Способ количественного определения феноксиэтил- -диметил-(2- окси3-ацетил-5-хлор)бензиламония 3-окси2-нафтоата

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ рц 59О666

Союз Советсннк

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 08.06.76 (21) 2370923/28-13 (51) М. Кл."- 6 01N 33/16 с присоединением заявки ¹

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.01.78. Бюллетень № 4 (45) Дата опубликования описания 01.02.78 (53) УДК 616.995.1:616. . 002. 95. 535. 37 (088.8) (72) Авторы изобретения

И. Е. Шумакович, А. С. Найденова и Б. В. Лопатин

Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е. И. Марциновского (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

N-p-Ф Е Н О KC И ЗТ ИЛ- N-N-Д И МЕТИЛ- (2-0 К С И-3-А ЦЕТ ИЛ-5-ХЛОР)-БЕНЗИЛАММОНИЯ 3-ОКСИ-2-НАФТОАТА

Изобретение относится к области медицины, а именно к способам определения антгельминтика в биологической жидкости — моче и тканях (печени, почках, мышце сердца, стенках тонкого и толстого кишечника, содержимом кишечника млекопитающих и тканях гельминтов) .

Известен способ количественного определения четвертичных солей аммония в биологическом материале путем экстракции этанолом и последующего определения концентрации соединения в экстракте методом спектроскопии.

Однако известный способ обладает низкой чувствительностью и недостаточной специфичностью.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Эта цель достигается тем, что концентрацию соединения определяют по собственной флуоресценции катионной и анионной части соединения.

Определение концентрации катионной части соединения проводят при длине волны возбуждающего света 390 нм и регистрируемого — 478 нм, а анионной части при длине волны возбуждающего света 290 нм и регистрируемого — 490 нм.

Пр имер 1. Опыт проводят на белых мышах средним весом — 20 г, зараженных для эксперимента Trichocephalus muris.

Препарат вводят per os в виде суспензии в

5 1 % -пом крахмальном клейстере в дозах 1 г на 1 кг веса животного. Одновременно проводят три параллельных определения на трех белых мышах. В контрольном опыте используют мышей без проведения предварительно10 го лечения препаратом.

Навеску -100 мг тканей гельмпнта или тканей органов мыши гомогенизируют и смывают 3 мл 0,002 н. этанольного раствора соляной кислоты, центрифугируют 2 мнн при

15 4000 об/мин. К 1 мл полученного раствора добавляют 1 мл 0,005 н. спиртового раствора

КОН (раствор А).

Измеряют интенсивность флуоресценцтги раствора на спектрофотометре в кювете с тол20 шиной слоя 10 мм. Концентрацию катионной части молекулы в микрограммах на 1 мг веса органов определяют при возбуждении

390 нм и испускании 478 нм и рассчитывают по формуле испускание вещества контроля ис ускание стандарта

ЗС65у, а 100%

590666

3 С 35!о а. 100 ОО

Составитель С. Малютина

Техред Н. Рыбкина Корректор Н. федорова

Редактор Н. Хубларова

Заказ 3259/14 Изд. М 181 Тираж 1109

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб. д. 4/5

Подписное

Типография, пр. Сапунова, 2 где С вЂ” концентрация стандартного раствора, мкг/мл; а навеска биологической ткани, мг;

65 — содержание катиона по молекулярному весу препарата.

К 1 мл раствора А добавляют 2 мл 2 н. водного раствора iNaOH. Определяют содержание оксинафтойной кислоты при длине волны возбуждения 290 нм и длине волны испускания 480 нм.

Содержание кислоты в органах рассчитывают по формуле испускание вещества контроля

Х испускание стандарта

3 С 35оо а. 100 у, где С вЂ” концентрация стандарта, мкг/мл; а — навеска биологической ткани, мг;

35 — содержание кислоты в препарате по молекулярному весу.

В качестве стандарта используют раствор препарата в 0,002 н. спиртовом растворе

НС1 — 10 мкг/мл. Дальнейшее определение проводят как описано выше.

П р им е р 2. Мочу собирают сразу от трех используемых в параллельном опыте мышей.

Пипеткой отбирают 0,5 — 0,1 мл мочи мышей и доводят объем до 3 мл 0,002 н. раствором соляной кислоты в 96%-ном этиловом спирте.

Дальнейшее определение проводят так же, как в предыдущем примере.

Содержание катиона в микрограммах на

1 мл мочи рассчитывают по формуле испускание вещества контроля испускание стандарта о 3С65уо а 100Я где а — количество взятой для опыта мочи, мл.

Содержание оксинафтойной кислоты в микрограммах на 1 мл мочи рассчитывают по

5 формуле испускание вещества контроля испускание стандарта где а — количество мочи, мл.

Предлагаемый способ обладает высокой чувствительностью, специфичностью и позво15 ляет определить препарат в биологических объектах при введении его per os в терапевтических дозах.

20 Формула изобретения

1. Способ количественного определения NP-феноксиэтил- N-N-диметил- (2-окси- 3-ацетил5-хлор) -бензиламмония 3-окси-2-нафтоата в

25 биологическом материале путем экстракции этанолом и последующего определения концентрации соединения в экстракте методом спектроскопии, отличающийся тем, что, с целью повышения его чувствительности, 30 концентрацию соединения определяют по собственной флуоресценции катионной и анионной части соединения.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что определение концентрации катионной ча35 сти соединения проводят при длине волны возбуждающего света 390 нм и регистрируемого — 478 нм, а анионной части при длине волны возбуждающего света 290 нм и регистрируемого — 490 нм.