Способ получения стрептокиназы

 

Союэ Сбветсмих

Социапистич@@кнх

РФспублин (61) Дополнительное к авт. свил-ву(22) Закнлвио 2з.11.74 (И) 2082617/28-13 (23) Ирио1зитвт — (32) 26.11.73 (31) ЖРС 12 d/174985 (ЗЗ) ГДР (53) M. Кл з

С 12 O 13/10 б@ц@ ф

ГОЩДИРстааакь! Й абнатет

СССР аа Делан ик6Ратакчй и атиуртай

Опубликовано 25,01.79. Бвллатень № 3 . Дата опубликовании onисания 25.01.79 (53) УЙК 615.779. ,94 (088.8) Иностранцы

Герхард Бэрвальд, Гюнтер Майер, Роберт Хайкель, фаус41йгер.ФЬльцка, Роземари Религ, Карл-Людвиг Декер, Вернер Келе11 и Дитер Гердах (ГДР) Иностранное предприятие ф

ФЕБ Арцнайьпгггельверк Дрезден" (ГДР) (54) СПОСОБ ПОЛУЧГНИЯ СТРЕПТОКИИАЗИ

Изобретение относится к медицинской промьппленности, а именно K HOJIplQHHt0 препаратов, которые могут найти применение при инфаркте миокарда, острых закупорках артерий конечностей, свежих тромбозах вен и змболии легких.

Известен способ получения стрептоккназы путем вьтрац ивания иродуцента на среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта (1}.

Однако зтот способ не обеспечивает высокого выхода целевого продукта.

11елью изобретения является повьттпенне вы. хода целевого продукта.

Эта цель достигается тем, что в качестве продуцента используют штамм ЗтгEptococt:Us

equisimi )is 1МЕХ 8 377 и выращивание осуществляют на питательной среде, содержащей в качестве нсточтп ка азота дрожжевой автолизат или кукурузный экстракт с содержанием азота

0,1-0 8% к объему питательной среды.

Применяющийся в способе штамм Streptocowus equfsirni/is 1МЕТ 8 377 представляет собой грамоположительный микроорганизм. Форма клетки шаровидная (кокки), диаметр 0,8 — 1,О (0,6 — 1,2) . После успешного деления клетки остаются склеещтымн друг с другом в виде жемчужного ожерелья, так что образутотся цепеобразные соединеши. Длина цепей разная и зависит большей частью от питательной среды. В предлагаемом способе цепь состоит из 4 — 8 отделыгых звеньев.

Иа прочной питательной среде с кровью штамм pscror небольшими колониями gHRMcrpoM

1 — 2 мм. Они имеют кр тлую форму, гладкие по краям и слегка вьптужлые. Оптимум роста идет при температуре 37 C. При росте иа шггательной среде с кровью у штамма происходят характерные изменещтя. Вокруг колонии развивается прозрачный осадок, в котором растворены красные клетки крови (зритрациты) .

Способ поясняется следующими примерами.

П р и и е р 1. )Кндкую питательную среду, состояцтую из 20 г на 1 л панкреатического пептона нз мяса или рыбы, 5 г/л поваре птой соли, 2% говяжей сыворотки или дрожжевого автолизата с содержанием 0,2Яо азота, вместе с жидкой питательной средой, заливают в колбу Эрлейнмейера объемом 200 мл, стерилизуют и с 10 мл суспензии

3 .стрептококка зквизимил!(с (cTpcпгококк группь!

С 3 засевают в с!В(зио)!Отцчес(аз)! 1)астворе !IоваГ ре1(НОЙ сол11. IÎc)IQ иик"банни в 1 счс(п(с 16 ч IР)п

37 С 20 мл зтой первой предвар;гге! ьной культурь(пересеива!От в 8111!RI)RTfR с меп!3)!кой QO, ÇBI-()а:3-!

31ие 2000 Гп! пптательпОЙ средь((BTupi QQIIHRрите)3 ьная кул ьт1л)3 ) (пlи в качестве )п(О !".у(! у!., Iа при меня(вт для Îc! IOB((0(J к) льтърь(, гь!(дка()(if! i" (3тельная среда состоит иэ дро)(скевого автолпза:а с

0,2/О соде ))((31(пя 330TR, TRi;)tiQ p (3. If!i!!(BI..;Ii(coJiя(т."I I. Р(3„} 1 ЦРО С11;;()(3 ь!3 ь(8.,. :((-С) ((((9"-О4 ° "е") -4 (("(4) г:з 4 !)((3 - " г

8bIP8IIt!!BR!BIB кУПЬТУPbl ВедУТ Около 8 -1 B!РП с

28 С, При 37 С продо)(мпе)пност(; культпаиравен)и составля(ет 7 ч.

