Штамм т.б., обладающий фунгицидными свойствами

 

п11 36925

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 05.07.78 (21) 2640841/30-15 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.05.80. Бюллетень № 20 (45) Дата опубликования описания 30.05.80. (51) М. К .

А 01N 15/00

Государственный комитет (53) УДК 632.937 (088,8) по делам изобретений и открытий (72) Авторы изобретения

А. И. Кустова, М. T. Петрухина, E. H. Воронкова, Э. К. Сугоняева, 3. П. Федосова, И. А. Софиенко, К. В. Кирюхин, А. П. Кашкан и E. М. Сазонова

Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактериальных препаратов (71) Заявитель (54) ШТАММ TRICHODERMA LIGNORUM Т.Б., ОБЛАДАЮЩИЙ ФУНГИЦИДНЫМИ СВОЙСТВАМИ

Изобретение относится к области микробиологической промышленности и может быть использовано для производства биопрепарата триходермин, который применяется для борьбы с фитопатогенными почвенными грибами.

Известен штамм Tr. lignorum 300 А

ВИЗР, используемый для наработки триходермина при глубинном культивировании в лабораторных условиях (1). 10

Недостатком указанного штамма являются медленное накопление спорового материала и низкая выживаемость конидий при лиофильной сушке в условиях промышленного производства. 15

Цель изобретения — выделение штамма, более пригодного для промышленного производства препарата триходермин.

Эта цель достигается путем использова- . ния в производстве штамма Tr. lignorum

Т, Б,, что позволяет сократить продолжительность ферментации на 48 часов и увеличить титр препарата как за счет более интенсивного накопления спор в глубинных условиях, так и более высокого уровня их выживаемости при лиофильной сушке.

Штамм выделен из почв Минской области и хранится в Коллекции Белорусского научно-исследовательского института защиты растений.

Штамм имеет следующие характеристики.

Морфолого-культуральные признаки.

Среда Чапек-агар, рН 5 Π— 6,0. Колония распростертая. Дерновинки вначале белые, на четвертые-пятые сутки роста темнозеленого цвета. Обратная сторона колонии бесцветная.

Среда ВИЗР-агар, рН 5,0 — 6,0. Колония распростертая. Дерновинки вначале белые, на 4 — 5 сутки роста желтого и зеленого цвета, Обратная сторона колоний бесцветная.

Среда Чапек-агар с 0,5% кукурузного экстракта, рН 5,0 — 6,0. Колония распростертая. Дерновинки бархатистые, вначале белые на 4 — 5 сутки роста приобретают в массе зеленый цвет, встречаются желтые и серые. Обратная сторона колонии бесцветная.

Среда Сусло-агар, рН 5,0 — 6,0. Колония распростертая. Дерновинки бархатистые, густо расположенные, вначале белые, на четвертые-пятые сутки роста темно-зеленого цвета. Обратная сторона колонии бесцветная. Конидиеносцы в виде боковых ответвлений гиф воздушного мицелия, боль736925

Таблица 1

Влияние лиофильной сушки в заводских условиях на штаммы 300 А ВИЗР и T. Б. Tr lignorum

Антагонистические свойства.

Подавляет рост Alternaria radicina, Botrytis cinerea, Helminthosporium sativum, слабо — Sclегоtinia libertiana, Fusarium oxysporum, особенно сильно — Verticillium

dahliae, Fusarium culmorum.

Пример получения препарата.

В заводских условиях используют в ка- 30 300А честве посевного материала культуру штам- Т вЂ” Б ма Tr. lignorum Т. Б., выращенную в тече- 300А ние пяти суток на пшене. Маточную культуру готовят в посевном реакторе емкостью

Т вЂ” Б

100 л на среде, содержащей 1% БВК (рН

5,5) в течение 17 — 24 ч и передавливают в Т вЂ” Б ферментер емкостью 1 м в количестве 1/10 к объему питательной среды. Культивирование в ферментере проводят на среде, сое жащей, г/л: технической глюкозы — 30; 4

Общее количество спор в г сухого препарата, млрд

Количество жизнеспособных спор в г сухого препарата, млрд

Выживаемость при лиофильной сушке, я

l6

II

26,0

30,0

32,0

28,0

24,0

31,0

22,0

28,0

2,6

12,0

5,0

14,0

1,2

II,0

2,5

9,0 д р 0

МаКО,— 3; КН2РО4 — 1; MgSO4 — 0,5; КС1—

0,5; FeSO4 — 0,01 и подсолнечного масла — 5 Опытная партия испытывалась в произ(рН 4); при продувании стерильного воз- водственных условиях против фомоза, чердуха в объеме 1: 1 и непрерывной работе ной и белой гнили моркови и капусты, кормешалки (360 об/мин). Температуру в фер- 45 невой и белой гнили огурцов. Результаты ментере поддерживают в пределах 30 — приведены в табл. 2.

