Способ количественного определения меди и цинка в биологических объектах

 

Союз Соаетскни

Соц талнстнческни

Республнк

< 631820 (61) Дополнительное к авт. свил-ву— (22) Заявлено 21.06.76 (21) 2373766/28 13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 05.11.78Бюллетень № 41 (45) Дата опубликования описания 17,11.78 (53) М. Кл 01М 33/16

Ваударствеинмй камитет

Ваавта Министров СССР иа димам изобретений и аткрмтий (53) УДК 543.849 (088.8) и

А

1 (72) Автор изобретения

В. И. Боцюрко (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕ) НОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕДИ

И ЦИНКА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ

25, 1

Изобретение относится к медипнне, точнее — к определению металлов в био- . логических объектах при клинических анализах.

Известен способ количественного определения меди н цинка в биэлэгическэм 5 объекте путем озоления пробы, освобождения от железа и использования комплексэобразователя - дитизона jlj .

Однако известный способ трудоемок, длителен, включает ряд сложных аналити- 10 ческих операций, которые затрудняют использование способа в клинической практике.

Целью настояшего изобретения является упрошение и ускорение метода для клинических анализов.

Цель достигается тем, что каждый из металлов - медь и цинк - определяют в неочишенной пробе при добавлении к ней соответственно диэтилдитиэкарбамата натрия и сульфарсазена.

Сушность изобретении заключается в том, что проводят озоление биологического объекта, например, крови, мочи, кусочков тканей, золу растворяют в соляной кислоте, из раствора экстрагируют ионы железа сернэкислым эфиром, медь и цинк из зэльногэ раствора не выделяют, а определяют непосредственно в неэчишенном растворе. Для этэго раствор делит на две пробы, в одной пробе определяют медь путем добавления диэтнлдитиокарбамата натрия, в другой пробе определяют цинк. Для этого сэдержимое упаривают, сухой остаток растворяют в

0,5 мл 18%-ной соляной кислоты, добавляют 40 мл бидистиллированной воды, 0,8 мл 10%-ного раствора винной кислоты, О, 2 мл 10%-ного раствора ли MormoN кислоты, 2 мл 10%ного раствора аммиака и 0,5 мл 0,02%-ного раствора сульфарсазена, обьем раствора доводят до 50 мл бидистиллированнэй водой и колориметрируют против контроля, который представляет собой смесь всех реактивов без испытуемой пробы.

Пример кэнкретного осушествления способа. Из вены берут 5-6 мл крови, высушивают при 110эС, сжигают и эзо20

3 6318 ляют. при 400 С в муфельной печи. Взяо тую навеску золы в количестве 50 мг высыпают в термоустойчивый стаканчик.

Добавляют к золе 1 мл концентрированной азотной кислоты и упаривают досуха.

После упаривания эолу растворяют в 20 мл 18 %-ного раствора соляной кислоты.

Раствор переносят в делительцую воронку.

B ней экстрагируют железо эфиром. В оставшейся после экстрагирования железа Ю водной фазе определяют медь и цинк. Для этor о пробу делят пополам, упаривают досуха. В одной порции определяют медь,. а в другой - цинк.

Количественное определение меди. В колбу с сухим остатком вносят 2 мл

1 8%-ного раствора соляной кислоты и количественно переносят в,депительную воронку. Сюда добавляют 1 мл 1%-ного Ю раствора диэтилдитиокарбамата натрия и

5 мл хлороформа. После вэбалтывания нижнюю часть после отстаивания выливают в медную пробирку. Образованный раствор желтого цвета колориметрируют про» 25 тив растворителя (хлороформу. По калибровочному графику, построенному из стандартных растворовСибд ЬЙ О,количественно определяют медь.

К оличественное определение цинка В колбу с сухим остажом добавляют 0,5 мл соляной кислоты, 0,8 мл 10%-иого раствора винной кислоты, 0,2 мл 10%ного раствора лимонной кислоты, 2 мл

10%- ного раствора. аммиака, 0,5 мл

0,02%-ного раствора суьфарсаэена и до 50 мл доводят дистиллированной водой.

К олориметрируют против контроля, для приготовления которого добавляют к воде реактивы в том же количестве, что и в опытную пробу. По калибровочному графику, ностроенному из стандартных растворов ЕНСА, количественно определяют

QssK °

По предлагаемому способу проведено определение меди и цинка в крови 20 здоровых людей (доноров) .

Среднее содержание меди равнялось у них 125-6,6 мкг%, а среднее содержание цинка - 760-36,6 мкг%. .Такие же исследования проведены в клинической ситуации у 103 больных ревматизмом, в зависимости от степени его активности. Содержание меди у больных с степенью активности составляло

181Щ,4 миг% (Р ..0,001), соЯстепенью - 19&3;14,2 миг%.

При осуществлении данного способа

Ф вЂ”" уменьшаетса число аналитических опера-, ций, что приводит к снижению риска эа грязиения щюбы sns потери этих элемен тов. Время, затраченное на анализ одной пробы золы, сокращается в 5-6 раз, по сравнению с известным способом.

Доступность и простота данного способа позволяют проводить это исследование в широкой сети лечебных учреждений.

Формула изобретения

Способ количественного определения меди и цинка в биологических обьектах путем озоления пробы, освобождения от железа и использования комплексообра эователей, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа нри клинических анализах, каждый из металлов определяют- в неочищенной пробе при добавлении к ней соответствен» но диэтилдитнокарбамата натрии и сульфарсазена.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Бабенко Г. А. Определение микрбэлементов и металлоферментов в клинических лабораториях. Киев, 1968, с.

34-46.

Составитель Н. Хрусталева

Редактор О. Иванова Техред М, Борисова Корректор С. Гараскиных

Заказ 6335/43 Тираж 1070 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4