Эта BTopRB предвар!1!СЛЬНRJI ici !3(тура ь о)кст бь!Ть ив!10)(ьзовапа в качестве посевно!.о ь(атсРИ()па ДЛЯ !!ОСЛЕД /1ОЩЕ(й(ОСНОВ lпг)й К)(Л(ЬТЪ P! 1.

П р и M c p 2. ) .идкал питательна)! cp )3

Основеlой K)f)IbT)ipbi и(аеет следу!()птий cOQTRB, и("1:

Дро)(окевой твзтоматнзат 15 — 120

Солевой раствор

КН, РО,(2,50

Кг НРО.! г "0 (II3 O0N3 1 г о (,00 (,(а Ц 0Д 00

MgSG 7II О 0,40

ГеБОч (NH4) So

lift nC I 4Нг О 0,02

Глюкоза I0,00

Затем и1 оводит стерилнзациlо солевово Гь!ст. вора и дрож:кевото автолнзата. Пос.-,.; —,: 3 0 —,О л(-,. бавляют стерилизова(п(ь!(1 Раство!) тт)юк.)зь(.

ДрожжевОЙ автолиэат фильтру(вт сте!)Плыло, ПОспс elf i!BR B q)QPMQ(ITQP 3RQQBRIBT в Jco .::-.чествснно(;1 соотногпении 1 100 .)бъеьп(ь(л -ьас:1-;Д

BQPBoII или BTOPQII )тРедваР!Т(е)1ьной кз (JiT iI:."а.

Культу )у Доводя(Lto TchlliQ!)ат пь(,,8 С пр7! помешивант!!! при 1С(0 —.)00 ОЯм!ТБ, - .1(под,-:е!) =:и(B3bRT H3 gpOBHQ 7,.2 — 7,4.

Продол)(О(тельность культ!!в IpoBа=(1(ч .:о:тавляет 20 — 24 q при засеве с нре1(варительноп .,-,:.:".-.;-.

1 - (, l)0(! !!:,i!f и() .i i!!!! !3!»!t l!Пл It ri(i((.l;:t пе з

1(!it (О)()Ч(! Тt*)iii„:!i le! t; !; ((, (- "- . ) Г)П It! .t!t Со! П . (Л! . с)! Ва / I 1) tl

itb! Õ )1f C i BC!i !0(C!ltB(Rii СОС .! ° П . i ! ! -100(0 -д/1:(3(, Ц !> и:.,1 е и 3, (и ппп ibl,; посс(!3(((3

Ь13ТЕ!)И31((1 П!.:Oi(CXt)jtl",Т Каи В !!)! i"!QBC . .!:. !;I, l пв! атель(!О!1 ср де осп и!П()и "у (1,и !:t !. (". . в:.

Iiс!Очипка 83() (3 при,.(сifl((()т;:ч!Л)ю(tl . к, !)ул,,ь:п ! п

;р,!."1 (,, ь0 (ил IJ tt 0;,),".; в- (8 tiQ г г,)tl -р

К

С(it jе. !

Солево!! НRQTBop )От:Ф(е, !ТО !i !3 !р(":- :"- - р

I if:,òi.-; tini.i,3ti!" )33(ЬЧ»,,(i I, f 3. .:I" ;(!(!,) !В: (lt! )К

) ги" 3 (;;!" и "ч\ (1 (г(Ь(!0(К ЛЬ)УПС(t,. i(П (П)ачип- -. )вс,у()("(р"..",!.:8 ion,,(Ч 0> . !. . РРТ tt;f!0!33(й

BЬ! ;СД lt., !СЦ:,, О П!)ОД1 КТR.

1 iit COIR (;()Л "1(Н!(Jt C, . (t ГOIC)i ПГ(\1 П;.—, «1 Р f. iГ .. ! „.(, (В i(if It; \1)j (i, ((Е(33 3 Па Сt)QJI Q (0 i,Ö iRÖ(-B (((: 0 .,C„; (()(tilii;f -i iiiQ8 .П(!Е 3 (,.Е;,QB(). 0 П; О>B 3-,(3 влччп п(-, (til атсльно;-1. с!)е:Q ()Опец;-ка!Не!! в Iti

1 едакто!) II. ХЯ)лева

".àõà 7944/J6 (са(вед i,(»«;у на

:.: „.:":),:ь . 3

Г((п 3":(1 7 лат(п(гс((вс