Таблица 2

Эффективность триходермина в борьбе с болезнями овощных культур

Снижение поражения растений, б

Прибавка урожая, %

Доза

Способ внесения

Культура

12,8

I0,8

15,4

15 кг/га

10 кг/га

50 г/ма

30 — 40

25 — 30

50 — 70

В почву

В почву

В торфоперегнойные горшки, Капуста

Морковь

Огурцы

Формула изобретения

Штамм Trichoderma lignorum Т. Б., обладающий фунгицидными свойствами, хранится в Коллекции Белорусского научноисследовательского института защиты растений, шей частью вильчато или тройчато разветвленные расположены несросшимися кучками (65 — 70) х, (2,5 — 3,0) мкм. Фиалиды бутылевидные слегка изогнутые, расположенные мутовками по две-три, иногда по четыре или одиночно (7 — 12) х, (2,5—

3,5) мкм. Конидии верхушечные шаровидные 2,7 — 3,3 мкм собраны в сферические головки.

Физиолого-биохимические свойства.

Источники углерода. Хорошо усваивает глюкозу, сахарозу, маннит, ксилозу; удовлетворительно — арабинозу; плохо — мальтозу, лактозу, рамнозу.

Источники азота. Хорошо усваивает азотнокислый натрий, азотнокислый калий; удовлетворительно сернокислый аммоний, хлористый аммоний.

Крахмал гидролизует.

Кл етч атку гидр ол изует.

5Келатину разжижает.

Нитриты в нитраты восстанавливает.

32 С. Культуральную жидкость после 72 ч роста гриба (титр 200 — 250) сепарируют (на сепараторе АСД-3) и сушат в сублимационной камере при 40 С, 5 Полученный препарат представляет собой порошок серовато-зеленого цвета, содержащий в своем составе конидии и частично хламидоспоры, а также остатки мицелия и питательной среды. Влажность

10 препарата не более 5%, титр препарата

10 млрд/г.

В табл. 1 приведены сравнительные данные по результатам лиофильной сушки штаммов ЗООА ВИЗР и T. Б. Tr. lignorum, 15 полученные при приготовлении препаратов триходермин-4 и триходермин-5 на ферментерах емкостью 1 м .

Морфолого-культуральные признаки.

Среда Чапек-агар, рН 50 — 6,0. Колония

50 распростертая. Дерновинки вначале белые, на четвертые-пятые сутки роста темно-зеленого цвета. Обратная сторона колоний бесцветная.

Составитель М. Дранишников

Техред В. Серякова Корректор О. Иоанесян

Редактор Т. Морозова

Заказ 1004/16 Изд. № 312 Тираж 729 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Среда ВИЗР-агар, рН 50 — 6,0. Колония распростертая. Дерновинки вначале белые, на четвертые-пятые сутки роста желтого и зеленого цвета. Обратная сторона колоний бесцветная.

Среда Чапек-агар с 0,5% кукурузного экстракта, рН 5,0 — 6,0. Колония распростертая. Дерновинки бархатистые, вначале белые, на четвертые-пятые сутки роста прибретают в массе зеленый цвет, встречаются желтые и серые. Обратная сторона колонии бесцветная.

Среда Сусло-агар, рН 5,0 — 6,0. Колония распростертая. Дерновинки бархатистые, густо расположенные, вначале белые, на четвертые-пятые сутки роста темно-зеленого цвета. Обратная сторона колонии бесцветная. Конидиеносцы в виде боковых ответвлений гиф воздушного мицелия большей частью вильчато или тройчато разветвленные расположены несросшимися кучками (65 — 70) )((2,5 — 30) мк. Фиалиды бутылевидные, слегка изогнутые, расположенные мутовками по две-три, иногда по четыре или одиночно, размером (7 — 12)к, (2,5 — 3,5) мк. Конидии верхушечные шаровидные, размером 2,7 — 3,3 мк, собраны в сферические головки.

Физиолого-биохимические свойства.

5 Источники углерода. Хорошо усваивает глюкозу, сахарозу, маннит, ксилозу; удовлетворительно — арабинозу; плохо — мальтозу, лактозу, рамнозу.

Источники азота. Хорошо усваивает

10 азотнокислый натрий, азотнокислый калий; удовлетворительно — сернокислый аммоний, хлористый аммоний.

Крахмал и клетчатку гидролизует.

Жел атину разжижает.

15 Нитраты в нитриты восстанавливает.

Анатагонистические свойства.

Подавляет рост Alternaria radicina, Botrytis cinerea, Helminthosporium sativum, слабо — Sclегоtini a liber tiana, Fusarium oxysporum, особенно сильно подавляет рост

Verticillium dahliae, Fusarium culmorum.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

25 № 502026, кл. А 01N 15/00, 1973 (прототип) .