Способ определения сантохина
ОП ИСАНИ Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
<»)705334
Союз Советских
Сощиапистических республик (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву— (22)Заявлено03.07.78 (21) 2642798/30 15 с присоединением заявки ¹ (51)M. Кл.
6 01M 33/16 (53) /ДК 578.088 (088.8) Гооударствеииь и комитет
СССР по Илам изобретоиий и открытий (23) Приоритет—
Опубликовано 25.12.79. Бюллетень № 47
Дата опубликования описания 28. 12.79 (72) Авторы изобРетениЯ A. Д. Пелевин и Л. С. Космачева
Всесоюзный научно-исследовательский институт комбикормовой промышленности (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ САНТОХИНА
Изобретение относится к технике количественного кинетического определения сангохина (этоксихина), щироко применяемой при контроле качества продукции в
: комбикормовой промышленности.
Известны способы определения сантохина в биологических материалах (тканях животных, яйцах, молоке, масле) и кормах (пюцерновой муке). К ним относятся фпуорометрический и спек грофотометрические способы. Фпуорометрический способ основан на том, что антиоксидант обладаег активной голубой флуоресценцией, измеря. емой фпуорометром.
По флуорометрическому способу определение сантохина проводят следующим образом. Антиоксидант экстрагируюг петропейным или диэгиповым эфиром, изооктаном, переводя pro в водорастворимое состояние с помощью соляной кислоты, а затем измеряют флуоресценцию. Авторы отмечают, что лри анализе биологическо:го материала такие соединения, как рибофпавин, фопиевая и никогиновая кислоты, которые входят в состав премиксов, мешают определению, так как дают дополнительную флуоресценцию 1 J . Установлено, что при определении сантохина ошибка составляет 10%, а для Нифпекса .П (действующим веществом которого является сангохин) загрязнения доходят- до 40-45%.
Кроме того, в некоторых способах используются вредные и ядовитые для человека химические реактивы, например, метанол и другие.
Известны спектрофотометрические способы определения сантохина, основанные на его экстракции и измерении оптической пло гнос ти. Известен спек грофо ro ме трический способ определения хлоргидроксихинолина путем экстракции его хлороформом и измерения оптической плотности при максимуме поглощении 325 нм (2 . Однако этот способ не обладаег достаточной чувсгвительнос bIo и точностью.
Известен способ определения сантохина, который является наиболее близким к предлагаемому. Он включает следующие
3 705334
"4 приемы: экстракцию этоксихина органиче- . Пример применения предлагаемого ским растворителем (гептаном, гексаном, способа. цетролейным эфиром), обработку 0,5í. Навеску корма, содержащего от 1 до соляной кислотой в делительной воронке и 25 мг сантохина, помешают в коническую
Ультрафиолетовую спектрофотометрию ниж- 5 колбу вместимостью 100 мл и экстрагинего водного слоя. При определении анти- руют при тщательном перемешивании тре
Оксиданта в образцах, содержащих приме-, мя порциями по 25 мл н-гексаном. Гекси, например бутилгидроксианазол, осущест- сановый экстракт переносят в делительвляется предварительное омыление спирто- ную воронку на 200 мл, промывают его вым раствором щелочи $3) . 10 трижды по 25 мл 0,5 н, серной кислотой
Этому способу также присущи недос- После каждого расслоения нижний водный
" ъ Ьткй: при определении сантохина мешают спой фильтруют через бумажный фильтр в " составные части корма — витамины, каро- мерную колбу на 100 мл доводят объем тиноиды, жиры, масла и др., а предвари- водой до метки и смешивают. (При содертепьное омыпение образца спиртовым раст- > жании в навеске корма or 8 до 25 мг " "вором едкого калия для освобождения от сантохина помешают 5 мп полученного примесей не решает поставленной задачи, экстракта в мерную колбу на 25 мл и так как при определении жирорастворимых доводят 0,5 н. соляной кислотой объем витаминов (А, Е, 13 ) данный прием ана- до метки), Затем в пробирки вместимоспиэа обязателен.
20 тью 10 мл наливают 5 мл этого раствора
Белью изобретения является разработка и добавляют 0,2 мл хлорйстого пара-сульнаиболее точного и ускоренного способа фофенилдиазония. (Последний готовят слеопределения сантохина в кормах, содержа- дующим образом: берут 0,5 мл 10%-ного щих большое количество биологически -"- раствора пара-аминобензолсупьфокислоты, 25 тивных веществ органической природы, приготовленной при нагревании на 35 -ной .таких, как витамины, антибиоТики» соляной кислоте, добавляют вначале 3 мл, " . лекарства и другие, которые мешают Опре а через 5 мин 12 мл 5o ного раствора делению сан тохина. азотистокислого натрия и 9,5 мл воды).
