Йодметилат 3е-ацетокси-1е, за-диметил-6ео-бензилоксифенил-4- пиперидон, проявляющий противовирусную активность

 

01) 536676

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСИСМУ СВИДЕТЕааЬСаВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 24.06.75 (21) 2150824/04 с присоединением заявки Хе (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.06.78. Бюллетень зч" 24 (45) Дата опубликования описания 29.06.78 (51) М. Кл,з С 07D 211/74

//С 12К 7/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547.824.07 (088.8) (72) Авторы изобретения М. М. Тимофеева, И. В. Брускова, Э. А. Изергина, О. Т. Андреева, В. И. Вотяков, В. И. Тыворский, Л. С. Стаиишевский и И. Г. Тищенко

Белорусский ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт эпидемиологии и микробиологии и Белорусский ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. В. И. Ленина (71) Заявители (54) ЙОДМЕТЙЛАТ-3е-АЦЕТОКСИ-! е,3а-ДИМЕТИЛб-е-о-БЕНЗИЛОКСИФЕНИЛ-4-ПИПЕРИДОНА, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНУЮ АКТИВНОСТЬ

Известные вирусные ингибиторы характеризуются недостаточно высокими интенсивностью действия и величиной химиотерапевтического индекса.

Цель изобретения — улучшение ингибирующей активности и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Это достигается при применении нового

10 производного пиперидона, а именно йодметилата Зе-ацетокси-1е,За-диметил-бе-о-бензилоксифенил-4-пиперидона формулы о-ñí, тО сн,— с — о си, II

° . снз

Предлагаемый вирусный ингибитор обладает более выраженным противовирусным эф- 25 фектом по сравнению с существующим.

Технология получения указанного соединения следующая.

К раствору 0,50 г моль 2-метил-2-ацетилоксирана и 0,36 г моль о-бензилоксибензальде- 30

Изобретение относится к синтезу биологически активных веществ, в частности к синтезу йодметилата Зе-ацетокси-1е,За-диметил-бео-бензилоксифенил-4-пиперидона, обладающего противовирусной активностью.

Известно, что соли аммония, например диметилцетил - а - метилнафтиламмонийхлорид, являются ингибитором кишечных вирусов (1).

Известно также, что производные пиперидона, например З-окси-1,3-диметил-б-арил-4пиперидон, находят применение в качестве ингибитора вирусов (2). гида в 100 мл метанола при охлаждении до

5 — 10 С и перемешивании приливают порциями 25 мл 15%-ного раствора едкого натра в метаноле. Реакционную смесь выдерживают при 10 С в течение 1 — 2 ч, отделяют выпавшие кристаллы, промывают их 50о/о-ным водным метанолом и кристаллизуют из изо-про536676

СггНгЛO4.

Вычислено, %: N 3,82.

Раствор 0,01 r.ìîëü ацетата пиперидона в

10 мл свежеперегнанного йодистого метила выдерживают в течение 40 — 48 ч, осадок йодметилата отделяют и промывают смесью гексан-изо-пропанол. Получают йодметилат 3еацетокси- lе,3a-диметил-бе-о-бензилоксифенил4-пиперидона в виде белых кристаллов с выходом 90%, т. пл. 147 С.

Найдено, %: N 2,58.

Сганг81МО41.

Вычислено, %: N 2,75.

Антивирусную активность полученного сое15 динения определяют в отношении кишечных вирусов ЕСНО 6, Коксаки В4 типов. B опытах используют 100 ЦПД5о в 0,1 мл вируса на пробирку.

Исследование проводят на пассируемых

20 кожно-мышечных клетках эмбриона человека и клетках Fl по снижению инфекционной активности вируса.

Пассируемые кожно-мышечные клетки эмбриона человека выращивают на среде, состо25 ящей из 5% гемогидролизата с 10% бычьей сыворотки, используют пробирочные культуры на 3 — 4 сутки роста с посевной дозой

300000 — 200000 в 1 мл.

Г!еревиваемые клетки Fl выращивают на

30 2,5%-ном гемогидролизате с 10 "/о бычьей сыворотки. Культуру клеток берут в опыт на 2—

3 сутки роста при посевной дозе 100000 клеток на пробирку. В качестве поддерживающей среды применяют 5%-ный гемогидролизат.

35 Соединение йодметилат ацетата 3е-окси-lе, 3a - диметил - 6е - о-бензилоксифенилпиперидона-4 оказывает вирусингибирующее действие в концентрациях 10; 5,0; 2,5; 1,0; 0,5 мкг/мл.

