласно временной инструкции. по применению плаэмафоре за, составленной Центральным ордена

4енина институтом гематологии и пере- ) лнвания крови и утвержденной 24.Я).65

Министерством эдравоохранения СССР.

Полученную:таким методом гипериммунную антистафилококковую плазму направленного действия накапливают и хранят в стерЛьных пластикатных м,ш !6 ках в холодильной камере при темпера туре от -20 до -30 С. Из этьй анти-стафилококковой плазмы выделяют анти- стафнлококковый гаммаглобулин путем фракционировання плазмы 53%-ным спир.том прн отрицательных. температурах,, Принципиальная "схема фракциониро вання плазмы. .. 1), Выделенйе фибриньгена при тем.пературе «ЗОС и концентрации. спирта. . OS в плазме до 8В.

-2); Выделение осадка гаммаглобулина

: в смеси с бетаглобулинами и липоидамн ."с доведением концентрации спирта до . -25% прн температуре -7ОС и ионной си- 30 ле 0,075. 3) . Выделение чистого гаммаглобу» лина нэ предыдущего оса цка элюацией при рН 5,0-5,2 и ионной силе 0,02

41 Концейтрация гаммаглобулнна 85 при .256 спирте и рй 7,0. .5). Высушивание. раствора гаммагло ,булнна в сушильных аппаратах Юзефруа или ХС-30 для освобождения от спирта.

6) ..Растворение гаммаглрбулина до, 40 концентрации 10% белка в Изотоническом .растворе хлористого натрия .(0,15 М),a,затем,стерялиэукнцая фильтрация и роз» лнв гамчаглобулина по аМПулам ОбъемоМ

-,3 мл..

В процессе фракциониоования анти-

45 стафилококковой плазмы достигают уве«

)учения концентрации антйстафилокок- . ковых ацтнтел в гаммаглобулине в 8-l0 раэ. по сравнению с исходной плаз-. мой, 60 формула изобретения

Тираж 702

ЦНИИПИ Заказ 934/7

Подписное

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул; Проектная, 4

Обычно сыворотка иммунных доноров содержит 40-70 AE и 1:640-1:1280 противостафнлококковых антител в 1 мл.

Кроме того, в процессе фракциониРОВания 80% исходной общей антитоксиЧеской н антимикробной активности плаз мЧ концентрируется в гаммаглобулнне

И 20% в альфаглобулине, имеющем под

ЭИ ность гамма в электрическом поле.

В полученной серии препарата в 1 мл

@нтнстафнлококкового гаммаглобулина

@ д@Раится 640 антитоксических единиц 60

1. Способ получения антистафилокок«, кового гипериммунного гаммаглобулина путем его спиртового фракционированиа иэ дьнорской плазмы, выделенной методом плаэмафореэа,: о т л..и ч а ю щ н и с я тем, что, с целью получения препарата с высоким содержанием противостафнлококковых,антимикробных и.антитоксических антйтел, доноров предварительно иммуниэируют стафилококковьп анатоксином.

2. Способ по и. l, о т л и ч а юшийся . Тем что доноров нммунизи» руют подкожно, трехкратно в дозах

0,5-1,0-1,0 .мл нативным стафилококко» вым анатоксином, а затем 3-4 раза адсорбированным стафнлококковым анатокаином в дозе 1,0 мл с интерваламн между инъекциями в 7-10 дней.