Способ обнаружения вируса гриппа

 

О П И С А Н И Е п11639941

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Со.оз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свпд-ву. (22) Заявлено 10.05.77 (21) 2487212/28-13 (51) М. Кл.

С 12К 7/00 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Государстаенньй комитет (43) Опубликовано 30.12.78. Бюллетень Ке 48 (53) УДК 576.858 (088.8) по делам изобретений

rI откоытнй (45) Дата опубликования описания 30.12.78 (72) Авторы изобретения (71) Заявители

С. Д. Иржанов, Е. С. Исаева, Н. Н. Соколова и 3. К. Чувакова

Казахский научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней и Ин микробиологии и вирусологии АН (54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИР

Изобретение относится к области медицины, а именно к вирусологии.

Известен способ обнаружения вируса гриппа путем введения исследуемого материала в субстрат, чувствительный к вирусу 5 гриппа, прерывания IIa ранней стадии инфекции цикла репродукции вируса с последующим заражением куриных эмбрионов 1).

Однако известный способ обладает недостаточно высокой чувствительностью.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Это достигается тем, что исследуемый материал вводят в эксплантаты трахеи 15 цыплят, затем после прерывания цикла репродукции вируса эксплантаты гомогенизпруют и гомогенатом заражают куриные эмбрионы.

Способ осуществляют следующим образом.

Для приготовления эксплантатов используют ткань трахеи 3-7-дневных цыплят, которых выращивают в условиях термостата из развивающихся куриных эмбрионов.

После извлече1п1я трахею тщательно отмывают от крови в чашках Петри раствором Хэнкса с антибиотиками: 200 ед. пенипиллина, 100 ед. стрептомицина и 50 ед. 30 нпстанина на 1 мл. Затем в свежей чашке

Г1етри для получения кольцсвндных фрагментов трахеи проводят разрез лезвием х1ежхрящсвым 11po .l1c2I ) I нах1.

Кольца трахеп дополнительно отмыва1от в растворе Хэпкса. 11з ткани трахеи одного

24 ipaxeaльных I o.tlüI1;I.

Фрагменты трахеп в количестве 3-х колец вносят в пенициллиновый флакон, содержащий 1 мл средь1 199.

Заражение эксплантатов проводят сразу же после пх приготовления. После удаления среды пз флакона пнфицированиеэксплантатов осуществляют путем непосредственного контакта тка1пе трахеи с 0,2—

0,3 мл носоглоточно,"о смыва больных гриппом в течспие 30 — бО IIII». На один исследуемый материал беру т два флакона с эксплантатами трахеп.

lIo истечении времени контакта ьо флакон вносят 1 мл среды 199 и зараженные эксплантаты трахеп инкубпруют прп 35 -2 С.

Через 4 — б ч от начала инкубации эксплантаты трахеп пз двух флаконов расп1рают в фарфоровой ступке и по 0,2 — 0,3мл тканевой взвеси вводят в четыре куриных эмбриона.

Зараженные куриные эмбрионы выдер639941

Составитель С. Малютина

Техред Н. Рыбкина

Редактор Г. Лаповая

Корректоры: О. Данишева и Л. Брахнина

Заказ 2209717 Изд. Ко 770 Тираж 526 Подпис <ое

НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Я(-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 живают в термостате при 35+2 С в течеíпе 48 ч.

Проводят вскрытие куриных эмбрионов и наличие в них вируса гриппа выявляют по реакции гсмагглютинацип.

Предлагаемый способ позволяет повысить чувствительность и выделяемость истаммов. Выделяемость истаммов предлагаемым способом составляет 14,9 — 19%, тогда как по известному способу выделяемость составляет 8,1 — 10,4%.

Формула изобретения

Способ обнаружения вируса гриппа путем введения исследуемого материала в субстрат, чувствительный и вирусу гр:ппа, прерывания на ранней стадии инфекции цикла репродукции вируса с последующим заражением куриных эмбрионов, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, исследуемый материал вводят в эксплантаты трахеи цыплят, затем после прерывания цикла репродукции вируса эксплантаты гомогенизируют и гомогенатом заражают куриные эмбрионы.

Источники информации, принятые во внимание прп экспертизе

1. «Вопросы вирусологии», № 6, 1975, 15 с. 732.