Инфекционная активность вируса типа ECHO

40 6 при данных концентрациях снижается на

6,81; 6,81; 6,81; 6,15; 1,31 lg ТЦД5о)о,g соответственно. В трех первых дозах отмечается полХарактер действия

Режим обработки вируса типа ECHO 6 снижение контроль опыт соединения

Введение 100 ЦПД о о > вируса на культуру ткани йосле предварнтельной обработки ее соединением в течение 2 ч

6,75

Профилактическое

6,75

Инкубация 0,1 мл цельного вируса в присутствии препарата, 2 ч при 37 С

5,25

В ирулнцидное

5,0АдсоРбциЯ 100 ЦПДао р 1 нНРУса в присутствии препарата, 1 ч при 37 С

6,5

6,75

0,25

На стадии адсорбцин

Препарат вносят на клетки после адсорбцин 100 ЦПДао,о, виру a

6,75

6,75

На стадии репродукции

3 панола. Получают 2-метил-5-о-бензилоксифепил-1,2-эпокси-4-пентен-З-он в виде бесцветных кристаллов с выходом до 62%, т. пл.

69 С.

Найдено, %: С 77,29; Н 5,94.

Свг1 зОз.

Вычислено, %: С 77,55; 1-1 6,12.

Раствор 0,16 г моль 2-метил-5-о-бензилоксифенил-1,2-эпокси-4-пентен-Ç-она и 0,20 r моль метиламина в 700 мл изо-пропанола выдерживают при 18 — 20 С в течение 40 — 48 ч, изопропанол отгоняют, остаток при охлаждении проточной водой подкисляют 5% -ной серной кислотой до рН 2 — 3 и экстрагируют непрореагировавшее исходное соединение эфиром.

Водный слой обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия до прекращения выделения углекислого газа, продукт реакции экстрагируют эфиром и объединенные эфирные вытяжки сушат сульфатом магния. Остаток после отгонки эфира кристаллизуют из смеси изо-октан — изо-пропанол и получают

Зе-окси-1е,За - диметил-6е-о-бензилоксифенил4-пиперидон в виде белых кристаллов с выходом 83%, т. пл. 108 С.

Найдено, %: N 4,16.

СгонгЗХОЗ °

Вычислено, %; N 4,31.

Раствор 0,03 г.моль пиперидона в 30 мл хлористого ацетила выдерживают при 18—

20"С в течение 40 — 48 ч, разбавляют 300 мл сухого эфира, выделившийся осадок отделяют декантацией и растворяют в 50 мл воды.

Продукт реакции выделяют аналогично указанному действием бикарбоната натрия и экстракцией эфиром. Эфирные вытяжки сушат сульфатом магния и .остаток после отгонки эфира кристаллизуют из смеси гексан-изопропанол. Получают Зе-ацетокси-lе,3a-диметил-6е-о-бензилоксифенил-4-пиперидон в виде белых кристаллов с выходом 51%, т. пл. 69 С.

Найдено, : Х 3,98.

Титр репродуцированного вируса в ig ТЦДао,о, 536676

10 о — сн, / Ъ сн,— с — о+ з 0+ 3

Я о сн3 з

Составитель 8. Навина

Редактор П. Горькова

Корректор О. Тюрина

Техред И. Михайлова

Заказ 1258/5 Изд. № 520 Тираж 568

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва; Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Типография, пр. Сапунова, 2 ное отсутствие репродукции вируса. Полученные результаты показывают, что терапевтический индекс предлагаемого соединения равен 20.

Репродукция вируса Коксаки В4 в присутствии указанных концентраций снижается на

4 87 4 87 4 87 3 62 1 87 1g ТЦД"Оуo,g.

Изучают профилактическое действие соединения на клетки, его впрулицидпое свойство.

Определяют действие соединения на этапы взаимодействия вируса с клеткой — адсорбцию и репродукцию вируса. Соединение исследуют в концентрации 5 мкг/мл.

Полученные результаты приведены в таблице.

При изучении действия соединения на синтез РНК и белка в клетках культуры ткани, инифицированных вирусом ЕСНО 6 (по включению Н -уридина и С 4-лейцина) выяснено, что соединение подавляет вирусиндуцированный синтез РНК более чем íà 75%, а на синтез белка в инифицированных клетках соединение не влияет.

Представленные данные свидетельствуют о том, что предлагаемый препарат не обладает профилактической и вирулицидной активностью. Антивирусное действие определяется на стадии репродукции вируса, конкретно на вирусиндуцированный синтез РНК.

Формула изобретения

Иодметилат Зе-ацетокси-1е,3а-диметил-6е-обензилоксифенил-4-пиперидона формулы проявляющий противовирусную активность.

20 Источники информации, принятыс во внимание при экспертизе

1, Авторское свидетельство СССР № 381684, М. Кл. С 12К 7/00, 1973.

2. Авторское свидетельство СССР № 380131, 25 М. Кл. С 12К 7/00, 1973.