Способ окрашивания спор пебрины тутового шелкопряда

 

ОП КСАН ИЕ

ЙЗОиРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Соцналистмческих

Республик (11) 488 567 (á1) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 16.08.73 (21) 1957388 30 д, с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опублиь овано <. 10. 75.Бюллетень МЛ9 (45) Дата опубликования описания 15 oт.76

Государственный комнтвт

Совета Мнннстров СССР аа делам нзооретеянй н открь1тнй (ЬЗ) УДК 638.252.3 (088.8 ) (72) Автор изобретения

И.А. Кириченко

Украинская опытная станция шелководства (?1) Заявитель (54) СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ СПОР ПЕБРИНЫ

ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

20. Изобретение относится к шелководству и может быть использовано при диагностических исследованиях, а также при микроанализе препаратов тутового шелкопряда на всех стадиях развития с целью обнаружения пебрины - опасного опустошительного заболевания.

Известен способ окраски спор пебрины черной тушью, по ..оторому на предметное стекло пестиком или стеклянной палочкой наносят каплю исследуемой жидкости, рядом — каплю черной туши и капли смешиватот. К образовавшейся одной большой каш:е подводят шлифованное предметное или покровное стекло. Край подведенного стеЫла должен плотно прилегать к предметному стеклу, а само подведенное стекло должно иметь наклон примерно 30 .

Впрль предметного стекла проводят быстрым движением, и капля распределяется по поверхности стекл". Получается мазок, которому дают высохнуть при комнатной температуре. После этого препарат фиксиI руют и переходят к микроскопированию.

-Вначале при помоши сухого объектива на(51) M. Кл. А 01k 67;0 4 ходят изображение, затем сухой объектив заменяют иммерсионным, на рассматриваемое место нрепарата наносят кедрово масло, опускают тубус микроскопа и прос5 матривают препарат. Микроскопическая картина: на черном.фоне споры пебрины в виде просветлений.

Этот способ окраски спор пебрины недостаточно -совершенен. На окрашенном в

)0 черный цвет фоне аналогично спорам пебЪ рит:ы просвет". ние дают кокковая и палочковидная спорообразуюшая и бесспоровая бактериальная микрофлора, полиэдры желтухи шелкопряда, что не позволяет дифференцировать возбудителей и точно определять болезнь.

Способ не позволяет определить точное количество спор пебрины s поле зрения ми раскопа, а также точное наличие полярной нити внутри пор, что очень важно гри диагностических и других исследованиях.

Невозможно четко определить контуры спор, этим объясняется трудность и точном определении их размеров.

488567

Составитель М. Дранишников

Л. ПинчУк ТехРед . орректор

РедаКТОр

И. ГОксич

1112 Тираж 619 Подписное

11НИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., p. 4/5

Заказ

Филиал ПЛП «Патент», г. Ужгород., ул. Гагарина, 101

Белью изобретения является повышение

ToчнОсти диаГнОстики Возбудителя болезни,,«то дОстигается тем, чтО Вначале спОры Окрашивают карболовым фуксином в розовый цвет, затем раствором малахитовой зеле;1Н окрашивают В светлозеленый цвет различные примеси„которые могут быть

В препарате (обрывки кожных покровов куксчки или Обломки усиков, крыльев, чешуйки pr Волоски тела бабочек), На предметное стекло наносят и распределяют го его поверхности каплю исслед" емой жидкости. Препарат Высушивают„ фиксиру»от, медленно проводя еГО тыльчОЙ стороной над пламенем три — четыре раза.

1,.

i iа не остывший еше препарат HGHocHT

О,. 6":--:-I.IÉ карболовый фуксин По истечении

1-; сек. карболовый фуксин смывают водой, д011раш ".Веют препарат 3 0 iо — ным pGcTBopoM малахите":;oé зелени В течение 3 мин смыВа»о-, Водой, обесцвеч11вают 10-15 cez

1. 0 нь»м pGOТBB,»o ccBIIog кислоты„смы

Влют Водой и Вь. сушивают.

01<рл1ценнь»е препараты IIpocMGTpHBGKT при естественном или искусственном освешении под сухим объективом (40х), накладь1Вач на них покровны стекла; окуляр (1c„x . е . В»й способ имеет следуюшие с; шестБенные пге11мушестВа ПО сравнению с известным.

Окра1денные споры пебрины B рОзОВый цвет конTpGCT o Вь1деляются на светло-зе":еном фоне, ToÄ B отличие от окраски тушью, позволяет отдифференцировать от друГИХ МИКВООРГЯНИЗМОВ И ИХ СПОО, КОТОРЫЕ (He окрапиваются фуксином или окрашиваются незначчтельно, имеют иную форму и размеры, Предлагаемые красители выявляют четкие границы спор пебрины и наличие полярной нити в них, wTo позволяет точно определить размер и количество этих спор.

Предле-аемый способ сокрашает трудозатраты на просмотр окрашенных препараЩ тов и отпадает необходимость в иммерсионных объективах и кедровок. масге. При з-1ом расширяется Возможнс "ть пользования простымй биологйческими микроскопами при обшепринятом в шелководстве увеличении

15 В 600 раз.

| 1

Микроскопию окрашенных препаратов предлагаемым способом можно осушествлять как При естественном, так и искус— ственном освещении, используя осветители

29 любых систем.

Предмет изобретения

Способ окрашивания спор пебрины тутоВого шелкопряда, включаюший окрашивание карболовым фуксином с последующим докрашиванием мала.хитовой зеленью и Обесцвечиванием кислотой, о т л и ч а ю ш и й— с я тем,. что, с цельк псвышения точности

Ю диагностики Возбудителя болезнч, о1рашиваниг спор карболовым фуксином п оводят в течение 5 сек с последующим докрашиванием в течение 3 мин 3,0%ным растВором малахитовой зелени и обесцвечиванием 1,ЯНЫМ раствором серной кис