Пробирки с содержимым встряхивают, по казанная цель достигается тем, что мешают на 2 мин в кипящую водяную бап бу сан хина обрабатывают раствором ню, охлаждают холодной водой и измеряют хлористог о пара-сульфофени пдиазо фофенипдиазония, ко- оптическу о плотность окрашенных раствс торый получают спедующи о и taIo следующим образом: бе- Роа на фотоэлектрокалориметре с фиолето рут 0 5 мл 10%-ного раствора пара-ами- вым светофильтром (длина волны 345 нм)
1 нобензолсульфокисло ты, приготовленной в кюветах с шириной рабочей грани 1 0 мм. при нагревании на З5 /-ной соляной кисло- Одновременно проводят пробу на реактивы. те, 15 мп „-ного раствора аз
15 57 ro раствора азотистокис- одержание сантохина рассчитывают по 4
9 5 мл воды после чего кап"бровочной кривой. Окрашенные pacraoлого натрия и, мл воды, посл
У фотометрируют полученное окра лученное окрашенное 4p р» Различных концентраций сантохина подсоединение. е. Отличительным признаком спо- чиняются закону Бугера-Ламберта-Вера соба является добавление раствора хпорис- при содержании 0,01-0,10 мг. мл. Протого пара — с суль па а с суль нилдиазония в ре- должительность анализа 35 мин. С целью
) эультате чего о разуется го Образуется комплекс саН- Оцени данн го и известного способов бь|л имеющий ИНМнсив"ую красно-оран-45 роведен анализ по Определению содержания -т9хина, имеюши ин с жевую окраску. Полученный раствор фо- сантохина в премиксе рецепта НВ0 1, ре тометрируют при 345 нм. зупьтаты которого приведены в табл
70 5334
Таблица 1
Содержание сантохина в премиксе (%) I
Введено сантохина 1,24%
1,32
1,24
1,30
1,24
1,38
1,24
- 0,07
1,40
1,29
1,17
1,24
+ 0,09 — 0,01
1,32
1,33
1,36
1,23
1,38
1,24
1,33
1,37
+ 0,09
7аблица 2
Сравнительная точность известного и, предлагаемого
Известный 1, 35
Предлагаемый 1,25
0,1150
0,212
+ 0,04 0,017
+ 5,3
+ 1,3
+ 0,12
+ 0,05
Формула изобретения
Способ определения сантохина, преимущественно в кормах, путем экстрагирования его органическим растворителем и последующего фотометрирования экстракта, отличающийся тем, что, с целью новь.шения точности и ускорения определения сантохина, перед фотометрированием к экстракту добавляют раствор хлористого пара-.супьфофенилдиазония.
Источники информации, принятые во внимание при акспертизе
1,Е.М.В.с оН а.о, no0ince8 СЬев Ы у,1956 V. 28,-% 3, р. 376, 2 Ж.Ра1 Ъ а йЕп„Ю,Р Неуйа. АисЯ уЯ
3.973, V, 98, Ин 1172, р. 797-801.
3- TQ80$ 4.0. ЭАямсиЮитЕ алВ Fooj% с n < t,1963, Q 11, l44, р. 340 342, ираж 107 3 Подписное
Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Результаты анализа показали, что содержание сантохина, определяемое данным способом, составляет в премиксе 1,25% 40 при отклонении or введенного «+ 0,09%, а при определении известным способом—
1;35% с отклонениями до+ 0,16%, а увеличение равно соответственно 0,8 и
8,8%. Ч очность данного способа + 1,3%, 45 известного + 5,3%.
Предложенный способ определения сантохина является наиболее точным. и ускоренным и рекомендуется для объективной so . оценки качества кормов; содержащих данный антиоксидант. Ожидаемый экономический аффект за счет только сокращения времени анализа и повышения объективности- оценки качества кормов составит око- M ло 4000 руб. в год. ,0НИИПИ Заказ 8019/46 Т
+ 0,08
+ 0,06
+ 0,14
+ 0,16
+ 0,05
+ 0,08
+ 0,12
+ 0,14+ 0,13
